초록 ▼

○ 우리나라에서 어류 양식이 성행하는 6개 지역(부산, 거제, 통영, 여수, 완도, 제주)의 13개 어류 양식장을 선정하여 각 어류 양식장에서 양식되고 있는 어류 4종(넙치, 조피볼락, 돔, 농어) 및 사육용수를 대상으로 병원성세균의 오염현황과 어류양식과정에서 가장 많이 사용되고 있는 Tetracycline계 항균제 4종 및 Oxolinic acid 등에 대한 어류 체내 잔류 정도 등을 조사함과 동시에 양식어류와 사육용수로부터 분리·동정된 세균에 대하여 여러 종류의 항균제에 대한 감수성 여부실험을 실시하였다.
○ 양식 어류 및

○ 우리나라에서 어류 양식이 성행하는 6개 지역(부산, 거제, 통영, 여수, 완도, 제주)의 13개 어류 양식장을 선정하여 각 어류 양식장에서 양식되고 있는 어류 4종(넙치, 조피볼락, 돔, 농어) 및 사육용수를 대상으로 병원성세균의 오염현황과 어류양식과정에서 가장 많이 사용되고 있는 Tetracycline계 항균제 4종 및 Oxolinic acid 등에 대한 어류 체내 잔류 정도 등을 조사함과 동시에 양식어류와 사육용수로부터 분리·동정된 세균에 대하여 여러 종류의 항균제에 대한 감수성 여부실험을 실시하였다.
○ 양식 어류 및 사육용수로부터 분리?동정된 세균 중 Vibrio alginolyticus가 각각 58.3%, 50.9%로 가장 높은 검출율을 나타내었고, 다음으로 양식 어류에서 Enterococcus faecium이 31.5%, V. parahaemolyticus가 28.7%, Ent. faecalis가 20.5%의 순으로 나타났으며, 사육용수에서는 V. parahaemolyticus가 43.7%, V. cholerae non-O1/O139가 12.5%, Salmonella spp.가 6.3%의 검출율을 나타내었다. 어종별로는 Vibrio. spp중 V. alginolyticus가 넙치에서 60%로 가장 높은 검출율을 나타내었으며, V. parahaemolyticus는 26.7%~35.7%의 검출율로 어종간의 뚜렷한 차이는 나타내지 않았다.
○ Tetracycline 계 항균제 중 oxytetracycline은 모든 조사 시료에서 불검출~0.307 ppm의 범위로 어종간 큰 차이없이 검출되었고, tetracycline은 10월에 거제에서 채취한 넙치에서 0.037~0.347ppm으로 다소 높은 값을 나타내었으며, doxycycline 및 chlorotetracycline은 모든 조사시료에서 검출되지 않았다. 항균제 사용이력 조사에 의하면 어류 양식장에서는 항균제를 사용하지 않는다고 하였으나, 거의 50%에 가까운 어류에서 항균제가 검출되었다. 또한, oxolinic acid는 4월에 완도에서 채취한 넙치에서 0.042~0.068ppm으로 기준치 이하로 검출되었다. 그러나 어류 양식장에서 출하시에는 기준치 0.1ppm을 초과하지 않았는데, 이는 항균제를 사용하더라도 충분한 휴약기간을 준수하고 양식어류를 출하한다면 큰 문제가 없을 것으로 사료된다.
○ 우리나라 6개지역의 주요 어류 양식장의 양식 어류와 사육용수로부터 병원성 세균과 장내세균인 Salmonella sp., Staphylococcus aureus, Vibrio sp., Enterococcus sp. 및 Escherichia coli를 총 512균주를 분리·동정하고, 그 중 총 405균을 대상으로 항균제 감수성 시험을 실시 한 결과, 98%에 해당하는 398주가 한가지 이상의 항균제에 내성을 나타내어 어류 양식장에서 분리된 병원성 세균 및 장관계 세균의 항균제에 대한 내성이 높다는 것을 보여주었다. 또한 전체 내성균의 약 27%가 MAR(multiple antibiotics registance)의 특성을 나타내었는데 특히 Enterococcus sp. 균주는 80%가, E. coli는 36%가 MAR 특성을 나타내었다. Vibrio spp.는 총 212주 중 단 2균주 만이 MAR로 나타내어, 육상유래 세균들의 다재 내성 경향이 높음을 알 수 있었다.

