차조기(Perilla frutescens var. acuta kudo) 잎의 물과 에탄올 추출물의 항산화 활성 Antioxidant Activities of Extract with Water and Ethanol of Perilla frutescens var. acuta kudo Leaf원문보기
본 연구에서는 차조기의 30, 50, 70, 95% 에탄올 및 물추출물과 분획물의 전자 공여능, 지질산화 억제능, SOD 유사활성 및 xanthin oxidase 저해 활성을 측정하였다. 추출물의 전자 공여능은 $18{\sim}30%$ 정도로 낮았으나, 분획물에서는 95%과 70% 에탄올 추출물의 chloroform 분획이 50% 수준의 활성을 보였고, ethyl acetate 분획에서는 모든 추출용매에서 75% 이상의 활성을 보였다. 특히, 70% 에탄올 추출물의 ethyl acetate 분획물이 93.4%로 가장 높은 활성을 보였으며 $RC_{50}$에 요구되는 농도는 200.5 ppm이었다. 저장 온도 $40^{\circ}C$에서 linoleic acid의 자동산화를 가장 효과적으로 억제하는 것으로 나타난 추출물은 70% 에탄올 이었다. 분획물의 경우, 95% 에탄추출물은 hexane과 ethyl acetate 가용성분이 그 외 에탄올 추출과 물추출은 chloroform과 ethyl acetate 가용성분이 가장 높은 억제효과를 나타내었다. SOD 유사활성은 에탄올 추출물이 $28{\sim}32%$, 물추출물이 30.3%이었으며, 70% 에탄올 추출물이 32.4%로 가장 높았다. 분획물에서는 70% 에탄올 추출물의 ethyl acetate 가용분이 38.8%로 활성이 가장 높았으며 $IC_{50}$에 요구되는 농도는 1549.0ppm이었다. Xanthine oxidase 저해 활성은 에탄올추출물이 $36{\sim}41.2%$이었으며, 물추출물이 46.9%로 추출물중 가장 높았다. 분획물에서는 물추출의 ethyl acetate 가용분이 1,000 ppm 농도에서 52%의 활성을 보여 가장 높았다.
본 연구에서는 차조기의 30, 50, 70, 95% 에탄올 및 물추출물과 분획물의 전자 공여능, 지질산화 억제능, SOD 유사활성 및 xanthin oxidase 저해 활성을 측정하였다. 추출물의 전자 공여능은 $18{\sim}30%$ 정도로 낮았으나, 분획물에서는 95%과 70% 에탄올 추출물의 chloroform 분획이 50% 수준의 활성을 보였고, ethyl acetate 분획에서는 모든 추출용매에서 75% 이상의 활성을 보였다. 특히, 70% 에탄올 추출물의 ethyl acetate 분획물이 93.4%로 가장 높은 활성을 보였으며 $RC_{50}$에 요구되는 농도는 200.5 ppm이었다. 저장 온도 $40^{\circ}C$에서 linoleic acid의 자동산화를 가장 효과적으로 억제하는 것으로 나타난 추출물은 70% 에탄올 이었다. 분획물의 경우, 95% 에탄추출물은 hexane과 ethyl acetate 가용성분이 그 외 에탄올 추출과 물추출은 chloroform과 ethyl acetate 가용성분이 가장 높은 억제효과를 나타내었다. SOD 유사활성은 에탄올 추출물이 $28{\sim}32%$, 물추출물이 30.3%이었으며, 70% 에탄올 추출물이 32.4%로 가장 높았다. 분획물에서는 70% 에탄올 추출물의 ethyl acetate 가용분이 38.8%로 활성이 가장 높았으며 $IC_{50}$에 요구되는 농도는 1549.0ppm이었다. Xanthine oxidase 저해 활성은 에탄올추출물이 $36{\sim}41.2%$이었으며, 물추출물이 46.9%로 추출물중 가장 높았다. 분획물에서는 물추출의 ethyl acetate 가용분이 1,000 ppm 농도에서 52%의 활성을 보여 가장 높았다.
This study was conducted to examine antioxidant activities of Perilla frutescens var. acuta leaf. For the this purpose, DPPH radical scavenging activity, lipid oxidation inhibition, SOD-like activity, and xanthine oxidase inhibitor activity of water extract, ethanol extracts (30, 50, 70, and 95%) an...
