초록 ▼

가. 제1세부과제명 : 유의 농약 잔류분석법 개선 및 잔류조사
□ 유의 농약 잔류분석법 개선
◦ 국내산 유 및 유가공품 중 잔류허용기준이 설정된 농약 57종 중 동시분석이 가능한 물질을 분석기기별로 나누어 47종의 대상물질 선정
· LC-MS/MS 그룹 : Acephate 등 유기인계 7종, bendiocarb 등 카바메이트계 6종, fenbuconazole 등 아졸계 8종, 기타 9종 등 총 30종
· GC-MS/MS 그룹 : Aldrin 등 유기염소계 5종, fenthion 등 유기인계 6종, bifenth

가. 제1세부과제명 : 유의 농약 잔류분석법 개선 및 잔류조사
□ 유의 농약 잔류분석법 개선
◦ 국내산 유 및 유가공품 중 잔류허용기준이 설정된 농약 57종 중 동시분석이 가능한 물질을 분석기기별로 나누어 47종의 대상물질 선정
· LC-MS/MS 그룹 : Acephate 등 유기인계 7종, bendiocarb 등 카바메이트계 6종, fenbuconazole 등 아졸계 8종, 기타 9종 등 총 30종
· GC-MS/MS 그룹 : Aldrin 등 유기염소계 5종, fenthion 등 유기인계 6종, bifenthrin 등 피레스로이드계 5종, 기타 2종 등 총 17종
◦ 분석기기별 분석조건 및 시료전처리법 확립
· LC-MS/MS 및 GC-MS/MS 분석을 위한 물질별 확인ㆍ정량 이온 선별 및 MRM 분석조건 확립
· LC-MS/MS 분석을 위한 이동상 용매 선정 및 이동상 분석조건 확립
: 5 mM ammonium formate가 포함된 증류수와 acetonitrile의 시간대 비율을 조절하는 gradient program을 사용
· LC-MS/MS 및 GC-MS/MS 분석을 위한 칼럼 선정
: LC의 경우 3개 제조사의 C18칼럼 비교결과 Phenomex사 Kinetex C18 칼럼, GC의 경우 비극성과 중간극성의 칼럼을 비교한 결과 중간극성(Zebron Multiresidue-1, Phenomex)의 칼럼에서 분리능 및 감도가 우수하게 나타남
· 원유시료에 Acetonitrile(1% acetic acid), MgSO₄, NaAcetate 를 하여 농약을 추출 후 원심분리하여 상층액을 C18, PSA, MgSO4 로 정제하였음. 다시 원심분리, 농축, 40% acetonitile(for LC) 또는 aceton (for GC)에 재용해 과정을 거친 후 0.2 ㎛로 필터하여 LC-MS/MS 및 GC-MS/MS 를 이용하여 분석하였음.
◦ 정확도 및 정밀도 등 분석능 검증
· 농도 0.5, 1, 5, 10, 20, 50, 100 ng/mL의 표준용액은 matrix effect를 보정하기 위하여 음성시료를 희석용매로 제조하였으며 표준용액을 분석한 결과 47종 모두 r² > 0.980 이상의 직선성을 나타내었음
· 원유 시료에 농약 표준물질 혼합액을 20, 50, 100 ng/mL 의 농도로 첨가하여 정확도 및 반복 정밀도를 확인한 결과 47종의 회수율 및 변이계수가 각각 20 ng/mL 에서 57.1∼12.5%와 15.6% 이하, 50 ng/mL 에서 78.8∼115.3%와 14.8% 이하, 100 ng/mL 에서 78.4∼119.6%와 11.3% 이하이었으며 47종의 LOD는 0.1∼9.2 ng/mL, LOQ는 0.1∼19.5 ng/mL 이었음
□ 유 및 유가공품의 농약 잔류조사
◦ 조사계획: 경기도를 비롯한 9개 시·도에서 100건의 원유시료 및 수입산 우유, 분유, 유크림, 버터, 치즈 등 5품목 74건의 시료 수거
