초록 ▼

생물학적제제는 생물 유래된 물질이나 생물체를 이용하여 생성시킨 물질을 함유한 의약품으로서 물리적ㆍ화학적 시험만으로는 그 역가와 안전성을 평가할 수 없다. 이러한 생물학적제제의 품질을 평가하기 위한 특성 규명과 정량을 위해서는 표준품의 역할이 필수적이다. WHO(World Health Organization)에서는 생물학적제제의 표준품들을 제조하여 국제 공동연구를 통해 국제표준품을 확립하고, 각 나라에서는 국제표준품을 활용하여 보정한 국가표준품들을 보유하도록 권고하고 있다. 현재 파상풍 톡소이드 백신의 역가시험 방법은 백신으로 면역한

생물학적제제는 생물 유래된 물질이나 생물체를 이용하여 생성시킨 물질을 함유한 의약품으로서 물리적ㆍ화학적 시험만으로는 그 역가와 안전성을 평가할 수 없다. 이러한 생물학적제제의 품질을 평가하기 위한 특성 규명과 정량을 위해서는 표준품의 역할이 필수적이다. WHO(World Health Organization)에서는 생물학적제제의 표준품들을 제조하여 국제 공동연구를 통해 국제표준품을 확립하고, 각 나라에서는 국제표준품을 활용하여 보정한 국가표준품들을 보유하도록 권고하고 있다. 현재 파상풍 톡소이드 백신의 역가시험 방법은 백신으로 면역한 기니픽의 혈청을 파상풍 독소와 중화반응을 시켜 다시 마우스에 주사한 이후 동물의 생사로 역가를 측정하는 독소 중화법(in vivo toxin neutralization test)으로 국가검정 및 제조사의 품질관리 시험법으로 활용되고 있다. 이 방법은 파상풍 독소 및 파상풍 항독소 표준품을 필요로 한다. 2001년에 수행한 연구사업을 통하여 파상풍 독소 국가표준품을 확립한 바 있으며, 본 연구에서는 파상풍 항독소 국가표준품을 제조ㆍ확립하고자 하였다.
실험동물로서 말을 선정하였으며, 면역, 항독소 항체의 분리정제 및 제제화 등은 제주대학교 수의과대학 및 (주)중겸과 함께 수행하였다. 제조한 후보물질은 관련 제조사들과 공동연구 및 통계분석을 통하여 역가를 산정하였으며, 동시에 안정성평가와 특성 분석을 수행하였다. 최종적으로 파상풍 항독소 국가표준품 후보물질은 역가(파상풍 항독소가)가 5.28 IU/vial, 95% 신뢰구간(confidence interval) 5.18 ~ 5.39 이었으며, 단백함량은 40.3 mg, 함습도는 4% 정도, 순도는 90% 이상으로 나타났다. 또한 특성분석 결과 파상풍 독소 및 톡소이드에 대해서만 특이적 반응성을 나타내어 확인(동정)시험용으로도 사용할 수 있으리라 사료된다. 실시간 안정성 평가 및 가속조건에서의 역가시험 결과는 3개월까지 역가의 변화없이 안정함을 확인할 수 있었으나, 지속적인 안정성 평가는 이루어져야 할 것으로 사료된다. 이러한 결과를 바탕으로 생물의약품 국가표준품 등록을 추진하여 파상풍 항독소(KFDA 10/036) 코드를 부여받음으로써 2011년부터 표준품 분양을 할 수 있으리라 예상된다.
파상풍 항독소 국가표준품 제조ㆍ확립을 최종목표로 한 본 연구과제는 그 목표를 충분히 달성하였으며, 최종적으로 생물의약품 국가표준품으로 등록되면서 관련제조사의 품질관리와 국가검정 시험에 활용하여 파상풍 톡소이드 백신의 품질평가 결과에 대한 신뢰성을 확보하고, 규제기관으로서의 위상제고도 꾀할 수 있을 것이다.
더불어 국제표준품을 대체함으로써 NIBSC로부터의 제한적인 항독소 공급으로부터 국내 제조사 및 식품의약품안전청은 신속하게 적기에 필요한 양의 표준품을 사용할 수 있게 되었으며, 항독소 표준품 제조에 대한 기술을 축적함으로써 추후 표준품 사업에 활용될 수 있을 것이다.

Abstract ▼

Biological products as drugs derived from biological substances or organisms, can not be assessed the potency and safety by physical and chemical tests alone. In order to evaluate the quality of the characterization and quantification for these biological products, the role of standards is essential

Biological products as drugs derived from biological substances or organisms, can not be assessed the potency and safety by physical and chemical tests alone. In order to evaluate the quality of the characterization and quantification for these biological products, the role of standards is essential. World Health Organization(WHO) has manufactured and established the international standards of biological products through an international collaborative study. And WHO has advised to hold national standards calibrated with international standard in each country.
Current potency test for tetanus toxoid vaccine is in vivo toxin neutralization test, which is to measure the activity of serum, obtained from guinea pigs immunized with the vaccine, by the animal's fate after incubated with tetanus toxin, re-injected into mice. This test method has been used as national lot release and manufacturer's quality control test method. To perform this method, tetanus toxin and tetanus antitoxin standards are used. National standard for tetanus toxin was established through the study conducted in 2001 already. This study was carried out to establish national standard for tetanus antitoxin.
Cheju National University College of Veterinary Medicine and Joonggyem Antibody Therapy Inc. performed horse selection and immune experimental animals, separation and purification, and formulation of anti-toxin antibodies, etc., and prepared the national standard candidate of tetanus antitoxin. The estimation of potency and stability testing evaluation, characterization of the candidate material was performed through joint collaboration study with the relevant manufacturers. Finally, the activity of tetanus antitoxin national candidate reference material is 5.28 IU/vial, 95% CI (confidence interval) 5.18 ~ 5.39, respectively. And its protein content, moisture content, and the purity was 40.3 mg, 4%, above 90%, respectively. This candidate material showed the specific reactivity only for tetanus toxin and toxoid and can be used also for identity testing. Activity in real-time stability evaluation and accelerated test conditions up to 3 months were found with no change in activity. However, lasting stability assessment is considered to be made. Based on these results, this candidate material was given the code (KFDA 10/036) as tetanus antitoxin national standard through promoting registration for national standard and can be distributed since 2011.
The objective to establish national standard for tetanus antitoxin as a final goal of this research were fully achieved. As registered by National Biological Standards and used on the relevant manufacturers' quality control and national lot release test, the reliability will be obtained for evaluation of the quality of tetanus toxoid vaccine and our position as regulatory agencies will be enhanced. Besides, the manufacturers and the Korea Food and Drug Administration(KFDA) will bring the effect to be free from NIBSC's supply restriction of international standards by replacing international standards with national standards. In addition, anti-toxin standard manufacturing techniques can be used for other anti-toxin standard's establishment.

목차 Contents

• 자체연구개발과제 최종보고서...1
• 표지...2
• 요약문...4
• Summary...5
• 목차...6
• I. 연구개발과제 연구결과...7
• 제1장 연구개발과제의 개요...7
• 제2장 연구개발과제의 국내ㆍ외 연구개발 현황...10
• 제3장 연구개발과제의 연구수행 내용 및 결과...11
• 제4장 연구개발과제의 연구결과 고찰 및 결론...22
• 제5장 연구개발과제의 목표달성도 및 관련분야에의 기여도...23
• 제6장 연구개발과제 연구개발 결과 활용계획...24
• 제7장 참고문헌...25
• 제8장 첨부서류...26
• ○ 붙임1. 파상풍 항독소 국가표준품 등록 코드 부여...26