본 연구에서는 김치로부터 분리한 유산균을 가지고 기존의 당을 끊는 β -Glucosidase 활성 균주를 분리하는 것이 아닌, 다른 구조변환을 하는 균주를 스크 리닝, 선발하고자 했다. 분리한 유산균주들과 ginsenoside와 반응시켜 전환 양상을 알아본 결과 TLC상 Ginsenoside F1과 Compound K 보다 비극성을 띠는 성질을 가지고, Rf값이 각각 더 높은 값을 가지는 양상을 발견하였다. 또, 당을 끊었을 때 와는 다른 Rf값을 가지며, Standard와도 다른 위치에 있는 것을 미루어 보아 다른 형태의 전환일 것이라 추측, 실험을 진행하였다. 이러한 활성이 있는 균주를 16S rRNA 분석을 수행, 16S rRNA ...
본 연구에서는 김치로부터 분리한 유산균을 가지고 기존의 당을 끊는 β -Glucosidase 활성 균주를 분리하는 것이 아닌, 다른 구조변환을 하는 균주를 스크 리닝, 선발하고자 했다. 분리한 유산균주들과 ginsenoside와 반응시켜 전환 양상을 알아본 결과 TLC상 Ginsenoside F1과 Compound K 보다 비극성을 띠는 성질을 가지고, Rf값이 각각 더 높은 값을 가지는 양상을 발견하였다. 또, 당을 끊었을 때 와는 다른 Rf값을 가지며, Standard와도 다른 위치에 있는 것을 미루어 보아 다른 형태의 전환일 것이라 추측, 실험을 진행하였다. 이러한 활성이 있는 균주를 16S rRNA 분석을 수행, 16S rRNA 염기서열을 가지고 EzTaxon BLAST에 의해 Lactobacillus 속에 속하는 것으로 밝혀졌으며, Lactobacillus brevis ATCC14687 99% 상동성을 가지는 것으로 나타났다. 이 균주를 Lactobacillus brevis DCY-ST 라 명명하고, 균체, 세포내외 효소를 각 F1과 반응 시켜 본 결과 세포내 효소의 활성이 강하여, 세포 내 효소를 이용하여 F1과 F2 진세노사이드와 반응을 시켰고 NMR분석을 통해 구조분석을 하였다. Lactobacillus brevis DCY-ST C-20번 위 치의 당을 끊지 못하고 C-3 위치의 수소를 이탈 시켜 C=O기를 생성하면서 케톤 화 된 물질을 생성하였다. F1은 이미 보고된 바와 같이 항산화 및 미백효과에 탁월 한 효과가 보고되었기에 F1과 기존에 잘 알려진 미백효과 물질인 Arbutin 그리고 본 전환물질 3-oxo-F1, 3-oxo-CK의 tyrosinase 억제능을 살펴보았고 이를 위한 MTT로 세포독성을 조사하였다. 그 결과 3-oxo-F1물질의 세포독성이 200 ㎎/㎕ 고농도에서 독성이 없었고, 시판되는 Arbutin에 비해 전환된 물질 3-oxo-F1은 tyrosinase 억제능이 유사하여 Arbutin 을 대체 할 수 있는 기능성 물질로의 개발 이 가능할 것으로 사료 된다. 또는 HPLC분석한 결과 멜라닌 Cell B16/F10의 세 포 내 melanin 함량이 현저히 감소됨을 알 수 있었다. 향후 임상실험을 통해 그 응 용가능성을 탐색하고, 이를 바탕으로 미백작용을 할 수 있는 물질이라는 검증을 더 확고히 할 필요성이 있다고 판단된다.
