파과분석(Breakthrough behavior) 비교에 의한 난백으로부터 라이소자임 크로마토그래피 분리 최적화 Optimization of Chromatographic Separation of Lysozyme from Homogenate of Hen Egg White by Comparison of Breakthrough Behavior원문보기
본 연구에서는 난백에 포함된 라이소자임의 컬럼 크로마토그래피에서의 breakthrough behavior 실험을 통해 최적 크로마토그래피 분리조건을 결정하였다. 다양한 양이온 교환수지의 라이소자임 breakthrough behavior를 비교한 결과 Cellufine C-200(Amicon, USA)이 라이소자임 흡착에 가장 우수한 성능을 보였다. Cellufine C-200 수지에서 이온강도, pH, 선속도 등이 난백 라이소자임의 breakthrough behavior에 미치는 영향을 비교한 결과 conductivity 2.75 mS/cm, pH 7, 선속도 0.635cm/min의 최적 조건을 얻었다. 본 최적조건에서 prep 규모 컬럼 크로마토그래퍼를 이용 난백으로부터 라이소자임을 분리하였다. 정제된 라이소자임과 Sigma 라이소자임의 specific activity는 비슷하였으며 SDS-PAGE 분석 결과 본 연구에서 정제된 라이소자임이 Sigma 라이소자임보다 impurity 단백질들을 적게 포함하고 있음을 확인하였다.
본 연구에서는 난백에 포함된 라이소자임의 컬럼 크로마토그래피에서의 breakthrough behavior 실험을 통해 최적 크로마토그래피 분리조건을 결정하였다. 다양한 양이온 교환수지의 라이소자임 breakthrough behavior를 비교한 결과 Cellufine C-200(Amicon, USA)이 라이소자임 흡착에 가장 우수한 성능을 보였다. Cellufine C-200 수지에서 이온강도, pH, 선속도 등이 난백 라이소자임의 breakthrough behavior에 미치는 영향을 비교한 결과 conductivity 2.75 mS/cm, pH 7, 선속도 0.635cm/min의 최적 조건을 얻었다. 본 최적조건에서 prep 규모 컬럼 크로마토그래퍼를 이용 난백으로부터 라이소자임을 분리하였다. 정제된 라이소자임과 Sigma 라이소자임의 specific activity는 비슷하였으며 SDS-PAGE 분석 결과 본 연구에서 정제된 라이소자임이 Sigma 라이소자임보다 impurity 단백질들을 적게 포함하고 있음을 확인하였다.
We have compared the breakthrough behavior of lysozyme contained in fresh han egg white on various cation exchagers, and the adsorbent, known by the trade name Cellufine C-200 (Amicon), has shown the best performance. The effects of ion strength, pH, and linear flow rate on the breakthrough behavior...
We have compared the breakthrough behavior of lysozyme contained in fresh han egg white on various cation exchagers, and the adsorbent, known by the trade name Cellufine C-200 (Amicon), has shown the best performance. The effects of ion strength, pH, and linear flow rate on the breakthrough behavior were examined using the Cellufine C-200 adsorbent. The optimal conductivity, pH and linear flow rate were determined from the breakthrough behavior and found to be 2.75 mS/cm, 7.0, and 0.635 cm/min, respectively.
We have compared the breakthrough behavior of lysozyme contained in fresh han egg white on various cation exchagers, and the adsorbent, known by the trade name Cellufine C-200 (Amicon), has shown the best performance. The effects of ion strength, pH, and linear flow rate on the breakthrough behavior were examined using the Cellufine C-200 adsorbent. The optimal conductivity, pH and linear flow rate were determined from the breakthrough behavior and found to be 2.75 mS/cm, 7.0, and 0.635 cm/min, respectively.
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