[논문]두충 추출물 투여와 트레드밀 운동이 골다공증 유발 백서의 골대사에 미치는 영향

윤석주; 김경윤; 김계엽; 남기원; 심기철; 김은정; 정현우; 김형우; 김기도

두충 추출물 투여와 트레드밀 운동이 골다공증 유발 백서의 골대사에 미치는 영향
Effects of Eucommia Ulmoides Oliver and Treadmill Exercise on the Osteoporosis of Rats Caused by Glucocorticoid Induction 원문보기

동의생리병리학회지 = Journal of physiology & pathology in Korean Medicine, v.22 no.4, 2008년, pp.884 - 890

윤석주 (동신대학교 물리치료학과) , 김경윤 (동신대학교 물리치료학과) , 김계엽 (동신대학교 물리치료학과) , 남기원 (동신대학교 물리치료학과) , 심기철 (동신대학교 물리치료학과) , 김은정 (동신대학교 물리치료학과) , 정현우 (동신대학교 한의학과) , 김형우 (동신대학교 한의학과) , 김기도 (동신대학교 물리치료학과)

Abstract ▼ AI-Helper

This study classified 40 of 10 weeks-old male Sprague Dawley rats which have osteoporosis caused by glucocorticoid(GC) induction into four groups of 10 rats and made the subjects medicated them Eucommia ulmoides Oliver and participate in treadmill exercise. Group I was non-treatment after GC induction; Group II was treadmill exercise after GC induction; Group III was Eucommia ulmoides Oliver feeding after GC induction; Group IV was treadmill exercise and Eucommia ulmoides Oliver feeding after GC induction. In the bone mineral density and bone strength test, there was a statistically significant difference between the group I, II, III compared to group IV(p<0.05). In the osteocalcin level as one of bone formation indexes, there was a statistically significant difference between the group I, II, III compared to group IV(p<0.05). In respect to the calcium there was a statistically significant difference between group I, II, III compared to group IV(p<0.05). In respect to histological findings, the group IV showed mild femur disruption and lytic change on femur section. The above results suggests that Eucommia ulmoides Oliver medicated and treadmill exercise is effective to prevention and treatment of osteoporosis.

주제어

AI 본문요약
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문제 정의

Kasperk 등29)의 연구에서 methylprednisolone, dexamethasone, prednisone를 각각 사람 조골세포에 배양하였을 때 osteocalcin 분비는 모든 당질 코르티코이드에 의하여 억제 되었지만, 콜라겐형성은 methylprednisolone과 dexamethasone의해서만 억제되었다고 보고하였다. 따라서 본 연구에서는 골대사에 중요한 영향을 미치는 methylprednisolone을 사용하여 골다공증을 유발하였다. 당질 코르티코이드는 조골세포' 칼슘' 성호르몬의 합성을 억제하는 역할을 한다.
따라서 본 연구에서븐 당질 코르티코이드를 이용하여골다공증을 유발하고 두충 투여와 트레드밀 운동이 골대사에 미치는 영향을 알아보기 위하여 골의 밀도 및 강도를 관찰하고 혈액학적 분석 및 조직학적 분석을 통하여 생약제제의 식이와 유산소 운동이 골다공증 예방 및 치료의 효율성을 평가하는데 중요한 자료로 제공하고자 한다.

가설 설정

C : Eucommia ulmoides Oliver feeding after GC induction. D : Treadmill exercise and Eucommia ulmoides Oliver feeding after GC induction.
Ⅱ : Treadmill exercise after GC induction. Ⅲ : Euajjumia uljnjides Oliver feeding after GC induction. Ⅳ : Treadmill exercise and Eucommia ulmoides Oliver feeding after GC induction.

