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문제 정의
- 본 연구는 육계 사료에 식물추출물(Coxynil®, Growell® 그리고 Respowell®)의 첨가가 육계의 성장, 혈액 성상 그리고 조직 내 변화에 미치는 영향을 조사하고, 또한 항생제 대체효과가 가능한가를 알아보기 위하여 수행되었다. 총 40, 000수의 Ross 종 수평아리를 공시하여 34일 동안 사양실험을 실시하였으며/ 대조군(CON)으로 salinomycin-6, clopidol-25, enramycin-1 그리고 BMD-2.
- 그리고 Operculina turpethum 는 얄랍나무로도 알려져 있으며 항산화활성이 우수하다μ]. 본 연구의 목적은 항균활성과 항산화활성이 우수한 상기의 식물 추출물들을 주성분으로 하여 제제화한 Coxynil®(Cinnamomum camphord), Growell® (Zingiber officinale), 그리고 Respowell® (Operculina turpethum)의 복합 첨가가 육계의성장에 미치는 영향과 항생제대체제로서의 효과에 대하여 조사하고자 하였다.
제안 방법
- 실험에 사용한 백신은 NDV백신과 IBDV백신으로 각각 2회에 걸쳐 음수백신을 실시하였다. 1차 IBDV음수백신은입추 전 부화장에서 실시하였고 15일령에 2차 IBDV음수백신을 실시하였다. 또 10일령에 1차 NDV음수백신을 실시하였고 21일령에 2차 NDV음수백신을 실시하였다.
- 나타내었다. 사료 섭취량은 체중 측정 시에 사료 급여량에서 잔량을 감한 값으로 하였고, 사료섭취 량과 실험 종료 시의 증체량을 근거로 사료요구율을 산출하였다.
- 사양 실험 종료 시에 평균 체중에 가깝고 육안으로 관찰하여 건강상태가 양호한 닭을 군별로 4수씩 선별하고 각 장기별로 조직 검사를 실시하였다(Fig. 1). 장, 허파, 심장, 신장, 사낭, 간, 뇌, 호흡기관 및 파브리키우스 소낭 조직의 사진 비교 분석 결과, CON군과 NP군 간의 유의한 차이를 보이지 않았다.
- 22일령 부터 전기사료를 중단하고 후기사료로 출하 시까지 급여하였다. 시험 기간 동안 사료와 물은 자유 섭취하도록 하였고, 주간 16시간과 야간 8시간으로 정상적인 점등관리를 실시하였다. CON군은 11일령에 독시싸이클린 클리닝을 하였으며, 25일령에는 암푸롤리움과 설파제로 콕시듐에 대한 클리닝을 실시하였다.
- 식물추출물의 첨가가 육계의 체액성 면역반응에 미치는 영향을 조사하기 위하여 백신접종 후에 생성되는 항체량을 분석하였다. 실험에 사용한 백신은 NDV백신과 IBDV백신으로 각각 2회에 걸쳐 음수백신을 실시하였다.
- 실험 2주차와 사양실험 종료 후에 평균체중에 가까운 개체를 실험 사육동 별로 10수씩 선별하여 익하정맥에서 5 ml 정도를 채혈한 후, 3, 000 rpm으로 20 min간 원심분리하여 혈청을 분리하였다. 혈청의 total cholesterol과 HDL-cholesterole (주)영동제약의 분석 키트을 이용하여 측정하였다.
- 또 10일령에 1차 NDV음수백신을 실시하였고 21일령에 2차 NDV음수백신을 실시하였다. 실험 2주차와 종료 시에 실험 사육동 별로 10수씩 선별하여 익하정맥에서 5 ml 정도를 채혈한 후 항체 생산량을 조사하였고, NDV와 IBDV 항체가는 영국의 Guildford사의 antibody ELISA kit를이용하여 분석을 하였다. 모든 kit는 제조회사의 지침서에 설명된 방법으로 실시하였다.
- 실험 종료 시에 CON 군과 NP 군에서 각각 4수씩 평균 체중에 가깝고 육안으로 건강해 보이는 개체를 선별하여 각 기관별 조직을 채취한 후 통상적인 처리과정을 거쳐 hematoxylin 과 eosin에 염색한 후 상호 비교하였다.