Abstract ▼

The survey of contamination state of pathogenic bacteria and confirmatory and quantitative detection of residues of antibiotics use in aquaculture, tetracylines and oxolinic acid, were carried out at 13 aquaculture nurseries in the prosperous 6 aquaculture areas, Busan, Geoje, Tongyoung, Yeosu, Wand

The survey of contamination state of pathogenic bacteria and confirmatory and quantitative detection of residues of antibiotics use in aquaculture, tetracylines and oxolinic acid, were carried out at 13 aquaculture nurseries in the prosperous 6 aquaculture areas, Busan, Geoje, Tongyoung, Yeosu, Wando and Jeju in Korea. 4 species of staple fin fish samples such as olive flounder, black rock fish, red sea bream and sea bass and sea water samples were collected in each nursery for the examinations. Antibiotics susceptibility of isolated pathogenic bacteria was also examined.
Among pathogenic bacteria, Vibrio alginolytius were most commonly isolated from fish samples (58.3% of the total number of isolates) and sea water samples (50.9% of the total number of isolates). Enterococcus faecium (31.5% of the total number of isolates), V. parahaemolyticus (28.7% of the total number of isolates) and Ent, faecalis (20.5% of the total number of isolates) were in incidence order from fish samples. And V. parahaemolyticus (43.7% of the total number of isolates), V. cholerae non-O1/O139 (12.5% of the total number of isolates) and Salmonella spp. (6.3% of the total number of isolates) were in incidence order from sea water samples. There was no marked difference in detection ratio of each pathogenic bacteria by sample. Among the Vibrios, Vibrio alginolytius were most commonly isolated from olive flounder (60.0% of the total number of isolates), followed by those of V. parahaemolyticus (26.7%~35.7% of the total number of isolates).
Determinated concentration range of oxytetracycline residue in all fish samples was 0~0.307ppm and no difference was shown by fish species. Residual concentration of tetracycline detected in olive flounder samples collected at Geoje in October showed relatively higher range as 0.037~0.347ppm. Doxycycline and chlortetracycline were not detected. Oxolinic acid was detected in olive flounder samples collected at Wando in April as below the critical limit (0.1ppm) as 0.042~0.068ppm. Though no antibiotics were currently used in all aquaculture nurseries according to on-the-spot survey, antibiotic residues were detected in almost 50% of samples. But detected concentrations of antibiotic residues in samples collected at the time of shipping were not exceeded the critical limit, 0.1ppm. This showed that withdrawal time of antibiotics was keep in surveyed aquaculture nurseries.
According to the examination results of antibiotics susceptibility of isolated pathogenic bacteria, 98% of isolated bacteria showed antimicrobial resistance against at least one antibiotics and enterobacteria showed higher resistance. 27% of the total number of antimicrobial resistant strains were MAR, especially, 80% of enterococci and 36% of Escherichia coli were MAR. But 2 strains among 212 antimicrobial resistant vibrios were MAR. Overall, terrestrial strains showed higher tendency of antimicrobial resistance. The results said that the problem of antimicrobial resistance in marine environment was not limited in use of antibiotics in fisheries.

