본 연구에서는 해조류 중 홍조류에 속하는 참가사리를 추출, 분획하여 항발암효과를 측정하였다. 참가사리 분획물을 4종의 암세포주 HT29, HepG2, MCF-7 및 H16-F10에 처리하였을 때 암세포 증식 억제실험을 한 결과 대장암세포주인 HT29의 경우 GTMM층과 GTMB층에서 농도의존적인 효과가 나타났으며 첨가농도 $150{\mu}g/mL$에서 각각 93.64%와 74.14%의 수치를 보였다. 간암세포주인 HepG2의 경우 $150{\mu}g/mL$ 첨가시 GTMM층과 GTMB층이 각각 95.97%, 81.78%의 높은 증식 억제효과를 보였으며 유방암세포주인 MCF-7에서는 GTMM층이 $120 {\mu}g/mL$과 $150{\mu}g/mL$ 첨가농도에서 각각 88.50%와 91.82%의 높은 암세포증식 억제효과를 나타냈다. 피부암세포주인 B16-F10은 다른 세포주에 비해 미약하나 역시 GTMM층이 최종첨가농도에서 86.20%의 억제를 나타내었다. 이와 같이 4종의 암세포주의 증식억제는 전반적으로 GTMM층과 GTMB층에서 높은 효과가 나타남을 알 수 있다. 한편 Western blot analysis를 통해 간암세포 주인 HepG2에서 GTMM층의 처리에 따른 pro-apoptosis Bcl-2 family의 발현증가를 볼 수 있었으며, PARP 분절과 연관된 caspase-3, 7의 활성화를 확인할 수 있었다. 이처럼 GTMM층은 apoptosis의 작용에 의한 세포사멸을 유도하며, 이러한 apoptosis의 기전으로는 최소한 caspase의 활성화에 따른 절단 PARP 단백질의 증가, Bad, Bax 등의 apoptosis 관여인자가 작용하고 있음을 확인할 수 있었다. HepG2를 이용한 quinone reductase 유도활성여부를 측정한 결과 GTMM층이 $45{\mu}g/mL$ 및 $60{\mu}g/mL$의 시료첨가농도에서 대조군에 비해 각각 2.34, 2.86배의 QR 유도활성을 나타내었으며, GTMB층의 경우 최종첨가농도인 $60{\mu}g/mL$에서 2.04배의 효소활성을 나타내었다.
본 연구에서는 해조류 중 홍조류에 속하는 참가사리를 추출, 분획하여 항발암효과를 측정하였다. 참가사리 분획물을 4종의 암세포주 HT29, HepG2, MCF-7 및 H16-F10에 처리하였을 때 암세포 증식 억제실험을 한 결과 대장암세포주인 HT29의 경우 GTMM층과 GTMB층에서 농도의존적인 효과가 나타났으며 첨가농도 $150{\mu}g/mL$에서 각각 93.64%와 74.14%의 수치를 보였다. 간암세포주인 HepG2의 경우 $150{\mu}g/mL$ 첨가시 GTMM층과 GTMB층이 각각 95.97%, 81.78%의 높은 증식 억제효과를 보였으며 유방암세포주인 MCF-7에서는 GTMM층이 $120 {\mu}g/mL$과 $150{\mu}g/mL$ 첨가농도에서 각각 88.50%와 91.82%의 높은 암세포증식 억제효과를 나타냈다. 피부암세포주인 B16-F10은 다른 세포주에 비해 미약하나 역시 GTMM층이 최종첨가농도에서 86.20%의 억제를 나타내었다. 이와 같이 4종의 암세포주의 증식억제는 전반적으로 GTMM층과 GTMB층에서 높은 효과가 나타남을 알 수 있다. 한편 Western blot analysis를 통해 간암세포 주인 HepG2에서 GTMM층의 처리에 따른 pro-apoptosis Bcl-2 family의 발현증가를 볼 수 있었으며, PARP 분절과 연관된 caspase-3, 7의 활성화를 확인할 수 있었다. 이처럼 GTMM층은 apoptosis의 작용에 의한 세포사멸을 유도하며, 이러한 apoptosis의 기전으로는 최소한 caspase의 활성화에 따른 절단 PARP 단백질의 증가, Bad, Bax 등의 apoptosis 관여인자가 작용하고 있음을 확인할 수 있었다. HepG2를 이용한 quinone reductase 유도활성여부를 측정한 결과 GTMM층이 $45{\mu}g/mL$ 및 $60{\mu}g/mL$의 시료첨가농도에서 대조군에 비해 각각 2.34, 2.86배의 QR 유도활성을 나타내었으며, GTMB층의 경우 최종첨가농도인 $60{\mu}g/mL$에서 2.04배의 효소활성을 나타내었다.
