[논문]차 카테킨 EGCG (Epigallocatechin Gallate)의 구강세균에 대한 살균효과

유미옥; 천재우; 오계헌

차 카테킨 EGCG (Epigallocatechin Gallate)의 구강세균에 대한 살균효과
Effect of Tea Catechin, EGCG (Epigallocatechin Gallate) on Killing of Oral Bacteria 원문보기

Korean journal of microbiology = 미생물학회지, v.40 no.4, 2004년, pp.364 - 366

유미옥 (순천향대학교 자연과학대학 생명과학부) , 천재우 (순천향대학교 자연과학대학 생명과학부) , 오계헌 (순천향대학교 자연과학대학 생명과학부)

초록
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본 연구는 차 카테킨인 EGCG (epigallocatechin gallate)에 의한 구강세균의 살균효과를 조사하기 위하여 수행되었다. 초기 세포밀도 $10^{7}$ cell/ml의 대상 세균에 대한 항세균 활성은 EGCG 1ml당 5mg에서 조사하였다. 선택 또는 복합배지상에서 집락생성단위(colony-forming unit, CFU)에 근거하여 EGCG의 항세균 활성은 농도에 비례하는 것을 확인하였다. Streptococcus mutans와 Streptococcus sobrinus는 5mg/ml의 EGCG에서 8시간 이내에 완전히 살균되었다. Lactobacillus acidophilus와 Lactobacillus plantarum도 동일한 조건에서 각각 2시간과 4시간 이내에 살균되었다. 2.5 mg/ml의 EGCG로 처리한 사람의 타액에서 유래하는 총 구강세균의 생존율을 BHI 고체배지상에서 조사하였으며, 총 구강세균은 10시간 이내에 완전히 살균되었다. MS 고체배지상에서 S. mitis and S. salivarius의 집락은 감소되었으며 배양 12시간 이내에서는 집락은 관찰되지 않았다. 그 결과, EGCG는 입냄새와 치석의 원인이 되는 구강세균을 살균시키고 충치를 예방하는 자연적이며 효과적인 물질임이 입증되었다.

Abstract ▼ AI-Helper

The purpose of this work was to investigate the effect oftea catechin, epigallocatechin gallate (EGCG) on killing of oral bacteria. The antibacterial activity of 2.5 mg/ml and 5.0 mg/ml EGCG was investigated for target bacteria of which initial cell number was approximately adjusted to $10^{7}ml$. The antibacterial activity of EGCG was proportional to the concentration according to colony-forming unit(CFU) of target bacteria enumerating on selective and complex media. Streptococcus mutans and Streptococcus sobrinus at 5mg/ml EGCG were completely killed within 8 hrs. Lactobacillus plantarum and Lactobacillus acidophilus were also killed within 2 hrs and 4 hrs under the same conditions, respectively. Oral bacteria at 2.5 mg/ml EGCG were completely killed within 10 hr. Colony numvers of S. mitis and S. salivarius treated with 2.5 mg/ml EGCG were decreased on MS solid media and no colony was observed on the media within 12 hrs. In consequence, EGCG would be a natural and effective compound that kill oral bacteria being caused of bad breath, plaque and gingivitis, and for preventing and treating dental caries.

주제어

AI 본문요약
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문제 정의

plantarum는 4시간만에 완전히 살균되었다. Hattori 등⑺은 차 폴리페놀이 S. 에서 glucosyltransferase의 반응으로 생성되는 불용성의 glucan의 합성을 억제하는 것을 보고하였는데, 이는 차 폴리페놀에 의한 항충치효과의 가능성을 제시한 것이다. Table 1은 녹차에서 정제된 생리활성이 강한 EGCG의 Streptococcus 속과 Lactobacillus 속에 대한 살균효과를 보여주고 있다.
본 연구에서는 사람의 구강에서 치아건강에 크게 영향을 미치는 Streptococcus mutans, S. sobrinus, S. mitis, S. salivarius, Lactobacillus acidophilus, L. plantanum 등을 포함하는 구강세균에 대한 차 카테킨 EGCG의 살균효과를 조사하였다.

제안 방법

EGCG (>90%, Roche Co., Sweden)에 의한 구강세균 S. mutans, S. sohrinus, L plantarum, L. acidophilus의 살균효율을 즉정하기 위해서 BHI, MRS 또는 MS 배지에 각 균주를 배양하였다. 균주가 대수성장기(exponential phase)를 거쳐 파장 660nm에서 OD 값이 1.
acidophilus 였으며 American Type Culture Collection에서 구입하여 사용하였다. S. znwwis와 S. sobrinus은 BHI (Difco, Sparks, USA)에 접종하였고, L. plantawm과 L. acidophilus^: MRS (Difco, Sparks, USA) 배지에 접종하여 37°C 배양기에서 48시간동안 배양하였다. 사람의 타액에서 유래하는 총 구강세균의 계수를 위하여 MS (mitis-salivarius) (Difco, Sparks, USA) 배지와 BHI 배지가 사용되였다.
5 mg/ml)에 12시간 동안 처리하면서 2시간 간격으로 샘플링하여 영양배지인 BHI (brain heart infusion)와 MS 고체배지상에 평판도말한 후, 37<>C에서 배양하였다. 고체배지상에 생성된 집락을 계수하여 EGCG가 실제 사람의 입에서 유래하는 구강세균에 미치는 영향을 조사하였다.
구강에 존재하면서 충치와 입 냄새의 원인이 되는 Streptococcus 속(S. mutans, S. sobrhius)과 Lactobacillus 속(L. acidophilus, L. plantarum)6^ 대한 EGCG의 살균력 실험을 수행 하였다. EGCG (5 mg/ml)에 노출된 S.
acidophilus의 살균효율을 즉정하기 위해서 BHI, MRS 또는 MS 배지에 각 균주를 배양하였다. 균주가 대수성장기(exponential phase)를 거쳐 파장 660nm에서 OD 값이 1.0에 도달하였을 때 배양액을 2000 X g에서 10분간 원심분리를 실시하였다. 상등액을 버리고 얻어진 균체는 10mM phosphate buffer (pH 7.
EGCG에 노출된 타액으로부터 구강세균 생존율 조사

