본 연구의 결과를 요약하면 참당귀추출물 1 mg/mL의 농도에서 열수추출물의 free radical소거 효과는 메탄올추출 물보다 높게 나타났으며 농도 의존적으로 DPPH free radical 소거 효과가 상승하는 것을 관찰하였다. 또한 참당귀 투여에 의하여 화학요법으로 발생된 지질과산화물의 생성을 감소시켰으며, 단백질 산화를 유의적으로 억제함으로써 참당귀추출물은 CYP를 투여로 생성된 free radical을 감소시킴으로써 독성을 감소시켜, 혈액학적 빈혈지표가 더 감소되는 것을 막았다고 사료되며, 항산화제로서의 가능성이 있는 한약재로서 활용성이 높을 것으로 사료된다 항산화효소인 SOD 활성은CYP투여에 의하여 활성이 증가하였으며 참당귀추출물의 투여에 의한 효과가 나타나지 않았으나 감소하는 경향을 보였고 catalase 활성은 CYP 투여에 의하여 활성이 증가하였으나 참당귀의 효과는 차이가 없었다. 결론적으로 참당귀추출물은 free radical 소거능을 갖고, 화학요법으로 발생된 지질과산화물의 생성을 낮춰 화학요법에 의한 부작용으로 발생되는 혈액학적 수치의 감소를 막음으로써 항산화제로의 활용성을 기대해본다.
본 연구의 결과를 요약하면 참당귀추출물 1 mg/mL의 농도에서 열수추출물의 free radical소거 효과는 메탄올추출 물보다 높게 나타났으며 농도 의존적으로 DPPH free radical 소거 효과가 상승하는 것을 관찰하였다. 또한 참당귀 투여에 의하여 화학요법으로 발생된 지질과산화물의 생성을 감소시켰으며, 단백질 산화를 유의적으로 억제함으로써 참당귀추출물은 CYP를 투여로 생성된 free radical을 감소시킴으로써 독성을 감소시켜, 혈액학적 빈혈지표가 더 감소되는 것을 막았다고 사료되며, 항산화제로서의 가능성이 있는 한약재로서 활용성이 높을 것으로 사료된다 항산화효소인 SOD 활성은CYP투여에 의하여 활성이 증가하였으며 참당귀추출물의 투여에 의한 효과가 나타나지 않았으나 감소하는 경향을 보였고 catalase 활성은 CYP 투여에 의하여 활성이 증가하였으나 참당귀의 효과는 차이가 없었다. 결론적으로 참당귀추출물은 free radical 소거능을 갖고, 화학요법으로 발생된 지질과산화물의 생성을 낮춰 화학요법에 의한 부작용으로 발생되는 혈액학적 수치의 감소를 막음으로써 항산화제로의 활용성을 기대해본다.
This study was carried out to evaluate the free radical scavenging effect and antioxidant effect of Cham-Dang-Gui (Angelica gigas) on cyclophosphamide (CYP) injected rats. Rats were divided into five groups: CON (normal group), ANS (CYP-injected and normal diet group), AND (CYP-injected and normal d...
This study was carried out to evaluate the free radical scavenging effect and antioxidant effect of Cham-Dang-Gui (Angelica gigas) on cyclophosphamide (CYP) injected rats. Rats were divided into five groups: CON (normal group), ANS (CYP-injected and normal diet group), AND (CYP-injected and normal diet and Cham-Dang-Gui-treated group), ALS (CYP-injected and low iron diet group), and ALD (CYP-injected and low iron diet and Cham-Dang-Gui-treated group). CYP (30 mg/kg) was intraperitoneally injected to rats for early 3 days. Saline or Cham-Dang-Gui was administrated orally for entire experimental period. DPPH radical scavenger activity was measured by DPPH method, it was shown higher in methanol extract (81.5%) than in water extract (66.3%) of Cham-Dang-Gui. We observed the preventive effects of Cham-Dang-Gui on lipid oxidation of liver and protein oxidation of plasma. Hepatic SOD and catalase activities were significantly higher in CYP-injected group (ANS) than CON group, but SOD activity was slightly lowered in Cham-Dang-Gui treated group than CYP-injected group (ANS). These results suggest that extract of Cham-Dang-Gui could be useful for functional materials to reduce the oxidation of lipids and protein induced by free radicals.