This study was conducted to examine antioxidant activities of Perilla frutescens var. acuta leaf. For the this purpose, DPPH radical scavenging activity, lipid oxidation inhibition, SOD-like activity, and xanthine oxidase inhibitor activity of water extract, ethanol extracts (30, 50, 70, and 95%) and the fractions obtained from these extracts were determined. The electron donating abilities of the chloroform fraction obtained from the 70% and 95% ethanol extracts were 50%, and that of the ethyl acetate fraction for all of the extracts was above 75%. In particular, the electron donating ability of the ethyl acetate fraction of the 70% ethanol extract showed the greatest activity with 200.5 ppm of $RC_{50}$ value. The 70% ethanol extract was most effective to inhibit the automatic oxidation of linoleic acid at $40^{\circ}C$ storage. The highest inhibition effects appeared in the chloroform and ethyl acetate fractions of the water extract, and the 30, 50, and 70% ethanol extracts, and the highest lipid oxidation inhibiting effect of the 95% ethanol extract occurred in the hexane and acetate fractions. The SOD-like activity of the water extract was 30.3%, and the activities of the various concentration of ethanol extracts were 28-32% and the activity of the 70% ethanol extract was the highest. The SOD-like activity of the ethyl acetate fraction of the 70% ethanol extract was highest with 1,549.0 ppm of $RC_{50}$ value. Xanthine oxidase inhibition activity was greatest in the water extract and the activities of the ethanol extracts were 36-41.2%. The xanthine oxidase inhibition activity of the ethyl acetate fraction of the water extract was highest. In summary, we found that electron donating ability, lipid oxidation inhibition, and SOD-like activity of Perilla frutescens var. acuta leaf were greatest in the ethyl acetate fraction of the 70% ethanol extract, and xanthine oxidase inhibition activity was highest in the ethyl acetate fraction of the water extract.
This study was conducted to examine antioxidant activities of Perilla frutescens var. acuta leaf. For the this purpose, DPPH radical scavenging activity, lipid oxidation inhibition, SOD-like activity, and xanthine oxidase inhibitor activity of water extract, ethanol extracts (30, 50, 70, and 95%) and the fractions obtained from these extracts were determined. The electron donating abilities of the chloroform fraction obtained from the 70% and 95% ethanol extracts were 50%, and that of the ethyl acetate fraction for all of the extracts was above 75%. In particular, the electron donating ability of the ethyl acetate fraction of the 70% ethanol extract showed the greatest activity with 200.5 ppm of $RC_{50}$ value. The 70% ethanol extract was most effective to inhibit the automatic oxidation of linoleic acid at $40^{\circ}C$ storage. The highest inhibition effects appeared in the chloroform and ethyl acetate fractions of the water extract, and the 30, 50, and 70% ethanol extracts, and the highest lipid oxidation inhibiting effect of the 95% ethanol extract occurred in the hexane and acetate fractions. The SOD-like activity of the water extract was 30.3%, and the activities of the various concentration of ethanol extracts were 28-32% and the activity of the 70% ethanol extract was the highest. The SOD-like activity of the ethyl acetate fraction of the 70% ethanol extract was highest with 1,549.0 ppm of $RC_{50}$ value. Xanthine oxidase inhibition activity was greatest in the water extract and the activities of the ethanol extracts were 36-41.2%. The xanthine oxidase inhibition activity of the ethyl acetate fraction of the water extract was highest. In summary, we found that electron donating ability, lipid oxidation inhibition, and SOD-like activity of Perilla frutescens var. acuta leaf were greatest in the ethyl acetate fraction of the 70% ethanol extract, and xanthine oxidase inhibition activity was highest in the ethyl acetate fraction of the water extract.
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제안 방법
하였다. 0.1 M phosphate buffer(pH 7.0) 9.6 m/에기질용액 1* 0n 을 넣고 추출 시료액 0.4 ml를 넣어 40℃에서 7 일 동안 지질 산화를 관찰하였다. 지질의 산화 억제 효과는 Mitsuda 등37)의 방법에 따라 실험하였다.
