한국에서 자라고 있는 옻나무속 3종의 항산화력을 조사하여 본 결과, 옻나무속 3종의 각 부위별 ethyl acetate 추출물에 대한 항산화능은 개옻나무의 경우 잎과 줄기에서 각각 32, 34 $\mu\textrm{g}$/$m\ell$, 옻나무의 경우 잎과 줄기에서 각각 39,21 $\mu\textrm{g}$/$m\ell$의 활성을 나타내었다. Sephadex LH-20 column chromatography를 이용하여 줄기 부위의 추출물을 12개의 fraction으로 분리하여 항산화능을 측정한 결과, fraction No.3이 가장 높은 항산화 활성을 나타내었으며, 옻나무가 1.5, 붉나무가 1.9, 개옻나무가 2.3 ug/$m\ell$ DPPH가를 나타내었다. 줄기 추출물로부터 2-propenoic acid (Caffeic acid), Benzoic acid (Gallic acid), 7-hydroxy-6- methoxy-2H-1-Benzopyran-2-one (Scopoletin) 등과 같은 phenol계 물질들이 동정되었다. 옻나무속 3종의 부위별 POD 활성 은 잎에 비해 줄기에서 193배 활성이 높게 나타났고 종간에는 붉나무가 0.58 unit/mg protein로 가장 높게 나타났으며 옻나무, 개옻나무 순으로 높게 나타났다. SOD 활성은 옻나무와 붉나무의 잎에 비해 줄기에서 높은 활성이 나타났으나,개옻나무는 잎이 줄기에 비해 25배 높게 나타났다.
한국에서 자라고 있는 옻나무속 3종의 항산화력을 조사하여 본 결과, 옻나무속 3종의 각 부위별 ethyl acetate 추출물에 대한 항산화능은 개옻나무의 경우 잎과 줄기에서 각각 32, 34 $\mu\textrm{g}$/$m\ell$, 옻나무의 경우 잎과 줄기에서 각각 39,21 $\mu\textrm{g}$/$m\ell$의 활성을 나타내었다. Sephadex LH-20 column chromatography를 이용하여 줄기 부위의 추출물을 12개의 fraction으로 분리하여 항산화능을 측정한 결과, fraction No.3이 가장 높은 항산화 활성을 나타내었으며, 옻나무가 1.5, 붉나무가 1.9, 개옻나무가 2.3 ug/$m\ell$ DPPH가를 나타내었다. 줄기 추출물로부터 2-propenoic acid (Caffeic acid), Benzoic acid (Gallic acid), 7-hydroxy-6- methoxy-2H-1-Benzopyran-2-one (Scopoletin) 등과 같은 phenol계 물질들이 동정되었다. 옻나무속 3종의 부위별 POD 활성 은 잎에 비해 줄기에서 193배 활성이 높게 나타났고 종간에는 붉나무가 0.58 unit/mg protein로 가장 높게 나타났으며 옻나무, 개옻나무 순으로 높게 나타났다. SOD 활성은 옻나무와 붉나무의 잎에 비해 줄기에서 높은 활성이 나타났으나,개옻나무는 잎이 줄기에 비해 25배 높게 나타났다.
Comparison of the antioxidant potential and enzyme activities of the extracts of Rhus showed considerable differences. The antioxidative activities of Rhus javanica were the highest of three species tried (7 $\mu\textrm{g}$/$m\ell$). The highest activities showed in fraction No...
Comparison of the antioxidant potential and enzyme activities of the extracts of Rhus showed considerable differences. The antioxidative activities of Rhus javanica were the highest of three species tried (7 $\mu\textrm{g}$/$m\ell$). The highest activities showed in fraction No.3 of 12 fractions by Sephadex LH-20 column chromatography and the antioxidative activity showed, in purified extract of each stem,1.5 $\mu\textrm{g}$/$m\ell$ (in Rhus verniciflua), 1.9 $\mu\textrm{g}$/$m\ell$ (in Rhus javanica) and 2.3 $\mu\textrm{g}$/$m\ell$ (in Rhus tricocarpa) respectively. These were identificated as phenolic compounds which are well known antioxidant compounds such as 2-propenoic acid (Caffeic acid), Benzoic acid (Gallic acid), 7-hydroxy- 6methoxy-2H-1-Benzopyran-2-one (Scopoletin). POD activities of stem were higher than leaf. Especially, POD activity in stem of Rhus javanica was 193 times higher than leaf. Rhus tricocarpa, however, showed very low POD activity. SOD activities of stem were higher than that of leaf in Rhus javanica and Rhus verniciflua but in Rhus tricocarpa, the activity of leaf was 25 times higher than that of stem.
