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[국내논문] 녹차에서 카테킨 화합물의 초임계 유제 추출
Supercritical Fluid Extraction of Catecnin Compounds from Green Tea 원문보기

한국생물공학회지 = Korean journal of biotechnology and bioengineering, v.16 no.4, 2001년, pp.327 - 331  

나영진 (초정밀분리기술센터, 인하대학교 화학공학과, 국가지정 초임계 유체 연구실) ,  이윤우 (한국과학기술연구원) ,  김재덕 (한국과학기술연구원) ,  노경호 (초정밀분리기술센터, 인하대학교 화학공학과, 국가지정 초임계 유체 연구실)

초록
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전라남도 보성산 녹차로부터 유용성분인 카테킨 화합물을 초임계 이산화 탄소와 첨가제를 사용하여 추출하고 역상 고성능 액체 크로마토그래피(RP-HPLC)를 사용하여 분석하였다. LiChrospher 100RP-18(15 $\mu$m)로 충진된 column을 이용하여 0.05% phosphoric acid가 포함된 물과 acetonitrile을 이동상으로 사용하였으며 구배용매 조성법을 적용하였다. 이동상의 조성에 따른 체류인자의 조절을 통해 EGCG를 분리하였다. 각각의 초임계 추출법에 따른 EGCG의 추출량을 비교한 결과, 초임계 유체에 극성물질을 포함하는 경우가 녹차의 유용 성분인 EGCG의 추출량이 가장 많았다. 그러나 ethanol에 의한 용매 추출법은 초임계 유체에 의한 추출법보다 EGCG에 대해 많은 추출양과 선택적인 고순도 분리가 가능하였다.

Abstract ▼ AI-Helper 아이콘AI-Helper

Catechin compounds from the Green tea cultivated in Bosung (Chollanamdo) were extracted using supercritical fluid and various additives, and analyzed by reversed-phase high performance liquid chromatography (RP-HPLC). The chromatographic column was packed with LiChrospher 100RP-18(15 $\mu$

Keyword

#EGCG   #catechin compound   #Green Tea   #supercritical fluid  

AI 본문요약
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* AI 자동 식별 결과로 적합하지 않은 문장이 있을 수 있으니, 이용에 유의하시기 바랍니다.