This study was carried out to evaluate the free radical scavenging effect and antioxidant effect of Cham-Dang-Gui (Angelica gigas) on cyclophosphamide (CYP) injected rats. Rats were divided into five groups: CON (normal group), ANS (CYP-injected and normal diet group), AND (CYP-injected and normal diet and Cham-Dang-Gui-treated group), ALS (CYP-injected and low iron diet group), and ALD (CYP-injected and low iron diet and Cham-Dang-Gui-treated group). CYP (30 mg/kg) was intraperitoneally injected to rats for early 3 days. Saline or Cham-Dang-Gui was administrated orally for entire experimental period. DPPH radical scavenger activity was measured by DPPH method, it was shown higher in methanol extract (81.5%) than in water extract (66.3%) of Cham-Dang-Gui. We observed the preventive effects of Cham-Dang-Gui on lipid oxidation of liver and protein oxidation of plasma. Hepatic SOD and catalase activities were significantly higher in CYP-injected group (ANS) than CON group, but SOD activity was slightly lowered in Cham-Dang-Gui treated group than CYP-injected group (ANS). These results suggest that extract of Cham-Dang-Gui could be useful for functional materials to reduce the oxidation of lipids and protein induced by free radicals.
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문제 정의
참당귀추출물의 투여로 인해 혈액학적 빈혈 수치를 향상시킨 요인이라 가정되는 두 번째 요인은 CYP 투여로 인해 CYP가 간에서 활성화하면서 생긴 free radical이 조직 에 손상을 주어 부작용이 발생하게 되 므로(19), 참당귀추출물로 인해 혈액학적 빈혈수치가 향상된 것은 참당귀추출물의 투여가 EPO 발현에 의한 조혈효과보다는 CYP 투여로 생성된 free radical의 감소효과일 가능성을 제시하였다. 이에 본 연구에서는 CYP로 유도된 산 화성 손상의 피해를 개선하는 기전을 살펴보고자 자유기를 포착하는 항산화 능력 을 측정 할 수 있는 DPPH free radical scavenging 효과와 참당귀 열수 추출물의 투여가 혈액과 간 조직에서의 지질, 단백질 산화 억제 능력, 간조직의 항산화 효소 활성에 미치는 영향을 살펴보고자 하였다.
, USA)를 사용하였다. 저철분 식이에 의한 빈혈효과와 CYP 투여에 의하여 상승효과를 주어 체내 철분의 영양 상태를 저하시킨 상태를 유지하고자 하였다. 정상군(CON, 8마리), CYP-정 상식 이 -식 염 수군(ANS, 8마리), CYP-정 상식 이 .
제안 방법
정상군(CON, 8마리), CYP-정 상식 이 -식 염 수군(ANS, 8마리), CYP-정 상식 이 ..참당귀추출물 투여군(AND, 8마리), CYP-저 철분 식이-식염 수군(ALS, 8마리 ), CYP-저 철분식 이 -참당귀추출물 투여군(ALD, 8마리)으로 나누었다. 모든 실험동물의 식이는 자유 섭취 방법으로 공급하였다.
05) ANS군과는 유의적인 차이를 차이를 보이지는 않았고 감소하는 경 향성을 보였다. CYP를 투여한 저 철분식 이 군인 ALS군과 저철분식이군에서 참당귀추출물을 투여한 ALD군은 정상대조군인 CON군과 비교해 차이가 나지 않았다. 또한 H2O2를 분해하여 조직의 손상을 방지 하는 catalase 활성도 CYP를 투여한 정상식이군인 ANS군이 정상 대조군인 CON에 비해 유의적으로 증가했으나 참당귀를 투여한 AND군과는 유의적인 차이가 없었고, SOD의 결과와 같이 catalase에서도 저철분식이 에서는 CON군과 차이가 없었다.
DPPH에 의한 항산화 활성은 화합물이 DPPH radical에 전자를 공여함으로써 자유기를 소거하는 활성을 측정하는 것으로 DPPH(l-diphenyl-2-picryl hydrazyl)를 에탄올에 희석하여 희석 배수에 따라 540 nm에서 흡광도를 측정하여 0.96 ~ 0.97이 되는 농도를 선택하였다. Free radical 활성측정은 96-well microtiter plate reader(20)를 사용하여 시료 10%를 에탄올에 처리한 후 동량의 1 mM DPPH를 가한 후상온에서 30분을 두었다가 540 nm에서 흡광도를 측정하였다(21).
Free radical로서 비교적 안정한 DPPH(1 -diphenyl-2- picrylhydrazyl)를 이용하여 참당귀 메탄올추출물과 열수 추출물을 농도별로 free radical 소거 효과를 측정하여 Fig. 1 에 나타내었다.
