초록 ▼

◦세부과제명: 구제역 감수성 동물 모델의 작성과 평가
가. 마우스에서의 감수성 바이러스 작성
- 일반 C57BL/6 마우스에 구제역 바이러스 역계대 실시
- 역계대하여 확보된 바이러스를 사용하여 마우스에서 병원성 획득 여부 실험
- 병원성을 획득한 6주*의 구제역 바이러스를 이용하여 LD₅₀를 측정
* O Jincheon, A Malaysia97, Asia1 Mongolia, C3 Resende, SAT1 Bot1, SAT3 Zim strains
- 상용백신에 대한 마우스 LD

◦세부과제명: 구제역 감수성 동물 모델의 작성과 평가
가. 마우스에서의 감수성 바이러스 작성
- 일반 C57BL/6 마우스에 구제역 바이러스 역계대 실시
- 역계대하여 확보된 바이러스를 사용하여 마우스에서 병원성 획득 여부 실험
- 병원성을 획득한 6주*의 구제역 바이러스를 이용하여 LD₅₀를 측정
* O Jincheon, A Malaysia97, Asia1 Mongolia, C3 Resende, SAT1 Bot1, SAT3 Zim strains
- 상용백신에 대한 마우스 LD₅₀확인된 바이러스를 이용한 공격접종 실험 실시
· O Jincheon, A Malaysia97으로 효능평가에 대한 방법 설정 실험 실시

나. 구제역 감수성 형질전환 마우스 작성
- 구제역 감수성 실험동물 모델을 작성하기 위해서 구제역 바이러스의 주요 세포수용체인 bovine ανβ₆ integrin을 작성
- 작성된 세포 수용체를 BHK-21세포에 삽입 발현하고 구제역바이러스 증식을 통한 증식성 확인
- 증식성이 확인된 세포수용체를 C57BL/6 마우스에 삽입하여 형질전환 마우스 생산
- bovine integrin 세포수용체가 형질 전환된 마우스에 구제역바이러스 공격접종실험을 통한 혈통 선별 작업하여 4대까지 진행
- 혈통 선별 작업 개선을 위한 bovine integrin αν 및 β₆ 유전자 확인작업 실시
* TG mouse에 대한 유전자 삽입 확인(PCR, RNA별 확인)하여 143 line군은 bovine integrin αν 및β₆ 유전자가 모두 확인되고 163 line군은 bovine integrin β₆ 유전자만 확인
* IP 확인 결과 protein level에서 확인가능하나 과발현으로 보기 힘듦
* 마우스 감수성 구제역 바이러스 공격접종결과 wild type에 비해 감수성이 없음

◦세부과제명: 동물 모델에서의 구제역 방어능 평가 및 평가방법 확립
가. 상용화된 후보 백신 접종후 방어능 평가
- 상용백신에 대한 마우스 LD₅₀확인된 바이러스를 이용한 공격접종 실험 실시
* A Malaysia97에 대한 효능평가를 통해 mouse PD₅₀ 확인
- 마우스 감수성 확인 바이러스를 이용한 효능평가 방법 설정
* 공격접종 주령별 마우스 감수성 차이 확인
* 공격접종 경로에 따른 치사율 확인: 복강접종에서만 치사율 확인됨
* 백신접종후 경시별 공격접종에 따른 방어능 평가를 통해 공격접종 시기 결정

나. 개발중 후보백신 접종후 작성된 바이러스로 방어능 평가
- 진천 시험 백신에 대한 마우스 LD₅₀확인된 바이러스를 이용한 공격접종 실험 실시
* 진천 시험 백신 고역가(10ug/dose) 및 저역가(2ug/dose)에 대한 효능평가를 통해 mouse PD₅₀ 확인과 목적동물(돼지) PD₅₀ 확인 시험 진행

(출처 : 연구결과 요약 2p)