M. viridis와 M. piperita의 흰쥐에서의 생리활성을 확인하기 위해 수행한 실험 결과는 다음과 같다. 1. ADH 활성은 M. viridis ext. 1g/kg body weight of rat/day 투여군 (이하 M. viridis ex. 1 g 투여군)과 M. piperita ext. 0.2g/kg body weight of rat/day 투여군 (이하 M. piperita ext. 0.2g 투여군)이 음성대조군에 비해 각각 147% 및 144% 증가하여 양성대조물질인 Silymarin 투여군 (95%)보다 매우 효과적으로 알콜의 빠른 분해에 기여하는 것으로 확인되었다. 2. ALDH활성은 M. viridis ext. 1g 투여군과 M. piperita ext. 0.2g 투여군이 음성대조군에 비해 각각 154%, 158%의 활성증가를 나타냈으며 이는 Silymarin 투여군 (153%)보다 높은 활성으로 2종의 박하가 모두 효과적으로 알콜을 분해할 것으로 생각되었다. 3. CAT 활성은 M. viridis ext. 투여군이 M. piperita ext. 투여군보다 유의적으로 높았으며 특히, M. viridis ext. 투여군은 정상군이나 음성대조군 및 Silymarin 투여군보다도 활성이 높아 M. viridis ext. 투여군이 CAT에 의한 알콜분해에 있어서 M. piperita ext. 투여군보다 우수한 것으로 확인되었다. 4. Mn-SOD 활성은 M. viridis ext. 0.2g 및 1g 투여군은 음성대조군에 비해 각각 69% 및 75%를, M. piperita ext. 0.2g 및 1g 투여군은 각각 94% 및 86%를 나타내어 M. viridis ext. 투여군이 M. piperita ext. 투여군보다도 알콜투여에 의한 산화적 스트레스를 효과적으로 방어하는 것을 알 수 있었으며 특히, M. viridis ext. 투여군은 SiIymarin 투여군(84%)보다도 MN-SOD의 활성 회복에 효과적이었다. 5. GSH-px의 활성은 음성대조군에 비해 M. viridis ext. 0.2g 및 1g 투여군이 각각 81% 및 88%를, M. piperia ext. 0.2g 및 1g 투여군이 88% 및 67%를 나타내 알콜에 의해 유도된 GSH-px의 활성증가를 2종의 박하 모두 효과적으로 회복시켜주었다. 6. 혈청 GPT의 활성은 음성대조군에서 정상군에 비해 유의적으로 증가 (126%)하였으나 M. viridis와 M. piperita 투여군은 음성대조군이 나타낸 활성에 대해 $69%{\sim}72%$의 활성을 나타내 우수한 GPT활성 회복력을 가졌으며 이는 Silymarin(93%) 보다도 우수하였다. 2종의 박하 추출물 투여군들 사이에는 혈청 GPT 활성에 대한 유의적인 차이가 나타나지 않았다. 7.과산화물질 (TBARS)의 함량은 정상군에 비해 음성대조군에서 약간의 함량 증가가 관찰되었으나 유의적인 수준은 아니었으며 대부분의 박하 추출물 투여군과 Silymarin 투여군에서 과산화지질이 비슷한 수준으로 증가하여 박하는 알콜에 의한 과간화지질생성에 대한 저해효과가 낮은 것으로 확인되었다. 8. 상대간장중량은 각 실험군별로 상대간장중량에서의 차이는 다소 있었으나 유의성은 없었다.
