보고서 정보
주관연구기관 |
성균관대학교 산학협력단 SungKyunKwan University |
연구책임자 |
안강모
|
참여연구자 |
이정옥
,
이진영
,
곽문화
,
김재환
,
송지연
,
송우정
,
이지원
|
보고서유형 | 최종보고서 |
발행국가 | 대한민국 |
언어 |
한국어
|
발행년월 | 2016-10 |
과제시작연도 |
2016 |
주관부처 |
식품의약품안전처 Ministry of Food and Drug Safety |
등록번호 |
TRKO201700017547 |
과제고유번호 |
1475009123 |
사업명 |
식품등안전관리 |
DB 구축일자 |
2017-11-25
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키워드 |
유전자변형식품.알레르기성.혈청은행.genetically modified food.allergeniciy.serum bank.
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DOI |
https://doi.org/10.23000/TRKO201700017547 |
초록
▼
연구목표
-혈청을 이용한 유전자변형식품 삽입단백질 11종의 알레르기성 평가 자료에 대한 검증 및 혈청은행 구축
연구내용
-환자 혈청을 이용한 유전자변형식품 삽입발현단백질(CSR-1, DMO, AAD-1, AAD-12, CspB, Pj.D6D, Nc.Fad3, eCry3.1Ab, avhppd-03, hppdPfW336, EPSPS GRG23Ace5)의 알레르기성 검증 실험
-알레르기성 실험에 필요한 상기 11종의 미생물을 이용한 발현 시스템 구축
-유전자변형식품 알레르기성 실험을 위한 알레르기 환자의
연구목표
-혈청을 이용한 유전자변형식품 삽입단백질 11종의 알레르기성 평가 자료에 대한 검증 및 혈청은행 구축
연구내용
-환자 혈청을 이용한 유전자변형식품 삽입발현단백질(CSR-1, DMO, AAD-1, AAD-12, CspB, Pj.D6D, Nc.Fad3, eCry3.1Ab, avhppd-03, hppdPfW336, EPSPS GRG23Ace5)의 알레르기성 검증 실험
-알레르기성 실험에 필요한 상기 11종의 미생물을 이용한 발현 시스템 구축
-유전자변형식품 알레르기성 실험을 위한 알레르기 환자의 임삼정보 수집 및 혈청 확보
연구결과
-소아를 대상으로 식품 알레르겐에 대한 특이IgE를 ImmunoCAP(Phadia, Uppsala, Sweden)으로 측정하여 양성으로 판정된 경우와, 성인에서는 피부단자시험 혹은 MAST법에 의해 식품 특이 IgE가 양성으로 나온 경우를 대상으로 하였음. 2개 병원( 삼성서울병원, 서울대학교병원)에서 각각 456명 및 133명의 임상정보와 혈청을 수집하여 냉동보관하고 있으며 식약처에 제공할 예정임.
-유전자변형 콩, 옥수수에 각각 삽입되어 있는 신규단백질(CSR-1, DMO, AAD-1, AAD-12, CspB, Pj.D6D, Nc.Fad3, eCry3.1Ab, avhppd-03, hppdPfW336, EPSPS GRG23Ace5)에 대한 유전자를 성공적으로 클로닝하여 대장균에서 다량 발현시킨 후 affinity chromatography를 통해 순수분리 정제하였음.
-순수 분리정제한 11종의 신규단백질과 환자의 혈청을 이용하여 immunoblotting을 통해 혈청선별검사를 시행하였음. 10종의 단백질(CSR-1, DMO, AAD-1, AAD-12, CspB, Pj.D6D, Nc.Fad3, eCry3.1Ab, hppdPfW336, EPSPS GRG23Ace5)에서는 반응성을 발견할 수 없었으나 유전자변형 콩단백질 avhppd-03에 대하여 특이 IgE가 발견되었다. 이는 pepsin 처리에 쉽게 분해되어 식품알레르기를 일으키지는 못할 것으로 판단된다.
연구활용방안
-유전자변형식품에 삽입되어 있는 단백질의 발현 및 분리정제와 혈청 스크리닝을 시행함으로써 새로운 유전자변형식품의 알레르기 안전성 평가를 시행하였고, 이러한 경험과 기술은 향후 표준화된 시스템으로서 활용할 수 있음.
(출처 : 국문 요약문 6p)
Abstract
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Purpose: The purpose of this study was to evaluate the safety of potential allergenicity of genetically modified soybean and maize.
Results:
-Sera were obtained from allergic patients who are sensitized against egg white, cow’s milk, soybean, peanut, wheat and maize. Specific IgE was measu
Purpose: The purpose of this study was to evaluate the safety of potential allergenicity of genetically modified soybean and maize.
Results:
-Sera were obtained from allergic patients who are sensitized against egg white, cow’s milk, soybean, peanut, wheat and maize. Specific IgE was measured by ImmunoCAP (Phadia, Uppsala, Sweden) or skin prick test. A total of 456 sera from allergic children and 133 sera from allergec adults were collected.
-Newly inserted gene was sequenced and cloned from GM soybean and GM maize. Proteins were expressed by these newly inserted genes(CSR-1, DMO, AAD-1, AAD-12, CspB, Pj.D6D, Nc.Fad3, eCry3.1Ab, avhppd-03, hppdPfW336, EPSPS GRG23Ace5) and purified for serum screening.
-Serum screening test(Immunoblot analysis) was done using patients sera and newly inserted protein in GM soybean and GM maize. The novel proteins(CSR-1, DMO, AAD-1, AAD-12, CspB, Pj.D6D, Nc.Fad3, eCry3.1Ab, hppdPfW336, EPSPS GRG23Ace5) did not show any reactivity with sera from allergic patients, while avhppd-03 was bound with sera containing specific IgE against soybean. However, avhppd-03 was easily degraded by pepsin digestion.
This result suggest that proteins encoded by newly inserted gene in GM soybean and maize are not likely to develop allergic reactions.
Future plan: The allergenicity of GM soybean and maize was assessed by immunoblot analysis using sera from allergic children and proteins encoded by newly inserted genes.
These methods such as collection of sera, purification of recombinant proteins, pepsin digestion analysis, etc. can be used for allergenicity assessment of GM food.
(출처 : Summary 8p)
목차 Contents
- 표지 ... 1
- 용역연구개발과제 최종보고서 ... 2
- 제출문 ... 3
- 목차 ... 4
- Ⅰ. 총괄연구개발과제 요약문 ... 6
- 국문 요약문 ... 6
- Summary ... 8
- Ⅱ. 총괄연구개발과제 연구결과 ... 10
- 제1장 총괄연구개발과제의 목적 및 필요성 ... 10
- 제2장 총괄연구개발과제의 내용 및 방법 ... 12
- 제3장 총괄연구개발과제의 최종결과 및 고찰 ... 18
- 제4장 총괄연구개발과제의 연구성과 ... 53
- 제5장 총괄주요연구 변경사항 ... 54
- 제6장 총괄참고문헌 ... 55
- 제7장 총괄첨부서류 ... 57
- 끝페이지 ... 58
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