제안 방법

  • 녹차로부터의 카테킨 화합물의 추출은 주로 열수 또는 ethanol 등을 이용한 용매 추출법을 주로 사용해왔다(6). 녹차로부터 항산화제 및 항암제 등으로 그 효용 가치가 뛰어나다고 밝혀진 EGCG 등을 포함한 카테킨 화합물에 대한 초임계 유체 추출 특성을 살펴보기 위해 추출한 samplee 첨가제로서 물과 ethanol을 사용하였고 분석용 역상 HPLC로서 분석을 하였다. ethanol을 사용하여 용매추출법으로 카테킨 화합물을 분리하였고 초임계유체에 의한 실험 결과와 비교하였다.
  • 녹차로부터 항산화제 및 항암제 등으로 그 효용 가치가 뛰어나다고 밝혀진 EGCG 등을 포함한 카테킨 화합물에 대한 초임계 유체 추출 특성을 살펴보기 위해 추출한 samplee 첨가제로서 물과 ethanol을 사용하였고 분석용 역상 HPLC로서 분석을 하였다. ethanol을 사용하여 용매추출법으로 카테킨 화합물을 분리하였고 초임계유체에 의한 실험 결과와 비교하였다.
  • 7GPH)를 사용하였다. 추출기의 출구에는 추출기의 압력을 일정하게 유지시켜 주기 위하여 압력 조절기 (Tescom model 26-1021-44)를 설치하였으며, line filter와 rupture disc를 설치하였다. 분리기 하부의 외벽에는 냉각을 위한 jacket을 부착하였다.
  • 분리기 하부의 외벽에는 냉각을 위한 jacket을 부착하였다. 분리기로부터 나 온 line에는 작은 입자로부터 압력 조절계를 보호하기 위하여 line filter와 압력을 일정하게 유지하기 위한 압력 조절기를 설치하였다.
  • 추출물은 모두 끈적한 gel 상태로 농축되어 있었으며 이를 분석하기 위해 추출물을 ethyl acetate(HPLC grade)를 용매로 하여 30℃, 300 rpm에서 1시간 동안 교반한 후 물을 이용 1:1로 partition 한 후 여과하였다. sample의 농도는 1 g/10 mL 이다.
  • 주입 시료의 농도는 1 mg/mL에서부터 100 mg/mL까지 변화시키면서 실험하였으나 ethanol을 포함한 초임계 유체에서의 시료를 제외하고는 UV detector의 감도가 매우 낮아서 peak의 판별이 어려웠다. 같은 조건에서의 실험을 위해서 3가지 초임계 유체의 시료를 100 mg/mL의 일정한 농도로 실험하였다. ethanol을 이용한 용매추출법도 병행하여 초임계 유체에 의해서 추출한 시료와 비교하였다.
  • 같은 조건에서의 실험을 위해서 3가지 초임계 유체의 시료를 100 mg/mL의 일정한 농도로 실험하였다. ethanol을 이용한 용매추출법도 병행하여 초임계 유체에 의해서 추출한 시료와 비교하였다. 녹차잎 5 g을 ethylacetate 30 mL에 녹인 후 40℃에서 1시간 동안 교 반흔! 다음, 여과를 하고 증발기를 이용하여 용매를 증발시킨 후에 물에 다시 녹여서 chloroform과 ethylacetate를 이용 1:1 분배를 하여 30 mL의 시료를 얻었다.
  • 분석은 역상 HPLC에서 행해졌으며 녹차에 포함된 유용성 분인 카테킨 화합물 중에서 가장 효과가 뛰어나다고 알려진 EGCG의 분리되는 정도를 고찰하였다. 역상 HPLC 분석에서의 이동상의 조성은 0.
  • 분석은 역상 HPLC에서 행해졌으며 녹차에 포함된 유용성 분인 카테킨 화합물 중에서 가장 효과가 뛰어나다고 알려진 EGCG의 분리되는 정도를 고찰하였다. 역상 HPLC 분석에서의 이동상의 조성은 0.05% (vol.) phosphoric acid가 포함된 물과 acetonitrile을 사용하였고 구배 시간은 시작시간으로부터 20분간으로 초기 조성 90:10 (water:acetonitrile, vol. %)에서 60:40 (vol. %)까지 선형으로 구배를 주었다. 40분 이내에 한 번의 분석을 완료하였다.
  • EGCG의 머무름 시간은 Figures 2, 3과 비슷하였지만 추출 양의 증가에 따라서 이전 peak (caffein, EGC, EC등)가 커짐에 따라서 약간 머무름 시간이 길어졌다. EC, EGC, EGCG 표준시료 물질을 각기 주입하여 두 개의 peak를 각기 정성 분석하였다.

대상 데이터

  • 녹차는 보성산으로 경동시장에서 구입하였으며, 초임계 유체는 CO2, 첨가제로는 water 및 ethanol을 사용하였고, 이동상은 phosphoric acid가 0.05% 포함된 water와 acetonitrile을 사용하였다. 표준시료 물질인 (-)Epicatechin (EC), (-)Epigallocatechin Gallate (EGCG), (-)Epicatechin Gallate (ECG) 는 Sigma Co.
  • , 첨가제로는 water 및 ethanol을 사용하였고, 이동상은 phosphoric acid가 0.05% 포함된 water와 acetonitrile을 사용하였다. 표준시료 물질인 (-)Epicatechin (EC), (-)Epigallocatechin Gallate (EGCG), (-)Epicatechin Gallate (ECG) 는 Sigma Co.
  • 표준시료 물질인 (-)Epicatechin (EC), (-)Epigallocatechin Gallate (EGCG), (-)Epicatechin Gallate (ECG) 는 Sigma Co. 에서 구입하였으며, acetonitrile, ethyl acetate는 HPLC grade> 덕산화학에서 구입하였고, phosphoric acid는 동양화학에서 extra pure급을 구입하였다. water는 2차 증류한 증류수를 사용하였다.
  • 그러나 첨가제를 사용하는 경우에는 상평형 관계가 복잡해지고 기존의 추출 때와 같이 용매의 잔유분 문제가 대두되는 단점이 있나. 녹차는 (1) 사연 건조한 상태, (2) 물을 포함한 상태 (5.0 wt.%), 그리고 (3)ethan이을 포함한 상태 (5.0 wt.%)로 초임계 유체 C6를 이용하여 추출하였다. 추출 수율은 각각 0.

이론/모형

  • sample의 농도는 1 g/10 mL 이다. 용해된 시료를 구배 용매 조성법을 사용하여 HPLC로 분석하였다.
  • Figure 3. Chromatogram of supercritical fluid with H2O extract by RP-HPLC in gradient method. (1st mobile phase : 0.
  • Figure 4. Chromatogram of supercritical fluid with ethanol extract by RP-HPLC in gradient method. (1st mobile phase : 0.
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