건조 차조기 분말을 물과 30, 50, 70 및 95% 에탄올로 추출하였다. 즉, 물 추출은차조기 분말 100 g 에 대하여 증류수를 7~8배 (v/w)로 가하여 hot plate 상에서 5~6 시간 교반하면서 가열 추출하였고, 에탄올 추출은 각 농도의 에탄올 용매를 시료에 대해 7~8배 (v/w)로 가하여 실온에서 48시간 동안 교반하면서 추출하였다.
이러한 차조기의 기능성 성분의 분리에 관한 연구가 진행되고 있으나, 목적으로 하는 추출에 적절한 용매의 선별과 기능성 확인 및 활성 측정 등에 관한 연구는 미진하다. 본 연구에서는 차조기 추출의 용매를 달리 하여 용매별 추출물의 항산화 활성을 검증하고자 물 추출물과 30, 50, 70 및 95% 에탄올 추출물 그리고 이들 각각의 추출물의 단계별 분획성분들의 전자 공여능, 지질 산화 억제능, SOD 유사 활성 및 xanthine oxidase 저해 활성을 측정하였다.
본 연구에서는 차조기의 30, 50, 70, 95% 에탄올 및 물추출물과 분획물의 전자 공여능, 지질산화 억제능, SOD 유사활성및 xanthin oxidase 저해 활성을 측정하였다. 추출물의 전자 공여능은 18~30% 정도로 낮았으나, 분획물에서는 95%과 70% 에탄올 추출물의 chloroform 분획이 50% 수준의 활성을 보였고, ethyl acetate 분획에서는 모든 추출용매에서 75% 이상의활성을 보였다.
2로 조정하였다. 이 용액 0.9mZ에 24mM pyrogall이을 포함한 10mM HC1 을 0.1m/ 혼합한 후 25℃를 유지시키면서 420nm에서 2분간의 흡광도 변화를 측정하였다18). 이때 TCB 0.
1m/ 혼합한 후 25℃를 유지시키면서 420nm에서 2분간의 흡광도 변화를 측정하였다18). 이때 TCB 0.9m/을 취하여 동일한 방법으로 측정한 흡광도 값의 증가를 대조구로 하였으며, EC50은 phyrogallol의 자동산화를 50% 억제시키는 시료의 농도로 나타내었다. 활성도(%)는 (대조구의 흡광도 - 시료 첨가구의 흡광도 /대조구의 흡광도 변화)X 100으로 산출하였다.
95% 에탄올로 추출하였다. 즉, 물 추출은차조기 분말 100 g 에 대하여 증류수를 7~8배 (v/w)로 가하여 hot plate 상에서 5~6 시간 교반하면서 가열 추출하였고, 에탄올 추출은 각 농도의 에탄올 용매를 시료에 대해 7~8배 (v/w)로 가하여 실온에서 48시간 동안 교반하면서 추출하였다. 추출액은 거즈로 여과하고 건더기는 다시 동일한 방법으로 2회 반복 추출한 다음 이를 모두 합하여 다시 Whatman No.
차조기의 물추출물과 30, 50, 70 및 95% 에탄올 추출물의 전자 공여능을 측정하고, 이들 각각의 추출물을 hexane, chloroform, ethyl acetate 및 butanol의 순으로 분획하여 얻어진 분획물의 전자 공여능을 측정한 결과를 Fig. 1에 나타내었다. DPPH free radical 소거법은 라디칼이 감소하는 정도를 DPPH의 짙은 자색의 탈색으로 나타난다.
즉, 물 추출은차조기 분말 100 g 에 대하여 증류수를 7~8배 (v/w)로 가하여 hot plate 상에서 5~6 시간 교반하면서 가열 추출하였고, 에탄올 추출은 각 농도의 에탄올 용매를 시료에 대해 7~8배 (v/w)로 가하여 실온에서 48시간 동안 교반하면서 추출하였다. 추출액은 거즈로 여과하고 건더기는 다시 동일한 방법으로 2회 반복 추출한 다음 이를 모두 합하여 다시 Whatman No. 2 여과지로 감압 여과하고 회전감압농축기 (EYELA N-1000, Japan)로 감압농축 하였다. 농축된추출물은 증류수에 현탁시킨 다음 hexane, chloroform, ethyl acetate 및 butanol순으로 용매 분획하고 그 잔사를 물분획물이라 하였다.
