초록 ▼

본 연구는 안전성이 확보된 유산균의 유전체를 이용하여 생물신소재의 안정적 생산, 유용균주 개발, 라이브벡신의 개발 등에 활용 가능한 조절가능 발현?분비 시스템의 개발을 목표로 하였다. 본 과제에서는 먼저 외래 유전자의 발현의 양을 증가시키는 프로모터를 Lactococcus lactis ssp. cremoris LM0230으로부터 분리하여 대장균 및 L. lactis에서 프로모터 활성 및 전사개시점을 확인하여 특성을 규명하였으며, 발현된 유전자의 세포 밖으로 분비시키는 신규 분비신호를 L. lactis LM0230으로부터분리하여 분비

본 연구는 안전성이 확보된 유산균의 유전체를 이용하여 생물신소재의 안정적 생산, 유용균주 개발, 라이브벡신의 개발 등에 활용 가능한 조절가능 발현?분비 시스템의 개발을 목표로 하였다. 본 과제에서는 먼저 외래 유전자의 발현의 양을 증가시키는 프로모터를 Lactococcus lactis ssp. cremoris LM0230으로부터 분리하여 대장균 및 L. lactis에서 프로모터 활성 및 전사개시점을 확인하여 특성을 규명하였으며, 발현된 유전자의 세포 밖으로 분비시키는 신규 분비신호를 L. lactis LM0230으로부터분리하여 분비 신호의 효율을 측정하여 특성을 규명하였다. 또한 항생제 선별마커를 대체하여 melibiose를 가수분해 하는 α-galactosidase 를 선별마커로 하여 외래 유전자의 발현을 위한 food-grade vector를 제조하고, 안정성을 향상시킨 integrative food-grade vector system을 제조하여 이들의 이용 가능성을 검증하였다.

Abstract ▼

During the last three decades, biotechnology has been developed. It is possible that overproduction of medical supplies like human growth hormone and insulin using microorganism. However, most reports were focused in E. coli, with little attention being paid to the utilization in lactic acid bacteri

During the last three decades, biotechnology has been developed. It is possible that overproduction of medical supplies like human growth hormone and insulin using microorganism. However, most reports were focused in E. coli, with little attention being paid to the utilization in lactic acid bacteria (LAB). Recently, some studies were reported on improved LAB. However, the recombinants used for the production of foods and even medicines should be composed solely of DNA food-grade organism and devoid of any antibiotic-resistance markers.
LAB are generally regards as safety (GRAS) microorganism. In addition, they can modify gene easier than the others, because of small genomesize, relatively much genetic information than other GRAS microorganism. Consequently, LAB are the proper organisms for the production of valuable bio-materiallike a bacteriocin in food industries. In Europe case, they recognize the potential on the expression of functionalbio-materials in LAB. It has been supported on LAB research by government and the research on it is much developer than ours. In my country, a few research on it was reported. It is necessary to develop new genetic resources and food grade vector for LAB. It will use the production of functional bio-materials in LAB. Therefore, we studied the isolation and characterization of new genetic recourses secretion signal, promoter- for expression of foreign protein, the construction food-grade vector system.

목차 Contents

• 제출문 ...1
• 요약문 ...2
• SUMMARY...5
• CONTENTS...8
• 목차 ...10
• 제1장 연구개발과제의 개요 ...12
• 제2장 국내외 기술개발 현황 ...14
• 제3장 연구개발수행 내용 및 결과 ...16
• 제1절 Lactococcus lactis ssp. cremoris LM0230으로부터 분비신호 분리 및 특성규명 ...16
• 1. 서론 ...16
• 2. 연구개발의 내용 및 방법 ...16
• 3. 연구결과 및 고찰 ...18
• 제2절 Lactococcus lactis ssp. cremoris LM0230으로부터 프로모터 분리 및 특성규명 ...23
• 1. 서론 ...23
• 2. 연구개발의 내용 및 방법 ...23
• 3. 연구결과 및 고찰 ...27
• 제3절 Lactococci를 위한 food-grade expression/secretion vector 제조 ...33
• 1. 서론 ...33
• 2. 연구개발의 내용 및 방법 ...33
• 3. 연구결과 및 고찰 ...37
• 제4절 Lactococci를 위한 integrative food-grade expression/secretion vector 제조 ...42
• 1. 서론 ...42
• 2. 연구개발의 내용 및 방법 ...42
• 3. 연구결과 및 고찰 ...43
• 제4장 목표달성도 및 관련분야에의 기여도 ...52
• 제5장 연구개발결과의 활용계획 ...54
• 제6장 연구개발과정에서 수집한 해외과학기술정보 ...55
• 제7장 참고문헌 ...56