초록 ▼

면역글로불린제제 중 정맥주사용 사람면역글로불린(말토즈 첨가 사람면역글로불린, 글리신첨가 사람면역글로불린, 정맥주사용 B형간염 사람면역글로불린)은 완제의약품에 대하여 면역글로불린 중합물(polymer 또는 aggregate)의 함량을 측정하는 중합물부정시험과, 중합물과 보체 결합정도를 측정하는 항보체성부정시험을 실시한다. 항보체성부정시험은 면역글로불린제제 내 중합물이 보체와 결합하는 수준을 측정하고 그 한도를 관리함으로써, 면역글로불린제제 주사에 의한 부작용을 예방하기 위하여 수행하는 실험이다. 현재 사용중인 우리나라 생기 제2법은

면역글로불린제제 중 정맥주사용 사람면역글로불린(말토즈 첨가 사람면역글로불린, 글리신첨가 사람면역글로불린, 정맥주사용 B형간염 사람면역글로불린)은 완제의약품에 대하여 면역글로불린 중합물(polymer 또는 aggregate)의 함량을 측정하는 중합물부정시험과, 중합물과 보체 결합정도를 측정하는 항보체성부정시험을 실시한다. 항보체성부정시험은 면역글로불린제제 내 중합물이 보체와 결합하는 수준을 측정하고 그 한도를 관리함으로써, 면역글로불린제제 주사에 의한 부작용을 예방하기 위하여 수행하는 실험이다. 현재 사용중인 우리나라 생기 제2법은 표준품을 사용하여 시스템적합성을 확인하지 않고, 보체대조군을 시험하지 않으며, 시험 절차도 유럽약전 및 일본 생기 시험법과 차이를 갖는다. 따라서 생기 제2법 시험결과는 다른 두 공정서의 시험법 결과와 비교하기 어렵고, 시험법 특성상 최근 허가된 100 mg/mL 정맥주사용 글리신첨가 면역글로불린제제 등과 같은 고함량 제제에 적용하기 어려운 한계가 있다. 본 연구를 통하여 유럽약전에 기반한 항보체성부정시험법을 설정하고 검증하여, 보다 다양한 제품에 적용 가능하며 완건성을 확보한 표준화된 시험법을 마련하고자 하였다. 유럽약전에 기반한 항보체성부정시험법을 설정하고 ICH Q2(R1)가이드라인에 따라 시험법을 검증하였다. 정확성 및 실험실내 정밀성 시험에서는 EDQM BRP를 표준품으로 제조한 양성/음성 대조군을 두 시험자가 각각 3일간 3회씩 시험한 결과 양성대조군의 항보체가가 62.39～76.50 %(평균: 68.64 %), 음성대조군은 13.90～24.93 % (평균: 19.09 %)로 모두 유효성 기준(양성대조군 60～100 %, 음성대조군은 10～40 % 이내여야 함)에 적합하였고, CV값이 20 %이하로 기준에 만족하였다. 실험실간 정밀성 시험에서는 세 기관(A, B, C)이 3일간 EDQM BRP 양성대조액, 음성대조액, 정상검체, 가혹검체를 3반복씩 시험한 결과 CV 값이 양성대조군은 7.42 %, 음성대조군은 9.34 %, 정상검체는 19.53 %, 가혹검체는 6.93 %로 실험실간 정밀성 기준에 적합하였다.

특이성 시험에서는 Formulation buffer, Gelatin barbital buffer의 항보체가는 EDQM BRP(Negative control) 미만의 결과가 나왔고, 정상검체, Human Serum Proteins(NIBSC 74/520)의 항보체체가는 EDQM BRP(Negative control) 이상으로, 가혹검체의 항보체가는 50% 이상으로 특이성을 나타내었다. 시험법의 완건성은 시험과정 중 특정 변수의 작은 의도적인 변화에도 그 결과가 영향을 받지 않은 정도를 의미하며, 정상 시험조건으로 시험 수행 시 결과의 신뢰성을 평가하는 척도가 된다. 완건성 시험으로 검체 및 완충액의 pH, 용혈소 함량를 변화시켰을 때 결과값에 유의한 차이를 보이지 않았다. 생기 시험법과 EP기반 시험법 간 시험결과 비교를 위해 말토즈 첨가 사람면역글로불린 및 정맥주사용 B형 간염 사람면역글로불린을 시험한 결과 생기2법 및 EP 시험법 모두 적합한 결과를 얻었으나, 글리신 첨가 사람면역글로불린(100 mg/mL)는 생기2법으로 시험하였을 때 모든 반응액에서 용혈이 일어나 분석에 적합한 실험결과를 얻지 못하였다. 정주용 면역글로불린제제에 대한 신규 시험법 적용 타당성 검토하기위해 유통검체 5종을 3기관에서 시험한 결과 모두 시스템 적합성 항목에 만족하였고, 항보체가는 7.10∼29.08 %로 기준(항보체가 ≤ 50 %)에 적합하였다. 따라서 이번 연구를 통해 유럽약전에 기반한 항보체성부정시험법을 설정하고 검증하였으며, 보다 다양한 제품에 적용 가능하며 완건성을 확보한 표준화된 시험법을 국가출하승인 및 제조사 품질관리에 적용할 근거를 마련하였다.

