초록 ▼

○ 축산물중 주요 병원미생물인 대장균 O157:H7, 살모넬라균, 리스테리아균에 대한 표준분리방법과 검출킷트의 효율성을 비교 시험한 결과 IMS법은 최대 10～100cfu/ml 수준 까지 검출할 수 있어 EIA등 다른 킷트 및 균분리 배양법보다 약 2～10배정도 검출효율 이 우수한 것으로 나타났음.
○ 면역자기분리법의 검출방법 개선을 위해 증균액의 여과등에 따른 검출효율 비교에서는 Adventec 여과지로 여과한 시료의 검출율이 우수하였고, 비특이 반응을 줄이기 위한 bead 세척액은 PBS/Tween20+skim milk를

○ 축산물중 주요 병원미생물인 대장균 O157:H7, 살모넬라균, 리스테리아균에 대한 표준분리방법과 검출킷트의 효율성을 비교 시험한 결과 IMS법은 최대 10～100cfu/ml 수준 까지 검출할 수 있어 EIA등 다른 킷트 및 균분리 배양법보다 약 2～10배정도 검출효율 이 우수한 것으로 나타났음.
○ 면역자기분리법의 검출방법 개선을 위해 증균액의 여과등에 따른 검출효율 비교에서는 Adventec 여과지로 여과한 시료의 검출율이 우수하였고, 비특이 반응을 줄이기 위한 bead 세척액은 PBS/Tween20+skim milk를 사용한 경우가 상대적으로 검출효율이 우수하였음.
○ IMS법을 이용한 개발 kit의 적정 Beads 농도는 6.25X106/ml로 선정하였으며, E.coli O157, Salmonella균, Listeria균등 3종 병원성 미생물을 토끼에 면역시켜 항혈청을 생산하고 생산한 혈청의 역가 및 bead coati
○ 대장균 O157, Salmonella균, Listeria균 등에 대한 IMS 개발 kit의 특이성과 민감도를 비교한 결과 특이성과 민감도가 높았으며, 시판 kit와 개발 kit의 검출효율성 비교시험에서도 두 kit간의 검출효율성은 유사한 것으로 나타났음
○ 우육 67시료, 돈육 91시료, 계육 145시료 및 우유 5시료등 총 308시료에 대하여 표준배양법과 병행하여 개발 kit를 현장적용시험한 결과 E. coli O157:H7은 모두 에서 검출되지 않았으며, Salmonella균은 표준배양법 및 면역자기분리법에서 각 1시료씩 검출되었으며, Listeria monocytogenes는 표준배양법에서는 5시료, 면역 자기분리법은 10시료에서 검출되어 면역자기분리법이 표준배양법 보다 민감성이 높은 것으로 나타나 앞으로 표준분리배양법과 병행적용이 가능한 것으로 생각됨.g에 적용할 혈청의 역가를 선정하였음.

Abstract ▼

The aims of this study were i) to evaluate the specificity and sensitivity of Immunomagnetic Separation(IMS) method for the detection of E. coli O157:H7,Listeria spp., Salmonella spp. and ii) to compare the sensitivity of Convetional cultural method with IMS for detecting the these pathogen iii) to

The aims of this study were i) to evaluate the specificity and sensitivity of Immunomagnetic Separation(IMS) method for the detection of E. coli O157:H7,Listeria spp., Salmonella spp. and ii) to compare the sensitivity of Convetional cultural method with IMS for detecting the these pathogen iii) to produce these pathogen antibody coated beads and iv) to apply the coated beads to the field samples. Non-specific binding of other organisms and sample materials to the magnetic beads could be reduced by washing of the beads in PBS/Tween 20/Skim milk and filtering of the stomached sample materials. We compared our coated bead with the commercial diagnostic beads(Dynal, Oslo) about the sensitivity and specificity. We had similar results to the sensitivity and specificity by using our coated beads. The IMS method is more sensitive and simple technique than Convetional cultural method for the isolation of E. coli O157:H7, Listeria monocytogenes, Salmonella spp. on the field samples.

목차 Contents

• 수의과학기술개발연구사업 연구과제 중간보고서 ... 1
• Ⅰ. 연구배경 및 목표 ... 3
• Ⅱ. 재료 및 방법 ... 3
• 1. 재료 ... 3
• 2. 방법 ... 3
• Ⅲ. 결과 ... 6
• 1. 병원성 미생물 검출키트의 효율성 비교시험 ... 6
• 2. 증균배양(대장균 O157)에 따른 면역자기분리법 및 균 분리 배양법 비교 ... 6
• 3. 면역자기 분리법 개선 ... 7
• 4. 병원성미생물 검출을 위한 면역자기분리 킷트 개발 ... 8
• Ⅳ. 고찰 ... 12
• Ⅴ. 결론 ... 13
• Ⅵ. 참고문헌 ... 13
• Ⅶ. 연구결과활용 ... 14