대상 데이터
차조기 잎은 2005년 5월에 경북 칠곡에서 수확한 것을흐르는 물로 세척하고 음건하여 보관하면서 필요시마다 분쇄하여 분말을 사용하였다.
4mM DPPH용액 2 ml를 넣고 교반 한 후 30분간 실온의 암소에서 방치한 다음 spectrophotometer를 이용하여 517nm에서 흡광도를 측정하였다. 전자 공여능(%)은 (1-시료의 흡광도/대조구의 흡광도)X 100 식에 의하여 산출하였다. 이때 시료를 첨가하지 않은 대조구의 흡광도를 50% 감소시키는데 필요한 시료의 농도를 RC50 으로 하여 나타내었다.
4 ml를 넣어 40℃에서 7 일 동안 지질 산화를 관찰하였다. 지질의 산화 억제 효과는 Mitsuda 등37)의 방법에 따라 실험하였다. 즉, 반응액 2mZ에 35% trichloroacetic acid(TCA) 1 m/와 0.
성능/효과
3%의 저해 효과를 보였으나 이후 저해율은 낮아졌다. 30% 에탄올 추출물은 저장 5일까지 38.9%의 저해를 나타내었으며, 이후 저해율은 감소하여 7일에 22.7%로 나타났다. 분획물은 chloroform, ethyl acetate 및 butanol 분획물에서 7일 동안 무첨가보다 32.
2%의 저해효과를 보였으며 그 중 ethyl acetate 분획이 저장 기간 내 저해율이 가장 높았다. 50% 에탄올 추출물은 4일에 57.1%의 저해효과를 보였으며, 5-7일까지 41.7 ~51.4%의 억제 효과를 유지하여 지질산화를 효과적으로 지연하는 것으로 나타났다. 50% 에탄올 추출의 분획물에서는 CF 과 EF 및 BF에서 4일째에 TBA 값이 각각 0.
4%의 억제 효과를 유지하여 지질산화를 효과적으로 지연하는 것으로 나타났다. 50% 에탄올 추출의 분획물에서는 CF 과 EF 및 BF에서 4일째에 TBA 값이 각각 0.102, 0.074 및 0.084로 무첨가의 0.214보다 52.3-65.4% 낮았으며 CF과 EF 분획은 저장 7일까지 50% 이상의 산화 억제 효과를 보였다. HF 는 5일에 37.
9%로 극히 낮아졌다. 70% 에탄올 추출물은 저장 4일에 TBA값이 0.072로 급속한 산화가 진행되어 0.213의 값을 보인 무첨가구와 비교하여 66.2% 낮은 값을 나타내었으며, 저장 5일과 7일까지도 지속적으로 억제되어 66.1%와 50.1%의 지연효과를 나타내었다. 70% 에탄올 추출의 분획물에서는 CF와 EF에서 상당히 높은 지질 억제효과가 나타났는데 7일째 까지도 50%의억제 효과를 나타내었다.
1%의 지연효과를 나타내었다. 70% 에탄올 추출의 분획물에서는 CF와 EF에서 상당히 높은 지질 억제효과가 나타났는데 7일째 까지도 50%의억제 효과를 나타내었다. Butanol 분획 (BF)에서는 4일에 0.
반면 HF과 WF에서는 억제 효과가 낮았다. 95% 에탄올 추출에서는 저장 4일 까지 TBA값이 0.103으로 51.87% 억제 되었으며 이후 TBA값이급격히 증가하여 6일 이후에는 무첨가구와 별 차이가 없었다. 95% 에탄올 추출의 분획물에서는 모든 분획에서 5일까지 무첨가보다 낮은 TBA값을 나타내어 지질산화를 억제하는 것으로 나타났다.
87% 억제 되었으며 이후 TBA값이급격히 증가하여 6일 이후에는 무첨가구와 별 차이가 없었다. 95% 에탄올 추출의 분획물에서는 모든 분획에서 5일까지 무첨가보다 낮은 TBA값을 나타내어 지질산화를 억제하는 것으로 나타났다. Hexane 분획물(HF)이 저장 6일까지 TBA값이 0.