참당귀추출물 투여군(AND, 8마리), CYP-저 철분 식이-식염 수군(ALS, 8마리 ), CYP-저 철분식 이 -참당귀추출물 투여군(ALD, 8마리)으로 나누었다. 모든 실험동물의 식이는 자유 섭취 방법으로 공급하였다. 실험시작 14일 후에 희생하여 혈액을 채취하고, 간조직을 분리 -70℃ 냉동 보관하였다.
빈혈 유발 군은 정 상식 이 군(ferric citrate 6 g/kg diet)과 철분결핍 식 이군(ferric citrate 2 g/kg diet)으로 분류하여 식이를 제공하였으며, 참당귀추출물을 1 g/kg BW/day로 14일 동안 경구 투여 하였다. 정 상식 이는 AIN-76A diet(Dytes Inc.
0) 1 mL를 첨가하여 혼합한 후 15분간 진탕 가열하여 냉각시키고, 70% TCA 용액 1 mL를 첨가하여 20분간 상온에서 방치시킨 후 3, 000Xg에서 10분간 원심분리하였다. 원심분리 후 상층액 내 MDA 함량은 회귀방정식으로 산줄한 표준용액 1, 1, 3, 3-tetramethoxy propane(TMP)의 직전 방정식에 대입하여 지질과산화물(MDA) 농도를 구하였다. 지 질과산화물 측정 에 사용된 간조직 의 단백질 함량은 Bradford reagent(Sigma, USA)를 이용하여 측정하고 ng/ mg protein으로 나타내었다.
Catalase 활성도 측정 : Catalase 활성도 측정은 Aebi(28) 와 Claiborne(29)의 방법을 이용하여 측정하였다. 자외 선 범위 에서 H2O2는 파장이 감소함에 따라 흡광도가 지속적으로 증가되고, catalase에 의해 H2O2가 물(压0)과 산소(。2)로 분 匐됨 에 따라 240 nm 파장에서 감소되는 흡광도를 측정 하였다. 이 때의 분당 홉광도(/A24(/min) 감소차를 catalase 활성도로 나타내었다.
방법에 의하여 측정하였다. 침전된 단백질에 2, 4-DNPH 시 약과 반응시 킨 후에 탄올과 에 텔 아세 테 이 트의 혼합액 으로세 척 하고 6 M guanidine-HCl 용액으로 용해 하여 370 nm에서 흡광도의 차이를 측정하고 홉광계수는 (22xio「5 mofi cnfi)를 이용하여 환산하였다.
0) 1 mL를 첨가하여 2분간 240 nm에서 흡광도의 변화를 3회 반복 측정하였다. 효소 시료의 catalase 활성도는 catalase standard(EC 1.11.1.6, Sigma, USA)를 이용하여 홉광도와 unit 간의 방정 식 을 구한 후, 측정된 시료의 흡광도의 차이 를이 방정식 에 대입하여 활성도를 구하였다. 효소의 활성은 1분 동안 1 Hmol의 H2O2를 분해시키는 효소의 양을 1 unit로 하였다.
대상 데이터
4주령의 Sprague-Dawley계 수컷 횐쥐를 (주)샘타코에서 구입 하여 , 적응기 간 1주 동안 일반고형사료를 공급하고, 실험 군은 cyclophosphamide(500 mg, 중외 제 약)를 30 ㎎/㎏ BW/day로 3회 복강 투여하여 빈혈을 유도하였다. 빈혈 유발 군은 정 상식 이 군(ferric citrate 6 g/kg diet)과 철분결핍 식 이군(ferric citrate 2 g/kg diet)으로 분류하여 식이를 제공하였으며, 참당귀추출물을 1 g/kg BW/day로 14일 동안 경구 투여 하였다.
참당귀 G4ng新粉 gigas)는 강원도 평 창군 진부면산을 강원 약초 영농조합법인 생산약초공장에서 구입하여 참당귀 500 g을 20배의 물에 2시간동안 진탕기로 열탕추출하여 감압 여과하고 rotary vacuum evaporator(EYELA, JapanX 사용하여 감압농축한 후 동결건조하여 사용하였다. 또한, 참당귀 를 분쇄하여 24시간 동안 70% 메탄올로 3회 추출한 후, 추출액을 evaporator로 농축한 후 동결 건조 사용하였다.
데이터처리
Statistical analysis was performed using one-way ANOVA followed by Duncan's multiple range test, abc: Values within the same row with different alphabets are significantly different (p< 0.05) among group.
0) program을 이용하여 분석하였으며, 그 결과는 평균(mean) 士 표준편 차(standard deviation, SD)로 표시 하였다. 각 실 험군의 평균의 차이는 general linear model(GLM)의 Duncan's multiple range test를 이용하여 p<0.05 유의수준에서 검증하였다. 또한 CYP 투여 에 의한 효과는 general linear model (GLM)의 Duncan's multiple range test를 이용하여 p<0.
