초록 ▼

혈관내에서 여러 가지 내적 외적 변화들에 의해서 혈관 평활근세포는 수축형 세포 (contractile form)에서 수축기능을 상실하고 대신 외부 자극에 대한 다양한 염증매개성 또는 염증반응성 물질을 생산하는 생산형 세포(synthetic form)로 세포의 표현형 변화를 나타내게 된다. 이러한 혈관의 수축반응의 조절과 혈관 구성세포들의 증식과 분화 및 이동의 경우 그 발생과 진행을 초래하는 원인에 대해서는 아직 완전하게 밝혀지지 않아, 본 연구에서는 혈관 내피세포와 더불어 혈관기능에 중요한 영향을 미치고, 급성변화뿐만 아니라 만성

혈관내에서 여러 가지 내적 외적 변화들에 의해서 혈관 평활근세포는 수축형 세포 (contractile form)에서 수축기능을 상실하고 대신 외부 자극에 대한 다양한 염증매개성 또는 염증반응성 물질을 생산하는 생산형 세포(synthetic form)로 세포의 표현형 변화를 나타내게 된다. 이러한 혈관의 수축반응의 조절과 혈관 구성세포들의 증식과 분화 및 이동의 경우 그 발생과 진행을 초래하는 원인에 대해서는 아직 완전하게 밝혀지지 않아, 본 연구에서는 혈관 내피세포와 더불어 혈관기능에 중요한 영향을 미치고, 급성변화뿐만 아니라 만성적인 혈관의 변화에 중요한 역할을 담당하는 혈관 평활근세포에서 나타나는 수축형 세포에서 생산형 평활근세포로의 변화와, 혈관 내막 방향으로의 이동에 관한 연구를 세포골격 단백질중 특히 액틴과 액틴 결합 단백질에 초점을 맞춰 혈관의 구성 및 기능 변화를 이해하고자 하였다.
2011년도
1. 표현형의 변화를 관찰할 수 있는 조직 배양 실험조건 및 관찰 조건들을 확립하였으며 특히 실험동물에서 혈관 평활근 세포를 분리하여 세포배양기에서 배양하는 조건 범위를 확립함.
2. 표현형의 변화에서 세포내의 세포골격 단백질의 발현의 변화와 프로파일의 변화관찰. 혈관평활근세포는 수축형인 경우 수축에 필요한 alpha-smooth muscle actin의 발현에서 표현형이 변화되어 생산형으로 전환됨에 따라서 beta-actin의 발현으로 변화되는 것을 추적 관찰.
3. 표현형의 변화에서 있어서 액틴필라멘트의 변화를 일으키는 다양한 액틴결합단백질들 중에서 신장에 중요한 역할을 담당하는 것으로 알려져 있는 Ena/VASP family 단백질도 세포의 표현형의 변화와 함께 변화한다는 것을 발견.
2012년도
1. 평활근 세포의 표현형에 변화에 따른 세포의 이동에 미치는 영향을 평가하고 평활근 세포의 이동에 미치는 영향을 평가하는 방법을 개발하기 위하여 Wound-healing assay를 이용하여 세포의 이동에 미치는 영향을 평가하는 실험조건을 확립.
2. 표현형이 변화된 혈관평활근 세포의 이동개시과정에서 액틴필라멘트의 신장을 통한 이동개시과정에 VASP 단백질이 필라멘트의 신장부분으로 이동하여 세포의 이동개시에 중요한 역할을 담당하는 기존의 연구결과를 재확인.
3. 세포의 이동에 있어서 중요한 역할은 기계적 자극을 인식하여 세포내로 변화를 매개하는 인티그린 수용체가 관여하고 있으므로 혈관 평활근 조직에서의 인티그린의 발현을 확인하는 스크리닝 연구를 시작하여 이 결과를 약학회지에 논문으로 보고하였으며 또한 표현형의 변화과정에 영향을 미치는 세포외기질(Extracellular matrix, ECM)에 대한 변화를 관찰하기 위해 immunohistochemistry 기법을 이용하여 혈관조직의 ECM중 콜라겐의 발현을 관찰함(Huh & Kim, 약학회지 2013).
2013년도
1. 혈관 평활근의 기능에 영향을 미치는 세포골격단백질중에서 PKC의 활성조절에 영향을 미치는 calponin의 기능을 살펴보기 위해 antisense를 이용한 protein knock-down을 통해서 calponin의 발현이 혈관평활근의 수죽반응에 영향을 미침을 발견하여 논문으로 보고함(Kim et al., BMRI, 2013).
2. 혈관평활근세포에는 다양한 PKC isoform이 발현되어 있으며 특히 이들 조절과 관련하여 PDK site, hydrophobic site, turn motif site중 PDK site와 hydrophobic site가 calponin을 통해 조절되고 있음을 밝힘(Kim et al., BMRI, 2013).
3. 완전 분화된 혈관조직에서 혈관평활근의 단백질 발현을 조절하기위한 시도로서 아데노바이러스벡터(pAd5CMVmcsIRESeGFPpA)를 이용하여 혈관조직을 배양하고 감염을 통한 GFP 단백질의 발현시도를 통해 아데노바이러스를 통한 단백발현은 평활근 에서는 매우 제한적임을 확인하여 보고함(Huh & Kim, 약학회지 2013).
4. 혈관 평활근세포에서 adducin, ERK, caldesmon 등의 세포골격단백질 및 신호전달단백질이 외부의 자극에 의한 PKC 활성에 따른 변화와 parallel하게 조절되고 있음을 확인하였으며 특히 delayed contraction에 관여되고 있음을 발견. 추후의 지연된 수축반응의 이해를 돕는데 기여함(Kim et al., BMRI, 2013).
5. 세포골격의 변화를 전자현미경을 통한 연구를 응용하여 진행하기 위하여 한국기초과학지원연구원의 도움을 받아 혈관의 조직내 세포골격단백질의 변화를 관찰하기 위한 파일럿스터디를 통해 세포골격의 미세구조 관찰조건을 확립함.