M. viridis와 M. piperita의 흰쥐에서의 생리활성을 확인하기 위해 수행한 실험 결과는 다음과 같다. 1. ADH 활성은 M. viridis ext. 1g/kg body weight of rat/day 투여군 (이하 M. viridis ex. 1 g 투여군)과 M. piperita ext. 0.2g/kg body weight of rat/day 투여군 (이하 M. piperita ext. 0.2g 투여군)이 음성대조군에 비해 각각 147% 및 144% 증가하여 양성대조물질인 Silymarin 투여군 (95%)보다 매우 효과적으로 알콜의 빠른 분해에 기여하는 것으로 확인되었다. 2. ALDH활성은 M. viridis ext. 1g 투여군과 M. piperita ext. 0.2g 투여군이 음성대조군에 비해 각각 154%, 158%의 활성증가를 나타냈으며 이는 Silymarin 투여군 (153%)보다 높은 활성으로 2종의 박하가 모두 효과적으로 알콜을 분해할 것으로 생각되었다. 3. CAT 활성은 M. viridis ext. 투여군이 M. piperita ext. 투여군보다 유의적으로 높았으며 특히, M. viridis ext. 투여군은 정상군이나 음성대조군 및 Silymarin 투여군보다도 활성이 높아 M. viridis ext. 투여군이 CAT에 의한 알콜분해에 있어서 M. piperita ext. 투여군보다 우수한 것으로 확인되었다. 4. Mn-SOD 활성은 M. viridis ext. 0.2g 및 1g 투여군은 음성대조군에 비해 각각 69% 및 75%를, M. piperita ext. 0.2g 및 1g 투여군은 각각 94% 및 86%를 나타내어 M. viridis ext. 투여군이 M. piperita ext. 투여군보다도 알콜투여에 의한 산화적 스트레스를 효과적으로 방어하는 것을 알 수 있었으며 특히, M. viridis ext. 투여군은 SiIymarin 투여군(84%)보다도 MN-SOD의 활성 회복에 효과적이었다. 5. GSH-px의 활성은 음성대조군에 비해 M. viridis ext. 0.2g 및 1g 투여군이 각각 81% 및 88%를, M. piperia ext. 0.2g 및 1g 투여군이 88% 및 67%를 나타내 알콜에 의해 유도된 GSH-px의 활성증가를 2종의 박하 모두 효과적으로 회복시켜주었다. 6. 혈청 GPT의 활성은 음성대조군에서 정상군에 비해 유의적으로 증가 (126%)하였으나 M. viridis와 M. piperita 투여군은 음성대조군이 나타낸 활성에 대해 $69%{\sim}72%$의 활성을 나타내 우수한 GPT활성 회복력을 가졌으며 이는 Silymarin(93%) 보다도 우수하였다. 2종의 박하 추출물 투여군들 사이에는 혈청 GPT 활성에 대한 유의적인 차이가 나타나지 않았다. 7.과산화물질 (TBARS)의 함량은 정상군에 비해 음성대조군에서 약간의 함량 증가가 관찰되었으나 유의적인 수준은 아니었으며 대부분의 박하 추출물 투여군과 Silymarin 투여군에서 과산화지질이 비슷한 수준으로 증가하여 박하는 알콜에 의한 과간화지질생성에 대한 저해효과가 낮은 것으로 확인되었다. 8. 상대간장중량은 각 실험군별로 상대간장중량에서의 차이는 다소 있었으나 유의성은 없었다.
Alcohol metabolizing and antioxidant activity of Mentha species were investigated in rat liver. Fifty six Sprague Dawley rats were randomly divided into seven groups such as normal (ethanol excluded), negative control (40% ethanol (10 g/kg of body weight/day) fed), positive control (1 g Silymarin/kg...
Alcohol metabolizing and antioxidant activity of Mentha species were investigated in rat liver. Fifty six Sprague Dawley rats were randomly divided into seven groups such as normal (ethanol excluded), negative control (40% ethanol (10 g/kg of body weight/day) fed), positive control (1 g Silymarin/kg of body weight/day with ethanol fed), two Mentha viridis extracts (0.2 g & 1 g M. viridis methanol ext./kg of body weight/day with ethanol fed) and two M piperita extracts (0.2 g & 1 g M. piperita methanol ext./kg of body weight/day with ethanol fed) groups. After 2 weeks, rats were sacrificed under ether. The activities of alcohol dehydrogenase (ADH), aldehyde dehydrogenase (ALDH), catalase (CAT), manganese superoxide dismutase (Mn-SOD), glutathione peroxidase (GAH-px) and the content ofthiobarbituric acid reactive substance (TBARS) in the rat livers and the activity of glutamate pyruvate transferase (GPT) in serum were evaluated. From the analyses, 1 g M. viridis and 0.2 g M. piperita administrated groups showed higher ADH and ALDH activity than the other groups. Groups fed with 0.2 g and 1 g M. viridis ext. and 0.2 g M. piperita ext. showed higher CAT activity than the other groups. All the Mentha extract fed groups exhibited more effective in recovering Mn-SOD, GSH-px and GPT acitivities to a similar degree of normal group. TBARS contents of two M. viridis ext. fed group and 0.2 g M. piperita ext. fed group were higher than those of the other groups. M. viridis extract fed groups showed more effective in CAT and Mn-SOD activities than M. piperita extract groups at p < 0.05. Finally, it is concluded that both Mentha species have alcohol metabolizing and antioxidant activity and M viridis is more effective than M. piperita.