05 유의수준에서 검증하였다. 또한 CYP 투여 에 의한 효과는 general linear model (GLM)의 Duncan's multiple range test를 이용하여 p<0.05 유의수준에서 검증하였고, 식이에 의한 효과는 정상식이 군과 저철분식이군 사이의 students' t-test를 이용하여 검증하였으며 참당귀추출물 투여에 의한 효과는 CYP만 투여한 군과 CYP 투여 후 참당귀 추출물을 투여 한 군 사이의 studentsz t-test를 이용하여 검증하였다.
모든 실험결과는 Statistic Analysis System(SAS, Ver 8.0) program을 이용하여 분석하였으며, 그 결과는 평균(mean) 士 표준편 차(standard deviation, SD)로 표시 하였다. 각 실 험군의 평균의 차이는 general linear model(GLM)의 Duncan's multiple range test를 이용하여 p<0.
이론/모형
SOD 1 unit는 1분 동안 pyrogallol의 자동산화를 50%까지 억제하는데 요구되는 효소의 양으로 하였다. Catalase 활성도 측정 : Catalase 활성도 측정은 Aebi(28) 와 Claiborne(29)의 방법을 이용하여 측정하였다. 자외 선 범위 에서 H2O2는 파장이 감소함에 따라 흡광도가 지속적으로 증가되고, catalase에 의해 H2O2가 물(压0)과 산소(。2)로 분 匐됨 에 따라 240 nm 파장에서 감소되는 흡광도를 측정 하였다.
Superoxide dismutase(SOD) 활성 도 측정 :Superoxide dismutase 활성도 측정은 pyrogallol법 (26)과 자동산화에 의한 발색을 이용한 Marklund와 Marklund의 방법 (27)을 이 용하였다. SOD의 활성도를 측정하기 위해 일정량의 간조직 에 0.
Thiobarbituric acid를 이용한 Sinnbuber와 Yu의 방법 (22) 및 Lee의 방법(23)을 이용하여 간조직 내 지질과산화물과 Buege와 Aust(24)의 방법으로 혈장 내 지질과산화물의 농도를 나타내는 thiobarbituric acid reactive substances(TBARS) 농도를 측정하였다. TBARS는 조직이나 세포 내 소기관 부유액의 malondialdehyde(MDA)와의 반응물로 추정 되 며 지질과산화물의 수준을 평가하는데 이용된다.
빈혈 유발 군은 정 상식 이 군(ferric citrate 6 g/kg diet)과 철분결핍 식 이군(ferric citrate 2 g/kg diet)으로 분류하여 식이를 제공하였으며, 참당귀추출물을 1 g/kg BW/day로 14일 동안 경구 투여 하였다. 정 상식 이는 AIN-76A diet(Dytes Inc., Bethlehem, PA., USA)를 사용하였다. 저철분 식이에 의한 빈혈효과와 CYP 투여에 의하여 상승효과를 주어 체내 철분의 영양 상태를 저하시킨 상태를 유지하고자 하였다.
혈장과 간의 단백질 산화정도는 단백질 carbonyl 함량을 DNPH(2, 4_dinitrophenyl hydrazine)을 이용한 Oliver 등(25) 의 방법에 의하여 측정하였다. 침전된 단백질에 2, 4-DNPH 시 약과 반응시 킨 후에 탄올과 에 텔 아세 테 이 트의 혼합액 으로세 척 하고 6 M guanidine-HCl 용액으로 용해 하여 370 nm에서 흡광도의 차이를 측정하고 홉광계수는 (22xio「5 mofi cnfi)를 이용하여 환산하였다.
성능/효과
05)(Table 1). CYP를 투여 하고 참당귀를 투여한 AND군(30.8±1.8 ng/ mg protein)은 CYP만 투여한 ANS군(38.5 ±2.7 ng/mg pro- tein)에 비하여 유의 하게 감소함을 보이 면서 참당귀 투여 에의 한 지 질 과산화를 억 제 하는 항산화 효과를 보였다. 그러 나저철분 식이 공급 후 참당귀 투여군에서는 유의적인 차이가 없었으나 감소하는 경향을 보였다.
05). CYP를 투여 후 참당귀 추출물을 투여 한 AND군은 39.2±2.2 (unit/mg protein)로 CON군에 비해 유의적으로 증가했으나 (p<0.05) ANS군과는 유의적인 차이를 차이를 보이지는 않았고 감소하는 경 향성을 보였다. CYP를 투여한 저 철분식 이 군인 ALS군과 저철분식이군에서 참당귀추출물을 투여한 ALD군은 정상대조군인 CON군과 비교해 차이가 나지 않았다.
