초록 ▼

연구개요
◌ 본 연구에서는 국내 자생 오리방풀 유래 멜라닌 생합성 저해 생리활성물질의 기능성원료 와 연관된 생명공학 기술, 피부 세포 in vitro 미백효능 검증 및 작용기전 규명과 동물대체시험시스템(피부세포 기반 자체 제작 human 3D tissue culture, zebrafish)및 Proteomics를 활용한 신규 미백단백질 도출에 관한 평가기술을 개발한다면, 미래의 미백 기능성 화장품 개발방향을 제시할 수 있고, 기존 미백물질과 차별화된 신규 미백 기능이 있는 활성소재를 개발하여 피부기능성 원료의 수입대체효과와 기

연구개요
◌ 본 연구에서는 국내 자생 오리방풀 유래 멜라닌 생합성 저해 생리활성물질의 기능성원료 와 연관된 생명공학 기술, 피부 세포 in vitro 미백효능 검증 및 작용기전 규명과 동물대체시험시스템(피부세포 기반 자체 제작 human 3D tissue culture, zebrafish)및 Proteomics를 활용한 신규 미백단백질 도출에 관한 평가기술을 개발한다면, 미래의 미백 기능성 화장품 개발방향을 제시할 수 있고, 기존 미백물질과 차별화된 신규 미백 기능이 있는 활성소재를 개발하여 피부기능성 원료의 수입대체효과와 기능성화장품을 포함한 전반적인 국내 화장품산업의 국제 경쟁력을 확보할 수 있을 것으로 사료됨.

연구 목표대비 연구결과
◌ 1단계(1년차): 국외 논문 SCI 3편 및 국내논문 1편 게재
• 오리방풀을 확보하여 메탄올로 추출하여 추출물을 확보하고, 용매순차분획에 의해 Hexane, EtOAc, BuOH, H₂O 다양한 유기용매 추출물 제조 및 확보
• 각 분획물에 대한 멜라닌 생합성 저해 효능과 in vivo Zebrafish 모델에서의 효능을 확인 하였음.
• 피부세포 기반 3D skin tissue cell lines 배양에 필요한 culture insert를 이용한 배양을 시작으로 시스템 구축하기 위한 실험법을 확립하기 위한 준비 마련
• 미백 단백질 발굴을 위한 프로테오믹스 기반기술을 확립하고자 실험방법 준비
◌ 2단계(2년차): 국제학술대회 2편, 국내학술대회 3편 발표 및 우수포스터상수상
• 오리방풀 추출물로부터 멜라닌생합성에 효능이 있는 2종의 화합물을 분리, 정제, 구조 동정과 함께 멜라닌생합성에 효능이 있는 결과를 도출하였음.
• 오리방풀 유래 화합물의 멜라닌 생합성 경로에서 중요한 역할을 담당하는 단백질 억제 효능을 검증하였음.
• 프로테오믹스 기법에 관한 구축은 완료하였음.
◌ 3단계(3년차): 국내 논문 1편 게재, 국내학술대회 2편 발표 및 석사 1명, 석사 수료생 2명
• 오리방풀 유래 화합물의 세포내 기전을 알아보기 위해, MITF, p-AKT, p-ERK에 대한 단백질 발현 정도를 확인해본 결과, MB302는 phsphorlyation AKT를 통해서 멜라닌 합성을 저해 시키는 것으로 사료됨.
• 오리방풀 유래 화합물의 Proteomics기법은 구축을 완료하였으나, 이미지분석 및 기기분석등이 미흡하여, 이를 활용한 단백질 발굴은 진행중에 있음.
• 피부세포 기반 3D skin tissue cell lines 배양법은 구축 완료하였음.
• Zebrafish를 이용한 in vivo 에서의 오리방풀 유래 유효성분의 미백효능과 안전성을 확인 하였음.
• 다기능성으로 항산화, 항염증 및 항바이러스 활성을 확인해본 결과, 염증반응 지표인 NO 생성 저해능, IL-1β의 생성을 억제하였고, 단백질과 기전을 알아보는 실험을 한 결과, ERK의 phosphorylation을 저해하여, 염증 저해 및 항산화와 항바이러스 효능도 검증함.

연구개발결과의 중요성
◌ 본 연구는 기 확립된 in vivo zebrafish embryo model과 in vitro 미백활성 연구 시스템을 기본으로 가장 근접한 인체 적응 실험인 피부세포기반 3D human skin tissue 자체 제작을 통해 미백활성을 검증하고, 미백과 관련 단백질 발굴하고자, 프로테오믹스 기법을 확립하여, 향후 신규소재 처리에 따른 신규 미백단백질에 대한 새로운 메커니즘 규명에 관한 연구가 가능할 것으로 판단되며, 현재까지 보고된 미백에 관한 연구 논문이나 기타 미백소재 관련 과학적 수행방법보다 한 단계 앞서고, 유럽 화장품시장에서의 동물실험에 대한 까다로운 규제를 넘어서는 효과적이고 창의적인 방법으로서, 미백분야의 연구를 주도할 뛰어난 연구 성과가 될 것이라고 사료됨.

(출처 : 요약문 2p)

목차 Contents

• 표지 ... 1
• 연구결과 요약문 ... 2
• 목차 ... 3
• 1. 연구개발과제의 개요 ... 3
• 2. 연구수행내용 및 연구결과 ... 4
• 2-1. 1차년도 수행 연구실적(2015. 11. 1 ~2016. 10. 31) ... 4
• 2-2. 2차년도 수행 연구실적 (2016. 11. 1. ~ 2017. 10. 31.) ... 11
• 2-3. 3차년도 수행 연구실적 (2017. 11. 1. ~ 2018. 10. 31.) ... 15
• 3. 연구개발결과의 중요성 ... 33
• 4. 참고문헌 ... 34
• 5. 연구성과 ... 36
• 끝페이지 ... 38