70% 에탄올 추출의 분획물에서는 CF와 EF에서 상당히 높은 지질 억제효과가 나타났는데 7일째 까지도 50%의억제 효과를 나타내었다. Butanol 분획 (BF)에서는 4일에 0.112 로 무첨가보다 47.4%의 낮은 TBA값을 보였으나 이후 급격하게 증가하여 6~7일 사이에는 무첨가구보다 15.9~11.5%로 지연효과를 빠르게 상실하는 것으로 나타났다. 반면 HF과 WF에서는 억제 효과가 낮았다.
헥산 층 분획(HF)에서는 95% 에탄올 추출물의 HF가 19% 정도이나 전자 공여능이 매우 낮거나 없다고 보여 진다. Butanol 분획 (BF)에서는 항산화능이 40% 미만으로 강하지는 않으나 물추출물의 BF에서 39.5%로 가장 높았고, 에탄올 추출물에서도 에탄올 혼합율이 낮을수록 항산능이 높아지는 경향을 나타내었다. 따라서 BF의 항산화 성분은 수용성이 강한 것으로 사료된다.
물층은 대조구보다 낮은 값을 보이나 큰 차이는 없어 산화지연효과를 보이지는 않는 것으로 나타났다. Butanol 층의 산화억제 성분은 95%와 70%에서는 약하지만 50% 이하의 에탄올 추출과 물 추출에서 높은 저해효과를 보였다. 결과적으로 차조기 물추출과에탄올 추출물은 linoleic acid의 자동산화를 억제시키는 것으로나타났으며, 특히 70% 에탄올 추출이 추출물 중에서 가장 높은 저해 효과를 보이는 것으로 나타났다.
이것은 천연 항산화 ascorbic acid의 전자공여 능 88% 보다 높은 결과이다. Chloroform 분획(CF)에서는 70%와 95% 에탄올 추출의 CF에서 50% 이상의 비교적 높은 전자 공여능을 갖는 것으로 보이며 50% 이하의 에탄올 추출물이나 물추출물의 CF에서도 항산화 성분이 약하지만 용출되어지는 것으로 사료된다. 헥산 층 분획(HF)에서는 95% 에탄올 추출물의 HF가 19% 정도이나 전자 공여능이 매우 낮거나 없다고 보여 진다.
Ethyl acetate 분획 (EF) 은 4일에 TBA가 다소 증가하는 경향을 보였으나 이후에도 산화가 서서히 진행되는 양상으로 7일까지 무첨가보다 지질산화가 30%정도 억제 효과를 유지하여 HF첨가구와 함께 가장 낮은 것으로 확인 되었다. Chloroform 층(CF)은 6일까지 24.7 ~27.9% 산화 억제 효과를 보였으며 butanol 층도 5일 까지 20.0~22.27%의 유의적인 지연효과를 나타내었다. 물층은 대조구보다 낮은 값을 보이나 큰 차이는 없어 산화지연효과를 보이지는 않는 것으로 나타났다.
70% 낮은 값으로 2배의 지연효과를 보여분획물 중 산화억제효과가 가장 높았다. Ethyl acetate 분획 (EF) 은 4일에 TBA가 다소 증가하는 경향을 보였으나 이후에도 산화가 서서히 진행되는 양상으로 7일까지 무첨가보다 지질산화가 30%정도 억제 효과를 유지하여 HF첨가구와 함께 가장 낮은 것으로 확인 되었다. Chloroform 층(CF)은 6일까지 24.
1%로 다른 농도의 ethanol 추출이나 물추출보다 다소 많이 추출된 것으로 보인다. Ethyl acetate 분획은 추출용매 모두에서 30% 이상의 활성을 나타내었는데 50, 70 및 95% 에탄올 추출에서 각각 35.9, 38.8, 36.6%로 나타나 70% 에탄올 추출의 분획물이 활성이 가장 높았으며, 30% 에탄올 추출이 가장 활성이 낮았다. Hexane, butanol 및 물 분획에서는 SOD 유사 활성이 10% 미만으로 매우 낮아서 활성 물질이 hexane이나 butanol 가용성분은 아닌 것으로 판단된다.