- 실험개시 후 4주 동안 2주 간격으로 각각의 사육동에서 100 수를 선별하여 개체의 체중을 측정하였고, 증체량은 시험 종료 후 출하시의 체중에서 실험 개시 시의 체중을 감한 값을 구하여 나타내었다. 사료 섭취량은 체중 측정 시에 사료 급여량에서 잔량을 감한 값으로 하였고, 사료섭취 량과 실험 종료 시의 증체량을 근거로 사료요구율을 산출하였다.
- 가능한가를 알아보기 위하여 수행되었다. 총 40, 000수의 Ross 종 수평아리를 공시하여 34일 동안 사양실험을 실시하였으며/ 대조군(CON)으로 salinomycin-6, clopidol-25, enramycin-1 그리고 BMD-2.5를 포함하는 항생제 첨가사료를 20, 000수에게 급여하였으며, 식물추출물 급여군(NP)은 항생 제대체제로 Growell India사에서 판매되는 Coxynil®, Growell® 그리고 Respowell®을 각각 0.03%, 0.035% 그리고 0.03%씩 첨가하여 20, 000수에게 급여하였다. 종료시 체중, 증체량 그리고 사료섭취량에 있어서 CON과 NP간의 유의적인 차이는 나타나지 않았으나 NP군의 사료섭 취 량이 다소 감소하는 경향을 나타내었다.
- 혈청의 total cholesterol과 HDL-cholesterole (주)영동제약의 분석 키트을 이용하여 측정하였다.
- 환경적응이 완료된 육계 40, 000수를 각각 체중이 유사하도록 10, 000수씩 4개의 동에 나누어 넣고 2개 동씩을 각각 대조군(CON)과 처리군(NP)으로 하여 사육하였다. 22일령 부터 전기사료를 중단하고 후기사료로 출하 시까지 급여하였다.
대상 데이터
- 처리군(NP)으로 하여 사육하였다. 22일령 부터 전기사료를 중단하고 후기사료로 출하 시까지 급여하였다. 시험 기간 동안 사료와 물은 자유 섭취하도록 하였고, 주간 16시간과 야간 8시간으로 정상적인 점등관리를 실시하였다.
- 갓 부화된 육계 수평아리 (Ross종) 40, 000수를 공시동물로 하여 부화 후 7일간 환경 에 적응시 킨 후 34일간 시 험사료를급여하여 사육하였다(경기도 연천 풀빛 농장). 실험사료는 sal-inomycin-6/ clopidol-25z enramycin-l, BMD-2.
- 5 등의 항생 제가 첨가된 사료(CON, 대조군)와 항생제를 첨가하지 않고 식물추출물 복합제를 첨가한 사료(NP, Natural Plant Extracts)를 제조하여 급여하였다. 사용한 식물 추출물은 인도의 Growell India사에서 시 판되고 있는 것으로 항균활성이 높은 Coxynil®과 Respowell® 그리고 항산화활성이 높은 Growell® 을 사용하였고, 각각 0.03%, 0.035% 그리고 0.03%의 비율로 사료 내에 혼합하였다. 실험사료의 배합비율은 Table 1에 나타내었다.
- 사육하였다(경기도 연천 풀빛 농장). 실험사료는 sal-inomycin-6/ clopidol-25z enramycin-l, BMD-2.5 등의 항생 제가 첨가된 사료(CON, 대조군)와 항생제를 첨가하지 않고 식물추출물 복합제를 첨가한 사료(NP, Natural Plant Extracts)를 제조하여 급여하였다. 사용한 식물 추출물은 인도의 Growell India사에서 시 판되고 있는 것으로 항균활성이 높은 Coxynil®과 Respowell® 그리고 항산화활성이 높은 Growell® 을 사용하였고, 각각 0.
- 실험에 사용한 백신은 NDV백신과 IBDV백신으로 각각 2회에 걸쳐 음수백신을 실시하였다. 1차 IBDV음수백신은입추 전 부화장에서 실시하였고 15일령에 2차 IBDV음수백신을 실시하였다.
데이터처리
- 시험에서 얻어진 자료의 통계 처리는 SAS 9.1 package의 GLM (general linear model) procedure를 이용하여 실시하였으며, Fisher's protected least significant difference (LSD)로 처리하여 평균 간의 유의성을 검정하였다.
