[논문]민들레 추출물의 항산화 활성 및 세포독성 효과

허성일; 왕명현

민들레 추출물의 항산화 활성 및 세포독성 효과
Antioxidant Activity and Cytotoxicity Effect of Extracts from Taraxacum mongolicum H. 원문보기

생약학회지, v.39 no.3 = no.154, 2008년, pp.255 - 259

Abstract ▼ AI-Helper

This study was investigated antioxidant and anticancer activity of water, methanol extract from upper and root part of Taraxacum mongolicum H. Total phenolic compound contents of methanol and water extracts from upper part were $51.95{\pm}0.18$ mg/g and $48.16{\pm}0.89$ mg/g respectively, and total flavonoid compound contents were estimated as $20.57{\pm}1.12$ mg/g in methanol extract and $6.55{\pm}1.20$ mg/g in water extract. $EC_{50}$ values for DPPH radical scavenging activity of methanol and water extract from upper part were $138.47{\pm}3.78{\mu}g/mL$ and $204.38{\pm}5.32{\mu}g/mL$, and methanol and water extracts from root part were as $512{\pm}8.11{\mu}g/mL$ in methanol extract and $1315.05{\pm}11.98{\mu}g/mL$ in water extract. Reducing power and hydroxyl radical $({\bullet}OH)$ scavenging activity estimated that methanol extract of each part were higher than water extracts. The cell viability showed that the methanol extract from upper part had a cytotoxicity in the growth of colon carcinoma cell (44.58%). Both water extract $(51.97{\pm}11.43%)$ from upper part and methanol $(53.46{\pm}19.77%)$, water $(52.79{\pm}13.53%)$ extracts from root part had quite higher cytotoxicity than that of methanol extract $(88.25{\pm}2.02%)$ from upper part. Based on the results, It was suggested that the methanol extract of Taraxacum mongolicum H. were potential materials for use as functional food and medicine.

주제어

AI 본문요약
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문제 정의

하지만 토종민들레는 서양민들레의 왕성한 번식력에 밀려 토종 민들레를 찾아 보기 매우 어려운 실정이다. 이에 토종민들레의 항산화 및 항암효과를 평가하여 활용가치를 높이며, 그 우수성을 알리고자 한다.

제안 방법

02% 로 낮게 나타났다. 각 추출물들은 293 (정상 신장 세포) 세포를 이용하여 세포에 대한 독성을 나타내는지를 검토하였다. 지상부, 뿌리의 메탄올, 물 추출물 모두에서 정상 신장 세포는 세포생존율 110.
민들레 부위별 추출물의 총 페놀성 및 플라보노이드 화합물 함량 - 민들레는 지상부와 뿌리로 나누어 메탄올(methanol)과 물 (distilled water)을 이용하여 추출하였다 (Table I). 추출 수율은 지상부 메탄올, 물 추출물이 각각 8.
암세포주 및 배양조건 - 항암활성 실험에 이용된 HT-29(colon carcinoma cell, 결장암세포), NCI-N₈₇ (stomach carcinoma cell, 위암세포), 293 (normal kidney cell, 정상 신장세 포)은 10% FBS (fetal bovine serum, Gibco, Roeville, MD, USA)와 1% penicillin-streptomycin (100 IU-100 pig/ mL)이 첨가된 RPMI 1640 medium에 접종하여 37℃, 5% CO₂, humidified atmosphere에서 배양하였다. 각각의 세포들은 2~3 일간 배양한 후 배지를 제거하고 PBS (pH₇.
즉, 10, 50, 100, 500, lOOOiig/mL의 농도로 준비한 추출물 1 mL에 0.2 mM DPPH 용액 1 mL을 잘 혼합하여 25 분간 실온에 방치하고 multiplate spectrophotometer (ELx800TM, BioTek, USA)를 이용하여 515 nm 흡광도를측정하고 아래와 같이 계산하여 EC₅₀ 값으로 나타내었다.
총 플라보노이드 화합물 함량 - 1 mg/mL의 농도로 추출물을 제조하여, 20 mg/mL의 aluminum trichloide을 함유하는 100% 에탄올 (ethanol)용액 잘 혼합하여 40 분 동안 실온에서 반응시 킨 후 uV/vis 분광도계 (Optizen 2120UV; Mecasys, Korea)를 이용하여 415 nm에서 흡광도를 측정하였다. 이때 총 플라보노이드 함량은 quercetin을 이용하여 작성한 표준곡선으로부터 함량을 구하였다.
즉, 1 mg/ mL로 조제한 추출물 1 mL에 Folin-Denis 시액 2mL을 잘 넣고, 35%의 탄산나트륨 (Na2CO₃) 용액을 2 mL을 넣은 다음 잘 혼합하여 실온에서 30 분간 반응 후, 분광도계 (ELx800, Biotec, USA)를 이용하여 750nm에서 흡광도를 측정하였다. 측정된 흡광도는 탄닌산 (tannic acid)을 이용호} 여 작성된 표준곡선을 이용하여 검량선을 작성하여 종 페놀성 화합물의 함량을 계산하였다.