호흡에 의해 생성되는 * superoxide 과산화수소(HM)로 전환시키는 반응을 촉매 하는 산화 효소로 분자량이 30KDa 이상으로 세포내로 쉽게 흡수되지 못하므로 SOD 활성을 갖는 저분자 물질이나 유사 물질에 대한 연구가 활발하다40). Fig. 3은 차조기 추출물의 SOD 유사 활성 측정 결과를 나타낸 것으로, 물 추출물은 30.3%의 활성을, 30-95% 에탄올 추출물은 28~32% 정도의 SOD 유사 활성을 나타내었으며 특히, 70% 에탄올 추출물이 32.4%로 가장 활성이 높았다. 주출물의 분획에서는 chloroform과 ethyl acetate 분획물에서 11.
95% 에탄올 추출의 분획물에서는 모든 분획에서 5일까지 무첨가보다 낮은 TBA값을 나타내어 지질산화를 억제하는 것으로 나타났다. Hexane 분획물(HF)이 저장 6일까지 TBA값이 0.121 로 무첨가구 보다 58.70% 낮은 값으로 2배의 지연효과를 보여분획물 중 산화억제효과가 가장 높았다. Ethyl acetate 분획 (EF) 은 4일에 TBA가 다소 증가하는 경향을 보였으나 이후에도 산화가 서서히 진행되는 양상으로 7일까지 무첨가보다 지질산화가 30%정도 억제 효과를 유지하여 HF첨가구와 함께 가장 낮은 것으로 확인 되었다.
0ppm이었다. Xanthine oxidase 저해 활성은 에탄올추출물이 3671.2%이었으며, 물추출물이 46.9%로 추출물중 가장 높았다. 분획물에서는 물추출의 ethyl acetate 가용분이 1,000 ppm 농도에서 52 활성을 보여 가장 높았다.
분획물의 농도가 증가함에 따라 활성도 증가하였으나, 1,000 ppm 이상의 농도에서는 활성이 크게 증가하지 않았다. ethyl acetate 분획물은 1, 000 ppm 농도에서 38.8%, 2,000 ppm에서는 59.2로 활성이 크게 증가하는 경향을 나타내었다.
단계적 분획 후 잔사로 볼 수 있는 물층(VF)은 10% 이하의 낮은 활성을 나타내었다. 결과적으로 차조기 물과 에탄올 추출물의 전자 공여능은 높지 않으나, 이들 주출물의 chloroform, ethyl acetate 및 butanol 분획물에서 50% 이상의 높은 활성을 보였으며, 70% 에탄올 추출물의 ethyl acetate 분획이 90% 이상의 높은 활성을 보였다. Table 1은 가장 높은 활성을 보인 70% 에탄올 추출물의 chloroform, ethyl acetate와 butanol 분획 물을 125~2,000 ppm의 농도에서 전자 공여능을 측정하였으며, 라디칼 50% 소거에 요구되는 농도를 확인한 결과이다.
Butanol 층의 산화억제 성분은 95%와 70%에서는 약하지만 50% 이하의 에탄올 추출과 물 추출에서 높은 저해효과를 보였다. 결과적으로 차조기 물추출과에탄올 추출물은 linoleic acid의 자동산화를 억제시키는 것으로나타났으며, 특히 70% 에탄올 추출이 추출물 중에서 가장 높은 저해 효과를 보이는 것으로 나타났다. 또 지질 산화 억제효과를 나타내는 물질은 물 추출과 30, 50 및 70% 에탄올 추출의 경우 chlorofbnr과 ethyl acetate 가용성분이었으며, 95% 에탄올 추출은 hexane과 ethyl acetate 가용성분인 것으로 나타났다.
Table 1은 가장 높은 활성을 보인 70% 에탄올 추출물의 chloroform, ethyl acetate와 butanol 분획 물을 125~2,000 ppm의 농도에서 전자 공여능을 측정하였으며, 라디칼 50% 소거에 요구되는 농도를 확인한 결과이다. 농도를 증가시킬수록 전자 공여 능은 유의적으로 증가하는 것으로 나타났으며 chloroforme 획과 ethyl acetate 분획의 R%은 각각 827.6 ppm과 200.5 ppin으로 확인 되었다.
