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문제 정의
- 따라서, 강화쑥을 소재로 하여 사람의 장내미생물을 이용하여 발효시킨 발효강화쑥을 생리활성을 지닌 천연물 신소재로 개발하고자 사염화탄소 및 d-galactosamine으로 유발된 간장해에 대한 보호효과를 검토하였다.
- 따라서, 강화특화작목인 강화쑥의 식의약품의 기능성 신소재로서 유용성을 추구하고자 하는 연구의 일환으로 강화 쑥을 사람 장내미생물 유래 유산균을 이용하여 발효시킨 생물 전환 발효강화쑥의 간장해 보호활성을 검토한 결과를 보고하고자 한다.
제안 방법
- - HepG2 celle MEM(10% FBS)배지를 사용하여 배 양하였으며 3일마다 계대 배양하였다. HepG2 cell을0.
- - 간장해 보호 기능성을 검토하고자 in #에서 humanhepatoma cell line인 HepG2 cell을 이용하여 fer/-butylhy-droperoxide(Z-BHP) 처치로 유발된 세포독성에 대한 보호효과를 검토하여 그 결과를 Table Ⅰ에 제시하였다. 그 결과 강화 쑥 및 장내미생물로부터 분리한 유산균 K-525로 발효시킨 발효강화쑥의 세포독성 보호효과를 평가한 바 25µg/ml 농도에서 발효전 검체에 비하여 유산균으로 처리하여 얻은 생물 전환 발효쑥에서 양호한 세포독성 보호효과를 관찰하였다.
- - 사염화탄소 투 여로 유발된 간장해 흰쥐의 혈액 중 superoxide dismutase (SOD), glutathione reductase(GR) 및 glutathione peroxidase(Gpx) 효소활성에 미치는 검액 강화쑥(AP) 및 발효강 화쑥(AP-F) 효과를 Table Ⅲ에 제시하였다. 흰쥐에 사염화 탄소를 처치하면 혈중의 SOD 및 Gpx 효소활성도는 사염 화탄소 비처치 정상군에 비하여 유의하게 감소되며, GR 효 소활성도는 유의하게 증가됨을 알 수 있었다.
- - 채취한 전혈을 3, 000 rpm, 4℃에서 10분간 원심분리한 다음, 상등액을 취해 이utathione reductase 활성은 RANDOX Glutathione Reductase GR 2368 kit를, glutathione peroxidase 활성은 RANDOX RANSEL RS 505 kit를 사용하여 Cobas Mira Plus로 측정하였다.
- - 흰쥐 1군을 6 마리로 하여 검액을 1일 1회 5일간 경구투여하고 최종투여3시간 후에 olive oil에 용해시킨 20% 사염화탄소 1.0 ml/ 100 g을 경구투여하였다. 사염화탄소 투여 24시간 후에 심장 채혈하여 상온에서 60분간 방치하고 3, 000rpm에서 15분간 원심분리하여 혈청을 분리하였다.
- - 흰쥐 1군을 6마리로 하여 검액을 각각 1일 1회 5일간 경구투여하고 최종투여 30분 후에 d-galactosamine 250 mg을 복강내 투여하였다. d-Galactosamine 투여 후 24시간 동안 절식시키고 ethei로 가볍게 마취시킨 다음 심장채혈하여 상온에서 60 분간 방치하고 3, 000 rpm에서 15분간 원심분리하여 혈청을 분리하였다.
- 세포를 부착시킨 후 강화 쑥 추출물(AP) 및 발효강화쑥(AP-F)을 처리하여 1시간 동안 반응시 켰다. 1시간 후 100 jiM fer/-butylhydroper-oxide(zBHP)을 가하고 2시간 반응 후 MTT시약을 가하여 1 시간 동안 반응시키고 595nm에서 흡광도를 측정하였다.
- 5 ml에 생리식염수를 적당량 가하여 vortex mixing하여 세척한 후 3, 000 rpm, 4℃에서 5분간 원심분리한 다음 상층의 생리식염수를 suction하여 제거하였다. 이 과정을 세 번 반복 후 증류수로 2 ml。] 되게 맞춘 후, RANDOX RANSOD SD125 kit를 사용하여 Cobas Mira Plus로 측정하였다.
- 간장해 유발물질로 아미노당으로서 RNA와 단백질 합성을 억제시키는 물질로 바이러스성 간염과 유사한 형태의 간세포 괴사를 일으키는 물질인 d-galactosamine을 이용하여 간장해 병태모델 동물에서 간장해보호작용을 검토하였다. 그 결과 d-galactosamine만 처치한 대조군은 비처치 정상군에 비하여 혈청 중 AST, AU, ALP 및 LDH 효소활성도를 유의하게 상승시킴으로서 간장해가 유발됨을 알 수 있었다.