Alcohol metabolizing and antioxidant activity of Mentha species were investigated in rat liver. Fifty six Sprague Dawley rats were randomly divided into seven groups such as normal (ethanol excluded), negative control (40% ethanol (10 g/kg of body weight/day) fed), positive control (1 g Silymarin/kg of body weight/day with ethanol fed), two Mentha viridis extracts (0.2 g & 1 g M. viridis methanol ext./kg of body weight/day with ethanol fed) and two M piperita extracts (0.2 g & 1 g M. piperita methanol ext./kg of body weight/day with ethanol fed) groups. After 2 weeks, rats were sacrificed under ether. The activities of alcohol dehydrogenase (ADH), aldehyde dehydrogenase (ALDH), catalase (CAT), manganese superoxide dismutase (Mn-SOD), glutathione peroxidase (GAH-px) and the content ofthiobarbituric acid reactive substance (TBARS) in the rat livers and the activity of glutamate pyruvate transferase (GPT) in serum were evaluated. From the analyses, 1 g M. viridis and 0.2 g M. piperita administrated groups showed higher ADH and ALDH activity than the other groups. Groups fed with 0.2 g and 1 g M. viridis ext. and 0.2 g M. piperita ext. showed higher CAT activity than the other groups. All the Mentha extract fed groups exhibited more effective in recovering Mn-SOD, GSH-px and GPT acitivities to a similar degree of normal group. TBARS contents of two M. viridis ext. fed group and 0.2 g M. piperita ext. fed group were higher than those of the other groups. M. viridis extract fed groups showed more effective in CAT and Mn-SOD activities than M. piperita extract groups at p < 0.05. Finally, it is concluded that both Mentha species have alcohol metabolizing and antioxidant activity and M viridis is more effective than M. piperita.
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문제 정의
본 연구에서는 증가하는 기능성 소재의 수요증가에 부응하기 위해 식물자원을 대상으로 한 항산화제 탐색을 지속적으로수행해 오던 중 우수한 효과를 나타낸 2종의 박하 M. vidiris L. (혹은 M. spicata L.)과 M. piperita [“에 대해 알콜로 유도한 산화百 스트레스에서의 항산화작용 및 알콜분해능을 검토하여 보다 우수한 기능성 자원을 선발하고자 하였다.
제안 방법
5 mM H2O2 그리고 50 mM potassium phosphate buffer (pH 7.0)를 합하여 3 皿 이 되게 한 후 25°C에서 30초 동안 반응시켰으며, 이 반응액을 240nm 에서 压。2의 흡광도 변화로 효소 활성을 측정하였다. 효소 활성 (k/mg protein)은 I분간 1 |_iM 也6를 분흐H 시키는 데 요구되는 효소양으로 나타내었다.
2주간의 투여실험 후 15시간동안 절식한 후 에텔로 흰쥐를마취하고 간장과 혈액을 채취하였다. 이때 간장은 0.
2주일간의 사육 기간동안 매일 40% 에탄올 (10 g/kg body weight of rat/day)을 경구투여함으로서 산화적 스트레스를 유발하면서멸균된 고형사료 (샘타코, 한국)와 물은 자유롭게 섭취토록 하였으며 각 동물들의 체중 변화를 매일 기록하였고 희생하기 17시간 전부터 단식시켰다.
lxlO3M Sodium azide와 I mM EDTA를 함유하는 0.1 M potassium phosphate buffer (pH 7.0) 500 以匕 효소액 100 “匕 이utathione reductase (2.768 U/it涉)100“匕 1x10-2M glutathione 100 以 를 혼합하여 3기C에서 10분 동안 예비배양한 후 이 반응액에 0.1% NaHCCK에 녹인 1.5x10「3 M NADPH 100以를 가해 1분간 그리고 L5xl(「3 m h2O2 100必를 가한 후 다시 1분간 340nni 에서 홉광도를 측정하였다. 결과는 흡광도와 NADPH의 molecular extinction coefficient (E = 6.
간장 조직 중량의 10배량의 0.1 M phosphate buffers- 가흐H 세절한 후 glass teflon homogenizer로 마쇄하여 얻어진 liver homogenate 중 일부는 과산화물질 (thiobarbituric acid reactive substance, TBARS)의 함량 분석에 사용하였다. 남은 일부의 liver homogenate는 600>缶에서 15분간 원심분리하여 상등액을얻고 다시 8, 000xg에서 10분간 원심분리하여 얻어진 침전물로 catalase (CAT), aldehyde dehydrogenase (ADLH)의 활성을 분석하였다.
