어성초 ethanol 추출물의 마우스 살모넬라 감염증에 대한 항균 및 치료효과 규명 Antibacterial and Therapeutic Effects of Houttuynia cordata Ethanol extract for Murine Salmonellosis원문보기
항생제의 오남용으로 인한 항생제 내성을 가진 세균의 출현은 공중보건학적인 측면에서 많은 피해를 입히고 있다. 또한, 세포 내 기생세균의 경우 예방과 치료가 어려운 상황에 놓여져 있고 항생제 대체 물질개발에 많은 관심이 집중되고 있다. 어성초는 오랜 기간 동안 소독제, 이뇨제, 해열제, 항균제, 항바이러스 제제, 항염증 제제로서 사용되어왔으며 중요한 민간요법의 하나로서 인식되고 있는 바, 본 실험에서는 어성초의 ethanol 추출물이 세포내 기생 난치성 세균 감염증인 S. typhimurium의 감염증에 대한 치료효과를 검증하였다. 본 실험의 결과로서 HCEE 추출물이 탐식세포의 형태적 변화를 유도하였고, S. typhimurium에 대한 직접적인 살균작용과 탐식세포를 통한 항균작용은 미약한 것으로 나타났다. 또한 HCEE 추출물이 S. typhimurium의 탐식세포 감염 시 시간경과에 따라 감염능 및 세포내 증식능이 감소하는 것이 확인되었다. 탐식균에 의한 사멸을 유도하는 탐식세포의 NO의 산생량에 있어서는 HCEE 추출물의 처리가 탐식세포로부터 NO 산생이 감소되어 NO를 이용한 탐식세포의 균 사멸과는 직접적 연관이 없을 것으로 추정되며, 마우스 감염시험에서 HCEE를 투약이 상당한 치료효과를 나타내어 HCEE가 S. typhimurium에 의한 염증을 감소시키고, 또한 apoptosis를 유도함으로 인해 균을 제거함으로 이루어지는 것으로 추측된다. 본 연구를 통해 HCEE의 살모넬라증에 대한 치료효과를 확인 할 수 있었으며, 천연소재 약용자원을 활용한 난치성 세균 감염증에 대한 신약개발이 가능하고, 이의 활용은 항생제 오남용을 줄일 수 있고 국민보건 증진에 이바지 할 것이다.
항생제의 오남용으로 인한 항생제 내성을 가진 세균의 출현은 공중보건학적인 측면에서 많은 피해를 입히고 있다. 또한, 세포 내 기생세균의 경우 예방과 치료가 어려운 상황에 놓여져 있고 항생제 대체 물질개발에 많은 관심이 집중되고 있다. 어성초는 오랜 기간 동안 소독제, 이뇨제, 해열제, 항균제, 항바이러스 제제, 항염증 제제로서 사용되어왔으며 중요한 민간요법의 하나로서 인식되고 있는 바, 본 실험에서는 어성초의 ethanol 추출물이 세포내 기생 난치성 세균 감염증인 S. typhimurium의 감염증에 대한 치료효과를 검증하였다. 본 실험의 결과로서 HCEE 추출물이 탐식세포의 형태적 변화를 유도하였고, S. typhimurium에 대한 직접적인 살균작용과 탐식세포를 통한 항균작용은 미약한 것으로 나타났다. 또한 HCEE 추출물이 S. typhimurium의 탐식세포 감염 시 시간경과에 따라 감염능 및 세포내 증식능이 감소하는 것이 확인되었다. 탐식균에 의한 사멸을 유도하는 탐식세포의 NO의 산생량에 있어서는 HCEE 추출물의 처리가 탐식세포로부터 NO 산생이 감소되어 NO를 이용한 탐식세포의 균 사멸과는 직접적 연관이 없을 것으로 추정되며, 마우스 감염시험에서 HCEE를 투약이 상당한 치료효과를 나타내어 HCEE가 S. typhimurium에 의한 염증을 감소시키고, 또한 apoptosis를 유도함으로 인해 균을 제거함으로 이루어지는 것으로 추측된다. 본 연구를 통해 HCEE의 살모넬라증에 대한 치료효과를 확인 할 수 있었으며, 천연소재 약용자원을 활용한 난치성 세균 감염증에 대한 신약개발이 가능하고, 이의 활용은 항생제 오남용을 줄일 수 있고 국민보건 증진에 이바지 할 것이다.