- 강화쑥 및 발효강화쑥을 전투여하고 사염화탄소를 투여하여 검액의 간장해보호효과를 혈액중의 효소활성도를 지표로 평가하였다. 간손상도의 지표로 사용되는 ALT, AST 등의 효소활성도는 간독성으로 인한 간세포의 괴사와 간 조직의 파괴가 진행됨에 따라 혈액에 방출되어 효소 활성 도가 증가하는 것으로 알려져 있*) 다 따라서, 사염화탄소만을 처치한 대조군은 비처치 정상군에 비하여 혈청 중 ALT, AST, ALP 및 LDH 효소활성도가 유의하게 증가되었다.
- 강화쑥 및 발효강화쑥의 간장해 보호효과를 평가하고자 급성 간독성을 유발하는 것으로 알려진 사염화탄소를 간 독성물질로 하여 흰쥐에 경구투여하여 병태모델을 작성하였다. 사염화탄소는 체내로 흡수되면 cytochrome P450 대사 효소계에 의하여 OOC, 을 형성하거나 지질과산화를 일으키며 단백질이나 지방과도 공유결합을 형성함으로써 간중심부 괴사(centrilobular necrosis), 단백질합성 억제, 지방변성 등을 야기시켜 간독성을 일으키는 것으로 알려져 있다.
- 강화특화작목으로부터 식의약품 신소재 탐색 및 개발 연구의 일환으로 in #O에서 human hepatoma cell인 HepG2 cell에 대한 보호효과와 in I#c에서 사염화탄소 및 d-galac-tosamine 유발 간장해 병태모델 흰쥐를 사용하여 강화 쑥과 발효 강화 쑥의 간장해보호효과를 평가하였다. 그 결과 HepG2 cell의 F-BHP에 대한 세포독성 보호효과와 사염화탄소 및 dgalactosamine 처치로 유발된 간장해 흰쥐에서 혈청 중transaminase(AST & ALT) 및 lactic dehydrogenase 효소활성도에 대하여 유의한 상승억제효과가 인정되었다.
- d-Galactosamine 투여 후 24시간 동안 절식시키고 ethei로 가볍게 마취시킨 다음 심장채혈하여 상온에서 60 분간 방치하고 3, 000 rpm에서 15분간 원심분리하여 혈청을 분리하였다.검액 투여 및 혈청 중 효소활성도 측정은 전기 사염화탄소 유발 간독성에 미치는 영향과 동일한 방법으로 실시하였다.
- 또한, 혈액 중 항산화효소인 superoxide dismutase(SOD), glutathione reductase(GR) 및 glutathione per-oxidase(Gpx) 효소활성을 아래 방법에 준하여 측정하였다. 검액은 강화쑥 주정 추출물(AP)과 발효강화쑥(AP-F) 각각 100 ㎎/㎏ 및 400㎎/㎏을 각각 경구투여하였고, 대조군에는 생리식 염수를 투여 하였으며 , 양성 비교약물로는 silymarin 25 ㎎/㎏을 경구투여하여 비교관찰하였다.
- 처치로 유발된 세포독성에 대한 보호효과를 검토하여 그 결과를 Table Ⅰ에 제시하였다. 그 결과 강화 쑥 및 장내미생물로부터 분리한 유산균 K-525로 발효시킨 발효강화쑥의 세포독성 보호효과를 평가한 바 25µg/ml 농도에서 발효전 검체에 비하여 유산균으로 처리하여 얻은 생물 전환 발효쑥에서 양호한 세포독성 보호효과를 관찰하였다.
- 따라서, 항산화활성과 관련된 혈청 효소인 superoxidedismutase(SOD), glutathione reductase(GR) 및 glutathioneperoxidase(Gpx) 효소활성도를 측정하였다. 그 결과 사염화탄소만을 처치한 대조군의 SOD 및 Gpx 효소활성도는 사염화탄소 비처치 정상군에 비하여 유의하게 저하되었고, GR 효소활성도는 유의하게 증가됨을 알 수 있었다.