5x10「3 M NADPH 100以를 가해 1분간 그리고 L5xl(「3 m h2O2 100必를 가한 후 다시 1분간 340nni 에서 홉광도를 측정하였다. 결과는 흡광도와 NADPH의 molecular extinction coefficient (E = 6.22시俨 c市) 로부터 효소액과 blank의 1분간의 NADPH 농도 변화 (△[NADPH]/min)를 산출하고 이 효소액의 수치에서 blank의수치와 glutathione peroxidase와 관련없는 인자에 의해 나타나는 사NADPH]/min를 빼준 값을 다음의 식에 대입하여 이uta- thione peroxidase의 활성 (Uk/mg protein)^- 산줄하였다.
1 M phosphate buffers- 가흐H 세절한 후 glass teflon homogenizer로 마쇄하여 얻어진 liver homogenate 중 일부는 과산화물질 (thiobarbituric acid reactive substance, TBARS)의 함량 분석에 사용하였다. 남은 일부의 liver homogenate는 600>缶에서 15분간 원심분리하여 상등액을얻고 다시 8, 000xg에서 10분간 원심분리하여 얻어진 침전물로 catalase (CAT), aldehyde dehydrogenase (ADLH)의 활성을 분석하였다. 전 단계에서 남은 상등액은 105, 000 xg에서 1 시간동안 초원심분리 하여 최종적으로 얻어진 상등액으로 manganese superoxide dismutase (Mn-SOD), glutathione peroxidase (GSH-px) 및 alcohol dehydrogenase (ADH)의 활성 분석을 수행하였다.
전 단계에서 남은 상등액은 105, 000 xg에서 1 시간동안 초원심분리 하여 최종적으로 얻어진 상등액으로 manganese superoxide dismutase (Mn-SOD), glutathione peroxidase (GSH-px) 및 alcohol dehydrogenase (ADH)의 활성 분석을 수행하였다. 또한 복부대동맥에서 채취된 혈액은 4°C에서 30분간 정치한 후 3, 000rpm에서 15분간 원심분리하여 혈청을 분리하여 glutamate pyruvate transferase [GPT, 또는 alanine aminotransferase (ALT)]의 활성분석에 사용하였다.
)는 2004년 9월 농촌진흥청 작물과학원 약용자원시험포장에서 지상부를 채취한 것으로 세척, 동결건조, 분쇄하여 추출물 조제에 사용하였다. 박하 분말을 accelerated solvent extraction (ASE apparatus)를 이용하여 50°C에서 5분간 메탄올로 2회 반복 추출하고 이를 여과한 후 감압농축하여 메탄올추출물을 조제한 후 동물활성 검정에 사용하였다.
박하 추출물이 알콜을 투여한 흰쥐의 간장에서 항산화효소 glutathione peroxidase (GSH-px)의 활성에 미치는 영향을 살펴보았다 (Fig. 5). 실험결과 알콜을 투여한 모든 실험군들이정상군에 비해 GSH-px의 활성이 감소되었는 데, 음성대조군에 비해서는 M.
생후 4주된 체중 130~140g의 Sprague-Dawley계 웅성 흰쥐는 샘타코 (한국)에서 구입하여 식이군별로 8마리씩 난괴법에 따라 배정하여 온도 22±2°C, 습도 55%, 명암 주기 12시간으로 유지한 환경에서 1주일간 예비 사육한 후 Table 1에나타낸 것처럼 정상군, 음성대조군, 양성대조군 및 박하 추출물 4개 투여군 등 모두 7개 군으로 나누어 사육하였다. 2주일간의 사육 기간동안 매일 40% 에탄올 (10 g/kg body weight of rat/day)을 경구투여함으로서 산화적 스트레스를 유발하면서멸균된 고형사료 (샘타코, 한국)와 물은 자유롭게 섭취토록 하였으며 각 동물들의 체중 변화를 매일 기록하였고 희생하기 17시간 전부터 단식시켰다.
알콜의 투여로 다량 생성되는 라디칼들은 생체 내에서 항산화효소인 Mn-SOD의 활성을 증가시키는 데 라디칼을 적절히제거할 수 있는 항산화물질이 존재하면 그 활성은 정상 수준으로 회복 (Koch et al., 2004)되므로 알콜 투여로 유발된 산화적 스트레스에 대해 2종의 박하 추출물이 어떠한 영향을 미치는 지를 관찰하였다. Fig.