이론/모형
- 모든 kit는 제조회사의 지침서에 설명된 방법으로 실시하였다. 또한 혈청의 IgG는 면역비탁법(TIA; turbidimetric immuno assay)으로 분석하였으며, glob-uline 비색법을 이용하여 분석하였다.
성능/효과
- 그러나 육계가 성장하여 28일령이 되었을 때에는 식물추출물 복합제를 항생 제대체제로 급여하여도 항생제를 급여한 CON군과 비교하였을 때 IBDV의 백신 효과에는 차이가 없는 것으로 나타났다. NDV 1차와 2차 음수백신에 대한 항체역가는 CON군이 NP군보다 유의성 있는 차이를 보여 NDV 백신에 대한 효과는 NP군이 CON군에 비해 낮은 것으로 나타났다(Table 4, p< 0.05). 그러나 두 군 모두 분석 키트상의 항체역가 수치는 정상 이상의 수치를 나타냈고 34일간의 시험 기간 동안 두 군 모두newcastle disease virus 및 infectious bursal disease virus 에 감염 되지 않았다.
- 실험 종료 후, 각 장기의 조직을 적출한 후에 조직 상태를 조사한 결과 CON군과 NP군 간의 큰 차이점이 발견되지 않았다. Salinomycin-6, clopidol-25, enramycin-1 및 BMD-2.5 등의 항생제를 각각 Cinnamomum amphora, Zingiber officinale 그리고 Operculina tnethiun을 주성분으로하는 Coxynil®, Growell® 및 Respowell®으로 대체하여 육계 사양실험을 실시한 결과, 상호간에 큰 차이를 나타내지 않았다. 본 연구결과를 통하여, 상기 3종류의 식물 추출물들의 복합첨가는 육계 사양시 항생제를 대체할 수 있는 것으로 사료된다.
- 05). 그러나 두 군 모두 분석 키트상의 항체역가 수치는 정상 이상의 수치를 나타냈고 34일간의 시험 기간 동안 두 군 모두newcastle disease virus 및 infectious bursal disease virus 에 감염 되지 않았다.
- 영향은 Table 4에 나타내었다. 농장에 입추하기 전 부화장에서 1차 IBDV의 음수백신을 한 후 2주 후 혈액의 IBDV 항체역가에서는 CON군이 NP군보다 항체 생성량이 유의적으로 높게 나타났지만, 2차 IBDV의 음수백신 후 2주 후 혈액의 IBDV 항체역가에서는 CON군과 NP군의 항체 생성 량은 유의적인 차이를 나타내지 않았다. 육계에 있어 6-글루칸, 효모 그리고 생균제 등과 같은 첨가제의 경우 항체 생산 반응의 개선 효과가 있는 것으로 알려져 있으나[2, 16], 본 실험에서 사용된 항산화 및 항균능력을 특징으로 하는 식물 추출물의 경우, 뚜렷한 항체 생산 반응의 개선 효과는 나타나지 않았다.
- 또한 폐사율에 있어서는 입추부터 출하 시까지 CON군이 총 1, 693수가 폐사한 반면, NP군은 1, 008수가 폐사하여 CON군에 비교하여 폐사율이 보다 낮은 결과를 나타내었다. 따라서 본 연구에 사용한 식물추출물의 급여가 일반적인 항생제 급여 사육에 비하여 생산성 저하 없이 보다 낮은 폐사율을 보여 기존 항생제의 대체제로 우수하게 적용이 가능함을 알 수 있었고, 항생제 내성 등의 부작용이 없는 천연 제제인 식물추출물을 사료에 첨가함으로써 친환경 육계 사양의 가능성을 시사하였다.
- 본 실험에서는 전 시험 기간 동안, 항생제 첨가군과 비교하여 생산성에 큰 차이가 나타나지 않았다. 또한 폐사율에 있어서는 입추부터 출하 시까지 CON군이 총 1, 693수가 폐사한 반면, NP군은 1, 008수가 폐사하여 CON군에 비교하여 폐사율이 보다 낮은 결과를 나타내었다. 따라서 본 연구에 사용한 식물추출물의 급여가 일반적인 항생제 급여 사육에 비하여 생산성 저하 없이 보다 낮은 폐사율을 보여 기존 항생제의 대체제로 우수하게 적용이 가능함을 알 수 있었고, 항생제 내성 등의 부작용이 없는 천연 제제인 식물추출물을 사료에 첨가함으로써 친환경 육계 사양의 가능성을 시사하였다.