- 혈청 중 transaminase(ALT & AST), alkaine phosphatase(ALP) 및 lactic dehydrogenase (LDH) 효소활성도를 아래의 방법에 따라 측정하였다. 또한, 혈액 중 항산화효소인 superoxide dismutase(SOD), glutathione reductase(GR) 및 glutathione per-oxidase(Gpx) 효소활성을 아래 방법에 준하여 측정하였다. 검액은 강화쑥 주정 추출물(AP)과 발효강화쑥(AP-F) 각각 100 ㎎/㎏ 및 400㎎/㎏을 각각 경구투여하였고, 대조군에는 생리식 염수를 투여 하였으며 , 양성 비교약물로는 silymarin 25 ㎎/㎏을 경구투여하여 비교관찰하였다.
- 사염화탄소 투여 24시간 후에 심장 채혈하여 상온에서 60분간 방치하고 3, 000rpm에서 15분간 원심분리하여 혈청을 분리하였다. 혈청 중 transaminase(ALT & AST), alkaine phosphatase(ALP) 및 lactic dehydrogenase (LDH) 효소활성도를 아래의 방법에 따라 측정하였다. 또한, 혈액 중 항산화효소인 superoxide dismutase(SOD), glutathione reductase(GR) 및 glutathione per-oxidase(Gpx) 효소활성을 아래 방법에 준하여 측정하였다.
대상 데이터
- - 본 실험에서 사용한 강화쑥(Artemisia princeps PAMPANINI, 국화과 Compositae) 주정 (Ethanol) 추출물은경희대학교 생명과학대학 백남인 교수로부터 분양받아 사용하였다. 또한 Lee 등의 방법저)에 준하여 강화쑥 주정 추출물의 장내 유산균에 의한 발효강화쑥을 경희대학교 약학대학 김동현 교수로부터 분양받아 사용하였다.
- - 본 실험에서 사용한 실험동물은 (주)샘 타코에서 구입한 250 g 전후의 SD계 웅성 흰쥐를 사용하였고, 물은 상수를 사용하여 충분히 공급하면서 실험실 환경에서 2 주간 순응시킨 후 사용하였다. 특별히 명시하지 않는 한 실험은 24±2℃, 습도 60%의 항온, 항습장치가 되어 있는 실험실 내에서 실시하였다.
- 강화쑥의 발효는 사람의 장내미생물로부터 분리한 유산균 일종인 KH-525 균주를 이용하였으며 , 강화쑥 에탄올 추출물에 KH-525 균주를 이식하여 발효시킨 다음 동결건조한 것을 발효강화쑥으로 하였다 저)우선 in I#에서 발효강화쑥의 간세포보호효과를 검토하고자 human hepatoma cell인 HepG2 cell을 이용하였다. HepG2 cell을 간장해물질인 fer/-butylhydroperoxide(/-BHP)처치로 유발된 세포독성에 대한 강화쑥 및 발효강화쑥의 보호 효과를 검토한 바 25 jig/ml 농도에서 발효강화쑥이 약 3 배까지 보호활성이 증가됨을 알 수 있었으나 농도 의존성을 나타내지 않았다.
- (영국) 제품을 사용하였고, 기타 분석용 시약은 1급 시약을 사용하였다. 기구로는 Prime Automatic Clinical Chemistry Analyzer(BPC Biosed, 이 탈리 아), 분광광도계(W 160A, Shimadzu Co. 일본), 원심분리기(VS-6000CFN, Vision Scientific Co., 한국), COBAS MIRA PLU S(Roche Products Ltd, 한국) 등을 사용하였다.
- 또한 Lee 등의 방법저)에 준하여 강화쑥 주정 추출물의 장내 유산균에 의한 발효강화쑥을 경희대학교 약학대학 김동현 교수로부터 분양받아 사용하였다. 각각 voucher specimene 경희대학교 생명과학대학 및 약학대학에 보관하고 있다.
데이터처리
- - 모든 실험결과는 평균부표준오차로 나타내었으며, 자료분석은 Studente t-testS 이용하여 p<0.05 수준에서 유의성을 검정하였다.
이론/모형
- - 혈청 중 AST와 ALT는 UV-Rate법에 따라, ALP는 p-니트로페닐인산 기질법 *) LDH 는 UNRate법을 이용하여 측정용 kit 시약(Asan Pharm. Co.)를 사용하^여 Prime automatic clinical chemistry analy-zer로 측정하였다.