대상 데이터

실험재료 - 본 실험에 사용한 민들레는 2007년 10월에 정선군에서 채취된 것을 구입하여 사용하였으며, 시료의 추 줄 방법은 시료 중량 대비 20배의 증류수 및 메탄올을 가하여 24시간 동안 실온에서 침지하여 추출하였으며, 각 추출물은 Advantec No. 2 여과지로 여과하여 감압 농축하여 본 실험의 시료로 사용하였다.

이론/모형

OH 소거능 측정 - Hydroxyl radical 소거능 측정은 Fenton 반응으로 생성된 . OH에 의해 핵산의 구성당인 deoxyribose가 분해되는 정도를 TBA 발색법을 이용하여 즉정한다. 시험관에 각 부위별 추출물 0.
전자공여능 측정 - 시료의 전자공여능은 l, l-diphenyl-2- pyctylhydrazyl (DPPH, Sigma)을 이용한 방법으로 측정하였다. 즉, 10, 50, 100, 500, lOOOiig/mL의 농도로 준비한 추출물 1 mL에 0.
총 페놀성 화합물 함량 - 총페놀성 함량은 페놀성 물질이 phosphomolybdic acid와 반응하여 청색으로 발색되는 것을 이용한 Folin-Denis 방법에 따라 분석하였다. 즉, 1 mg/ mL로 조제한 추출물 1 mL에 Folin-Denis 시액 2mL을 잘 넣고, 35%의 탄산나트륨 (Na2CO₃) 용액을 2 mL을 넣은 다음 잘 혼합하여 실온에서 30 분간 반응 후, 분광도계 (ELx800, Biotec, USA)를 이용하여 750nm에서 흡광도를 측정하였다.
환원력의 측정 -Moreni 등방법에 의거하여 시료의 환원력을 측정하였다. 즉, 각각의 농도별로 조제한 시료0.