Comparison of the antioxidant potential and enzyme activities of the extracts of Rhus showed considerable differences. The antioxidative activities of Rhus javanica were the highest of three species tried (7 $\mu\textrm{g}$/$m\ell$). The highest activities showed in fraction No.3 of 12 fractions by Sephadex LH-20 column chromatography and the antioxidative activity showed, in purified extract of each stem,1.5 $\mu\textrm{g}$/$m\ell$ (in Rhus verniciflua), 1.9 $\mu\textrm{g}$/$m\ell$ (in Rhus javanica) and 2.3 $\mu\textrm{g}$/$m\ell$ (in Rhus tricocarpa) respectively. These were identificated as phenolic compounds which are well known antioxidant compounds such as 2-propenoic acid (Caffeic acid), Benzoic acid (Gallic acid), 7-hydroxy- 6methoxy-2H-1-Benzopyran-2-one (Scopoletin). POD activities of stem were higher than leaf. Especially, POD activity in stem of Rhus javanica was 193 times higher than leaf. Rhus tricocarpa, however, showed very low POD activity. SOD activities of stem were higher than that of leaf in Rhus javanica and Rhus verniciflua but in Rhus tricocarpa, the activity of leaf was 25 times higher than that of stem.
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문제 정의
따라서 본 연구에서는 비록 혐오 및 독성식품이 지만 민간에서 위통 및 숙취제거로 사용되고 특히 구전으로 여러가지 효능있다고 알려지고 있는 옻나 무류의 항산화 효과를 탐색하기 위해 한국에서 자라 고 있는 옻나무속 3종으로 부터 부위별 항산화성 물질을 분리 동정 하고 항산화 효소활성을 조사하였다.
제안 방법
Cuvette내에 농도별 test sample과 300 ㎛ DPPH 용액을 넣고 3712에서 30분간 반응 후 515 nm에서 20초간 상온에서 흡광도 변화를 측정하였다. UV 측정시 반응액의 흡광도가 1.
1과 같이 분획 추출하여 ethyl acetate층을 질소 가스로 농축한 후 냉동보관하여 항산화활성 assay를 위한 시료로 사용하였다. Ethyl acetate 추출 시료를 Sephadex LH-20 column chromotography (100% MeOH)를 행하여 12개의 활성분획을 얻었으며, 이를 항산화활성 assay와 GC/MS 분석시료로 사용하였다.
8)과 함께 마쇄한 후, 4P에서 14, 000 rpm으로 30분간 원심분리하여 얻어진 상등액을 조효소액으로 사용하였다. POD 활성은 pyrogallol (Sigma, Cot# P-O381)을 기질로 사용하고 100 [4 조효소액 에 2.9 ml assay buffer를 첨가하여 420 nm에서 20초간 상온에서 흡광도변화를 측정하였다.
SOD 활성은 McCord와 Fridovich (1969)의 방법에 따라 xanthine/xanthine oxidase system을 superoxide radicals (CM)의 공급원으로 이용하여 superoxide radicals0!] 의한 cytochrome c의 환원속도를 550 nm에서 의 흡광도 변화를 측정하였다. SOD 활성 1 unit는 25P에서 반응을 시작하여 150초간 550 nm에서 흡광도 변화를 조사하여 xanthine oxidase 활성이 50% 억제되는 것으로 정의하였다.
0이 넘지 않도록 DPPH 용액을 희석하여 조정하였다. 시료처리에 의한 억제율은 DMSO가 처리된 대조구와 비교하여 계산하였고, ICso 가는 50% DPPH free radicals를 제어 시키는 시료 농도로 계 산하였다.
항산화능이 가장 높게 나타난 fraction을 GC/MS 로 분석하여 10가지 성분을 분리 동정한 결과(표 2), 특히 antioxidants. 알려진 2-propenoic acid (Caffeic acid), Benzoic acid (Gallic acid), 7-hydroxy-6- methoxy-2H-1 -Benzopyran-2-one (Scopoletin) 등과 같은 phenol계 물질들이 동정되었다.
항산화물질의 동정 을 위하여 GC/MS (Hewlett Packard 6890/5973)을 이용하였으며, Columne Ultra-2 (Crosslinked 5% PH ME Siloxane), Oven 조건은 8(TC에서 시작하여 분당 EC씩 25CTC까지 승온하였으며, 250P에서 5분간 유지하였다. 운반체는 He 가스를 사용하였으며, 유속은 0.
대상 데이터
옻나무속인 개옻나무 (Rhus tricocarpa), 옻나무 (Rhus verniciflua) 및 붉나무 (Rhus javanica)^: 경북 영양 일월산 일대에서 1999년 7월에 부위별로 채취하여 양건 후 분쇄하여 시 료로 사용하였다. 추출은 Fig.
항산화물질의 동정 을 위하여 GC/MS (Hewlett Packard 6890/5973)을 이용하였으며, Columne Ultra-2 (Crosslinked 5% PH ME Siloxane), Oven 조건은 8(TC에서 시작하여 분당 EC씩 25CTC까지 승온하였으며, 250P에서 5분간 유지하였다. 운반체는 He 가스를 사용하였으며, 유속은 0.8 ml/min로 분석하였다.
