초록 ▼

항암면역 세포치료제가 지니는 한계점인 노화 및 세포사를 극복하고 생체 내 생존증대를 유도하기 위하여 종양 타겟팅 기능을 부여한 Long-lived NK 세포와 항원 특이적 T세포를 제작하여 재발암/내성암에 효과적인 복합면역 세포 치료 원천기술을 개발하고자 함.
● Ex vivo Tumor-specific T 세포 및 Human NK 세포 제작 및 배양기술 확립
● Human NK 세포와 T 세포 에서 노화와 세포사를 극복하고 체내 생존능 증대를 유도하는 메카니즘 연구
● 면역세포의 체외 증식 효율 향상 기술 개발 및

항암면역 세포치료제가 지니는 한계점인 노화 및 세포사를 극복하고 생체 내 생존증대를 유도하기 위하여 종양 타겟팅 기능을 부여한 Long-lived NK 세포와 항원 특이적 T세포를 제작하여 재발암/내성암에 효과적인 복합면역 세포 치료 원천기술을 개발하고자 함.
● Ex vivo Tumor-specific T 세포 및 Human NK 세포 제작 및 배양기술 확립
● Human NK 세포와 T 세포 에서 노화와 세포사를 극복하고 체내 생존능 증대를 유도하는 메카니즘 연구
● 면역세포의 체외 증식 효율 향상 기술 개발 및 이종이식 동물암 모델에서 가능성 있는 병용 치료법 제시
● Long-lived NK 세포 치료제제 및 종양 조직 타겟팅 가능 면역세포 치료제제 개발 및 동소이식 동물암 모델 구축을 통한 최적의 병용 치료법 개발
● 개발된 면역 세포 치료제의 안전성 및 독성 평가 및 기발굴한 표적 지향성 복합 면역 세포 치료제 안전성 및 독성 평가

(출처 : 보고서 요약서 3p)

Abstract ▼

Purpose & Contents
In order to overcome limitations of anti-tumor immune cell therapeutic agents, namely senescence and apoptosis, and induce in vivo persistence, we plan to construct long-lived NK cells equipped with tumor trafficking and stemness functions and tumor antigen specific stem-like c

Purpose & Contents
In order to overcome limitations of anti-tumor immune cell therapeutic agents, namely senescence and apoptosis, and induce in vivo persistence, we plan to construct long-lived NK cells equipped with tumor trafficking and stemness functions and tumor antigen specific stem-like central memory T cells and thereby develop source technologies of anti-tumor treatments effective to recurrent and resistant cancers.

Results
1. Construction of and establishment of technologies to culture human tumor-specific T cells and NK cells.
- Construction of tumor-specific (NYESO-1 and WT-1) T cells originated from melanoma patients and normal people: Construction of anti-tumor specific CD45RO+CD28-CD127- T cells.
- Construction of human primary NK cells originated from cancer patients and normal people: KL1+LCL feeder cell line (Patent: 10-2015-0024098,10-2015-0098269 (South Korea), 14/339371, 15/204,407 (USA), 201380028253.3 (China), technology transfer (technology trasnfer to nkmax(2016).

2. Studies for mechanisms to overcome senescence and apoptosis in human NK cells and T cells and thereby to induce in vivo persistence.
- Analysis of expression changes in important genes following senescence and apoptosis in immune cells (NK/T cells).
- Analysis of expression changes in stemness-related genes to enhance in vivo persistence of immune cells.
- Cloning of and construction of viral vectors including genes related to anti-senescence, anti-apoptosis and in vivo persistence.

3. Development of technologies to enhance ex vivo expansion efficiency of immune cells through overcoming senescence/apoptosis of immune cells.
- Discovery of small molecule regulators to culture long-lived immune cells.
- Development of technologies to enhance ex vivo expansion efficiency of NK cells employing inhibitors against apoptosis, ER stress and ROS (Patent: 10-2015-0098269).

4. Development of long-lived NK cell therapeutic agents with enhanced in vivo persistence
- Construction of long-lived NK cells enhanced in viability and anti-tumor activities employing stepwise hypoxic condition (Patent:10-2016-0053418).
- Discovery of in vivo persistence related genes through analyzing gene expression patterns between long-lived NK cells made in hypoxic condition and normal control NK cells (AK3L1, PFKFB4, MT1G, ANKRD37, BNIP3).

