초록 ▼

1. 후보물질 탐색을 위하여 1차에는 GM-CSF를 기준으로 API 요소 첨가한 8종의 oncolytic 바이러스를 제작함. 2차에는 shTGF-β/shHSP25를 기준으로 API 요소 첨가한 12종의 oncolytic 바이러스를 제작함. - 도입된 유전자서열상동성, 발현 등이 정상적임을 확인함.
2. 마우스 모델용 간암 BNL 1ME A.7R.1에 HSP25와 CAR, E1B55 KD를 발현시키게 한 세포주를 제작함. - 도입된 3가지 유전자들의 발현 및 감염율, 복제율 증가 확인함.
3. 마우스 type의 선도물질을

1. 후보물질 탐색을 위하여 1차에는 GM-CSF를 기준으로 API 요소 첨가한 8종의 oncolytic 바이러스를 제작함. 2차에는 shTGF-β/shHSP25를 기준으로 API 요소 첨가한 12종의 oncolytic 바이러스를 제작함. - 도입된 유전자서열상동성, 발현 등이 정상적임을 확인함.
2. 마우스 모델용 간암 BNL 1ME A.7R.1에 HSP25와 CAR, E1B55 KD를 발현시키게 한 세포주를 제작함. - 도입된 3가지 유전자들의 발현 및 감염율, 복제율 증가 확인함.
3. 마우스 type의 선도물질을 포함한 다양한 후보물질들을 간암마우스 모델에서 항암효능 검증함 (총 3차례 실시) 그 결과 YSC-02의 항종양효과 및 면역활성이 가장 우수함을 확인함.
4. anti-PD1 단독과 마우스 type YSC-02 단독 및 anti-PD-1+mYSC-02 combination 효능 비교(간암 및 흑색종)하려고 하였으나 anti-PD1 항체의 항종양효과가 2차례의 마우스실험에서 나타나지 않아 그 원인을 규명한 결과 마우스 암세포주들 (BNL, B16BL6)에서 PD-L1 이 발현되지 않음을 확인하고 BNL과 B16BL6에 mouse type의 PDL-1 유전자를 도입한 후 anti-PD1 항종양 효과 유무를 다시 확인하는 실험을 진행중임.
5. PK/PD 시험시 종양혹은 피하로 전달된 아데노바이러스들은 고농도에서 다른 장기에서 초기에는 검출되나 시간이 흐르면서 검출되지 않음. 마우스 type의 YSC-02의 GM-CSF 혈액 및 조직내 소실경 향성 및 종양내 잔존양 및 발현경향성 파악함 (바이러스 잔존여부, 싸이토카인 발현여부, 조직검사)-혈액내에서 GM-CSF 발현이나, 종양내에서 아데노바이러스 발현이 검출됨을 확인하고 다른 장기에서 는 감염초기에만 검출되고 그 이후 급속히 감소함. 다른 장기에서의 조직이상은 발견되지 않음.
6. human type의 YSC-02의 예비독성이나 mouse type의 YSC-02의 예비독성 실험결과 모두에서 고농도에서도 간독성은 나타나지 않았으며 실험기간 (30일)동안 모두 생존함.

(출처 : 보고서 요약서 3p)

Abstract ▼

1. For the screening of leading compound, 8 kinds of oncolytic adenovirus which were composed of GM-CSF-based APIs were constructed at 1st trial and 12 kinds of oncolytic adenovirus which were composed of shTGF-β/shHSP25-based APIs were constructed at 2nd trial. Also, all kinds of viral constructs h

1. For the screening of leading compound, 8 kinds of oncolytic adenovirus which were composed of GM-CSF-based APIs were constructed at 1st trial and 12 kinds of oncolytic adenovirus which were composed of shTGF-β/shHSP25-based APIs were constructed at 2nd trial. Also, all kinds of viral constructs have the same DNA base homology with their corresponding target genes and expressed inserted target genes normally.
2. A special mouse liver cell line of BNL 1ME A.7R.1 expressing HSP25, CAR, and E1B55 KD was constructed.
3. Anti-tumor effects by various candidates including a leading compound of mouse type (mYSC-02) were demonstrated in mouse liver cancer model. Among them, mYSC-02 was proven to have the most potent anti-tumor effect.
4. Due to the deficiency of PD-L1 expression in cancer cell lines used in mouse model, the antitumor effect of anti-PD1 antibody to liver and melanoma mouse models were proven not to be confirmed.
5. From PK/PD test, intratumoral or subcutaneous delivery of adenovirus was not rarely detected in other organs. However, GM-CSF in the blood and replicating adenovirus in the tumor tissue were detected in steady amount at least in a week.
6. Preliminary toxicity test of human type YSC-02 or mouse type YSC-02 revealed undetectable even in highest concentration of virus.

(출처 : SUMMARY 7p)

목차 Contents

• 표지 ... 1
• 제출문 ... 2
• 보고서 요약서 ... 3
• 요 약 문 ... 4
• SUMMARY ... 7
• CONTENTS ... 8
• 목차 ... 9
• 제1장 연구개발과제의 개요 ... 10
• 제2장 국내외 기술개발 현황 ... 15
• 제3장 연구개발 수행 내용 및 결과 ... 17
• 1. 마일스톤 1 (2016.09.20~2017.09.19) 선도물질 ... 17
• 제4장 목표달성도 및 관련분야에의 기여도 ... 74
• 제5장 연구개발결과의 활용계획 ... 74
• 제6장 연구개발과정에서 수집한 해외과학기술정보 ... 75
• 제7장 연구시설ㆍ장비 현황 ... 75
• 제8장 참고문헌 ... 75
• 끝페이지 ... 76