성능/효과
- 001 의유의한 혈청중 AST 효소활성 상승억제효과를 관찰할 수 있 었고 검액의 용량의존적임을 알 수 있었다. ALT 활성은 AP 및 AP-F 검액 400㎎/㎏ 투여군에서는 각각 226.7±27.5 IU/L와 83.3±24.9IU/L로 사염화탄소 처치 대조군에 비하여 각각 p<0.05와 p<0.001의 유의한 혈청중 ALT 효소활 성 상승억제효과를 관찰할 수 있었다. 그리고 각 검체 저농 도 lOO㎎/㎏ 투여군에서 AP 처치군에서는 다소 억제시키는 경향을 보이나 유의차는 없었으나, AP-F 처치군에서는 n6.
- 01의 유의한 감소억제 효과를 나티내었다. AP 저농도 100 ㎎/㎏ 처치군은 758.7±14.5 Unit/g Hb로 대조군에 비하여 p<0.05의 유의한 감소억제 효과를 나타내었고, AP-F 100㎎/㎏ 처치군에서는 다소 억제시키는 경향을 보이나 통계적으로 유의차는 없었다. 양^대조약물 silymarin 25 ㎎/㎏ 투여군에서도 혈액 중 SOD, GR및 Gpx 효소활성도는 대조군에 비하여 유의한 개선 효과를 관찰할 수 있었다.
- AST 효소활성도는 AP lOO㎎/㎏ 및 400㎎/㎏ 투여군에서는 각각 443.3 ±32.7 IBL와 403.3±41.4IU/L로 사염화탄소 처치 대조군에 비하여 다소 억제시키는 경향을 보이나 통계적으로 유의차는 없었다. 반면에 AP-F 100㎎/㎏ 및 400㎎/㎏ 투여군에서는 각각 206±23.
- 이용하였다. HepG2 cell을 간장해물질인 fer/-butylhydroperoxide(/-BHP)처치로 유발된 세포독성에 대한 강화쑥 및 발효강화쑥의 보호 효과를 검토한 바 25 jig/ml 농도에서 발효강화쑥이 약 3 배까지 보호활성이 증가됨을 알 수 있었으나 농도 의존성을 나타내지 않았다.
- 평가하였다. 간손상도의 지표로 사용되는 ALT, AST 등의 효소활성도는 간독성으로 인한 간세포의 괴사와 간 조직의 파괴가 진행됨에 따라 혈액에 방출되어 효소 활성 도가 증가하는 것으로 알려져 있*) 다 따라서, 사염화탄소만을 처치한 대조군은 비처치 정상군에 비하여 혈청 중 ALT, AST, ALP 및 LDH 효소활성도가 유의하게 증가되었다. 검액 강화 쑥 400 ㎎/㎏ 투여군에서는 ALT 및 LDH 효소 활성도에 대하여 p<0.
- 간손상도의 지표로 사용되는 ALT, AST 등의 효소활성도는 간독성으로 인한 간세포의 괴사와 간 조직의 파괴가 진행됨에 따라 혈액에 방출되어 효소 활성 도가 증가하는 것으로 알려져 있*) 다 따라서, 사염화탄소만을 처치한 대조군은 비처치 정상군에 비하여 혈청 중 ALT, AST, ALP 및 LDH 효소활성도가 유의하게 증가되었다. 검액 강화 쑥 400 ㎎/㎏ 투여군에서는 ALT 및 LDH 효소 활성도에 대하여 p<0.05의 유의한 상승억제효과가 인정되나 AST 및 ALP 효소활성도에 대해서는 상승을 억제시키는 경향을 보였다. 반면에 검액 발효강화쑥 400 ㎎/㎏ 투여군에서는 AST, AIT, ALP 및 LDH 효소활성도를 유의하게 상승억제시킴이 인정되었고, 검액의 용량의존적으로 나타났다.
- 그 결과 d-galactosamine만 처치한 대조군은 비처치 정상군에 비하여 혈청 중 AST, AU, ALP 및 LDH 효소활성도를 유의하게 상승시킴으로서 간장해가 유발됨을 알 수 있었다. 검액 강화쑥 및 발효강화쑥 400 ㎎/㎏ 처치군에서는 각각간장해 지료로 측정한 AST, ALT, ALP 및 LDH 효소활성도의 상승을 유의하게 억제시킴이 인정되었다. 그리고, 혈액 중 항산화효소인 SOD, GR 및 Gpx 효소활성도에 대해서 d-galactosamine 처치 대조군은 비처치 정상군에 비하 여유의 한 변화를 관찰할 수 있었으며, 검액 강화쑥 및 발효강화 쑥 각각 400 ㎎/㎏ 처치군에서는 대조군에 비하여 유의한 개선효과가 인정되었다.