5. Development of immune cell therapeutic agents capable of tumor tissue trafficking
- Screening of cytokines and chemokines capable of tumor trafficking (CXCR2, CXCR3, CXCR6, CCR5, CCR8, CCR10) and construction of NK/T cells expressing their cognate receptors.

6. Development of optimum combination therapies through establishing xenograft and orthotopic animal tumor models.
- Suggestion of combination therapies using modulators to regulate tumor microenvironment as well as immune cell therapies and anti-tumor virotherapy agents in xenograft and orthotopic animal tumor models (Patent: 10-2016-0088646).
- Suggestion of possibility for combination therapy of NK cells and T cells.

7. Evaluation of safety and toxicity of developed immune cell therapeutic agents
- Evaluation of efficacy and safety of long-lived NK cells and immune cells (NK/T) capable of tumor tissue trafficking: in vivo.
- Suggestion of optimum target-oriented anti-tumor immunotherapy technologies through combination therapies of agents to control tumor microenvironment as well as tumor killing viruses.

Expected Contribution
● Securement of source technologies through developing expansion technologies of long-lived NK cells and central memory T cells and expectation to acquire international patents and produce high values by developing combination therapies such as anti-tumor therapy, immunomodulators and virotherapeutic agents.
● Application of developed "expansion techniques of long-lived NK cells and central memory T cells" not only to melanoma and breast cancers but also all kinds of cancers with tumor antigens, and thereby significant expansion of ranges of cancer patient groups.

(출처 : SUMMARY 5p)

목차 Contents

• 표지 ... 1
• 제 출 문 ... 2
• 보고서 요약서 ... 3
• 국문 요약문 ... 4
• SUMMARY ... 5
• CONTENTS ... 6
• 목차 ... 7
• 제1장. 연구개발과제의 개요 ... 8
• 1. 연구개발 목적 ... 8
• 2. 연구개발의 필요성 ... 8
• 3. 연구개발 범위 ... 8
• 제2장. 국내외 기술 개발 현황 ... 9
• 1. 국내․외 관련 기술의 현황 ... 9
• 2. 국내․외 지식재산권 현황 ... 14
• 3. 국내․외 시장현황 ... 17
• 제3장. 연구 수행 내용 및 성과 ... 19
• 1. 1차년도 연구수행 내용 및 결과 ... 29
• 2. 2차년도 연구수행 내용 및 결과 ... 58
• 3. 3차년도 연구수행 내용 및 결과 ... 117
• 4. 연구개발성과 ... 151
• 제5장. 연구개발성과의 활용계획 ... 152
• 1. 내성암과 재발암의 발생 메카니즘 발굴로 타 치료제의 타겟으로 응용가능 ... 152
• 2. NK 세포와 T 세포의 노화 (senescence) 및 세포사 (apoptosis) 메카니즘에 대한 보다 나은 이해제공 ... 152
• 3. 줄기능 (stemness)이 도입된 새로운 NK 및 T 세포치료제의 타 질환에서의 활용가능 ... 152
• 4. NK 세포와 T 세포의 종양타겟팅 증대에 따른 치료효능 향상 ... 152
• 5. 본 연구결과의 산물은 추가연구를 통한 기업화와 기술이전을 가능케 함 ... 152
• 제6장. 연구 과정에서 수집한 해외 과학기술 정보 ... 153
• 1. 해외 과학기술 정보수집을 위한 교류 ... 153
• 2. Human NK 세포로 유전자 주입(transduction)을 위한 lentiviral vector를 사용한 해외 과학 기술 정보 ... 154
• 2. Human T 세포로 유전자 주입(transduction)을 위한 lentiviral vector를 사용한 해외 과학 기술 정보 ... 157
• 제7장. 연구개발성과의 보안등급 ... 163
• 제8장. 국가과학기술종합정보시스템에 등록한 연구시설·장비현황 ... 164
• 제9장. 연구개발과제 수행에 따른 연구실 등의 안전 조치 이행 실적 ... 165
• 제10장. 연구개발과제의 대표적 연구 실적 ... 168
• 제11장. 기타 사항 ... 169
• 제12장. 참고 문헌 ... 170
• 끝페이지 ... 172