결과적으로 차조기 물추출과에탄올 추출물은 linoleic acid의 자동산화를 억제시키는 것으로나타났으며, 특히 70% 에탄올 추출이 추출물 중에서 가장 높은 저해 효과를 보이는 것으로 나타났다. 또 지질 산화 억제효과를 나타내는 물질은 물 추출과 30, 50 및 70% 에탄올 추출의 경우 chlorofbnr과 ethyl acetate 가용성분이었으며, 95% 에탄올 추출은 hexane과 ethyl acetate 가용성분인 것으로 나타났다.
295 이었다. 물 추출물(WE)의 TBA 값은 저장 7일 기간 내내 대조구보다 낮은 27-38% 정도의 억제능을 보였다. 분획물에서는 hexane 분획과 물 분획은 TBA값이 대조구와 큰 차이 없는 것으로 나타났으나 ethyl acetate 분획이 7일 까지 60%의 저해 효과를 나타내어 지질 산화를 억제하는 효과가 가장 높았다.
DPPH free radical 소거법은 라디칼이 감소하는 정도를 DPPH의 짙은 자색의 탈색으로 나타난다. 물 추출물과 에탄올 추출물의 전자 공여능은 95% 에탄올 추출물이 35%로 가장 높았고, 19-35% 범위로 대체적으로 낮게 나타났다. 그러나 이들 각각의 추출물의 ethyl acetate 분획 (EF)에서는 모든 추출물에서 75% 이상의 강한 전자 공여능을 보여서.
9% 로 나타나 에탄올 농도와는 유의적인 관계를 보이지는 않았으며, 70% 에탄올 추출물이 가장 높은 저해 활성을 보였다. 물추출물에서는 46.9%로 추출물 중 가장 높은 활성을 보였다. 이들 각각의 분획물의 효소 활성 저해능은 hexane, chloroform 및물분획은 10% 미만의 낮은 활성을 보인 반면 butanol 분획물에서 24.
그러나 이들 각각의 추출물의 ethyl acetate 분획 (EF)에서는 모든 추출물에서 75% 이상의 강한 전자 공여능을 보여서. 물추출물의 전자 공여능이 80, 30, 50, 70 및 95% 에탄올 추출이 각각 75, 85, 90 및 80%로 나타나 70% 에탄올 추출물의 EF에서 전자공여 능이 가장 높다. 이것은 천연 항산화 ascorbic acid의 전자공여 능 88% 보다 높은 결과이다.
물 추출물(WE)의 TBA 값은 저장 7일 기간 내내 대조구보다 낮은 27-38% 정도의 억제능을 보였다. 분획물에서는 hexane 분획과 물 분획은 TBA값이 대조구와 큰 차이 없는 것으로 나타났으나 ethyl acetate 분획이 7일 까지 60%의 저해 효과를 나타내어 지질 산화를 억제하는 효과가 가장 높았다. Butanol 분획 (BF)은 5일에 48.
9%로 추출물중 가장 높았다. 분획물에서는 물추출의 ethyl acetate 가용분이 1,000 ppm 농도에서 52 활성을 보여 가장 높았다.
7%로 나타났다. 분획물은 chloroform, ethyl acetate 및 butanol 분획물에서 7일 동안 무첨가보다 32.2-54.2%의 저해효과를 보였으며 그 중 ethyl acetate 분획이 저장 기간 내 저해율이 가장 높았다. 50% 에탄올 추출물은 4일에 57.
저해활성이 가장 높은 것으로 나타난 물 추출물과 ethyl acetate 분획과 butanol 분획물의 농도를 달리하여 xanthine oxidase 저해 활성을 측정한 결과는 Table 3에 나타내었다. 분획물의 농도 증가에 따라 저해율도 증가하는 경향을 보였으며 ethyl acetate 분획은 1, 000ppm 이상의 농도에서는 50% 이상의 활성을 보였다. 차조기의 xanthine 산화 효소의 활성을 저해하는 물질은 물을 이용하여 추출하는 것이 가장 빠르게 추출할 수 있는 것으로 보이며, 저해 활성 물질은 ethyl acetate와 butanol 가용성분인 것으로 사료된다.