제안 방법

Nishimura와 Ikuyama끄의 방법에 따라 methylprednisolone (Depo-medrol, Upjohn, USA)의 당질코르티코이드를 체중 200 g 당 1 mg의 용량으로 3주간 매일 피하에 주사하였다.
Osteocalcin 측정을 위한 시약으로 Osteocalcin RIA kit (osteocalcin, Radim Co., Italy)를 사용하여 방사면역 측정법 (radioimmunoassy) 에 의해 y- counter (Hewlett Packard, USA) 로 측정하였으며, Calcium 측정을 위한 시 약(ELITECH. Division of SEPPIM S.A, France)으로 혈청 중의 Calcium 활성도를 분석하였다.
있다38). 골다공증에서 골의 강도를 알아보기 위하여 장력측정기를 이용한 실험이 골다공증의 판단에 의미가 있을 것으로사료되어 3-point bending test를 실시하여 골절강도를 측정하였다. 본 연구에서는 각 실험군간의 비교에서 I 군에 비해 II군, m 군, IV군에서 골강도가 증가하였으며, 특히 트레드밀 운동과 두충식이를 병행한 IV군이 통계적으로 유의한 차이를 보였다.
당질 코르티코이드(Glucocorticoid; -GC)를 3주간 피하주사하여 유발뙨 골다공증 백서를 대상으로 6주간 두충투여와 트레드밀 운동 후 골밀도 및 골강도 검사, 혈액학적 검사, 조직학적검사를 통하여 두충과 트레드밀 운동이 골다공증 예방 및 치료에 미치는 영향을 관찰하였다. 연구결과 골다공증 유발백서에서트레드밀 운동 및 두충투여는 골밀도 및 골강도 증가에 효과가있었으며, 특히 트레드밀 운동과 두충투여를 병행하여 실시할 때골대사에 미치는 영향은 유의하게 나타나 골다공증 예방 및 치료에 효과촄일 것으로 사료된다.
대퇴골은 혈액 채취 후 즉시 적출하고 생리 식염수로 세척하여 물기를 제거하고, 대퇴골을 10% 포르말린으로 고정 후 alcohol 용액으로 지방을 제거한 후 탈회용액(5% formic acid, 8.5% HCL, 7% ALCh의 혼합용액)에서 약 10일간 탈회한 후, 통상의 조직 처리과정을 거쳐 파라핀 포매를 한 다음 4 ㎛의 두께로 표본을 만들고 H & E 염색을 통해 대퇴골체의 파골세포를관찰하였다.
약재에 증류수 4, 000 ml를 다시 가한 후 동일한 방법으로 2차 추출액을 얻은 후, 1차 추출액과 2차 추출액을 합하고 rotary evaporator (Eyela, Japan) 로 감압농축하여 65 g의 최종 추출물을 얻었다. 두충 추출물 100mg을 증류수 10 ml에 용해하여 투충검액을 만들어 10 mg/100 g의 용량으로 매일 1회, 주 5회, 6주간구강 투여하였다.
고형사료와 물은 자유롭게 먹도록 하였다. 실험군은 골다공증 유발 후 아무런 처치를 하지 않은 I 군(n=10), 골다공증 유발후 트레드밀 운동을 실시한 II군(11=10), 골다공증 유발 후 두충을 투여한 HI군(n=10), 골다공증 유발 후 두충 투여와 트레드밀운동을 병행한 IV군(n=10)으로 나누었다(Table 1).
자체 제작된 폭 12 on의 레 인 5개가 설치된 동물용 트레드밀에서 6주간 실시하였다. 운동부하는 점증적 과부하의 원리를 이용하여/ 4주째부터는 28 m/min, 30 min/day, 5 day/week 로 실시하였다23).

대상 데이터

두충 추출물은 두충의 건조된 수피를 구입하여 제조하였다. 두충 500 g에 증류수 4, 000 ml를 가하고 직화상에서 2시간 가열추출 후 약재를 분리하고 여과하여 1차 추출액을 얻었다.
생후 10주령의 체중 250 ± 20 g 내외의 Sprague - Dawley계백서 40마리를 각 군당 10마리씩 4군으로 분류하여 사육하였다. 사육실의 온도는 25 ± 1℃, 습도 55 ± 10%를 유지하였으며, 명 암은 12시간 주기로 하였다.

데이터처리

All value are showed Mean±SD. Tested by one-way ANOVA and multiple comparison test (*:p<0.05). Ⅰ : Non-treatment after GC induction.
for windows®을사용하였다. 각 실험 결과 값은 평균과 표준편차로 나타내었으며, 골밀도 및 골강도 변화, 혈액학적 검사에서 각 군간 유의성검정은 one-way ANOVA를 실시하였고, 사후 검정은 Tukey 방법을 사용하였다. 통계학적 유의수준은 a=0.

이론/모형

대퇴골 강도는 직경 3 mm의 탐침이 부착된 Universal testing machine(CR-100D/ Sun Scientific Co., Japan)을 이용하여 three point bending 방법으로 측정하였다.
대퇴골 밀도 측정을 위해 대퇴골의 부피는 Wasnicl#)의 방법에 따라 다음 식에 의해 구한 다음 밀도를 측정하였다25).