In this study, we investigated anticarcinogenic effects of extracts from Gloiopeltis tenax (GT). GT was extracted with methanol (GTM), which was then further fractionated into four fractions by using solvent fractionation method, affording methanol (GTMM), hexane (GTMH), butanol (GTMB) and aqueous (...
In this study, we investigated anticarcinogenic effects of extracts from Gloiopeltis tenax (GT). GT was extracted with methanol (GTM), which was then further fractionated into four fractions by using solvent fractionation method, affording methanol (GTMM), hexane (GTMH), butanol (GTMB) and aqueous (GTMA) soluble fractions. We determined the cytotoxic effects of these fractions on cancer cells by MTT assay. Among various fractions of GT, the GTMM showed the strongest cytotoxic effect at concentration of $150{\mu}g/mL$, displaying 95.97% on HepG2 cell lines and 93.64% on HT-29 cell lines, respectively. And, the anti-proliferative effect of GT was accompanied by a marked in increase of levels of Bad, Bax, Bok and Bak protein and activation of caspase-3, caspase-7 and PARP protein. Also, we observed quinone reductase (QR) induced effects in all fraction layers of GT on HepG2 cells. The QR induced effects of the GTMM and GTMB on HepG2 cells at concentration of $60{\mu}g/mL$ showing inductive indexes of 2.86 and 2.04 compared to the control value of 1.0.
In this study, we investigated anticarcinogenic effects of extracts from Gloiopeltis tenax (GT). GT was extracted with methanol (GTM), which was then further fractionated into four fractions by using solvent fractionation method, affording methanol (GTMM), hexane (GTMH), butanol (GTMB) and aqueous (GTMA) soluble fractions. We determined the cytotoxic effects of these fractions on cancer cells by MTT assay. Among various fractions of GT, the GTMM showed the strongest cytotoxic effect at concentration of $150{\mu}g/mL$, displaying 95.97% on HepG2 cell lines and 93.64% on HT-29 cell lines, respectively. And, the anti-proliferative effect of GT was accompanied by a marked in increase of levels of Bad, Bax, Bok and Bak protein and activation of caspase-3, caspase-7 and PARP protein. Also, we observed quinone reductase (QR) induced effects in all fraction layers of GT on HepG2 cells. The QR induced effects of the GTMM and GTMB on HepG2 cells at concentration of $60{\mu}g/mL$ showing inductive indexes of 2.86 and 2.04 compared to the control value of 1.0.
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문제 정의
GTMM층의 처리가 apoptosis의 유발에 어떠한 기전을 통해 관련이 있는지를 알아보기 위하여 세포사멸에 관여하는 Bcl-2 family의 발현 여부에 미치는 GTMM층의 영향을 알아보았다. Apoptosis 유발에 대표적인 Bel-2 family 유전자 중 pro-apoptotic 분자인 Bad, Bax 등은 mitochondria로부터 cytochrome C와 같은 apoptosis 유발에 관여 하는 인자를 조절하며 이들은 또한 종양억제 유전자 p53, caspase 및 DNA 단편화와 연관된 endonuclease 등의 활성을 조절하게 되고 이 dimer들의 발현수준 변화는 apoptosis 유발에 관여한다고 알려져 있다(20-22).
특히 해 양식 물 중 홍조류인 첨 가 시료의 양은 적 채, 쑥부쟁이 등 다른 육상생물(13, 14)에 첨가한 시료 양의 약 1/3에 해당되는 낮은 농도에서 높은 암세포 성장 억 제효과를 보였으며 또한 최종첨 가농도 500 Ug/mL인 모자반, 미 역귀 등 다른 해조류(15, 16)의 실험결과와 비교해보았을 때도 그 효과는 월등히 높았다. 그리고 암세포 성장저지를 일으키는 참가사리의 생리활성 물질은 약한 극성물질이 녹아있는 GTMM층과 일부 극성물질이 녹아있는 GTMB층에 주로 존재한다고 추측해 볼 수 있었으며 이 층에서의 구조적 분석과 암세포 성장을 저지시키는 물질의 존재가 주목되는 바이다.
