초록 ▼

연구결과
필요성 및 목표
○ 항트롬빈III 제조 공정 중 친화 겔 크로마토그래피에 사용하는 헤파린 레진으로부터 헤파린이 유리되어 항트롬핀III 제제에 오염될 경우 출혈 등의 부작용이 우려됨
○ 유럽약전 및 미국약전에는 건조 농축 사람 항트롬빈III 제제의 헤파린 함량 기준이 설정되어 있으며, 국내에도 시험법 확립 및 기준 설정이 필요함
○ 이에, 건조 농축 사람 항트롬빈III의 헤파린 함량 시험법을 개발, 검증하고자 함
방 법 및 결 과
○ FactorXa기반 발색기질시험법(상용 Coatest Hep

연구결과
필요성 및 목표
○ 항트롬빈III 제조 공정 중 친화 겔 크로마토그래피에 사용하는 헤파린 레진으로부터 헤파린이 유리되어 항트롬핀III 제제에 오염될 경우 출혈 등의 부작용이 우려됨
○ 유럽약전 및 미국약전에는 건조 농축 사람 항트롬빈III 제제의 헤파린 함량 기준이 설정되어 있으며, 국내에도 시험법 확립 및 기준 설정이 필요함
○ 이에, 건조 농축 사람 항트롬빈III의 헤파린 함량 시험법을 개발, 검증하고자 함
방 법 및 결 과
○ FactorXa기반 발색기질시험법(상용 Coatest Heparin Kit)와 혈액응고시험법, Thrombin기반 발색기질시험법을 설정하여 비교 시험한 결과, 측정결과의 정밀성, 정확성이 높고 기관 간 결과가 유의수준에서 다르지 않은 Thrombin기반 발색기질시험법을 최종 선택함
○ Thrombin 기반 발색기질시험법에 대하여 제조사와의 공동연구를 수행한 결과 각 기관의 시험결과가 유의수준에서 유사하였으며, 공동연구 기간 중 생산된 항트롬빈III 완제의약품에 대하여 시험법을 적용하여 본 결과 모든 lot에서 헤파린함량이 검출되지 않거나 있더라도 극히 미량으로 추정됨
○ 시험법 밸리데이션 결과 특이성과 검출한계가 적합하였음
기대성과
○ 헤파린 함량 시험법 확립을 통한 시험법의 국제조화로 항트롬빈III제제의 국제경쟁력 제고 및 수출증대 기여
○ 제약사에 선진기법 전수 및 혈액제제 품질관리 향상에 기여

Abstract ▼

Since human antithrombin III (AT) concentrates are obtained by heparin affinity chromatography from human plasma pool, it may contain heparin released from column resin. Therefore the risk of unexpected bleeding or heparin-induced thrombocytopenia by the residual heparin should be considered. In thi

Since human antithrombin III (AT) concentrates are obtained by heparin affinity chromatography from human plasma pool, it may contain heparin released from column resin. Therefore the risk of unexpected bleeding or heparin-induced thrombocytopenia by the residual heparin should be considered. In this study, as a national control laboratory, we plan to establish an assay method for heparin content of human plasma-derived AT concentrates. We examined 3 candidate method described in USP, EP and a manufacturer's protocol. Pilot test results with manufacturer's protocol, which is based on the thrombin-mediated chromogenic assay, showed most acceptable precision and accuracy. The absolute values of Z-score from all laboratories were lower than 2 and it confirmed that they are capable of performing the test well enough to generate accurate results. We designed a collaborative study of 3 laboratories including MFDS to evaluate this method further and found that the intra-laboratory and inter-laboratory precision is appropriate. We also assessed the specificity and LOD (limit of detection) of the method, and concluded they were adequate for measuring heparin contents of AT. As used on the relevant manufacturers' quality control and national lot release test, the safety and reliability of AT products will be enhanced, and the international regulatory harmonization can be promoted.

목차 Contents

• 표지 ... 1
• 자체연구개발과제 최종보고서 ... 2
• 국문 요약문 ... 3
• Summary ... 4
• 목 차 ... 5
• 연구개발과제 연구결과 ... 6
• 제1장 연구개발과제의 개요 ... 6
• 제1절 연구개발과제의 목표 ... 6
• 제2절 연구개발과제의 필요성 ... 6
• 제2장 연구개발과제의 국내·외 연구개발 현황 ... 10
• 제3장 연구개발과제의 연구수행 내용 및 결과 ... 11
• 제1절 공정서 및 해외제조사 시험법 조사 ... 11
• 제2절 시험법 조건 설정 ... 13
• 제3절 예비시험 및 공동연구를 통한 시험법 선정 ... 16
• 제4절 시험법 밸리데이션 ... 22
• 제5절 완제의약품의 헤파린 함량 측정 ... 24
• 제4장 연구개발과제의 연구결과 고찰 및 결론 ... 26
• 제1절 공정서 및 해외제조사 시험법 조사 ... 26
• 제2절 시험법 조건 설정 ... 27
• 제3절 예비시험 및 공동연구를 통한 시험법 선정 ... 28
• 제4절 시험법 밸리데이션 ... 29
• 제5절 완제의약품의 헤파린 함량 측정 ... 29
• 제5장 연구개발과제의 목표달성도 및 관련분야에의 기여도 ... 30
• 제1절 연구개발과제의 목표달성도 ... 30
• 제2절 관련 분야에의 기여도 ... 31
• 제6장 연구개발과제의 연구개발 결과 활용계획 ... 32
• 제1절 활용성과 ... 32
• 제2절 활용계획 ... 32
• 제7장 참고문헌 ... 33
• 제8장 첨부서류 ... 33
• 끝페이지 ... 34