05)(Table 2). CYP를 투여하고 참당귀를 투여 한 AND군(77.5 ± 10.7 nmol/mg protein)은 CYP만 투여한 ANS군(128.3±3.1 nmol/mg protein)에 비하여 유의하게 감소함을 보이 면서 참당귀 투여 에 의한 단백질 산화를 유의적으로 억제하는 항산화 효과를 보였다. 또한 저철분식이 공급 후 참당귀 투여군에서도 유의적인 차이가 보임으로써 저 철분 식이에 의한 단백질 산화정도를 억제하였다.
또한 저철분식이 공급 후 참당귀 투여군에서도 유의적인 차이가 보임으로써 저 철분 식이에 의한 단백질 산화정도를 억제하였다. 간의 단백질 산화 정도는 CYP의 투여에 의하여 증가하였으나 저철분식이에 의해서는 유의적인 차이가 없었고 참당귀의 투여에의 해서는 유의적 인(p<0.05) 감소를 보임으로써 참당귀의 단백질 산화억제 효과를 알 수 있었다.
간조직의 지질 과산화물 농도는 정상대조군인 CON군은 26.1±1.6(ng/mg protein)이 었고, CYP를 투여한 후 정상식이를 섭취한 ANS군은 45.3±1.8(ng/mg protein)로 CON군에 비해 유의적으로 높았다(p<0.05). 또한 CYP를 투여 한 정상식이 군에서 참당귀추출물을 투여한 AND군은 34.
반면, CYP를 투여한 후 저 철분식 이를 섭 취한 군인 ALS 군과 CYP를 투여 한 저 철분식 이 군에서 참당귀추출물을 투여한 ALD군은 정상대조군인 CON군과 차이가 없었다. 결론적으로 TBARS 생성 수준은 CYP 투여 여 부에 따라, 정 상식이와 저철분식이 섭취에 따라, CYP투여 후 참 당귀추출물의 투여 여부에 따라 유의적으로 높게 나타났다(p<0.05).
CYP를 투여한 저 철분식 이 군인 ALS군과 저철분식이군에서 참당귀추출물을 투여한 ALD군은 정상대조군인 CON군과 비교해 차이가 나지 않았다. 또한 H2O2를 분해하여 조직의 손상을 방지 하는 catalase 활성도 CYP를 투여한 정상식이군인 ANS군이 정상 대조군인 CON에 비해 유의적으로 증가했으나 참당귀를 투여한 AND군과는 유의적인 차이가 없었고, SOD의 결과와 같이 catalase에서도 저철분식이 에서는 CON군과 차이가 없었다.
이는 산화스트레스에 의한 자유기의 발생이 증가함에 따라 세포의 환경을 보호하기 위하여 활성이 증가하였다고 사료된다. 또한 SOD 가 ROS를 제거한 후 생성된 H2O2를 분해함으로써 조직의 손상을 방어 하는 catalase도 CYP를 투여한 정상식이군의 경우 정 상대조군에 비해 유의 적으로 높았고, 저철분식이군도 정상대조군에 비해 유의적인 차이는 아니었으나 높은 경향을 보였다. 이는 Rekha 등(39)의 연구에서 CYP(25 ㎎/㎏ BW)를 10일동안 투여한 후 마우스의 조직 에서 SOD와 cat- alase가 증가한다는 결과와 같았다.
1 nmol/mg protein)에 비하여 유의하게 감소함을 보이 면서 참당귀 투여 에 의한 단백질 산화를 유의적으로 억제하는 항산화 효과를 보였다. 또한 저철분식이 공급 후 참당귀 투여군에서도 유의적인 차이가 보임으로써 저 철분 식이에 의한 단백질 산화정도를 억제하였다. 간의 단백질 산화 정도는 CYP의 투여에 의하여 증가하였으나 저철분식이에 의해서는 유의적인 차이가 없었고 참당귀의 투여에의 해서는 유의적 인(p<0.
차이가 없었다. 또한, 식이 섭취량은 정상대조군인 CON 군에 비해 CYP를 투여 후 정상식이와 저철분식이를 섭취한 군인 ANS군과 ALS군이 유의적으로 낮게 섭 취 하였다. 정 상식 이군에서 CYP 투여 후 참당귀추출물의 투여 에 의해서 식이 섭취량의 차이가 나지 않았고, 저철분식이군에서 CYP 투여 후 참당귀 추출물을 투여 한 ALD군은 ALS군에 비해 유의적으로 높았다(p<0.