목차 Contents

• 표지 ...1
• 제출문 ...3
• 요약문 ...5
• Summary ...6
• 목차 ...7
• 제1장 서 론 ...11
• 제1절 수산업 생산동향 ...11
• 1. 수산물 생산현황 ...11
• 2. 어류양식 현황 ...12
• 가. 시설 현황 ...15
• 나. 생산 동향 ...15
• 다. 종묘 생산기술 개발 ...15
• 라. 양식기술의 발전 전망 ...17
• 제2절 수산물 소비동향 ...17
• 제3절 수산물과 식품위생 ...21
• 1. 식중독 발생현황 ...21
• 2. 수산식품과 비브리오 ...21
• 제4절 해면양식과 항균제 사용 ...25
• 1. 양식어류 질병발생 동향 ...25
• 2. 양식어류에서 항균제 사용실태 ...26
• 3. 항균제 잔류 양식어의 식품위생학적 문제점 ...30
• 4. 항균제 관리체제 구축의 필요성 ...32
• 제5절 연구목적 및 필요성 ...33
• 제2장 국내.외 연구동향 ...35
• 제1절 항균제 사용절감을 위한 어류질병 관리 기술개발 현황 ...35
• 1. 일본 ...35
• 2. 노르웨이 ...36
• 3. 한국 ...40
• 제2절 양식어류에 대한 항균제 사용규제 및 내성균에 연구동향 ...42
• 1. 양식어류에 대한 항균제 관리 ...42
• 2. 항균제 내성균 연구동향 ...44
• 3. 우리나라에서의 항균제 및 내성균 연구동향 ...46
• 제3장 연구개발 수행내용 및 결과 ...56
• 제1절 양식어류 및 사육용수에 대한 병원성세균 오염실태 모니터링 ...56
• 1. 연구내용 ...56
• 2. 연구방법 ...57
• 가. 모니터링 대상지역 선정 ...57
• 나. 수온, 염분농도 및 탁도의 측정 ...57
• 3. 연구결과 ...65
• 가. 모니터링 대상 시료에 대한 일반적 현황 ...65
• 나. 병원성 세균의 검출 현황 ...68
• (1) 양식어류 및 해수에서의 병원성 세균의 전반적 검출현황 ...68
• (2) 어종별 병원성 세균 검출율 ...75
• (3) 지역별 어류 양식장의 병원성 세균에 대한 검출 현황 ...75
• (4) 어류에서 검출된 병원성 세균의 검출 현황 ...90
• (5) 주요 병원세균의 월별 검출현황 ...90
• 제2절 양식어류에 대한 항균제 잔류량 모니터링 ...99
• 1. 연구내용 ...99
• 2. 연구방법 ...101
• 가. 시료의 채취 ...101
• 나. 표준품 및 시약 ...101
• 다. 표준용액 및 이동상 용매의 조제 ...101
• (1) 표준용액 ...101
• (2) HPLC용 이동상 용매의 제조 ...101
• 라. 표준 검량선의 작성 및 계산 ...101
• 마. 항균제 잔류량 분석 방법 ...102
• (1) Tetracycline 계열 항균제 분석 방법 ...102
• (가) 시료의 전처리 방법 ...102
• (나) HPLC 분석조건 ...103
• (2) 옥소린산 분석 ...107
• (가) 시료의 전처리 ...107
• (나) HPLC 분석조건 ...111
• 3. 연구결과 ...111
• 가. 양식중 어류에서 어종별 항균제 잔류량 ...111
• 나. 어종에 따른 월별 항균제 잔류량 변화 ...113
• 다. 지역별 양식어류에 대한 항균제 잔류량 모니터링 ...117
• 제3절 양식어류 및 해수에서 분리된 병원성 세균의 항균제 내성 모니터링 ...137
• 1. 연구내용 ...137
• 2. 재료 및 방법 ...138
• 가. 항균제 감수성 시험 ...138
• (1) 디스크 확산법(Disk diffusion method) ...138
• (2) 분리된 병원성 세균에 대한 항균제 디스크의 감수성 시험 ...139
• (3) 균종별 항균제 디스크의 종류 ...139
• 나. 시험균주 ...139
• 3. 결과 및 고찰 ...139
• 가. 항균제 내성균의 검출 ...139
• 나. 균종별 내성유형 ...141
• 다. MAR (Multiple Antibiotics Resistance, 다제내성) ...152
• 라. 검출지역에 따른 동일 균종의 항균제 내성유형 ...154
• 4. 결론 ...165
• 제4장 연구개발 달성도 및 대외 기여도 ...168
• 제5장 연구개발결과의 활용성과 및 계획 ...169
• 가. 계량적 성과 ...169
• 나. 성과내용기술 ...169
• 다. 활용계획 ...169
• 제6장 기타 중요변경사항 ...171
• 가. 연구원 변경 ...171
• 나. 연구비 변경 요청 ...172
• 제7장 참고문헌 ...173
• 총괄 연구과제 요약 ...183