또한 육상생 물은 이 미많은 연구가 진행되었으나 해양생물은 아직 제한된 연구로인하여 미지의 천연물질의 개발에 대한 기대가 높이 평가되고 있다. 따라서 본 연구는 식용으로 애용되는 해조류 중홍조류에 속하는 참가사리 분획물의 생리활성을 이용한 암세 포 성 장저 지 및 QR 유도활성 효과를 연구함으로써 식 품이가지는 식의약 생리활성기능을 암 예방 차원에서의 역할을검토하여 그 결과를 보고하고자 한다.
본 실험 에서는 4종의 암세포주에 대한 참가사리 분획물의암세포 증식 억 제효과를 조사하기 위해 MTT assay를 행하였다. 실험 에는 대장암세포주인 HT29, 간암세포주인 HepG2, 유방암세포주인 MCF-7 및 피부암세포주인 B16-F10이 사용되었으며, 실험결과는 Fig.
제안 방법
많이 사용되어 왔다. QR유도물질 탐색은 인체 암세포배양법으로 행해졌으며, 참가사리 분획물의 암 예방효소 유도 여부를 조사하기 위하여 암세포 증식억제효과에 사용된 4종의 암세포주 중 유일하게 quinone reductase를 가지고 있는 간암세포 HepG2를 사용하여 QR유도활성 효과를 측정하였으며, 그 결과는 Fig. 7에 나타내었다. 즉, HepG2 세포주에 각각의 시료 분획물을 첨가했을 때 GTMM층에서 높은 QR유도활성 이 나타났고 그 다음으로는 GTMB층에서 유의적으로 QR유도활성이 나타났으며 , 그 외 의 분획 층은 큰 영향을 미치지 않았다.
변형 하여 측정하였다. T-75 flask에 HepG2 세포가 80% 이 상 증식 하게 되면 24 well plate의 각 well에 1 x 104 cells/ mL가 되도록 세포를 분주하여 37℃, 5% CO2 incubator에서 24시 간동안 배 양한 후 참가사리 분획 물을 HepG2의 세포생존율이 50%되는 양을 final 농도로 잡아 각각 DMS0에녹여 15, 30, 45, 60 Ug/mL의 농도로 첨가하고 다시 24시간배양하였다. 배양액을 제거한 후 각 well에 250 J1L의 lysis bufferdO mM Tris-HCl pH 8.
각각의 암세포주를 세포배양용 petridish에 24시간 동안 안정 화시 킨 다음 참가사리 분획 물을 30, 60, 90, 120, 150 Ug/ mL씩 농도별로 처리하여 48시간동안 배양한 후 현미경을 이 응하여 200배의 배율로 각 농도에 따른 암세포의 형 태변화를 관찰한 다음 Olympus DP70을 이용하여 촬영하였다.
준비 된 membrane에 1차 antibody를 처리 하여 상온에서 1시간 이상 또는 4℃에서 overnight 시킨 다음 PBS-T 로 세척(10분간 3회)하고 처리된 1차 antibody에 맞는 2차 antibody(PBS-T로 1:1500 희석)를 사용하여 1시간정도 반응시 켰다. 다시 PBS-T로 세척 (10분간 3회 )하고 Enhanced Chemiluminoesence(ECL) 용액 (Amersham Life Science Corp., Arlington Heights, IL, USA)을 적 용시 킨 다음 암실 에서 X-ray film에 감광시켜 특정단백질의 양을 분석하였다.
일정시간동안 배양한 후 각 well에 PBS 완충용액 에 녹인 MTT 용액을 100 虬씩 첨가하여 4시간동안 다시 배양시킨 후, well 바닥에 형성된 formazan이 흩어지지 않게 상등액을 제거하고DMSO 와 ethanol을 1:1로 혼합한 용액 1 mL를 첨가하여 천천히 녹인 후 multi-detection microplate를 이용하여 540 nm에서 흡광도를 측정하였다. 대조군 세포수를 100%로 하였을 때의 상대적인 세포성장 억제율을 구하였다.