◦ 조사결과: 9개 시·도(강원, 경기, 경남, 경북, 전북, 전남, 제주, 충북, 충남)의 원유시료 100건의 조사결과 농약이 검출된 예는 없었음. 74건의 유가공품을 분석한 결과 필리핀산유크림 1건에서 유기염소계 살충제 DDT의 분해산물인 p,p‘-DDE 가 0.085 mg/kg(F) 검출되었고, 미국산 치즈 2건에서 피레스로이드계 살충제 permethrin이 0.106 ∼ 0.135 mg/kg(F) 검출되었음. 검출농도는 잔류허용기준을 초과하지는 않았음.
나. 제2세부과제명 : 알의 농약 잔류분석법 개선 및 잔류조사
□ 알의 농약 잔류분석법 개선
◦ 국내산 알 및 수입산 알가공품 중 잔류허용기준이 설정된 농약 42종 중 동시분석이 가능한 물질을 분석기기별로 나누어 37종의 대상물질 선정
- LC-MS/MS 그룹 : Acephate 등 유기인계 6종, bendiocarb 등 카바메이트계 3종, fenbuconazole 등 아졸계 4종, 기타 6종 등 총 19종
- GC-MS/MS 그룹 : Aldrin 등 유기염소계 5종, methidathion 등 유기인계 3종, bifenthrin 등 피레스로이드계 5종, 기타 5종 등 총 18종
◦ 분석기기별 분석조건 및 시료전처리법 확립
- LC-MS/MS 분석은 Phenomex사의 Kinetex C18 칼럼을 이용하고 Ammonium formate를 첨가한 acetonitrile와 D.W를 이동상으로 하여 gradient condition으로 분석
- GC-MS/MS 분석은 ThermoScientific 사의 TR-PESTICIDE 2 칼럼을 이용하고 PTV injector로 주입하여 gradient program으로 분석
- 계란을 대표시료로 하고 QuEChERS 분석법을 적용하여 전처리법 개발. Acetonitrile buffered with Acetic Acid (1%, v/v) 로 추출하고, magnesium sulfate와 sodium acetate로 수분제거 및 탈염과정을 거친 후 dispersive SPE (magnesium sulafte, C18, PSA, GCB)로 정제
◦ 분석법 검증
- 위 분석법을 검증한 결과, 모든 분석물질에서 r² > 0.95, 정량한계는 MRL 이하이었으며, MRL을 고려하여 20 ng/mL, 50 ng/mL, 100 ng/mL에서 정확도 및 정밀도를 검증한 결과 회수율 70∼120% 이내, 변이계수 20% 미만의 값을 나타내어 적절한 분석법으로 평가되었다.
□ 알 및 알가공품의 농약 잔류조사
◦ 조사계획: 경기도를 비롯한 9개 시·도에서 100건의 계란시료 수거 및 수입산 전란액, 전란분, 난황액, 난황분, 난백액, 난백분, 피단 등 7품목 50건의 시료 수거
◦ 조사결과: 9개 시·도(강원, 경기, 경남, 경북, 전북, 전남, 제주, 충북, 충남)의 계란시료 100건 및 난황액(일본, 미국, 중국), 난황분(미국), 난백분(스웨덴, 벨기에, 프랑스, 스페인, 중국, 이탈리아, 미국), 전란액(카나다), 피단(중국) 등 9개국에서 수입된 알가공품 50건에 대한 잔류조사를 실시한 결과 미국산 난황분 1건에서 Permethrin이 검출되었고, 미국산 난황액 1건에서 Carbendazim, Diemthoate 및 Pirimicarb이 미량 검출되었음.

Abstract ▼

Title (1st subtitle) : Development of analytical method and monitoring of pesticide residues in milk
A fast multi-residue method was developed for the screening, quantification and confirmation of 47 pesticides, belonging to different chemical families of insecticides, acaricides, fungicides, her