Salmonellosis is a major bacterial zoonosis that causes a variety of disease syndromes, self-limited enteritis to fatal infection in animals and food-borne infection and typhoid fever in humans. Recently, the emergence of multidrug resistant strains of Salmonella spp. causes more serious problems in...
Salmonellosis is a major bacterial zoonosis that causes a variety of disease syndromes, self-limited enteritis to fatal infection in animals and food-borne infection and typhoid fever in humans. Recently, the emergence of multidrug resistant strains of Salmonella spp. causes more serious problems in environment and public health. The present study was investigated the antibacterial effect of Houttuynia cordata ethanol extract(HCEE) for murine salmonellosis. In the cytotoxic effect of HCEE on RAW 264.7 cells, there was no detectable effect with any concentrations between 25 and 100 ${\mu}g/ml$ after 8 h incubation. The bacteriocidal effect of HCEE was not showed on a Salmonella enterica serovar Typhimurium(S. typhimurium). HCEE makes morphological change of the RAW 264.7 cells, and there was significant decreased bacterial uptake and intracellular replication within Salmonella infected cells. And further nitric oxide(NO) production of Salmonella infected RAW 264.7 cells with HCEE was decreased comparing to RAW 264.7 cells without HCEE until 8 h post infection. Oral administration of HCEE showed a therapeutic effect for S. typhimurium infected BALB/c mice. The mortality of HCEE treated mouse was 80% until 12 days, while that of HCEE untreated mouse was 100 % until 8 days after lethal dose of S. typhimurium infection. These data suggested that HCEE has a potency treatment for intracellular replicative pathogen including salmonellosis, brucellosis, tuberculosis, listeriosis etc., and the application of HCEE makes new strategies for safety medicine development without antibiotic resistance bacterial appearance and residue problem in food and solves the public health problem from antibiotic mis- and over use.
Salmonellosis is a major bacterial zoonosis that causes a variety of disease syndromes, self-limited enteritis to fatal infection in animals and food-borne infection and typhoid fever in humans. Recently, the emergence of multidrug resistant strains of Salmonella spp. causes more serious problems in environment and public health. The present study was investigated the antibacterial effect of Houttuynia cordata ethanol extract(HCEE) for murine salmonellosis. In the cytotoxic effect of HCEE on RAW 264.7 cells, there was no detectable effect with any concentrations between 25 and 100 ${\mu}g/ml$ after 8 h incubation. The bacteriocidal effect of HCEE was not showed on a Salmonella enterica serovar Typhimurium(S. typhimurium). HCEE makes morphological change of the RAW 264.7 cells, and there was significant decreased bacterial uptake and intracellular replication within Salmonella infected cells. And further nitric oxide(NO) production of Salmonella infected RAW 264.7 cells with HCEE was decreased comparing to RAW 264.7 cells without HCEE until 8 h post infection. Oral administration of HCEE showed a therapeutic effect for S. typhimurium infected BALB/c mice. The mortality of HCEE treated mouse was 80% until 12 days, while that of HCEE untreated mouse was 100 % until 8 days after lethal dose of S. typhimurium infection. These data suggested that HCEE has a potency treatment for intracellular replicative pathogen including salmonellosis, brucellosis, tuberculosis, listeriosis etc., and the application of HCEE makes new strategies for safety medicine development without antibiotic resistance bacterial appearance and residue problem in food and solves the public health problem from antibiotic mis- and over use.
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문제 정의
본 연구는 천연소재 약용자원인 어성초를 이용하여 대표적인 인수공통 전염병이자 세포내 기생 감염증의 하나인 Salmonella enterica serovar Typhimurium에 대한 항균효과 및 치료 효과를 in vitro와 in vivo상에서 실험을 수행하였고, 이를 토대로 어성초를 활용한 항생제 대체 물질 및 세포내 기생 세균성 감염증에 대한 안전한 치료제의 개발 가능성을 검토하였다.