T-75 flask에 HepG2 세포가 80% 이 상 증식 하게 되면 24 well plate의 각 well에 1 x 104 cells/ mL가 되도록 세포를 분주하여 37℃, 5% CO2 incubator에서 24시 간동안 배 양한 후 참가사리 분획 물을 HepG2의 세포생존율이 50%되는 양을 final 농도로 잡아 각각 DMS0에녹여 15, 30, 45, 60 Ug/mL의 농도로 첨가하고 다시 24시간배양하였다. 배양액을 제거한 후 각 well에 250 J1L의 lysis bufferdO mM Tris-HCl pH 8.0, 14 mM NaCl, 15 mM MgCla, 0.5% NP-40)를 첨가한 후 37℃, 5% CO2 incubator 에 10분간 두면서 cell을 lysis한 후 reaction mixture 즉, 10 mM Tris-HCKpH 7.4), 0.5 mg/mL BSA, 0.008% tween-20, 40 ]1M FAD, 0.8 mM glucose-6-phosphate, 2 U/mL glu- cose-6~phosphate dehydrogenase, 25 ]1M NADP, 40 μg /mL MTT 및 1 mM menadione을 혼합하여 well에 1 ml/4] 첨가하여 5분동안 반응시킨 후, 반응정지 용액인 0.3 mM dicumarol, 0.5% pyridine, 5 mM potassium phosphate(pH 7.4) 혼합액을 250 J1L씩 첨가하여 효소반응을 정지시키고 multi-detection microplate# 이용하여 610nm에서 흡광도를 측정하여 계산하였다.
본 실험에서 는 Prochaska와 Santamaria의 방법 Q2)을 일부 변형 하여 측정하였다. T-75 flask에 HepG2 세포가 80% 이 상 증식 하게 되면 24 well plate의 각 well에 1 x 104 cells/ mL가 되도록 세포를 분주하여 37℃, 5% CO2 incubator에서 24시 간동안 배 양한 후 참가사리 분획 물을 HepG2의 세포생존율이 50%되는 양을 final 농도로 잡아 각각 DMS0에녹여 15, 30, 45, 60 Ug/mL의 농도로 첨가하고 다시 24시간배양하였다.
후 참가사리의 추출물(GTM)을 얻었다. 이 추출물을 각 용매별로 분획하여 hexane층(GTMH), methanol층 (GTMM), butanol층(GTMB) 및 수층분획 물(GTMA)로 각각-분획하고-각.층을 감압 농축 후 동결 건조하여 분말로만들.
이를 위해 각 세포주를 1X105 cells/well의 농도로 맞추고 24 well에 각각 1 mL씩 첨가하여 24시간 동안 37℃, 5% CO2 incubator에서 배양한 후 용매종류별 분획물을 각각 일정 량의 dimethyl-sulfoxide(DMSO)에 녹여서 30, 60, 90, 120, 150 lig/mL의 농도로 첨가하였다. 일정시간동안 배양한 후 각 well에 PBS 완충용액 에 녹인 MTT 용액을 100 虬씩 첨가하여 4시간동안 다시 배양시킨 후, well 바닥에 형성된 formazan이 흩어지지 않게 상등액을 제거하고DMSO 와 ethanol을 1:1로 혼합한 용액 1 mL를 첨가하여 천천히 녹인 후 multi-detection microplate를 이용하여 540 nm에서 흡광도를 측정하였다.
이를 위해 각 세포주를 1X105 cells/well의 농도로 맞추고 24 well에 각각 1 mL씩 첨가하여 24시간 동안 37℃, 5% CO2 incubator에서 배양한 후 용매종류별 분획물을 각각 일정 량의 dimethyl-sulfoxide(DMSO)에 녹여서 30, 60, 90, 120, 150 lig/mL의 농도로 첨가하였다. 일정시간동안 배양한 후 각 well에 PBS 완충용액 에 녹인 MTT 용액을 100 虬씩 첨가하여 4시간동안 다시 배양시킨 후, well 바닥에 형성된 formazan이 흩어지지 않게 상등액을 제거하고DMSO 와 ethanol을 1:1로 혼합한 용액 1 mL를 첨가하여 천천히 녹인 후 multi-detection microplate를 이용하여 540 nm에서 흡광도를 측정하였다. 대조군 세포수를 100%로 하였을 때의 상대적인 세포성장 억제율을 구하였다.