먼저원심분리 한 조직 상등액 500 成 를 75 mM sodium xanthine 50 와 10 mM hydroxylamine hydrochloride 50 /波 그리고증류수 200成 를 혼합한 후 37°C에서 10분간 예비 배양하였 匸}. 여기에 xanthine oxidase (0.1 U/mL) 200/波를 가하고 匸扌 시 37°C에서 20분간 배양한 다음 1% sulfanilamide 1 m£, 0.02% M(1 -naphthyl)ethylenediamine 1 를 가한 후 실온에서 2哓간 방치한 후 540mn에서 흡광도를 측정하였고 이를 SOD를 표준물질로 사용한 검량선에 대입하여 활성 (unit/mg protein)을 나타내었다.
남은 일부의 liver homogenate는 600>缶에서 15분간 원심분리하여 상등액을얻고 다시 8, 000xg에서 10분간 원심분리하여 얻어진 침전물로 catalase (CAT), aldehyde dehydrogenase (ADLH)의 활성을 분석하였다. 전 단계에서 남은 상등액은 105, 000 xg에서 1 시간동안 초원심분리 하여 최종적으로 얻어진 상등액으로 manganese superoxide dismutase (Mn-SOD), glutathione peroxidase (GSH-px) 및 alcohol dehydrogenase (ADH)의 활성 분석을 수행하였다. 또한 복부대동맥에서 채취된 혈액은 4°C에서 30분간 정치한 후 3, 000rpm에서 15분간 원심분리하여 혈청을 분리하여 glutamate pyruvate transferase [GPT, 또는 alanine aminotransferase (ALT)]의 활성분석에 사용하였다.
8% BHT (butylated hydroxy toluene)를 함유한 hexane 2 血를 혼합한 후, 603<§에서 10분간 원심분리하였으며 이때 얻어진 상등액 2M를 취해 5% TCA 2 戒를 가한 후 원심 분리 하였다. 획 득된 상등액 0.51叫 를 취 해 5% TCA 0.5 mi, 0.8% TBA 1皿 와 함께 끓는 물에서 15분간반응시키고 급냉한 후 반응액의 흡광도를 521.5 nm 에서 측정하였고 TEP (1, 1, 3, 3-tetraethoxypropane)로부터 조제된 표준물질인 MDA에 대해 동일한 과정을 거쳐 얻어진 검량선식에 근거하여 과산화물질의 함량을 산줄하였다.
대상 데이터
실험에 사용된 분석용 시약 및 표준물질은 Sigma Co. (USA) 제품을 사용하였고 DMSO (dimethylsulfoxide)를 포함한 용매는 특급을 사용하였으며 혈청 GPT 활성분석에는 아산제약 (Korea)에서 생산한 GOT & GPT Kit를 사용하였다. 추출물 조제에는 ASE-300 (Dionex Co, USA)을, 효소액 조제에 는 Wheaton overhead stirrer (Wheaton Ser No E02, Wheaton Science, USA)와 초원심분리기 (Beckman LE 80K, USA谨■, 흡광도 측정에는 UV-visible spectrophotometer (Cary 300, Varian, Australia)# 사용하였다.
실험재료인 2종의 박하 (、M. viridis L., M. piperita L.)는 2004년 9월 농촌진흥청 작물과학원 약용자원시험포장에서 지상부를 채취한 것으로 세척, 동결건조, 분쇄하여 추출물 조제에 사용하였다. 박하 분말을 accelerated solvent extraction (ASE apparatus)를 이용하여 50°C에서 5분간 메탄올로 2회 반복 추출하고 이를 여과한 후 감압농축하여 메탄올추출물을 조제한 후 동물활성 검정에 사용하였다.
데이터처리
박하 추출물의 흰쥐에서의 활성분석으로부터 얻어진 결과에대한 유의성은 SAS (statistical analysis systems) program을이용하여 , <0.05의 수준에서 one way ANOVA test 및 Duncan's multiple range test로 검정하였다.
이론/모형
Glutathione peroxidase의 활성 (Uk/mg protein)은 Flohe'의방법 (1989)에 따라 다음과 같이 측정하였다. lxlO3M Sodium azide와 I mM EDTA를 함유하는 0.