또한, 세포 내 기생세균의 경우 예방과 치료가 어려운 상황에 놓여져 있고 항생제 대체 물질개발에 많은 관심이 집중되고 있다. 어성초는 오랜 기간 동안 소독제, 이뇨제, 해열제, 항균제, 항바이러스 제제, 항염증 제제로서 사용되어왔으며 중요한 민간요법의 하나로서 인식되고 있는 바, 본 실험에서는 어성초의 ethanol 추출물이 세포내 기생 난치성 세균 감염증인 S. typhimurium의 감염증에 대한 치료효과를 검증하였다. 본 실험의 결과로서 HCEE 추출물이 탐식세포의 형태적 변화를 유도하였고, S.
typhimurium에 의한 침입 및 증식이 억제되는 것을 확인할 수 있었다. 이에 in vivo실험을 통하여 과연 HCEE가 S. typhimurium 감염된 마우스에 치료효과 여부를 검정해보았다. 두 그룹의 mice에 복강내주사를 통해 치사량인 2×104의 S.
그러나 현재까지의 보고는 비병원성 균 또는 독소산생 균에 대한 항균효과가 대부분이었고, 세포내 기생세균에 대한 항균효과는 보고가 되어 있지 않다. 이에 따라 본 연구는 HCEE가 S. typhimurium에대한 항균효과를 가지는 지에 대한 실험을 수행하였다. 균 수를 1×144 조절한 후, HCEE용액 0, 25, 50, 100 μg/ml과 섞어서 37℃에서 0, 2, 4, 8시간 동안 배양하였다.
1 ml의 PBS 혹은 HCEE (100 μg/ml)용액을 24시간 마다 경구를 통해 투약하였다. 감염된 mice의 생존률은 매 24시간마다 확인하였다. 모든 실험절차는 경상국립대학교의 동물윤리협의회의 규정에 의거 실험을 수행하였다.
균 감염 4시간 이전에 HCEE를 농도별로 주입하여 같이 배양하였다. 균의 침입 양상을 측정하기 위해, MOI 20(multiplex of infection)이 되게 감염시켜 37℃, 5% CO2 환경에서 30분 혹은 60분 동안 배양하였다. 배양 후 세포에 탐식되지 않은 세포 외부의 균을 죽이기 위하여 기존의 배지를 30 μg/ml의 gentamicin이 포함된 RPMI 1640 + 10% FBS 배지로 교체한 후, 30분 동안 더배양하였다.
두 집단으로 구분한 mice에 복강내 주사를 통하여 치사량인 2×104이 되게 희석한 S. typhimurium을 주입하였다.
배양 후 세포에 탐식되지 않은 세포 외부의 균을 죽이기 위하여 기존의 배지를 30 μg/ml의 gentamicin이 포함된 RPMI 1640 + 10% FBS 배지로 교체한 후, 30분 동안 더배양하였다.
이후 감염된 세포는 PBS로 3회 washing한 후, DW를 이용하여 세포를 용해하여 세포 내 균을 LB agar에 spreading하여 균 수를 측정하였다. 세포 내 균의 증식은 균감염(MOI 20)을 수행하여 1시간 동안 배양한 후 gentamicin 을 포함한 RPMI 1640 + 10% FBS배지로 교체한 뒤, 2, 4, 8시간 동안 배양하였다. 세포 내 균 수의 측정은 균 침입 양상 측정법과 동일하게 수행하였다.
4로 적정된 PBS를 이용하여, 2×104/ml이 되도록 희석하고 HCEE를 0, 25, 50, 100 μg/ml의 농도가 되게 균액과 섞어주었다. 이 용액을 37℃에서 0, 2, 4, 8시간 동안 배양하였고, 배양 후 용액을 적절하게 희석하여 LB agar에서 spreading하여 bacterial colony forming unit(CFU)를 측정하였다.
cells/well) 에 분주한 후, HCEE를 0, 25, 50 and 100 μg/ml의 농도가 되게 주입한 후, 4시간 동안 배양하였다. 이 후 세균을 MOI 20이 되게 감염한 후, 2, 4, 8시간 동안 배양하였다. 배양이 끝난 후, 50 μl의 상등액을 채취하여 Griess reaction 방법으로 NO농도를 측정하였다.
이를 위해 0, 25, 50, 100 μg/ml농도의 HCEE 를 4시간 동안 탐식세포와 배양한 후, S. typhimurium을 MOI 20으로 감염시켰다.
이에 따라 HCEE가 탐식세포를 활성화시켜 간접적으로 S. typhimurium에 대한 항균효과를 가지는지 알아보기 위해 RAW 264.7 세포에 HCEE가 0, 25, 50, 100 μg/ml의 농도가 되도록 처리하였다.