의한 조직손상을 방어한다(38). 본 실험 결과에서 SOD 는 CYP를 투여한 정상식이군의 경우 정상대조군에 비해 유의적으로 높았고, 저철분식이군도 정상대조군에 비해 유의적 인 차이는 아니 었으나 수치 의 증가를 보였다. 이는 산화스트레스에 의한 자유기의 발생이 증가함에 따라 세포의 환경을 보호하기 위하여 활성이 증가하였다고 사료된다.
4(%)의 DPPH free radical 소거 효과를 보였다. 본 연구결과 참당귀추출물 1 mg/m丄의 농도에서 열수추출물의 free radical 소거 효과는 메탄올 추출물보다 높게 나타났으며 농도 의존적으로 자유기 를 소거 하는 능력이 상승하는 것을 관찰하였고 메탄올추출물은 합성항산화제 인 BHA 100 ppm 농도의 DPPH radical 소거 활성 88.1%와 흡사한 수치를보였다. 이는 참당귀추출물이 자유기 소거 능력이 있으며 가공과정 에 쓰이는 메탄올추출물보다 다류에 응용할 수 있는 열수추출물의 효과가 높다는 것도 의미가 있었다.
본 연구의 결과를 요약하면 참당귀추출물 1 mg/mL의 농도에서 열수추출물의 free radical 소거 효과는 메탄올 추출물보다 높게 나타났으며 농도 의 존적 으로 DPPH free radical 소거 효과가 상승하는 것을 관찰하였다. 또한 참당귀 투여 에의하여 화학요법으로 발생된 지질과산화물의 생성을 감소시켰으며, 단백질 산화를 유의적으로 억 제함으로써 참 당귀추출물은 CYP를 투여로 생성된 free radical을 감소시킴으로써 독성을 감소시켜, 혈액학적 빈혈지표가 더 감소되는 것을 막았다고 사료되며, 항산화제로서의 가능성이 있는 한약재로서 활용성이 높을 것으로 사료된다.
생체내 지질과산화물질의 증가는 성인병 및 만성 퇴행성질환인 동맥경화, 심장병의 원인이 되는데 지질과산화 반응물인 MDA(malondialdehyde)를 나타내는 TBARS(thiobar- bituric acid reactive substances)의 반응은 CYP를 투여 한정 상식이 군의 경우 정상대조군에 비해 유의적으로 높았고, 저철분식이군도 정상대조군에 비해 유의적인 차이는 없었으나 높였다. 이는CYP로 인해 지질과산화물이 유도되어 MDA 가 증가했다는 Kaya 등의 연구와 일치 했으며 (4, 5, 33), 또 한참 당귀추출물을 투여 한 AND군은 CYP만 투여 한 ANS군에 비 해 TEARS 생 성 수준이 유의 적 으로 감소해 참당귀 추출물이 CYP에 의한 지질과산화물 생성을 낮췄다고 사료된다.
또한 4일 이후에는 체중이 점차 증가하기 시작했다. 실험기간 최종체중은 정상식이군에서 CYP를 투여한 ANS군이 정 상대조군인 CON군에 비해 유의 적 으로 낮았으며 (p<0.05) 정 상식 이 군에서 CYP 투여 후 참당귀 추출물을 투여 한 AND군은 ANS군에 비해 체중이 유의적으로 높았다 (p<0.05).
이상과 같은 결과로 CYP투여 로 인해 CYP가 간에서 활성화하면서 생 긴 free radical이 조직 에 손상을 주어 부작용이 발생하게 되므로, 참당귀추출물로 인해 혈액학적 빈혈 수치가 향상된 것은 참당귀추출물의 투여가 EPO발현에 의한 조혈효과보다는 CYP를 투여로 생성된 free radical을 감소시 킴으로써 free radical로 인한 실험 동물의 독성을 감소시 킴으로 써 혈액학적 빈혈지표가 더 감소되는 것을 막았다고 사료된다.
또한, 식이 섭취량은 정상대조군인 CON 군에 비해 CYP를 투여 후 정상식이와 저철분식이를 섭취한 군인 ANS군과 ALS군이 유의적으로 낮게 섭 취 하였다. 정 상식 이군에서 CYP 투여 후 참당귀추출물의 투여 에 의해서 식이 섭취량의 차이가 나지 않았고, 저철분식이군에서 CYP 투여 후 참당귀 추출물을 투여 한 ALD군은 ALS군에 비해 유의적으로 높았다(p<0.05). 식 이효율은 참당귀 추출물을 투여 한 AND군이 CON군에 비해 높았으나, 저철분식이군에서는 참당귀 투여한 ALD군이 ALS군에 비해 유의적으로 식 이 효율이 낮았다(p<0.