Kathryn 등의 방법 (1996)에 따라 liver mitochondria 분획에 일정량의 50 mM phosphate buffer (pH 7.0)를 가하여 훈합한 후 0.1 皿을 취해 buffer 0.91戒로 희석한 후 반응액 1 mM NAD, 0.2 mM 4-methyl pyrazole, 1 mM magnesium chloride가 함유된 50 mM sodium pyrophosphate (pH 8.8) 1 II成, 0.2% rotenone 0.5 및 400 慫 protein에 해 당하는효소액을 가해 혼합하였다. 이 반응액을 30°C의 water bath에서 20분간 incubation한 후 340 nm 에서 1분간 흡광도를 측정하고 5 mM acetaldehyde를 0.
Mn-SOD 활성 (unit/mg proteii가은 Oh et al. (1992)과 Flohe, 의 방법 (1984)에 준해 다음과 같이 수행하였다. 먼저원심분리 한 조직 상등액 500 成 를 75 mM sodium xanthine 50 와 10 mM hydroxylamine hydrochloride 50 /波 그리고증류수 200成 를 혼합한 후 37°C에서 10분간 예비 배양하였 匸}.
간장의 TBARS 함량은 Botsoglou et al. (1994)의 방법에준해 수행하였는데 먼저 liver homogenate 2 m£, 10% aqueous TCA 2 n比, 0.8% BHT (butylated hydroxy toluene)를 함유한 hexane 2 血를 혼합한 후, 603<§에서 10분간 원심분리하였으며 이때 얻어진 상등액 2M를 취해 5% TCA 2 戒를 가한 후 원심 분리 하였다. 획 득된 상등액 0.
성능/효과
1. ADH 활성은 M. viridis ext. 1 g/kg body weight of rat/day 투여군 (이하 M. viridis ext. 1 g 투여군)과 M. piperita ext. 0.2 g/kg body wei않it of rat/day 투여군 (이하 M. piperita ext. 0.2 g 투여군)이 음성대 조군에 비해 각각 147% 및 144% 증가하여 양^대조물질인 Silymarin 투여군 (95%)보다 매우 효과적으로 알콜의 빠른 분해에 기여하는 것으로 확인되었다.
2. ALDH 활성은 M. viridis ext. 1 g 투여군과 M. piperita ext. 0.2 g 투여군이 음성대조군에 비해 각각 154%, 158%의활성증가를 나타냈으며 이는 Silymarin 투여군 (153%)보다 높은 활성으로 2 종의 박하가 모두 효과적으로 알콜을 분해할것으로 생각되었다.
piperita 투여군은 음성대조군이 나타낸 활성에 대해 69%伍72%의 활성을나타내 우수한 GPT 활성 회복력을 가졌으며 이는 Silymarin (93%) 보다도 우수하였다. 2종의 박하 추출물 투여군들 사이에는 혈청 GPT 활성에 대한 유의적인 차이가 나타나지 않았다.
4. Mn-SOD 활성은 M. viridis ext. 0.2 g 및 1 g 투여군은음성대조군에 비해 각각 69% 및 78%를, M. piperita ext. 0.2 g 및 1g 투여군은 각각 94% 및 86%를 나타내어 M. viridis ext. 투여군이 M.
5. GSH-px의 활성은 음성대조군에 비해 M. viridis ext. 0.2 g 및 1 g 투여군이 각각 81% 및 88%를, M. piperia ext. 0.2 g 및 1g 투여군이 88% 및 67%를 나타내 알콜에 의해유도된 GSH-px의 활성증가를 2종의 박하 모두 효과적으로 회복시켜주었다.
7. 과산화물질 (TBARS)의 함량은 정상군에 비해 음성대조군에서 약간의 함량 증가가 관찰되었으나 유의적인 수준은 아니었으며 대부분의 박하 추출물 투여군과 Silymarin 투여군에서 과산화지질이 비슷한 수준으로 증가하여 박하는 알콜에 의한 과산화지질생성에 대한 저해효과가 낮은 것으로 확인되었다.
8. 상대간장중량은 각 실험군별로 상대간장중량에서의 차이는 다소 있었으나 유의성은 없었다.
Fig. 1에 나타낸 바와 같이 생체 내에서 알콜을 아세트알데히드로 분해하는 효소인 ADH의 활성은 M viridis ext. 1 g/kg body weight of rat/day 투여군 (이하 M. viridis ext. 1 g 투여군)과 M. piperita ext 0.2 g/kg body weight of rat/ day 투여군 (이하 M. piperita ext. 0.2 g 투여군)에서 유의적으로 높은 활성이 관찰되었다. 이러한 결과는 음성대조군에 비해 M.