. 이에 탐식세포 내 S. typhimurium의 증식이 억제되는 기전을 조사하기 위해, HCEE를 첨가하였을 때 세포의 NO 산생량의 변화를 측정하였다. 이를 위해 0, 25, 50, 100 μg/ml농도의 HCEE 를 4시간 동안 탐식세포와 배양한 후, S.
배양 후 세포에 탐식되지 않은 세포 외부의 균을 죽이기 위하여 기존의 배지를 30 μg/ml의 gentamicin이 포함된 RPMI 1640 + 10% FBS 배지로 교체한 후, 30분 동안 더배양하였다. 이후 감염된 세포는 PBS로 3회 washing한 후, DW를 이용하여 세포를 용해하여 세포 내 균을 LB agar에 spreading하여 균 수를 측정하였다. 세포 내 균의 증식은 균감염(MOI 20)을 수행하여 1시간 동안 배양한 후 gentamicin 을 포함한 RPMI 1640 + 10% FBS배지로 교체한 뒤, 2, 4, 8시간 동안 배양하였다.
이후 시험 그룹 별 0.1 ml의 PBS 혹은 HCEE (100 μg/ml)용액을 24시간 마다 경구를 통해 투약하였다.
탐식능의 경우, 0, 25, 50, 100 μg/ml의 HCEE가 포함된 배지 안에서 탐식세포와 세균을 30분 혹은 60분간 반응시켜 각각의 시간 동안 탐식세포가 세균을 탐식하는 양과 세균에 의한 침입되는 양을 측정하였고, 탐식세포 내 탐식된 세균의 증식 정도를 확인하기 위해 0, 25, 50, 100 μg/ml의 HCEE가 포함된 배지 안에서 동일한 양의 세균을 탐식세포에 감염시킨 후, 2, 4, 8시간 동안 배양을 통하여 세포내의 세균의 증식 정도를 확인하였다.
탐식세포를 12-well cell culture plate(1×105 cells/well) 에 분주한 후, HCEE를 0, 25, 50 and 100 μg/ml의 농도가 되게 주입한 후, 4시간 동안 배양하였다.
탐식세포에 S. typhimurium을 감염시켜 균의 침임 및 증식 양상을 측정하였다13). 균 감염 4시간 이전에 HCEE를 농도별로 주입하여 같이 배양하였다.
또한 MTT test를 수행하여 HCEE에 의한 세포 독성 유무를 관찰해본 결과 HCEE에 의한 세포독성은 100 μg/ml의 농도에서는 나타나지 않았다. 탐식세포의 형태변화와 세균에 대한 탐식능 및 탐식세포 내 증식능과의 관계를 규명하기 위하여 HCEE처리 탐식 세포에 대한 균 감염을 수행하였다. 탐식능의 경우, 0, 25, 50, 100 μg/ml의 HCEE가 포함된 배지 안에서 탐식세포와 세균을 30분 혹은 60분간 반응시켜 각각의 시간 동안 탐식세포가 세균을 탐식하는 양과 세균에 의한 침입되는 양을 측정하였고, 탐식세포 내 탐식된 세균의 증식 정도를 확인하기 위해 0, 25, 50, 100 μg/ml의 HCEE가 포함된 배지 안에서 동일한 양의 세균을 탐식세포에 감염시킨 후, 2, 4, 8시간 동안 배양을 통하여 세포내의 세균의 증식 정도를 확인하였다.
현미경하(200×)에서 coverslip을 관찰하여, 탐식세포의 형태변화를 확인하였다.
대상 데이터
현미경하(200×)에서 coverslip을 관찰하여, 탐식세포의 형태변화를 확인하였다. 100개의 탐식세 포를 무작위적으로 선택하여, 형태변화가 일어난 세포의 수를 확인하였다.
경상대학교 동물생리활성물질 자원은행에서 구입한 어성초 분말 5 g을 100 ml의 absolute ethanol을 이용하여 8시간 동안 실온에서 교반시켜 용해시켰다. 어성초 용액의 상등액을 10분 동안 5,000 rpm으로 원심분리 시킨 후, Advantec filter paper number 2(Japan)으로 여과시켰다.