참당귀 섭취에 의한 항산화 효소 활성도의 변화를 관찰한 결과는 Table 3에서 보는 바와 같이 SODCsuperoxide dis- mutase)에서 정상대조군인 CON군은 31.3±3.1(unit/mg pro- tein)이었고, CYP를 투여한 ANS군에서 42.7±2.3(unit/mg protein)로 CON군에 비해 유의적으로 증가했다(p<0.05). CYP를 투여 후 참당귀 추출물을 투여 한 AND군은 39.
참당귀추출물을 농도별로 1 mM DPPH(l-diphenyl-2- picrylhydrazyl) 용액 에 첨가하여 free radical을 소거 하는 능력을 측정한 결과 참당귀의 열수추출물의 DPPH free radical 소거 효과는 0.125, 0.25, 0.5, l(mg/mL)의 농도에서 27.1 ±4.9, 38.5 + 4.3, 47.1 ±5.7, 66.3±41(%)로 나타났고, 메탄올 추출물에서는 0.125, 0.25, 0.5, l(mg/mL)의 농도에서 22.3±0.8, 37.8+5.0, 45.6 + 5.4, 81.5±2.4(%)의 DPPH free radical 소거 효과를 보였다. 본 연구결과 참당귀추출물 1 mg/m丄의 농도에서 열수추출물의 free radical 소거 효과는 메탄올 추출물보다 높게 나타났으며 농도 의존적으로 자유기 를 소거 하는 능력이 상승하는 것을 관찰하였고 메탄올추출물은 합성항산화제 인 BHA 100 ppm 농도의 DPPH radical 소거 활성 88.
또한 참당귀 투여 에의하여 화학요법으로 발생된 지질과산화물의 생성을 감소시켰으며, 단백질 산화를 유의적으로 억 제함으로써 참 당귀추출물은 CYP를 투여로 생성된 free radical을 감소시킴으로써 독성을 감소시켜, 혈액학적 빈혈지표가 더 감소되는 것을 막았다고 사료되며, 항산화제로서의 가능성이 있는 한약재로서 활용성이 높을 것으로 사료된다. 항산화효소인 SOD 활성은 CYP 투여에 의하여 활성이 증가하였으며 참 당귀추출물의 투여 에 의한 효과가 나타나지 않았으나 감소하는 경향을 보였고 catalase 활성은 CYP 투여 에 의하여 활성이 증가하였으나 참당귀의 효과는 차이가 없었다. 결론적으로 참 당귀추출물은 free radical 소거능을 갖고, 화학요법으로 발생된 지질과산화물의 생성을 낮춰 화학요법 에 의한 부작용으로 발생되는 혈액학적 수치의 감소를 막음으로써 항산화제로의 활용성을 기대해본다.
혈장에서의 단백질산화물 즉 carbonyl 농도는 생체내 대사과정에서 생성된 자유기에 의한 단백질의 손상을 측정하는 지표로서 정상대조군인 CON군에 비하여 CYP를 투여한 군과 CYP를 투여하고 저철분식이를 공급한 군에서 유의적으로 높았다(p<0.05)(Table 2). CYP를 투여하고 참당귀를 투여 한 AND군(77.
혈장에서의 지질과산화 평가는 지질과산화 반응물인 ma- londialdehyde(MDA) 함량으로 나타내는데 정상대조군인 CON군에 비하여 CYP를 투여 한 군과 CYP를 투여 하고 저 철분 식이를 공급한 군에서 유의적으로 높았다(p<0.05)(Table 1). CYP를 투여 하고 참당귀를 투여한 AND군(30.
후속연구
항산화효소인 SOD 활성은 CYP 투여에 의하여 활성이 증가하였으며 참 당귀추출물의 투여 에 의한 효과가 나타나지 않았으나 감소하는 경향을 보였고 catalase 활성은 CYP 투여 에 의하여 활성이 증가하였으나 참당귀의 효과는 차이가 없었다. 결론적으로 참 당귀추출물은 free radical 소거능을 갖고, 화학요법으로 발생된 지질과산화물의 생성을 낮춰 화학요법 에 의한 부작용으로 발생되는 혈액학적 수치의 감소를 막음으로써 항산화제로의 활용성을 기대해본다.