- 간장해보호효과를 평가하였다. 그 결과 HepG2 cell의 F-BHP에 대한 세포독성 보호효과와 사염화탄소 및 dgalactosamine 처치로 유발된 간장해 흰쥐에서 혈청 중transaminase(AST & ALT) 및 lactic dehydrogenase 효소활성도에 대하여 유의한 상승억제효과가 인정되었다. 또한 혈액 중 항산화효소인 superoxide dismutase, glutathione reductase 및 glutathione peroxidase 활성도를 유의하게 개선시키는 효과가 인정되었다.
- 검토하였다. 그 결과 d-galactosamine만 처치한 대조군은 비처치 정상군에 비하여 혈청 중 AST, AU, ALP 및 LDH 효소활성도를 유의하게 상승시킴으로서 간장해가 유발됨을 알 수 있었다. 검액 강화쑥 및 발효강화쑥 400 ㎎/㎏ 처치군에서는 각각간장해 지료로 측정한 AST, ALT, ALP 및 LDH 효소활성도의 상승을 유의하게 억제시킴이 인정되었다.
- 따라서, 항산화활성과 관련된 혈청 효소인 superoxidedismutase(SOD), glutathione reductase(GR) 및 glutathioneperoxidase(Gpx) 효소활성도를 측정하였다. 그 결과 사염화탄소만을 처치한 대조군의 SOD 및 Gpx 효소활성도는 사염화탄소 비처치 정상군에 비하여 유의하게 저하되었고, GR 효소활성도는 유의하게 증가됨을 알 수 있었다. 한편 검액강화쑥 400mgeg 처치군은 SOD, GR 및 Gpx 효소 활성도를 각각 52.
- 001의 유의한 혈청중 ALT 효소활 성 상승억제효과를 관찰할 수 있었다. 그리고 각 검체 저농 도 lOO㎎/㎏ 투여군에서 AP 처치군에서는 다소 억제시키는 경향을 보이나 유의차는 없었으나, AP-F 처치군에서는 n6.7±20.7IU/L로 사염화탄소 처치 대조군에 비하여 p<0.05의 유의한 혈청 중 ALT 효소활성 상승억제효과를 보였다
- 05의 유의한 혈청중 ALT 효소활성 상승억제효과를 관찰할 수 있었다. 그리고 각 검체 저농도 100 ㎎/㎏ 투여군에서 AP 처치군은 2, 853±216.5 IU/L5L d-galactosamine 처치대조군에 비하여 p<0.001의 유의한 혈청 중 ALT 효소 활성 상승 억제 효과를 보였으나 AP-F 처치군은 다소 억제시키는경향을 보이나 유의차는 없었다.
- 05의 유의한 상승억제효과를 관찰할 수 있었다. 그리고 각 검체 저농도 lOOmgkg 투여군에서 AP 처치군은 473.0±29.8IU/L 로 d-galactosamine 처치 대조군에 비하여 p<0.001의 유의한 혈청 중 ALP 효소활성 상승억제효과를 보였으나 AP-F 처치군은 다소 억제시키는 경향을 보이나 유의차는 없었다.
- 001의 유의한 혈청중 LDH 효소활성 상승억제효과를 관찰할 수 있었다. 그리고 저농도 100㎎/㎏ 처치군에서도 각각 대조군에 비하여 유의한 혈청 중 LDH 효소활성도 상승억제효과가 인정되었으며, 검액의 농도의존적임을 알 수 있었다. 특히 AP-F 400㎎/㎏ 처치군은 거의 정상 대조군으로 회복됨을 알 수 있었다.
- 5 #와 4, 203 부22L4IU/L로 dgalactosamine 처치 대조군에 비하여 과 #<005의 유의한 혈청중 LDH 효소활성 상승억제효과를 관찰할 수 있었다. 그리고 저농도 lOOmgeg 처치군에서는 다소 억제시키는 경향을 보이나 통계적으로 유의차는 없었다, 양성대조약물 silymarin 25 ㎎/㎏ 투여군에서도 혈청 중 AST, ALT 및 LDH 효소활성도는 대조군에 비하여 유의하게 상승억제시킴을 관찰할 수 있었다.
- 001 의 유의한 상승억제효과를 나타내었다. 그리고, Gpx 효소활성은 검 액 AP 및 AP-F 400 ㎎/㎏ 처치군은 각각778.3 ±14.9 Unit/g Hb와 754.7±7.2 Unit/g Hb로 d-galac-tosamine 처치군에 비하여 p<0.01의 유의한 감소억제 효과를 나티내었다. AP 저농도 100 ㎎/㎏ 처치군은 758.