마우스 탐식세포인 RAW 264.7 세포를 5% CO 2 , 37℃ 환경에서 RPMI 1640 + 10% fetal bovine serum(Gibco) 배지를 이용하여 배양하였다. 탐식세포는 실험을 수행하기 하루 전에 96-well cell culture plate에 각 well마다 1×104의 농도로 분주한 후, 5% CO2 , 37℃ 환경에서 배양하였다.
무균상태인 6-8주령, 몸무게 25±3 g의 암컷 BALB/C mice를 실험에 사용하였다.
데이터처리
모든 실험결과는 Student’s t-test를 이용하여 통계처리를 수행하였다.
이론/모형
감염된 mice의 생존률은 매 24시간마다 확인하였다. 모든 실험절차는 경상국립대학교의 동물윤리협의회의 규정에 의거 실험을 수행하였다.
배양이 끝난 후, 50 μl의 상등액을 채취하여 Griess reaction 방법으로 NO농도를 측정하였다.
HCEE가 탐식세포에 독성을 가지는지 알아보기 위해, 0, 25, 50, 100 μg/ml 농도의 HCEE와 탐식세포를 8시간 동안 96-well cell culture plate에서 배양하였다. 세포의 생존율은 MTT cleavage assay를 통하여 확인하였다.
성능/효과
typhimurium을 MOI 20으로 감염시켰다. 2, 4, 8시간 뒤에 배지의 상층액과 Griess용액을 반응시킨 후 NO값을 측정해 본 결과, 균을 감염시킨 실험군이 균을 감염시키지 않은 대조군에 비하여 NO 산생량이 크게 증가함을 확인 할 수 있었다(Fig. 4). 또한 균을 감염시킨 실험군 중에서 8시간째에 HCEE를 처리한 군이 HCEE를 처리하지 않은 군에 비해 NO산생량이 감소하는 양상을 보이고는 있으나, 유의적인 차이를 보이지 않았다(Fig.
3A). HCEE 처리에 의한 탐식세포 내에서 S. typhimurium의 증식 정도를 확인 해 본 결과 HCEE의 농도에 비례하여 탐식세포내 균의 증식이 감소하는 것을 관찰할 수 있었다(Fig. 3B).
typhimurium에 대한 직접적인 살균작 용과 탐식세포를 통한 항균작용은 미약한 것으로 나타났다. 또한 HCEE 추출물이 S. typhimurium의 탐식세포 감염 시시간경과에 따라 감염능 및 세포내 증식능이 감소하는 것이 확인되었다. 탐식균에 의한 사멸을 유도하는 탐식세포의 NO의 산생량에 있어서는 HCEE 추출물의 처리가 탐식세포로부터 NO 산생이 감소되어 NO를 이용한 탐식세포의 균 사멸과는 직접적 연관이 없을 것으로 추정되며, 마우스 감염시험에서 HCEE를 투약이 상당한 치료효과를 나타내어 HCEE가 S.
또한 MTT test를 수행하여 HCEE에 의한 세포 독성 유무를 관찰해본 결과 HCEE에 의한 세포독성은 100 μg/ml의 농도에서는 나타나지 않았다.
typhimurium 침입억제가 유도 되어지고, 감염의 정도가 약하게 일어날 것이라 예측할 수 있다. 또한, HCEE가 탐식세포 내 S. typhimurium의 증식이 억제됨으로서 균체의 사멸을 포함한 신체 전체적인 방어기전을 통한 치료 효과임을 짐작할 수 있다. 또한 mouse 감염실험에서 유효한 치료효과가 입증 되었던 바, 감염증에 대한 HCEE의 치료효과는 HCEE가 가지고 있는 고유한 항염증 효과로 인하여 살모넬라증의 병원성 발현에 필요한 염증을 억제시켜 치사율이 낮아지고 생체적 방어기전을 통한 치료효과가 나타나는 것으로 추정된다1-3).
본 실험 결과를 통해 HCEE가 탐식세포에의 S. typhimurium 의 침입 억제효과를 통해 유추해 볼 때, S. typhimurium의주 기생세포인 장 탐식세포의 하나인 상피세포에서의 S. typhimurium 침입억제가 유도 되어지고, 감염의 정도가 약하게 일어날 것이라 예측할 수 있다. 또한, HCEE가 탐식세포 내 S.
typhimurium의 감염증에 대한 치료효과를 검증하였다. 본 실험의 결과로서 HCEE 추출물이 탐식세포의 형태적 변화를 유도하였고, S. typhimurium에 대한 직접적인 살균작 용과 탐식세포를 통한 항균작용은 미약한 것으로 나타났다. 또한 HCEE 추출물이 S.