본 연구에서는 김치로부터 분리한 유산균을 가지고 기존의 당을 끊는 β -Glucosidase 활성 균주를 분리하는 것이 아닌, 다른 구조변환을 하는 균주를 스크 리닝, 선발하고자 했다. 분리한 유산균주들과 ginsenoside와 반응시켜 전환 양상을 알아본 결과 TLC상 Ginsenoside F1과 Compound K 보다 비극성을 띠는 성질을 가지고, Rf값이 각각 더 높은 값을 가지는 양상을 발견하였다. 또, 당을 끊었을 때 와는 다른 Rf값을 가지며, Standard와도 다른 위치에 있는 것을 미루어 보아 다른 형태의 전환일 것이라 추측, 실험을 진행하였다. 이러한 활성이 있는 균주를 16S rRNA 분석을 수행, 16S rRNA 염기서열을 가지고 EzTaxon BLAST에 의해 Lactobacillus 속에 속하는 것으로 밝혀졌으며, Lactobacillus brevis ATCC14687 99% 상동성을 가지는 것으로 나타났다. 이 균주를 Lactobacillus brevis DCY-ST 라 명명하고, 균체, 세포내외 효소를 각 F1과 반응 시켜 본 결과 세포내 효소의 활성이 강하여, 세포 내 효소를 이용하여 F1과 F2 진세노사이드와 반응을 시켰고 NMR분석을 통해 구조분석을 하였다. Lactobacillus brevis DCY-ST C-20번 위 치의 당을 끊지 못하고 C-3 위치의 수소를 이탈 시켜 C=O기를 생성하면서 케톤 화 된 물질을 생성하였다. F1은 이미 보고된 바와 같이 항산화 및 미백효과에 탁월 한 효과가 보고되었기에 F1과 기존에 잘 알려진 미백효과 물질인 Arbutin 그리고 본 전환물질 3-oxo-F1, 3-oxo-CK의 tyrosinase 억제능을 살펴보았고 이를 위한 MTT로 세포독성을 조사하였다. 그 결과 3-oxo-F1물질의 세포독성이 200 ㎎/㎕ 고농도에서 독성이 없었고, 시판되는 Arbutin에 비해 전환된 물질 3-oxo-F1은 tyrosinase 억제능이 유사하여 Arbutin 을 대체 할 수 있는 기능성 물질로의 개발 이 가능할 것으로 사료 된다. 또는 HPLC분석한 결과 멜라닌 Cell B16/F10의 세 포 내 melanin 함량이 현저히 감소됨을 알 수 있었다. 향후 임상실험을 통해 그 응 용가능성을 탐색하고, 이를 바탕으로 미백작용을 할 수 있는 물질이라는 검증을 더 확고히 할 필요성이 있다고 판단된다.
Ginsenosides were one of the main ingredients of medicinal plants and already has been used thousands of years ago. We isolated the Lactobacillus brevis DCY-ST from the korea kimchi belonged to the Lactobacillus strain. In PPT saponin, Ginsenoside F1 transformed by Lactobacillus brevis DCY-ST was co...
Ginsenosides were one of the main ingredients of medicinal plants and already has been used thousands of years ago. We isolated the Lactobacillus brevis DCY-ST from the korea kimchi belonged to the Lactobacillus strain. In PPT saponin, Ginsenoside F1 transformed by Lactobacillus brevis DCY-ST was converted 3-oxo-F1. In PPD saponin, Ginsenoside F2 was changed the CK and 3-oxo-CK. The structures were determined by NMR and HPLC. These results indicated that Lactobacillus brevis DCY-ST could catalyze the specific C-3 dehydrogenation of derivatives of ginsenoside-F1 and CK, as well as specific C-6 deglycosylation. 3-oxo-F1 exhibited tyrosinase hibition using B16 cell. 3-oxo-F1 result was analyzed and found that melanin generation inhibitory action based on the results of whitening substance. It can verify that there is a need to more studied and can be used.
Ginsenosides were one of the main ingredients of medicinal plants and already has been used thousands of years ago. We isolated the Lactobacillus brevis DCY-ST from the korea kimchi belonged to the Lactobacillus strain. In PPT saponin, Ginsenoside F1 transformed by Lactobacillus brevis DCY-ST was converted 3-oxo-F1. In PPD saponin, Ginsenoside F2 was changed the CK and 3-oxo-CK. The structures were determined by NMR and HPLC. These results indicated that Lactobacillus brevis DCY-ST could catalyze the specific C-3 dehydrogenation of derivatives of ginsenoside-F1 and CK, as well as specific C-6 deglycosylation. 3-oxo-F1 exhibited tyrosinase hibition using B16 cell. 3-oxo-F1 result was analyzed and found that melanin generation inhibitory action based on the results of whitening substance. It can verify that there is a need to more studied and can be used.
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