정상 및 GTMM이 처리된 배지에서 자란 세포들을 PBS 로 씻 어 내고 0.05% trypsin-EDTA를 처리 하여 부유시 킨 다음 원심분리하여 세포를 수집하였다. 이렇게 모아진 세포에 적 당량의 PRO - PREP (protei n extraction solution, iNtRON) 를 첨가하여 반응시 킨 ■후 13, 000 rpm으로 10분간 원심 분리하여 그 상층액을 취하였다.
참가사리의 암세포증식억제에서 가장 높은 효과를 보인 methanol분획층(GTMM)의 처리가 암세포의 형태에 어떠한 영향을 주는지 에 대해 알아보기 위하여 HepG2 세 포주에여러 농도의 GTMM층을 48시간동안 처리한 후 위상차 현미경을 이용한 형태학적 인 관찰을 시도하였다. Fig.
대상 데이터
본 실험에 사용한 암세포주는 대장암세포인 HT-29(hu- man colon adenocarcinoma), 간암세포인 HepG2(human hepatocellular carcinoma), 유방암세포인 MCF-7(human breast adenocarcinoma pleural effusion)고]" 피부암세포인 B16-F10(mouse melanoma)로서 2004년 5월 한국세 포주은행(Korean Cell Line Bank, KCLB)에서 구입하여 배양시킨후 실험에 사용하였다.
세포실험에 사용된 시약 중 NP-40과 menadionee Sigma(St. Louis, USA)사 제품을 구입하였고 Dulbecco's Eagle modified medium(DMEM)고!" fetal bovine serum (FBS), phosphate buffered saline(PBS) 등은 Gibco-BRL (Grand Island, NY, USA)에서 구입하였으며 그 외 연구에 사용된 용매 및 시약은 특급을 사용하였다.
HT-29 세포주는 RPMI1640 medium, HepG2, MCF-7과 B16-F10 세포주는 DMEM medium을 사용하였고 medium 은 10%의 fetal bovine serum(FBS)과 1% 100 units/mL의 penicillin streptomycin이 함유된 것으로 세 포를 T-75 flask 에 이식한 후, 37℃ 5% CO2 incubator 에서 monolay er 로 배양하였다.
본 실험에 사용된 참가사리는 전남 무안군에 위치한 (주) 삼일물산에서 제공된 것으로 (주)삼일물산 사장님 께 감사드립니다.
본 실험에 사용한 참가사리tenax, GT)는 2004년 5월 전남 무안군에 위치한 (주)삼일물산에서 제공받았다. 세포실험에 사용된 시약 중 NP-40과 menadionee Sigma(St.
실험 에는 대장암세포주인 HT29, 간암세포주인 HepG2, 유방암세포주인 MCF-7 및 피부암세포주인 B16-F10이 사용되었으며, 실험결과는 Fig. 1~4에 나타내었다.
층을 감압 농축 후 동결 건조하여 분말로만들.어 '시 료로 사용하였다.
이론/모형
단백질량은 동일한 set의 well plate에 대한 crystal violet 염 색방법으로 정 량하였다. 24 well plate에 crystal violet 용액 을 첨 가하고 37℃, 5% CO2 incubator에서 배 양한 후 증류수로 세 척 하였다.
참가사리 추출 분획 물의 암세포 증식 억제 효과는 MTT (3-[4, 5-dimethyl thiazol-2-yl]-2, 5-diphenyltetrazolium bromide) assay를 사용하여 행하였다.
성능/효과
Caspase는 apoptosis 유도 활성화 신호에 의해 활성화된 cystein- related proteases로서 직접 또는 간접 적 으로 세 포내에 존재하는 PARP 등과 같은 많은 표적 단백질의 분해에 관여하게된다(23). Apoptosis가 유발된 세포에서 높은 발현을 보이는것으로 알려진 caspase-3과 caspase-7의 발현여부를 직접조사한 결과 GTMM층의 처리에 의해 매우 유의적으로 발현되 었음을 알 수 있다. PARP(poly(ADP~ribose)polymerase) 는 정상세포의 DNA repair나 genomic stability의 유지 에중요한 역할을 하며, apoptosis 과정 중 caspase의 활성 화에의해 단백질 분해가 일어나면 PARIe 역할은 상실되어 정상적 인 repair 기능이 상실된다(24).
