초록 ▼

1. 스피라마이신의 기기분석 조건 확립
가. 스피라마이신은 자외선 232nm의 검출파장에서 이동상은 소량의 디에칠아민 용액 및 아세토나이트릴 (50/50)을 사용한 경우 간섭현상없이 분리능이 가장 좋았음.
나. 칼럼은 $C_1_8$(3.9×150mm, 5㎛)및 PLRP-S(8㎛, 1000Å)에서 스피라마이신의 분리능 및 대칭성이 가장 높았음.
다. 스피라마이신의 정량곡선은 10-100ppm구간에서 양호한 직선성(r> 0.999), 정밀성 ($RSD_r$< 3.3%) 및 정확성(

1. 스피라마이신의 기기분석 조건 확립
가. 스피라마이신은 자외선 232nm의 검출파장에서 이동상은 소량의 디에칠아민 용액 및 아세토나이트릴 (50/50)을 사용한 경우 간섭현상없이 분리능이 가장 좋았음.
나. 칼럼은 $C_1_8$(3.9×150mm, 5㎛)및 PLRP-S(8㎛, 1000Å)에서 스피라마이신의 분리능 및 대칭성이 가장 높았음.
다. 스피라마이신의 정량곡선은 10-100ppm구간에서 양호한 직선성(r> 0.999), 정밀성 ($RSD_r$< 3.3%) 및 정확성($RSD_r_e_c$< 5.7%)을 나타내었음.
라. 스피라마이신의 산제 및 주사제에 대한 회수율은 93.6-97.9%이었음.
2. 표준품 및 원료별 기기분석법(HPLC-UV) 및 기존 미생물학적분석법(Bioassay) 간의 상관성
가. 스피라마이신 표준품에 대한 두가지 분석법간에는 양호한 상관성이 인정되었음 (상관곡선의 기울기=0.9967, r> 0.99).
나. 스피라마이신 시판원료에 대한 두 분석법간에도 유의한 차가 없는 것으로 인정되었음[t값 범위 < 2.447(p=0.05, df=6)].
다. 스피라마이신 시판제품에 대한 두 분석법간 상관성은 단일산제에서는 유의한 차가 없었으나[t값 범위: 0.00-1.04, two tail t=2.57(p=0.05, df=5)], 복합주사제의 경우 미생물학적 분석법이 약간 높았음.
3. 액체크로마토그래프법의 실험실간 반복성 및 재현성
가. 제품에 대한 실험실간 비교실험의 반복성 $RSD_r$값은 0.5-2.7%이었고 재현성 $RSD_R$값은 0.7-2.8%이 었음.

Abstract ▼

High-performance liquid chromatography for spiramycin quantification in raw materials was compared with a microbiological assay using Bacillus subtilis ATCC 6633. Samples were commercial raw materials that were produced in China, France and Japan, and then marketed in Korea. The methanol-phosphate b

High-performance liquid chromatography for spiramycin quantification in raw materials was compared with a microbiological assay using Bacillus subtilis ATCC 6633. Samples were commercial raw materials that were produced in China, France and Japan, and then marketed in Korea. The methanol-phosphate buffer(30/70, v/v) was applied to standard and sample preparations for both HPLC and microbiological assay to keep stability of spiramycin in tests. The HPLC separation was conditioned on a C18 column (150 x 3.9 mm, 5㎛) with 0.1% diethylamine-acetonitrile(50/50, v/v) as the mobile phase at a flow-rate of 1.0 ml/min. The spiramycin I, II and III were detected at 232 nm and its retention time was 5.9, 7.4 and 10.9 minute, respectively. The calibration curve was obtained from 10 to 100㎍/㎖ and linearity, precision, and accuracy of the method were also tested. Agar diffusion method for microbiological assay was performed on using Bacillus subtilis ATCC 6633 spores and the calibration curve was obtained from 6.4 to 15.6㎍/ml according to the protocol described in Korean Pharmacopoeia. For statistic tests, intra-assay coefficient of variation, correlation, and Student' s paired t-test were used. The HPLC-UV method for spiramycin I showed high linearity(r> 0.999), good repeatability(RSDr< 3.3%) and accuracy(RSDrec< 5.7%). The difference between HPLC values and microbiological values was not statistically significant at concentrations tested and the correlation was also high linear(slope=0.9967, r> 0.99). This HPLC-UV method could be replaced microbiological method for quantification of spiramycin in a part of veterinary medicinal products.

목차 Contents

• 연구과제 최종보고서 ... 1
• I. 연구배경 및 목표 ... 2
• II. 재료 및 방법 ... 3
• 1. 재료 ... 3
• 2. 방법 ... 3
• III. 결과 및 고찰 ... 4
• 1. 스피라마이신의 기기분석 조건 확립 ... 4
• 2. 확립 HPLC-UV법을 이용한 스피라마이신의 정량곡선, 반복성 및 회수율 ... 6
• 3. 표준품, 원료 및 시판제품에 대한 기기분석법(HPLC-UV) 및 기존 미생물학적 분석법 (Bioassay)간의 상관성 ... 8
• 4. 액체크로마토그래프법의 실험실간 반복성 및 재현성 ... 10
• IV. 결론 ... 12
• V. 참고문헌 ... 12
• VI. 연구결과활용 ... 13
• VII. 영문초록 ... 13