성능/효과

H&E 염색을 통해 대퇴골의 조직을 관찰한 결과 I 군의 대퇴골 단면에서 해면골 골량의 감소와 함께 쩔형적인 골 파괴와융해의 변화를 관찰할 수 있었다. 또한 골아세포가 매우 드물게관찰되었으며 부위에 따라서는 많은 수의 파골세포의 증식과 활성으로 인한 골침식이 관찰되었다.
또한 골아세포가 매우 드물게 관찰되었으며부위에 따라서는 많은 수의 파골세포의 증식과 활성으로 인한골침식이 관찰되었다. 그러나 IV군은 다른 실험군들에 비해 경미한 골파괴와 융해의 변화를 보여 상태가 호전됨을 관찰할 수 있었다(Fig. 3).
당질 코르티코이드를 주사 한 각 실험군 대퇴골 단면에서해면골 골량의 감소와 함께 전형적인 골 파괴와 융해의 변화를관찰할 수 있었다. 또한 골아세포가 매우 드물게 관찰되었으며부위에 따라서는 많은 수의 파골세포의 증식과 활성으로 인한골침식이 관찰되었다.
골밀도는현재 가장 널리 사용되고 있는 골다공증의 지표로 알려져 있으는 골절이 일어날 수 있는 가장 나쁜 지표가 골밀도의며, D*) iez'저하라고 하였다. 본 연구결과 각 실험군간의 비교에서 I 군에비해 II군, HI군, IV군에서 골밀도가 증가하였으며, 특히 트레드밀 운동과 두충식이를 병행한 W군이 통계적으로 유의한 차이를보였다. 이와 같은 결과는 두충이 난소 제거 수술을 받은 쥐에게간접적으로 골밀도를 나타내 주는 스폰지골의 면적을 증가시킨보고35)와 두충이 난소기능 저하로 인한 골다공증에 대한 효과%) 와 유사한 결과를 보였다.
연령이 증가함에 따라 장관에서 칼슘의 흡수가 감소하고, 골다공증이 있는 경우에는 장관에서 칼슘의 흡수율이 더욱 감소하여 체내에 칼슘이 부족하게 되고 칼슘의 섭취가 일정수준 이하로떨어지면 골 소실이 발생하게 되며, 이러한 칼슘과 골다공증의관계는 이미 잘 알려져 있다45). 본 연구에서 혈중 칼슘농도는 I 군에 비해 II군, Ⅲ군, IV군에서 혈중 칼슘농도가 증가하였으며, 각 실험군과의 비교에서 트레드밀 운동과 두충식이를 병행한 Ⅳ.군이 통계적으로 유의한 차이를 보였다.
그 기전은 골대사에서 골흡수의 증가로 인해 골밀도가 감소하는 경우, 이차적으로 골아세포의 활동이 증가하게 되는데, 이때 골아세포에서 osteocalcin 합성이 증가되는 것으로 보고되고 있으며41), Morrise)는 골다공증 유발 후 osteocalcin이 증가된다고 하였다. 본 연구에서 혈청중 osteocalcin 농도는 각 실험군간의 비교에서트레드밀 운동과 두충식이를 병행한 IV군이 통계적으로 유의한차이를 보였다. 이러한 결과는 폐경 전 여성들의 osteocalcin 농도가 폐경 후 40% 증가하였다는 연구결과와43) 부합되며, 골다공증 유발 후 녹각을 투여한 실험군이 골다공증 유발군에 비해 osteoclacin이 증가하였다는 연구결과와44)도 욀치한다.
골다공증에서 골의 강도를 알아보기 위하여 장력측정기를 이용한 실험이 골다공증의 판단에 의미가 있을 것으로사료되어 3-point bending test를 실시하여 골절강도를 측정하였다. 본 연구에서는 각 실험군간의 비교에서 I 군에 비해 II군, m 군, IV군에서 골강도가 증가하였으며, 특히 트레드밀 운동과 두충식이를 병행한 IV군이 통계적으로 유의한 차이를 보였다. 황명훈 등39)의 연구에 의하면 골강도는 골다공증 유발 후 운동군들에서 대조군에 비해 유의한 증가를 보였다고 발표하여 본 연구결과와 어느 정도 부합하였다.
미치는 영향을 관찰하였다. 연구결과 골다공증 유발백서에서트레드밀 운동 및 두충투여는 골밀도 및 골강도 증가에 효과가있었으며, 특히 트레드밀 운동과 두충투여를 병행하여 실시할 때골대사에 미치는 영향은 유의하게 나타나 골다공증 예방 및 치료에 효과촄일 것으로 사료된다.

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저자의 다른 논문 :

표제어: PCR

동의어: Packet Collision Rate

용어 설명 출처 목록 (6)

용어 설명: PCR은 세균 특이성이 있는 primer를 이용하여 적은 수의 세균이 있을지라도 쉽게 검출할 수 있는 유용한 방법이며, 이를 이용하여 구강 내 치면세균막이나 타액에서 직접 세균을 검출할 수 있게 되었다[8].

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