82%의 높은 암세포 증식억 제효과를 나타내 었다. GTMB층도 농도증가에 따라 암세포 증식 억 제효과가 증가하였으며 150 Ug/mL 첨가 시 67.52%의 억제효과를보였다. Fig.
3에 나타내었으며 HT29 세포주와 유사하게 GTMM층과 GTMB 층에서 높은 증식억제를 보였다. GTMM층은 120 Ug/mL 농도에서 88.50%의 수치를 나타냈으며 최종첨가농도인 150 Ug/mL에서는 91.82%의 높은 암세포 증식억 제효과를 나타내 었다. GTMB층도 농도증가에 따라 암세포 증식 억 제효과가 증가하였으며 150 Ug/mL 첨가 시 67.
분절된 PARP는 핵 내에서 apoptosis# 진중21게 되는데, 활성화된 85KDaPARP의 분절을 Western blot 분석을 통해 확인함으로써 apoptosis 여부를 확인할 수 있다. 이 결과를 통해 GTMM에 의한 암세포주의 사멸은 apoptosis와 관련이 있을 것으로 생각된다.
이상의 결과를 종합하여 볼 때 용매별로 분획 한 참가 사리 분획물이 각 암세포주에 미치는 세포증식 억 제효과는 methanol 분획 층인 GTMM층과 butanol분획층인 GT MB 층에서 그 효과가 높았으며 전반적으로 GTMM층이 GTMB층에 비해 암세포증식 억 제효과가 더 높게 나타났으며 농도 의 존 적 경 향은 거의 유사하였다. 특히 해 양식 물 중 홍조류인 첨 가 시료의 양은 적 채, 쑥부쟁이 등 다른 육상생물(13, 14)에 첨가한 시료 양의 약 1/3에 해당되는 낮은 농도에서 높은 암세포 성장 억 제효과를 보였으며 또한 최종첨 가농도 500 Ug/mL인 모자반, 미 역귀 등 다른 해조류(15, 16)의 실험결과와 비교해보았을 때도 그 효과는 월등히 높았다.
이상의 결과에서 암 예방효과의 척도로 사용되는 QR 유도 활성 효과는 참가사리의 여러 용매 분획 물 중 methanol층과 butanol층에서 높은 활성을 보였으므로 이 분획 층에 quinone reductase의 inducer가 존재함을 추정할 수 있었다.
1은 대장암 세포주인 HT29에 각 층별 시료 분획 물을 30, 60, 90, 120 및 150 Ug/mL씩 농도별로 가하여 48시 간 동안 처리했을 때의 암세포 증식억제효과를 나타낸 그림으로 GTMM층과 GTMB층에서 농도의 존적으로 높은 암세포 증식 억 제효과를 보였다. 즉 GTMM층의 경우 낮은 농도인 30 Ug/mL 첨가에서부터 농도의존적으로 그 억제효과가 증가하여 90, 120 및 150 Ug/mL의 농도에서 각각 70.91, 86.46 및 93.64%의 높은 암세포 증식억제효과를 나타내었고, GTMB층의 경우 최종농도인 150ug/mL에서 74.71%의 효과를 보였다. Fig.
5에 나타난 결과는 HepG2 세 포주에 농도별 시료를 첨가한 후 나타난 현상이다. 즉 시료 처리 농도에 의 존적으로 현저 한 세포밀도의 감소현상과 형태적인 변화가 나타났으며, 시료농도의증가에 따라 세포막의 shrinking 및 blebbing현상을 관찰할수 있었다. 처리농도가 높은 경우 cell elongation-1- 포함하는 dendrite-like structure가 나타나며 암세포들의 부착력상실과 파괴된 세포 잔여물들이 뚜렷이 관찰되었다.