- 그리고, Gpx 효소활성은 검액 AP 및 AP-F 400mgeg 처치 군은 각각 821.4±25.4Unit/g Hb와 846.6± 15.7 Unit/g Hb로 사염화탄소 처치군에 비하여 p<0.05와 p<0.01의 유의한 감소억제효과를 나타내었다. 저농도 100㎎/㎏ 처치군은 각각 다소 억제시키는 경향을 보이나 통계적으로 유의차는 없었다.
- 0%의 유의한 개선효과를 나타내었다. 그리고, 발효강화쑥 400 ㎎/㎏ 처치군에서는 SOD, GR 및 Gpx 효소활성도를 각각 79.0%, 54.1% 및 75.3%의 유의한 개선효과가 인정되었다.
- 검액 강화쑥 및 발효강화쑥 400 ㎎/㎏ 처치군에서는 각각간장해 지료로 측정한 AST, ALT, ALP 및 LDH 효소활성도의 상승을 유의하게 억제시킴이 인정되었다. 그리고, 혈액 중 항산화효소인 SOD, GR 및 Gpx 효소활성도에 대해서 d-galactosamine 처치 대조군은 비처치 정상군에 비하 여유의 한 변화를 관찰할 수 있었으며, 검액 강화쑥 및 발효강화 쑥 각각 400 ㎎/㎏ 처치군에서는 대조군에 비하여 유의한 개선효과가 인정되었다.
- 05의 유의한 감소억제효과를 관찰할 수 있었으며, 저농도 lOOmgkg 처치군에서는 다소 억제시키는 경향을 보이나 유의차는 없었다. 또한 GR 효소활성은 검액 AP 및 AP-F 400 ㎎/㎏ 처 치군은 각각 159.0± 10.8 Unit/g Hb과 102.6±17.3 Unit/g HbS 사염화탄소 처치 대조군에 비하여 p<0.05와 p<0.001의 유의한 상승억제효과를 나타내었다. 한편 저농도 100㎎/㎏ 처치군에서 AP 처치군은 별다른 영향을 미치지 못하였으나, AP-F 처치군에서는 H9.
- 또한 GR 효소활성은 검액 AP 및 AP-F 400mgeg 처치 군은 각각 113.8±5.0 Unit/g HI과 55.3±9.0 Unit/g Hb로 dgalactosamine 처치 대조군에 비하여 p<0.001의 유의한 상승 억제 효과를 나타내었다. 한편 저농도 100mgeg 처치 군에서 AP 처치군은 별다른 영향을 미치지 못하였으나, AP-F 처 치 군에서는 89.
- 그 결과 HepG2 cell의 F-BHP에 대한 세포독성 보호효과와 사염화탄소 및 dgalactosamine 처치로 유발된 간장해 흰쥐에서 혈청 중transaminase(AST & ALT) 및 lactic dehydrogenase 효소활성도에 대하여 유의한 상승억제효과가 인정되었다. 또한 혈액 중 항산화효소인 superoxide dismutase, glutathione reductase 및 glutathione peroxidase 활성도를 유의하게 개선시키는 효과가 인정되었다. 따라서 강화쑥 주정추출물 및이 추출물의 유산균 발효물인 발효강화쑥은 간장해 보호 효과가 있는 것으로 사료되며 , 간장해 보호 기능성 물질로 기대된다.
- 4IU/L로 사염화탄소 처치 대조군에 비하여 다소 억제시키는 경향을 보이나 통계적으로 유의차는 없었다. 반면에 AP-F 100㎎/㎏ 및 400㎎/㎏ 투여군에서는 각각 206±23.1 IU/L와 180.0 ±21.2 IUZ로 사염화탄소 처치 대조군에 비하여 p<0.001 의유의한 혈청중 AST 효소활성 상승억제효과를 관찰할 수 있 었고 검액의 용량의존적임을 알 수 있었다. ALT 활성은 AP 및 AP-F 검액 400㎎/㎏ 투여군에서는 각각 226.
- 05의 유의한 상승억제효과가 인정되나 AST 및 ALP 효소활성도에 대해서는 상승을 억제시키는 경향을 보였다. 반면에 검액 발효강화쑥 400 ㎎/㎏ 투여군에서는 AST, AIT, ALP 및 LDH 효소활성도를 유의하게 상승억제시킴이 인정되었고, 검액의 용량의존적으로 나타났다.