성능/효과
DPPH free radical 소거 법 을 이용하여 3종의 옻나 무속 각 부위 별 ethyl acetate 추출물에 대한 항산화능 을 조사한 결과 (Table 1), 개 옻나무의 잎과 줄기에서 ICso 이 각각 32, 34 fjg/ml, 옻나무의 잎 과 줄기에서 각각 39, 21 ㎍/ml의 항산화활성을 나타내었다. 붉나무의 잎과 줄기에서 각각 7 ㎍/ml의 활성을 나타내어, 종간 그리고 부위 별 항산화능의 차이를 보였다.
SOD 활성은 옻나무와 붉나무의 잎에 비해 줄기에서 높은 활성이 나타났으나, 개옻나무는 잎이 줄 기에 비해 25배 높게 나타났다.
한국에서 자라고 있는 옻나무속 3종의 항산화력을 조사하여 본 결과, 옻나무속 3종의 각 부위별 ethyl acetate 추출물에 대한 항산화능은 개옻나무의 경우 잎과 줄기에서 각각 32, 34 옻나무의 경우 잎과 줄기에서 각각 39, 21 ㎍/ml의 활성을 나타내었다. Sephadex LH-20 column chromatography> 이용하여 줄기 부위의 추출물을 12개의 fraction으로 분리하여 항산화능을 측정한 결과, fraction No.3이 가장 높은 항산화 활성을 나타내었으며, 옻나무가1.5, 붉나무가 1.9, 개옻나무가 2.3 ㎍/ml DPPH가를 나타내었다.
옻나무속 3종의 부위별 POD 활성은 잎에 비흐'!] 줄기에서 193배 활성이 높게 나타났고 종간에는 붉나무가 0.58 unit/mg protein로 가장 높게 나타났으며 옻나무, 개옻나무 순으로 높게 나타났다.
67 unit/mg proteinS. 가장 높은 항산화효 소활성을 나타내었다.
따라서 한국에서 자라고 있는 옻나무속에는 항산 화물질이 내재하고 있었으며, 항산화효소의 활성도 매우 높은 것으로 판명되었다. 이들에 대한 실용적인 측면의 접근은 알레르기를 야기시키는 우루시올 물질의 제거법이 이루어 진다면, 판명된 성분들에 대한 생물학적 평가가 추후 이루어질 필요성이 있다고 생각된다.
DPPH free radical 소거 법 을 이용하여 3종의 옻나 무속 각 부위 별 ethyl acetate 추출물에 대한 항산화능 을 조사한 결과 (Table 1), 개 옻나무의 잎과 줄기에서 ICso 이 각각 32, 34 fjg/ml, 옻나무의 잎 과 줄기에서 각각 39, 21 ㎍/ml의 항산화활성을 나타내었다. 붉나무의 잎과 줄기에서 각각 7 ㎍/ml의 활성을 나타내어, 종간 그리고 부위 별 항산화능의 차이를 보였다.
옻나무속의 항산화 성분을 조사하기 위하여 종간에 큰 차이를 나타내는 줄기 부위의 추출물을 Sephadex LH-20 column chromotography (100% MeOH)으로 분획 하여 각 fraction별로 DPPH free radical 소거법을 이용하여 항산화능을 측정한 결과 (Table 2), 은 옻나무가 1.5, 붉나무가 1.9, 개 옻나 무가 2.3 ㎍/ml로 각각 나타났으며, 전체 fraction 별로도 옻나무가 타 두 종에 비해 높은 활성을 나타내었다. 이러한 결과는 Lee(1997)가 700여종의 식물 추출물로부터 항산화 활성이 높다고 분류한 대부분의 식 물추출물의 DPPH free radical scavenging 활성 이8.
한국에서 자라고 있는 옻나무속 3종의 항산화력을 조사하여 본 결과, 옻나무속 3종의 각 부위별 ethyl acetate 추출물에 대한 항산화능은 개옻나무의 경우 잎과 줄기에서 각각 32, 34 옻나무의 경우 잎과 줄기에서 각각 39, 21 ㎍/ml의 활성을 나타내었다. Sephadex LH-20 column chromatography> 이용하여 줄기 부위의 추출물을 12개의 fraction으로 분리하여 항산화능을 측정한 결과, fraction No.
후속연구
따라서 한국에서 자라고 있는 옻나무속에는 항산 화물질이 내재하고 있었으며, 항산화효소의 활성도 매우 높은 것으로 판명되었다. 이들에 대한 실용적인 측면의 접근은 알레르기를 야기시키는 우루시올 물질의 제거법이 이루어 진다면, 판명된 성분들에 대한 생물학적 평가가 추후 이루어질 필요성이 있다고 생각된다.
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