7에 나타내었다. 즉, HepG2 세포주에 각각의 시료 분획물을 첨가했을 때 GTMM층에서 높은 QR유도활성 이 나타났고 그 다음으로는 GTMB층에서 유의적으로 QR유도활성이 나타났으며 , 그 외 의 분획 층은 큰 영향을 미치지 않았다. GTMM층의 경우 대조군을 1.
향은 거의 유사하였다. 특히 해 양식 물 중 홍조류인 첨 가 시료의 양은 적 채, 쑥부쟁이 등 다른 육상생물(13, 14)에 첨가한 시료 양의 약 1/3에 해당되는 낮은 농도에서 높은 암세포 성장 억 제효과를 보였으며 또한 최종첨 가농도 500 Ug/mL인 모자반, 미 역귀 등 다른 해조류(15, 16)의 실험결과와 비교해보았을 때도 그 효과는 월등히 높았다. 그리고 암세포 성장저지를 일으키는 참가사리의 생리활성 물질은 약한 극성물질이 녹아있는 GTMM층과 일부 극성물질이 녹아있는 GTMB층에 주로 존재한다고 추측해 볼 수 있었으며 이 층에서의 구조적 분석과 암세포 성장을 저지시키는 물질의 존재가 주목되는 바이다.
참고문헌 (27)
Wynder EL, Gori GB. 1997. Contribution of environment to cancer medicine. J Natl Cancer Inst 58: 826-832
Reddy L, Odhav B, Bhoola KD. 2003. Natural products for cancer prevention a global perspective. Parmacol Ther 99: 1-13
Ha YL, Michael WP. 1981. Naturally-occuring novel anticarconogenes: Conjugated dienoic derivatices of linoleic acid (CLA). J Korean Soc Food Nutr 20: 401-407
Chihara G, Hamuro J, Maeda Y, Arai Y, Fukuoka F. 1970. Fractionation and purification of the polysaccharides with marked antitumor activity, especially lentinan, from Lentinus edodes (Berk.) Sing. Cancer Res 30: 2776-2781
Alley MC, Scuiero DA, Monks A, Hursey ML, Czerwinski MJ, Fine DL, Boyd MR. 1988. Feasibility of drug screening with panel of human tumor cell line using a microculture tetrazolium assay. Cancer Res 48: 589-601
Carmichael J, Degraff WG, Gazder AF, Minna JD, Mitchell JB. 1987. Evaluation of a tetrazolium based semiautomated colorimetric assay: assessment of chemosensitivity testing. Cancer Res 47: 936-942
Prochaska HJ, Santamaria AB. 1988. Direct measurement of NAD(P)H: Quinone reductase from cells cultured in mic-rotiter wells: A screening assay for anticarcinogenic en-zyme inducers. Anal Biochem 169: 328-336
Jung BM, Lim SS, Park YJ, Bae SJ. 2005. Inhibitory effects on cell survival and quinone reductase induced activity of Aster yomena fractions on human cancer cells. J Korean Soc Food Sci Nutr 34: 8-12
Bae SJ. 2004. Anticarcinogenic effects of Sargassum fulvellum fractions on several human cancer cell lines in vitro. J Korean Soc Food Sci Nutr 33: 480-486
Tounekti O, Pron G, Belehradek J, Mir LM. 1993. An apoptosismimetic drug that induces two types of cell death depending on the number of molecules internalized. Cancer Res 53: 5462-5469
Kaufmann SH, Desnoyers S, Ottaviano Y, Davidson NE, Poirier GG. 1993. Specific proteolytic cleavage of poly (ADP-ribose)polymerse: an early marker of chemotherapy-induced apoptosis. Cancer Res 53: 3976-3985
Steinhusen U, Badock V, Bauer A, Behrens J, Wittman- Liebold B, Dorken B, Bommert K. 2000. Apoptosis-induced cleavage of $\beta$ -catenin by caspase-3 result in proteolytic fragments with reduced transactivation potential. J Biol Chem 275: 16345-16353
Han EK, Arber N, Yamamoto H, Lim JT, Delohery T, Pamukcu R, Piazza GA, Xing WQ, Weinstein IB. 1998. Effects of sulindac sulfide and its matabolites on growth and apoptosis in human mammary epithelial and breast carcinoma cell lines. Breast Cancer Res Treat 48: 195-203
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