- 저농도 100㎎/㎏ 처치군은 각각 다소 억제시키는 경향을 보이나 통계적으로 유의차는 없었다. 양성대조약물 silymarin 25 mg4cg 투여군에서도 혈액 중 SOD, GR 및 Gpx 효소활성도는 대조군에 비하여 유의한 개선효과를 관찰할 수 있었다.
- 특히 AP-F 400㎎/㎏ 처치군은 거의 정상 대조군으로 회복됨을 알 수 있었다. 양성대조약물 silymarin 25 mg4cg 투여군에서도 혈청 중 AST, ALT 및 LDH 효소활성도는 대조군에 비하여 유 의하게 상승억제시킴을 관찰할 수 있었다
- 이상의 실험결과로부터 강화쑥 및 강화쑥 유산균 발효 물인 발효강화쑥은 각각 사염화탄소 및 d-galactosamine 처치로 유발된 간장해 병태모델동물에서 유의한 개선효과가 인정되었고, 이러한 효과의 일부는 산화적 stress에 대한 방어적 효과에 기인하는 것으로 사료된다.
- 그리고 저농도 100㎎/㎏ 처치군에서도 각각 대조군에 비하여 유의한 혈청 중 LDH 효소활성도 상승억제효과가 인정되었으며, 검액의 농도의존적임을 알 수 있었다. 특히 AP-F 400㎎/㎏ 처치군은 거의 정상 대조군으로 회복됨을 알 수 있었다. 양성대조약물 silymarin 25 mg4cg 투여군에서도 혈청 중 AST, ALT 및 LDH 효소활성도는 대조군에 비하여 유 의하게 상승억제시킴을 관찰할 수 있었다
- 그 결과 사염화탄소만을 처치한 대조군의 SOD 및 Gpx 효소활성도는 사염화탄소 비처치 정상군에 비하여 유의하게 저하되었고, GR 효소활성도는 유의하게 증가됨을 알 수 있었다. 한편 검액강화쑥 400mgeg 처치군은 SOD, GR 및 Gpx 효소 활성도를 각각 52.9%, 18.0% 및 54.0%의 유의한 개선효과를 나타내었다. 그리고, 발효강화쑥 400 ㎎/㎏ 처치군에서는 SOD, GR 및 Gpx 효소활성도를 각각 79.
- 한편 우리나라에서 자생하고 있는 쑥의 유효물질 중 흐} 나인 eupatilin 함유량은 지역적 함량변이가 매우 크고, 강화도, 백령도를 중심으로 한 서해안 지역에서 높은 함량을 보인 반면에 동해안과 남해안 지역에서 수집된 쑥에서는 거의 함유되어 있지 않음이 밝혀졌다. 따라서, 강화쑥이 다른 지역의 쑥과 다른 화학적 차이가 있음에 따라 강화특화 작목으로서 가치가 우수하다고 할 수 있다.
- 혈액 중 SOD 효소활성도는 검액 AP 및 AP-F 400 ㎎/㎏ 투여군에서는 각각 l,598±25.9Unit/g Hb와 1,638±30.3 Unit/g HIM 사염화탄소 처치 대조군에 비하여 p<0.05의 유의한 감소억제효과를 관찰할 수 있었으며, 저농도 lOOmgkg 처치군에서는 다소 억제시키는 경향을 보이나 유의차는 없었다. 또한 GR 효소활성은 검액 AP 및 AP-F 400 ㎎/㎏ 처 치군은 각각 159.
- 혈액 중 SOD 효소활성은 검액 AP 및 AP-F 400㎎/㎏ 투여군에서는 각각 2, 127±71.9Unit/g Hb와 2, 068±44.0 Unit/g Hb로 d-galactosamine 처치 대조군에 비하여 p<0.05의 유의한 감소억제효과를 관찰할 수 있었으며, 저농도 100 ㎎/㎏ 처치군에서는 다소 억제시키는 경향을 보이나 유의차는 없었다.
- 혈청 중 AST 효소활성도는 AP 100 ㎎/㎏ 및 400 mg 투여군에서는 각각 3, 473±196.3 IU/L와 2, 870±331.7 IU/L 로 d-galactosamine 처치 대조군에 비하여 p<0.01의 유의한 상승 억제 효과가 인정되었다. 반면에 AP-F 100㎎/㎏ 및 400 ㎎/㎏ 투여군에서는 각각 4, 517±434.
- 혈청중 ALP 효소활성도는 AP 100㎎/㎏ 및 400㎎/㎏ 투여군에서는 각각 사염화탄소 처치 대조군에 비하여 다소 억제시키는 경향을 보이나 유의차는 없었다. 반면에 AP-F 400 ㎎/㎏ 처치군에서는 519.