우선, HCEE가 RAW 264.7 세포를 활성화시키는지 알아보기 위하여 세포의 형태변화를 관찰하기 위해 탐식세포에 HCEE용액 100 μg/ml을 넣은후, 4, 8시간 동안 배양한 후 세포의 형태를 현미경하에서 관찰하였고, 그 결과 배양시간이 경과함에 따라 탐식세포의 형태적 변화가 증가 되었으며, 처리 후 8시간에 이르러 비 처리군의 형태적 변화가 5±3%인데 비하여 처리군의 형태적 변화는 52±9%에 이르렀다(Fig. 2A, B).
1 ml을 주입하 였다. 이 결과 HCEE를 투여한 실험군에서 실험 12일 동안 80%가 생존하였지만, PBS를 투여한 대조군에선 8일까지 모든 mice가 사망하였다(Fig. 5). 이를 통해 HCEE가 murine salmonellosis에 대하여 치료 효과가 있다는 것을 알 수 있었다.
5). 이를 통해 HCEE가 murine salmonellosis에 대하여 치료 효과가 있다는 것을 알 수 있었다.
4). 지금까지의 결과에서 HCEE는 S. typhimurium에 대해 직접적으로 정균 및 살균 효과를 보이지 않았으나, 탐식 세포에서 S. typhimurium에 의한 침입 및 증식이 억제되는 것을 확인할 수 있었다. 이에 in vivo실험을 통하여 과연 HCEE가 S.
typhimurium의 탐식세포 감염 시시간경과에 따라 감염능 및 세포내 증식능이 감소하는 것이 확인되었다. 탐식균에 의한 사멸을 유도하는 탐식세포의 NO의 산생량에 있어서는 HCEE 추출물의 처리가 탐식세포로부터 NO 산생이 감소되어 NO를 이용한 탐식세포의 균 사멸과는 직접적 연관이 없을 것으로 추정되며, 마우스 감염시험에서 HCEE를 투약이 상당한 치료효과를 나타내어 HCEE가 S. typhimurium에 의한 염증을 감소시키고, 또한 apoptosis를 유도함으로 인해 균을 제거함으로 이루어지는 것으로 추측된다. 본 연구를 통해 HCEE의 살모넬라증에 대한 치료효과를 확인 할 수 있었으며, 천연소재 약용자원을 활용한 난치성 세균 감염증에 대한 신약개발이 가능하고, 이의 활용은 항생제 오남용을 줄일 수 있고 국민보건 증진에 이바지 할 것이다.
탐식능의 경우, 0, 25, 50, 100 μg/ml의 HCEE가 포함된 배지 안에서 탐식세포와 세균을 30분 혹은 60분간 반응시켜 각각의 시간 동안 탐식세포가 세균을 탐식하는 양과 세균에 의한 침입되는 양을 측정하였고, 탐식세포 내 탐식된 세균의 증식 정도를 확인하기 위해 0, 25, 50, 100 μg/ml의 HCEE가 포함된 배지 안에서 동일한 양의 세균을 탐식세포에 감염시킨 후, 2, 4, 8시간 동안 배양을 통하여 세포내의 세균의 증식 정도를 확인하였다. 탐식세포에 대한 S. typhimurium 탐식 정도를 측정한 결과, 30분까지는 HCEE처리군에서 S. typhimurium의 침입이 HCEE비처리 대조군에 비해 탐식이 더 많이 일어나는 양상을 보였으나, 60분에서는 S. typhimurium의 탐식이 HCEE 의 용량이 증가함에 따라 감소하는 것을 확인할 수 있었다(Fig. 3A). HCEE 처리에 의한 탐식세포 내에서 S.