, 2004)되므로 알콜 투여로 유발된 산화적 스트레스에 대해 2종의 박하 추출물이 어떠한 영향을 미치는 지를 관찰하였다. Fig. 4에 나타낸 것처럼 음성대조군의 Mn-SOD 활성은 정상군에 비해 117% 증가하였으며 M. viridis ext. 0.2 g 및 1g 투여군은 음성대조군의 활성에 대해 각각 69% 및 78%를, M. piperita ext. 0.2 g 및 1 g 투여군은 각각 94% 및 86%를 나타내어 알콜투여에 의한 Mn-SOD의 활성이 정상수준으로 회복됨을 알 수 있었다. 한편 M.
, 2005). 그러므로, 만성적인 알콜 투여에서는 ALDH의 활성 감소가 예상되는 데 본 실험결과, Fig. 2에나타낸 바와 같이 알콜을 무투여한 정상군에 비해 알콜을 투여하면서 추출물을 무투여한 음성대조군은 그 활성이 56%인것을 볼 수 있다. 이와는 반대로 M.
만성적인 알콜 섭취가 유발하는 지방생성 증가 및 이를 통한 간장의 중량 증가 (Lee et al., 1993)에 대해 박하 추출물이 미치는 영향을 분석한 결과, 각 실험군별로 상대간장중량에서의 차이는 다소 있었으나 통계적인 유의성은 없는 것으로확인되어 Silymarin 뿐만 아니라 박하는 종에 관계없이 알콜섭취로 인해 증가하는 지방생성을 막는 데에는 효과적이지 않은 것으로 사료되었다.
먼저 과산화물질의 함량에 대한 분석결과를 살펴보면 정상군에 비해 음성대조군에서 약간의 함량 증가가 관찰되었으나유의적인 수준은 아니었으며 대부분의 박하 추출물 투여군과 Silymarin 투여군에서 과산화지질이 비슷한 수준으로 증가하였고 M. piperita ext. 1 g 투여군만이 정상군 및 음성대조군과유의적으로 동일한 수준을 유지하였다. 이러한 결과는 M.
5). 실험결과 알콜을 투여한 모든 실험군들이정상군에 비해 GSH-px의 활성이 감소되었는 데, 음성대조군에 비해서는 M. viridis ext. 0.2g 및 1g 투여군이 각각 81% 및 88%를, M. piperia ext. 0.2 g 및 1g 투여군이 88% 및 67%를 나타내 Silymarin 투여군의 35%보다는 높은수치이기는 하지만 Mn-SOD와 마찬가지로 알콜에 의해 유도된 GSH-px의 활성증가 (Harkany et al., 1997)를 2종의 박하 모두 효과적으로 회복시켜주는 것으로 판단되었다.
알콜투여 흰쥐의 혈청 glutamate pyruvate transferase (GPT)에 대한 박하 추출물의 영향을 살펴본 결과 (Fig. 6), 추출물을 투여하지 않고 알콜만을 투여한 음성대조군의 경우 정상군에 비해 GPT의 활성이 유의적으로 증가한 것을 알 수 있었으며, 음성대조군에 비해 박하 추출물과 알콜 그리고 Silymarin과 알콜을 투여한 실험군에서는 그 활성이 감소하는경향을 나타내었다. 특히 M.
혈청 GPT의 활성은. 음성대조군에서 정상군에 비해 유의적으로 증가 (126%)하였으나 M. viridis와 M. piperita 투여군은 음성대조군이 나타낸 활성에 대해 69%伍72%의 활성을나타내 우수한 GPT 활성 회복력을 가졌으며 이는 Silymarin (93%) 보다도 우수하였다. 2종의 박하 추출물 투여군들 사이에는 혈청 GPT 활성에 대한 유의적인 차이가 나타나지 않았다.
piperita 투여군은음성대조군이 나타낸 활성에 비해 69%〜72%의 활성을 나타냄으로서 Silymarin 투여군 (93%)에 보다 효과적으로 회복되었음을 알 수 있었다. 이러한 결과는 2종의 박하 추출물이 모두알콜에 의해 유도된 간독성에 대해 Silymarin보다 효과적인 어를 하는 것을 시사하는 결과이다. 한편, 2종의 박하 추출물투여군들 사이에는 혈청 GPT 활성에 대한 유의적인 차이가나타나지 않음을 확인할 수 있었다.
2 g 투여군)에서 유의적으로 높은 활성이 관찰되었다. 이러한 결과는 음성대조군에 비해 M. viridis ext. 1 g 투여군은 147%, M. piperita ext. 0.2 g 투여군은 144%가 증가하였고, 이는 양성대조물질인 Silymarin 투여군의 95%보다 높은 수치로서 양성물질인 Silymarin보다도 매우 효과적으로 알콜의 빠른 분해에 기여하는 것을 시사하는 것이며, 두 종의 박하는 모두 ADH의 활성을 증가시키는 효과가 있는 것으로 확인되었다.