성능/효과

⑸ 부위별 민들레 추출물의 항산화 효과는 DPPH radical 소거능, 환원력, -OH radical 소거능의 총 3가지 방법에 의해 측정되어 결과를Table Ⅱ에 나타내었다. DPPH radical 소거능은 지상부 메탄올 추출물에서 EC₅₀ 값이 138.47±3.78 uL/mL로 가장 높게 나타났으며, 지상부 물 추출물이 204.38±5.32 μg/mL로 나타났으며, 뿌리 메탄올, 물 추출물에서 512.27± 8.11 (ig/mL, 1315.05± 11.98 uL/ml로 나타났다. 이와 같은 결과는 페놀성 및 플라보노이드 함량과 비례적으로 나타났는데 이 같은 결과는 DPPH radical 소거능이 페놀성 화합물의 함량과 밀접한 관계를 나타낸 것이라고 사료된다.
5 曲/tnL을 사용하였다. HF29 (결장암 세포:에 대해 민들레 추출물의 항암효과는 지상부의 메탄올 추출물에서 세포 생존율 44.58±4.05%로 가장 높게 나타났으며 , 뿌리 메탄올 추출물에서 61.04±22.12%로 나타났다. NCI-N₈₇ (위암세포)에 대한 항암효과는 지상부 물 추출물, 뿌리 메탄올, 물 추출물에서 세포 생존율 51.
12%로 나타났다. NCI-N₈₇ (위암세포)에 대한 항암효과는 지상부 물 추출물, 뿌리 메탄올, 물 추출물에서 세포 생존율 51.97±11.43%-53.46± 19.77%로 비슷하게 나타났으며, 결장암세포에서 높은 항암 활성을 나타낸 지상부 메탄올 추출물에서는 88.25±2.02% 로 낮게 나타났다. 각 추출물들은 293 (정상 신장 세포) 세포를 이용하여 세포에 대한 독성을 나타내는지를 검토하였다.
민들레 지상부 메탄올 추출물의 페놀성 화합물의 함량은 51.95 ±0.18 mg/g으로 가장 높게 나타났으며, 지상부 물 추출에서 48.16±0.891/§으로 나타났다 (Table I). 민들레 뿌리 메탄올 추출물에서 23.
16mg/g으로 가장 낮게 나타났다. 민들레의 지상부가 뿌리 보다 페놀성 화합물을 많이 함유하는 것으로 보여지며, 각 부위별 메탄올 추출물에서 페놀성 함량이 더 높은 것으로 나타났다. 페놀성 화합물에 속하는 플라보노이드 함량은 지상부의 메탄올 추출물에서 20.
31%로 나타났으며, 이는 추출물이 세포독성을 갖지 않는다는 것을 나타낸다. 민들레추출물은 정상세포에 대해 독성을 나타내지 않았으며, 지상부 메탄올 추출물은 결장암세포에 대해 높은 항암효과를 나타냈다. 또한 위암세포에 대해서는 지상부의 메탄올, 물 추출물이 항암활성을 나타내었으며, 이는 민들레가 결장암 및 위암에 대해 항암효과를 갖고 있다고 사료된다.
94%로 나타났다. 부위별 메탄올 추출물에 비해 물 추출물에서 추출 수율은 높았으며 뿌리 추출물이 지상부 추출물에 비해 비교적 높았다. 총 페놀성 화합물은 항산화 효과와 밀접한 관계가 있으며, 식물계에 널리 분포되어 있는 페놀성 물질은 다양한 구조와 분자량을 가지며 이것은 단백질처럼 거대분자와 결합하여 항산화, 항균, 항암 등의 생리활성 기능을 가지는 것으로 보고 되었다.
민들레의 부위별 추출물 100 ug/mL, 500(ig/mL의 농도에 대한 환원력 측정 결과는 Table IT와 같다. 전자공여능 즉 DPPH radical 소거능과 유사한 경향으로 주줄물의 농도가 증가할수록 환원력도 증가하였다. 지상부 메탄올 추출물 500(ig/mL의 농도에서 0.
전자공여능 즉 DPPH radical 소거능과 유사한 경향으로 주줄물의 농도가 증가할수록 환원력도 증가하였다. 지상부 메탄올 추출물 500(ig/mL의 농도에서 0.43으로 환원력이 가장 높게 나타났으며, 부위와 관계없이 메탄올 추출물에서 비교적 높게 나타났으며, 물 추출물에서 낮게 나타났다. Hydroxyl radical (.
각 추출물들은 293 (정상 신장 세포) 세포를 이용하여 세포에 대한 독성을 나타내는지를 검토하였다. 지상부, 뿌리의 메탄올, 물 추출물 모두에서 정상 신장 세포는 세포생존율 110.07-123.31%로 나타났으며, 이는 추출물이 세포독성을 갖지 않는다는 것을 나타낸다. 민들레추출물은 정상세포에 대해 독성을 나타내지 않았으며, 지상부 메탄올 추출물은 결장암세포에 대해 높은 항암효과를 나타냈다.
민들레 부위별 추출물의 ・OH radical 소거능은 Table Ⅱ에 나타내었다. 지상부의 메탄올 추출물에서 92.21%, 뿌리의 메탄올 추출물에서 91.61 %로 높게 나타났으며, 이는 대조군으로 사용된 a- tocopherol (87.42%)에 비해 더 높은 소거능을 나타났다.
I). 추출 수율은 지상부 메탄올, 물 추출물이 각각 8.54%, 19.28%로 나타났으며, 뿌리 메탄올, 물 추출물이 각각 8.45%, 31.94%로 나타났다. 부위별 메탄올 추출물에 비해 물 추출물에서 추출 수율은 높았으며 뿌리 추출물이 지상부 추출물에 비해 비교적 높았다.
민들레의 지상부가 뿌리 보다 페놀성 화합물을 많이 함유하는 것으로 보여지며, 각 부위별 메탄올 추출물에서 페놀성 함량이 더 높은 것으로 나타났다. 페놀성 화합물에 속하는 플라보노이드 함량은 지상부의 메탄올 추출물에서 20.57±1.12 mg/g으로 다른 부위 및 다른 용매 추출물 보다 높게 나타났으며 지상부 물추출물 (6.55 ±1.20 mg/g), 뿌리 메탄올 추출물 (0.54±0.03 mg/g), 뿌리 물 추출물 (0.38±0.05 mg/g)순으로 나타났다. 이는 추출물의 페놀성 함량에 비례적으로 지상부의 메탄올 추출물에서 가장 높게 나타났으며 , 뿌리 보다는 지상부 추출물에서 높게 나타났다.

후속연구

하지만 유럽을 비롯한 서양에서는 예전부터 식품 및 약용으로 민들레를 이용하여 왔으나, 국내에서는 민들레의 우수한 효능에도 불구하고 이용가치가 낮게 평가되고 있다. 추출물 단위가 아닌 민들레의 생리활성 및 약리성을 갖는 물질의 연구가 더욱더 요구되며, 또한 이를 통해 기능성 식품 및 의약품 소재로 개발할 수 있는 다방면의 연구가 필요할 것이다.

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표제어: PCR

동의어: Packet Collision Rate

용어 설명 출처 목록 (6)

용어 설명: PCR은 세균 특이성이 있는 primer를 이용하여 적은 수의 세균이 있을지라도 쉽게 검출할 수 있는 유용한 방법이며, 이를 이용하여 구강 내 치면세균막이나 타액에서 직접 세균을 검출할 수 있게 되었다[8].

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