(출처 : 요약문 3p)

Abstract ▼

Intravenous human immunoglobulin (human immunoglobulin in maltose, human immunoglobulin in glycine, human hepatitis B immunoglobulin for intravenous administration) tests ‘molecular size distribution’ to measure the content of immunoglobulin polymers (polymer or agregate) and ‘anti-complementary act

Intravenous human immunoglobulin (human immunoglobulin in maltose, human immunoglobulin in glycine, human hepatitis B immunoglobulin for intravenous administration) tests ‘molecular size distribution’ to measure the content of immunoglobulin polymers (polymer or agregate) and ‘anti-complementary activity(ACA)’ to measure to the degree of binding between the polymer and complement. ACA test is an experiment conducted to prevent side effects from immunoglobulin injection by measuring the level at which polymers in immunoglobulin agents combine with the complement and managing their limits. The ACA test for IVIGs is performed according to the Korean Minimum Requirements for Biological Products (KMRBP) is not used to check the system suitability using standard products, do not test the complement control and the test procedure is different from the European Pharmacopoeia and the Miminum Requirements of Biological Products(in Japan). Therefore, it is difficult to compare the results of the KMRBP test with the results of the two different methods. In addition, due to the nature of the test method, the KMRBP has limitations that are difficult to apply to high-content agents such as recently licensed 100 mg/mL human immunoglobulin in glycine. Through this study, the Commission intended to establish and verify the ACA test method based on European Pharmacy, lay the basis for applying the standardized test method, which is applicable to more diverse products, to the approval of national lot release and to the quality control of manufacturers, and to internationalize the results of ACA test so that it can be compared between agencies and countries. As a result of setting up an ACA test method based on European Pharmacopoeia and testing positive/negative comparators who manufactured EDQM BRP as standard in accuracy and in-lab precision tests three times each for three days, the positive control group's ACA was 72.7 to 91.9 percent (average: 85.3 percent) and negative control group was 23.1 to 31.5 percent (average: 27.8 percent). In the interlaboratory precision test, the three laboratories (A, B and C) tested the EDQM BRP positive contrast, negative contrast, normal sample, and thermal accelerated sample for three days, and found that CV values were 7.42% for positive control, 9.34% for negative control, 19.53% for normal sample, and 6.93% for thermal accelerated sample.
In the specificity test, the anti-complementary activities of Formulation buffer and Gelatin barbital buffer was less than EDQM BRP (negative control), and anti-complementary activities of normal sample, Human Serum Proteins (NIBSC 74/520) was higher than EDQM BRP (negative control). The anti-complementary activities of the thermal accelerated sample was more than 50% specific. The robustness of the test method means the extent to which the results are unaffected by the small intentional changes of a particular variable during the test process, and is a measure of the reliability of the results when performing the test under normal test conditions. The robustness test showed no significant difference in the results when pH of samples, buffers, and hemolytic content were changed. Both human immunoglobulin in maltose and human hepatitis B immunoglobulin for intravenous administration were suitable as a result of testing with both the KMRBP and EP tests, but human immunoglobulin in glycine (100 mg/mL) resulted in haemolysis in all reactants when tested by the KMRBP method and did not obtain suitable test results. All five types of commercial products were tested by the three laboratories to review the validity of the application of the test method and the acceptance criteria (ACA ≤ 50%) were satisfied with the system suitability criteria at 7.10% to 29.08%.
Therefore, this study established and verified the ACA test method based on European Pharmacy and provided a basis for applying the standardized test method, which is applicable to more diverse products, to national lot release testing and manufacturer quality control.

(출처 : Summary 5p)

목차 Contents

• 표지 ... 1
• 자체연구개발과제 최종보고서 ... 2
• 국문 요약문 ... 3
• Summary ... 5
• 목차 ... 7
• Ⅰ. 연구개발과제 연구결과 ... 8
• 제1장 연구개발과제의 개요 ... 8
• 제2장 연구개발과제의 국내·외 연구개발 현황 ... 14
• 제3장 연구개발과제의 연구수행 내용 및 결과 ... 15
• 제4장 연구개발과제의 연구결과 고찰 및 결론 ... 40
• 제5장 연구개발과제의 목표달성도 및 관련분야에의 기여도 ... 44
• 제6장 연구개발과제의 연구개발 결과 활용계획 ... 45
• 제7장 참고문헌 ... 46
• 제8장 첨부서류 ... 48
• 끝페이지 ... 57