이러한 결과를 종합할 때, 박하는 ADH, ALDH 및 CAT의활성을 증가시킴으로서 알콜분해를 촉진하는 효과가 매우 우수하며, 과산화물질의 생성을 저해하는 데에는 기여하는 바가적으나 알콜에 의해 유도된 Mn-SOD 및 GSH-px 등 항산화효소의 활성 증가를 정상수준으로 회복시킴으로서 항산화 작용을 발휘할 것으로 사료되며 GPT의 활성회복에 의한 간손상저해 작용도 보유한 것으로 사료된다.
2에나타낸 바와 같이 알콜을 무투여한 정상군에 비해 알콜을 투여하면서 추출물을 무투여한 음성대조군은 그 활성이 56%인것을 볼 수 있다. 이와는 반대로 M. viridis ext. 1 g 투여군과 M. piperita ext. 0.2 g 투여군은 음성대조군에 비해 각각 154%, 158%의 활성을 나타냈으며 이는 Silymarin 투여군 (153%)보다 높은 수치이므로 박하는 ALDH의 활성도 효과적으로 증가시킴을 확인할 수 있었다. 한편, 2종의 박하 중에서 M.
viridis ext. 투여군은 Silymarin 투여군 (84%)보다도 효과적으로 Mn- SOD의 활성을 회복시키는 것을 확인할 수 있었다. 이러한 결과를 살펴볼 때, 2종의 박하 중에서 M.
viridis ext. 투여군은 정상군이나 음성대조군 및 Silymarin 투여군보다도 활성이 높았다. 한편, 음성대조군은 정상군에 비해 CAT의 활성이 낮게 나타났으며 이 값은 Silymarin 투여군보다도 높은 것이었는 데 이러한 실험결과는알콜을 투여한 흰쥐의 간장에서 CAT는 항산화효소로서의 기능과 알콜분해효소로서의 복합적인 기능에 기인한 것으로 사료된다.
6), 추출물을 투여하지 않고 알콜만을 투여한 음성대조군의 경우 정상군에 비해 GPT의 활성이 유의적으로 증가한 것을 알 수 있었으며, 음성대조군에 비해 박하 추출물과 알콜 그리고 Silymarin과 알콜을 투여한 실험군에서는 그 활성이 감소하는경향을 나타내었다. 특히 M. viridis와 M. piperita 투여군은음성대조군이 나타낸 활성에 비해 69%〜72%의 활성을 나타냄으로서 Silymarin 투여군 (93%)에 보다 효과적으로 회복되었음을 알 수 있었다. 이러한 결과는 2종의 박하 추출물이 모두알콜에 의해 유도된 간독성에 대해 Silymarin보다 효과적인 어를 하는 것을 시사하는 결과이다.
의 보고 (2004)와 일치하는 것으로 박하는 알콜에 의한 과산화물질 생성을 감소시키는 데에는 효과적이지 않은 것으로 사료되었다. 한편, 2종의 박하 중에는 M. piperitd가 M. viridis 보다 근소하게나마 과산화물질 '생성 저해 작용을 나타낸 것으로 사료되었다.
이러한 결과는 2종의 박하 추출물이 모두알콜에 의해 유도된 간독성에 대해 Silymarin보다 효과적인 어를 하는 것을 시사하는 결과이다. 한편, 2종의 박하 추출물투여군들 사이에는 혈청 GPT 활성에 대한 유의적인 차이가나타나지 않음을 확인할 수 있었다.
투여군은 정상군이나 음성대조군 및 Silymarin 투여군보다도 활성이 높았다. 한편, 음성대조군은 정상군에 비해 CAT의 활성이 낮게 나타났으며 이 값은 Silymarin 투여군보다도 높은 것이었는 데 이러한 실험결과는알콜을 투여한 흰쥐의 간장에서 CAT는 항산화효소로서의 기능과 알콜분해효소로서의 복합적인 기능에 기인한 것으로 사료된다. 2종 박하 중 M.
후속연구
piperita ext.는 투여량에 비례적으로 활성이 감소하였으므로 ADH 활성과 마찬가지로 ALDH 활성에 대해서도 보다 다양한 투여량에 대한 추가적인 검정이 필요할 것으로 사료되었다.
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