효과가 상승하는 것을 관찰하였다. 또한 참당귀 투여 에의하여 화학요법으로 발생된 지질과산화물의 생성을 감소시켰으며, 단백질 산화를 유의적으로 억 제함으로써 참 당귀추출물은 CYP를 투여로 생성된 free radical을 감소시킴으로써 독성을 감소시켜, 혈액학적 빈혈지표가 더 감소되는 것을 막았다고 사료되며, 항산화제로서의 가능성이 있는 한약재로서 활용성이 높을 것으로 사료된다. 항산화효소인 SOD 활성은 CYP 투여에 의하여 활성이 증가하였으며 참 당귀추출물의 투여 에 의한 효과가 나타나지 않았으나 감소하는 경향을 보였고 catalase 활성은 CYP 투여 에 의하여 활성이 증가하였으나 참당귀의 효과는 차이가 없었다.
참고문헌 (39)
Medical college of Seoul University. 1993. Hematology. Seoul National Univ Publish., Seoul.
Ma JY, Ha CS, Sung HJ, Zee OP. 2000. Hemopoietic effects of Rhizoma Rehmanniae Preparata on Cyclophosphamideinduced pernicious anemia in rats. Kor J Pharmacogn 31:
Tas F, Eralp Y, Basaran M, Sakar B, Alici S, Argon A,
Kim DU, Jin JL, Lee JU, Han CH, Min SS, Kim HG, Park
Cha BH, Oh SH, Yu CJ, Yang CY, Kim GY. 1992. Recombinant human granulocyte colony stimulation factor treatment of apriority agranulocytosis: 2 Case Report. Korean
Lee SI, Ahn DG, Shin MG, No SH, Lee YJ, Kim KH. 1982.
Liu XL. 1984. Twelve cases of aplastic anemia treated mainly by ready Chinese drugs. Cung/ TSA Chih 25: 759-760.
Kim HS, Heu IH, Lee SJ, Ahn HS. 1989. Immunologic characteristic on extract of old anter. Kor J Pharmacogn 38:
Park KJ, Hong SB, Kim EH, Ma JY, Eun YA, Kim HS. 1998.
Han DS. 1988. Herbology. Dong-Myoung publicating company,
Han JA, Jang KH, Kang SA, Choue R. 2003. Hematological Effects of water extracts of Cham-Dang-Gui on cyclophosphamide induced anemic rat. Korean J Nutrition 36: 1013-1021.
Kim SH, Lim JS. 1999. Effect of Korean traditional medicine
Colvin M. 1982. The alkylating agents. In Pharmacological principles of cancer treatment. Chabner B, ed. Saunders,
Mortensen SR, Chanda SM, Hooper MJ, Padilla S. 1996.
Shinnburber RO, Yu TC. 1958. Characterization of the red
Lee YK. 2000. Effects of dietary fatty acids and protein sources on lipid metabolism and DMBA induced mammary tumors in rats. PhD Dissertation. HanYang University.
Buege JA, Aust SD. 1978. Microsomal lipid peroxidation.
Oliver CN, Ahn B, Moerman EJ, Goldstein S, Stadtman ER.
Marklund S. 1984. Pyrogallol antioxidant. In CRC hanbook of methods for oxygen radical research. CRC Press, New York. p 243.
Marklund S, Marklund G. 1974. Involvement of superoxide
Aebi HE. 1984. Catalase. In Methods in enzymatic analysis.
Claiborne A. 1984. Catalase activity. In CRC hanbook of methods for oxygen radical research. CRC Press, New York.
Harman D. 1987. The free radical theory of aging. In Mordern
Kim SM, Cho YS, Kim EJ, Bae MJ, Han JP, Lee SH, Sung
Choi Y, Kim M, Shin JJ, Park JM, Lee J. 2003. The antioxidant
Kim SJ, Song BG, Lee EJ, Kim HG, Kim JG. 2000. The effect of Angellica gigas on the relaxation of vascular smooth muscle and the expression of iNOS. Korean J Immunol 20:
Kang SY, Lee KY, Park MJ, Kim YC, Markelonis GJ, Oh
Hur SK, Kim SS, Heo YH, Ahn SM, Lee BG, Lee SK. 2001.
Roberforid M, Calderon PB. 1995. Free radicals and oxidation phenomena in biological system. Marcel Dekker, Inc,
Chang NS, Ryu SM. 2001. Antioxidative effects of green tea powder diet against ethanol-induced oxidative damage in rat brain region. Kor J Nutr 34: 525-531.
Rekha PS, Kuttan G, Kuttan R. 2001. Effect of Brahma Rasayana on antioxidant systems and cytokine levels in mice during cyclophosphamide administration. J Exp Clin Cancer Res 20: 219-223.
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