사람의 타액을 수거하여 EGCG (2.5 mg/ml)에 12시간 동안 처리하면서 2시간 간격으로 샘플링하여 영양배지인 BHI (brain heart infusion)와 MS 고체배지상에 평판도말한 후, 37<>C에서 배양하였다. 고체배지상에 생성된 집락을 계수하여 EGCG가 실제 사람의 입에서 유래하는 구강세균에 미치는 영향을 조사하였다.
0)로 3회 세척하여 세균의 최종농도가 약 104 cells/ml 되게 하였다. 준비된 2.5-5.0mg/ml 농도의 EGCG에 세척된 균체를 각각 동일량을 접종하여 일정시간 간격으로 BHI 또는 MRS 배지에 100)11씩 평판도말한 후, 37°C(2에서 배양하였으며 형성되는 집락을 계수하여 EGCG의 농도와 노출시간에 따른 세균의 생존율(survival rate)을 조사하였다. 생존율 조사를 위한 방법은 Cho 등⑶의 방법에 따랐다.

대상 데이터

실험에서 사용된 구강세균은 S. mutans, S. sobrinus, L. plantarum, L. acidophilus 였으며 American Type Culture Collection에서 구입하여 사용하였다. S.

이론/모형

0mg/ml 농도의 EGCG에 세척된 균체를 각각 동일량을 접종하여 일정시간 간격으로 BHI 또는 MRS 배지에 100)11씩 평판도말한 후, 37°C(2에서 배양하였으며 형성되는 집락을 계수하여 EGCG의 농도와 노출시간에 따른 세균의 생존율(survival rate)을 조사하였다. 생존율 조사를 위한 방법은 Cho 등⑶의 방법에 따랐다.

성능/효과

Chang 등(2)은 한국산 녹차에서 추출한 차 폴리페놀을 이용하여 다양한 병원균에 대한 살균효과를 조사하였다. 10 mg/ml의 차 폴리페놀은 S. mitis와 S. salivarius를 8시 간이내에 살균한 것으로 확인되었는데, 5 mg/ml의 EGCG가 12시간 이내에 동일한 균을 완전히 살균한 것과 비교할 때 EGCG 의 살균효과가 우세함을 보여주는 것이다.
5 mg/ml)에 12시간 동안 처리하면서 두 시간 간격으로 샘플링하여 영양배지인 BHI 고체배지 상에서 배양한 결과 8시간 만에 90% 이상 제거되었으며, 10시간 만에 완전히 제거되었다. 또한 동일한 조건하에서 EGCG로 처리한 시료를 S. mitis와 S. salivariusS] 선택배지인 MS 고체배 지상에서 배양하여 S. mitiss와 S. salivarius7\ 10시간 만에 90% 이상 제거되었고 12시간이 경과하기 이전에 모두 사멸한 것을 확인하였다(Table 2). Chang 등(2)은 한국산 녹차에서 추출한 차 폴리페놀을 이용하여 다양한 병원균에 대한 살균효과를 조사하였다.
본 연구를 통해서 녹차에 포함된 차 카테킨 EGCG은 구강세균에 대한 탁월한 살균효과를 갖는 것으로 입증되었다. 향후 연구는 EGCG의 다양한 병원성 세균들에 대한 항균범위와 살균기작을 규명하고, 이 물질의 산업적 응용에 대하여 초점이 맞추어 질 것이다.
EGCG에 노출된 타액으로부터 구강세균 생존율 조사

사람의 침을 수거하여 EGCG (2.5 mg/ml)에 12시간 동안 처리하면서 두 시간 간격으로 샘플링하여 영양배지인 BHI 고체배지 상에서 배양한 결과 8시간 만에 90% 이상 제거되었으며, 10시간 만에 완전히 제거되었다. 또한 동일한 조건하에서 EGCG로 처리한 시료를 S.

후속연구

본 연구를 통해서 녹차에 포함된 차 카테킨 EGCG은 구강세균에 대한 탁월한 살균효과를 갖는 것으로 입증되었다. 향후 연구는 EGCG의 다양한 병원성 세균들에 대한 항균범위와 살균기작을 규명하고, 이 물질의 산업적 응용에 대하여 초점이 맞추어 질 것이다.

참고문헌 (15)

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저자의 다른 논문 :

표제어: PCR

동의어: Packet Collision Rate

용어 설명 출처 목록 (6)

용어 설명: PCR은 세균 특이성이 있는 primer를 이용하여 적은 수의 세균이 있을지라도 쉽게 검출할 수 있는 유용한 방법이며, 이를 이용하여 구강 내 치면세균막이나 타액에서 직접 세균을 검출할 수 있게 되었다[8].

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