후속연구
앞서 설명한 바와 마찬가지로 탐식된 세포 내균의 사멸에 관여하는 숙주세포의 공격인자는 NO 산생 또는 lysosome에 의한 공격을 예로 들 수 있는데 본 실험에서 수행한 균 감염 후 탐식세포의 NO 산생 능력은 HCEE처리군에 있어서 NO의 산생이 비처리 대조군에 비해 저하됨이 확인 되었던 바, 이는 탐식능 및 세포내 증식능의 저하에 따른 숙주세포의 반응에 의함임을 추정할 수 있다. 따라서 HCEE처리 탐식세포의 균 사멸 효과는 O2 산생, lysosome의 활성에 따른 균 사멸, 숙주세포의 apoptosis 유도에 의한균 사멸 등을 고려할 수 있겠으나, 이에 대한 해석을 위해서는 더 많은 연구가 필요할 것으로 사료된다. 본 실험을 통해서 천연소재 약용자원인 HCEE의 추출물이 난치성 인수공통 전염병의 대표적인 살모넬라증에 대하여 유효한 치료효과가 있음이 동물 실험을 통해 확인 되었으며, 이는 어성초 추출물 자체로서의 제품 개발과 추출물에 대한 성분 분석을 통한 신약개발이 가능할 것이며 전세계적으로 문제가 되고 있는 항생제 오남용 및 잔류 문제를 줄이는데 도움이 될 것이다.
따라서 HCEE처리 탐식세포의 균 사멸 효과는 O2 산생, lysosome의 활성에 따른 균 사멸, 숙주세포의 apoptosis 유도에 의한균 사멸 등을 고려할 수 있겠으나, 이에 대한 해석을 위해서는 더 많은 연구가 필요할 것으로 사료된다. 본 실험을 통해서 천연소재 약용자원인 HCEE의 추출물이 난치성 인수공통 전염병의 대표적인 살모넬라증에 대하여 유효한 치료효과가 있음이 동물 실험을 통해 확인 되었으며, 이는 어성초 추출물 자체로서의 제품 개발과 추출물에 대한 성분 분석을 통한 신약개발이 가능할 것이며 전세계적으로 문제가 되고 있는 항생제 오남용 및 잔류 문제를 줄이는데 도움이 될 것이다.
typhimurium에 의한 염증을 감소시키고, 또한 apoptosis를 유도함으로 인해 균을 제거함으로 이루어지는 것으로 추측된다. 본 연구를 통해 HCEE의 살모넬라증에 대한 치료효과를 확인 할 수 있었으며, 천연소재 약용자원을 활용한 난치성 세균 감염증에 대한 신약개발이 가능하고, 이의 활용은 항생제 오남용을 줄일 수 있고 국민보건 증진에 이바지 할 것이다.
질의응답
핵심어
질문
논문에서 추출한 답변
어성초는 국내, 일본 및 중국 등과 같은 나라에서 오랜 기간 동안 무엇으로 사용되고 있는가?
따라서 이러한 문제를 해결하고자 많은 국가에서 항생물질 대체제의 개발에 박차를 가하고 있으며 천연소재 자원을 이용한 대체제에 대한 연구가 활발히 진행되고 있다. 어성초는 국내, 일본 및 중국 등과 같은 나라에서 오랜 기간 동안 소독제, 이뇨제, 해열제로 사용되었으며, 항균제, 항바이러스 제제, 항염증 제제로서 사용되어왔다1-3). 어성초는 methyl nonyl ketone, Caryophyllene, bornyl acetate, α-pinene, β-pinene, limonene 등의 화학 물질을 포함하고 있다.
어성초는 무슨 화학 물질을 포함하고 있는가?
어성초는 국내, 일본 및 중국 등과 같은 나라에서 오랜 기간 동안 소독제, 이뇨제, 해열제로 사용되었으며, 항균제, 항바이러스 제제, 항염증 제제로서 사용되어왔다1-3). 어성초는 methyl nonyl ketone, Caryophyllene, bornyl acetate, α-pinene, β-pinene, limonene 등의 화학 물질을 포함하고 있다. 이들 화학물질들은 그람 양성균인 Staphylococcus aureus와 Sarcina ureae에 대한 항균효과가 보고되었다4).
어성초에 포함된 화학물질들은 무엇에 대한 항균효과가 보고되었는가?
어성초는 methyl nonyl ketone, Caryophyllene, bornyl acetate, α-pinene, β-pinene, limonene 등의 화학 물질을 포함하고 있다. 이들 화학물질들은 그람 양성균인 Staphylococcus aureus와 Sarcina ureae에 대한 항균효과가 보고되었다4). 또한, 어성초는 소염효과, 항균효과, 비만세포 활성효과, 항과민효과, NO 생성 조절효과 등을 가지고 있다고 보고되었다5-8).
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