9%로 추출물 중 가장 높은 활성을 보였다. 이들 각각의 분획물의 효소 활성 저해능은 hexane, chloroform 및물분획은 10% 미만의 낮은 활성을 보인 반면 butanol 분획물에서 24.6~15.4%, ethyl acetate 분획물이 47.1~36.8%로 다른분획보다 높은 활성을 가지는 것으로 ethyl acetate 분획물에서는 50% 에탄올 추출물의 저해능이 가장 낮고 30, 70 및 95% 에탄올 추출물의 저해활성은 45747.1%로 비슷하였으며, 물추출물의 활성이 52%로 가장 높았다. 저해활성이 가장 높은 것으로 나타난 물 추출물과 ethyl acetate 분획과 butanol 분획물의 농도를 달리하여 xanthine oxidase 저해 활성을 측정한 결과는 Table 3에 나타내었다.
4%로 가장 활성이 높았다. 주출물의 분획에서는 chloroform과 ethyl acetate 분획물에서 11.5~38.8%의 활성을 나타내었는데 chloroform 분획은 11.3~15.1%의 활성을 보인 반면 ethyl acetate 분획이 30% 이상의 활성을 보여 가장 높았다. Chloroform 분획에서는 70% 에탄올에서 추출한 것이 15.
이때 xanthine oxidase는 산소 분자를 수소 수용체로 이용하므로 이를 저해하게 되면 free radical의 생성이억제되어 항산화, 항노화 등의 효과를 기대할 수 있다. 차조기에탄올 추출물의 xanthine oxidase 활성 저해율은 Fig. 4에서와같이 30% 에탄올 추출물이 41%, 50% 에탄올 추출물이 36%, 70% 에탄올 추출물이 41.2% 및 95% 에탄올 추출물이 37.9% 로 나타나 에탄올 농도와는 유의적인 관계를 보이지는 않았으며, 70% 에탄올 추출물이 가장 높은 저해 활성을 보였다. 물추출물에서는 46.
Hexane, butanol 및 물 분획에서는 SOD 유사 활성이 10% 미만으로 매우 낮아서 활성 물질이 hexane이나 butanol 가용성분은 아닌 것으로 판단된다. 차조기의 SOD 유사활성은 물추출물과 에탄올추출물이 1,000 ppm 농도에서 30% 정도의 활성을 나타내며 활성 물질은 chloroibrm과 ethyl acetate 가용 성분인 것으로 보이며, 70% 에탄올에 가장 효과적으로 추출되는 것으로 나타났다. SOD 유사 활성이 가장 높은 70% 에탄올 추출물의 ethyl acetate 분획의 농도를 125~2,000 ppm까지 높여 SOD값의 변화를 관찰한 결과는 Table 2에 나타내었다.
분획물의 농도 증가에 따라 저해율도 증가하는 경향을 보였으며 ethyl acetate 분획은 1, 000ppm 이상의 농도에서는 50% 이상의 활성을 보였다. 차조기의 xanthine 산화 효소의 활성을 저해하는 물질은 물을 이용하여 추출하는 것이 가장 빠르게 추출할 수 있는 것으로 보이며, 저해 활성 물질은 ethyl acetate와 butanol 가용성분인 것으로 사료된다.
xanthin oxidase 저해 활성을 측정하였다. 추출물의 전자 공여능은 18~30% 정도로 낮았으나, 분획물에서는 95%과 70% 에탄올 추출물의 chloroform 분획이 50% 수준의 활성을 보였고, ethyl acetate 분획에서는 모든 추출용매에서 75% 이상의활성을 보였다. 특히, 70% 에탄올 추출물의 ethyl acetate 분획물이 93.
추출물의 전자 공여능은 18~30% 정도로 낮았으나, 분획물에서는 95%과 70% 에탄올 추출물의 chloroform 분획이 50% 수준의 활성을 보였고, ethyl acetate 분획에서는 모든 추출용매에서 75% 이상의활성을 보였다. 특히, 70% 에탄올 추출물의 ethyl acetate 분획물이 93.4%로 가장 높은 활성을 보였으며 RQ(에 요구되는 농도는 200.5 ppm이었다. 저장 온도 4(FC에서 linoleic acid의 자동산화를 가장 효과적으로 억제하는 것으로 나타난 추출물은 70% 에탄올 이었다.
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