- 혈청중 ALP 효소활성도는 검액 AP 및 AP-F 400mgkg 투여군에서는 각각 437.5 ±69.0 IU/L와 569.2±49.5 IU/L로 dgalactosamine 처치 대조군에 비하여 p<0.01과 p<0.05의 유의한 상승억제효과를 관찰할 수 있었다. 그리고 각 검체 저농도 lOOmgkg 투여군에서 AP 처치군은 473.
- 2 IU/L로 d-galactosamine 처치 대조군에 비하여 다소억제시키는 경향을 보이나 통계적으로 유의차는 없었다. 혈청중 ALT활성은 AP 및 AP-F 검액 400 ㎎/㎏ 투여군에서는 각각 2, 190 ±206.3 IU/L와 3, 450 ± 244.4 IU/L로 dgalactosamine 처치 대조군에 비하여 각각 p<0.001과 p< 0.05의 유의한 혈청중 ALT 효소활성 상승억제효과를 관찰할 수 있었다. 그리고 각 검체 저농도 100 ㎎/㎏ 투여군에서 AP 처치군은 2, 853±216.
- 혈청중 LDH 활성은 AP 및 AP-F 400mgeg 투여군에서는 각각 666.7±85.7IU/L와 316.7±13.2IU/L로 사염화탄소 처치 대조군에 비하여 p<0.05와 p<0.001의 유의한 혈청중 LDH 효소활성 상승억제효과를 관찰할 수 있었다. 그리고 저농도 100㎎/㎏ 처치군에서도 각각 대조군에 비하여 유의한 혈청 중 LDH 효소활성도 상승억제효과가 인정되었으며, 검액의 농도의존적임을 알 수 있었다.
- 혈청중 LDH 활성은 검액 AP 및 AP-F 400 ㎎/㎏ 투여군에서는 각각 3, 517부135.5 #와 4, 203 부22L4IU/L로 dgalactosamine 처치 대조군에 비하여 과 #<005의 유의한 혈청중 LDH 효소활성 상승억제효과를 관찰할 수 있었다. 그리고 저농도 lOOmgeg 처치군에서는 다소 억제시키는 경향을 보이나 통계적으로 유의차는 없었다, 양성대조약물 silymarin 25 ㎎/㎏ 투여군에서도 혈청 중 AST, ALT 및 LDH 효소활성도는 대조군에 비하여 유의하게 상승억제시킴을 관찰할 수 있었다.
- 제시하였다. 흰쥐에 d-galactosamineS- 처치하면 혈중의 AST, ALT, ALP 및 LDH 효소활성은 d-galactosamine비처치 정상군에 비하여 유의한 증가를 보였다.
- 효과를 Table V에 제시하였다. 흰쥐에 d-galactosamine을 처치하면 혈중의 SOD 및 Gpx 효소활성도는 d-galactosa-mine 비처치 정상군에 비하여 유의하게 감소되며, GR 효소 활성도는 유의하게 증가됨을 알 수 있었다.
- - 사염화탄소 투 여로 유발된 간장해 흰쥐의 혈액 중 superoxide dismutase (SOD), glutathione reductase(GR) 및 glutathione peroxidase(Gpx) 효소활성에 미치는 검액 강화쑥(AP) 및 발효강 화쑥(AP-F) 효과를 Table Ⅲ에 제시하였다. 흰쥐에 사염화 탄소를 처치하면 혈중의 SOD 및 Gpx 효소활성도는 사염 화탄소 비처치 정상군에 비하여 유의하게 감소되며, GR 효 소활성도는 유의하게 증가됨을 알 수 있었다.
- Ⅱ에 제시하였다. 흰쥐에 사염화탄소를 처치하면 혈중의 asparate aminotransferase(AST), 혈청중 alanine trans-ammase(AU), ALP 및 LDH 효소활성은 사염화탄소 비처치 정상군에 비하여 유의한 효소활성도 증가를 보여 간장해가 유발됨을 알 수 있었다.
후속연구
- 또한 혈액 중 항산화효소인 superoxide dismutase, glutathione reductase 및 glutathione peroxidase 활성도를 유의하게 개선시키는 효과가 인정되었다. 따라서 강화쑥 주정추출물 및이 추출물의 유산균 발효물인 발효강화쑥은 간장해 보호 효과가 있는 것으로 사료되며 , 간장해 보호 기능성 물질로 기대된다.
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