Title (1st subtitle) : Development of analytical method and monitoring of pesticide residues in milk
A fast multi-residue method was developed for the screening, quantification and confirmation of 47 pesticides, belonging to different chemical families of insecticides, acaricides, fungicides, herbicides and insect growth regulators in raw bovine milk using QuEChERS method with GC-MS/MS and LC-MS/MS. The Optimization of different parameters such as extractionsolvents (acetonitrile, acetone, or ethyl acetate), type of clean-up sorbents (PSA, C18, or GCB), GC and UPLC separation and MS/MS parameters were carried out. The developed method which used acetonitrile/1% acetic acid as an extraction solvent and used PSA/C18 sorbents as a cleanup step was applied. Under the optimized conditions, GC and LC-MS/MS gave linear calibrations (r²> 0.990) over the concentration range from 1 to 100 ng/mL. The recoveries were, with a few exceptions, in the range of 61 - 124 % at the different spiked levels with satisfactory precision (CV ≤ 16 %). The quantification of analytes was carried out using the most sensitive transition for every compound and by matrix-matched standards calibration.
Limits of detection (LOD) and quantification (LOQ) varied from 0.1 – 9.2 ng/mL and 0.2 – 19.5 ng/mL, respectively. After its validation the procedure was used to monitor pesticide residues in dairy products including 100 samples of domestic raw bovine milk and 74 samples of imported milk product (milk powder, cheese, butter, milk cream, etc.). Among the 172 samples analyzed, none showed concentrations above MRLs (maximum residue limits) and 3 samples were found p,p‘-DDE and permethrin at the levels below MRL. The results indicated that the proposed method can be applied to the determination of 47 pesticides which has MRLs in dairy products.
Title (2nd subtitle) : Development of analytical method and monitoring of pesticide residues in eggs
The analytical method of pesticides residues in eggs and egg products was developed using GC-MS/MS and LC-MS/MS after sample treatment by QuEChERS. Multi-residue analyses were conducted for 37 pesticides which has maximum residue limits (MRLs) in Korea. A 2.5 g of egg sample was extracted with 1% acetic acid in acetonitrile followed by removing water and salting out with magnesium sulfate and sodium acetate. Acetonitrile layer was collected and cleaned up by dispersive solid phase extraction with a C18/PSA/GCB/MgSO₄ (=400 mg/400 mg/ 45 mg/1200mg) cartridge. The instrumental analysis was performed using GC-MS/MS with multiple reaction monitoring (MRM) on positive ionization mode and using LC-MS/MS with MRM on positive electrospray ionization mode. The linearity of calibration (r²) was over 0.950 with the concentrations of 0.02, 0.05, and 0.10 ㎍/mL. Limit of detection and quantification varied from 0.1 to 20.4 ng/mL and from 0.4 to 61.7 ng/mL, respectively.
Recoveries ranged from 70.4% to 109.8%, and the coefficients of variation were from 0.7% to 18.7% at the spiked levels. The results indicate that the method provides an effective determination for the multi and trace level of pesticide residues in eggs. The monitoring study was performed for 100 domestic egg samples and 50 imported egg products with the developed muti-residue pesticide analysis method. There were no non-compliance samples, but permethrin was found in a sample of egg yolk powder and carbendazim, dimethoate, and pirimicarb were found in a sample of egg yolk at low levels.

목차 Contents

• 총괄요약표 ... 1
• 연구과제 최종결과보고서 ... 4
• Ⅰ. 연구배경 및 목표 ... 4
• 1. 연구배경 ... 4
• 2. 연구최종목표 ... 5
• 3. 연차별 연구개발 목표 및 내용 ... 5
• Ⅱ. 연구방법 및 수행전략 ... 6
• 1. 재 료 ... 6
• 2. 연구전략 및 방법 ... 6
• Ⅲ. 연구결과 ... 7
• 1. 제1세부과제명 : 유의 농약 분석법 개선 및 잔류조사 ... 7
• 2. 제2세부과제명 : 알의 농약 분석법 개선 및 잔류조사 ... 17
• Ⅳ. 연구결과요약 ... 28
• 1. 제1세부과제명 : 유의 농약 잔류분석법 개선 및 잔류조사 ... 28
• 2. 제2세부과제명 : 알의 농약 잔류분석법 개선 및 잔류조사 ... 28
• Ⅴ. 고찰 ... 29
• Ⅵ. 연구결과 활용실적 및 계획 ... 29
• Ⅶ. 참고자료 ... 30
• Ⅷ. 영문초록 ... 33
• 끝페이지 ... 34