- 항생제 대체제로서 급여하는 식물 추출물들은 그 종류나 첨가량에 따라서 다양한 효과를 나타낸다. 본 실험에서는 전 시험 기간 동안, 항생제 첨가군과 비교하여 생산성에 큰 차이가 나타나지 않았다. 또한 폐사율에 있어서는 입추부터 출하 시까지 CON군이 총 1, 693수가 폐사한 반면, NP군은 1, 008수가 폐사하여 CON군에 비교하여 폐사율이 보다 낮은 결과를 나타내었다.
- 5 등의 항생제를 각각 Cinnamomum amphora, Zingiber officinale 그리고 Operculina tnethiun을 주성분으로하는 Coxynil®, Growell® 및 Respowell®으로 대체하여 육계 사양실험을 실시한 결과, 상호간에 큰 차이를 나타내지 않았다. 본 연구결과를 통하여, 상기 3종류의 식물 추출물들의 복합첨가는 육계 사양시 항생제를 대체할 수 있는 것으로 사료된다.
- 혈액 중 total cholesterol, HDL-cholesterol, globulin 및 IgG 함량에서도 NP군과 CON군 간의 유의적인 차이는 발견되지 않았다. 실험 종료 후, 각 장기의 조직을 적출한 후에 조직 상태를 조사한 결과 CON군과 NP군 간의 큰 차이점이 발견되지 않았다. Salinomycin-6, clopidol-25, enramycin-1 및 BMD-2.
- 1). 장, 허파, 심장, 신장, 사낭, 간, 뇌, 호흡기관 및 파브리키우스 소낭 조직의 사진 비교 분석 결과, CON군과 NP군 간의 유의한 차이를 보이지 않았다. 이는 식물추출물 복합제가 각 장기 조직에 부정적인 영향을 주지 않는다는 것을 보여주는 결과이다.
- 사료요구율, 폐사율에 미치는 영향은 Table 2에 나타내었다. 전 시험 기간 동안에 있어 CON군과 NP군의 증체량 및 사료 섭취량에서 유의적 차이는 관찰되지 않았다. 주별 체중은 1주차에 CON군과 NP군이 각각 169 g/bird와 170 g/ bird로 나타났으며, 3주차까지는 각각 766 g/bird와 831 g/bird로 나타났다.
- 03%씩 첨가하여 20, 000수에게 급여하였다. 종료시 체중, 증체량 그리고 사료섭취량에 있어서 CON과 NP간의 유의적인 차이는 나타나지 않았으나 NP군의 사료섭 취 량이 다소 감소하는 경향을 나타내었다. 한편 시험기간 동안 CON군은 총 1, 693 수가 폐사하였으나 NP 군은 1, 008수가 폐사하여 식물추출물의 급여가 육계를 보다 건강하게 생육시키는 긍정 적 인 결과를 보였다.
- Globulin과 IgG 함량은 두 시험처 리구간의 유의적인 차이는 나타나지 않았다. 즉 본 실험에서 사용한 식물추출물 복합제들은 육계의 globulin과 IgG 형성의 증가 혹은 감소에는 영향을 미치지 않는 첨가 수준인 것으로 사료되었다.
- 함량에 미치는 영향은 Table 3에 나타내었다. 총 cholesterol 함량과 HDL-cholesterol에 있어서 CON군과 NP군에서 서로 유의한 차이를 보이지 않았고, 각 군별 실험 2주와 4주째 혈청분석 결과도 차이가 나타나지 않았다. 가금류에 있어 혈청 및 간 내 cholesterol의 변화는 근육조직에서 보다 빠르게 일어나는 것으로 알려져 있으며, 포유동물과는 다르게 70~90%가 간에서 합성되는 것으로 알려져 있다[6].
- 항체 생성 반응에 있어서는 NP군이 CON군에 비하여 낮은 IBDV와 NDV 항체역가를 나타내었다. 혈액 중 total cholesterol, HDL-cholesterol, globulin 및 IgG 함량에서도 NP군과 CON군 간의 유의적인 차이는 발견되지 않았다. 실험 종료 후, 각 장기의 조직을 적출한 후에 조직 상태를 조사한 결과 CON군과 NP군 간의 큰 차이점이 발견되지 않았다.
후속연구
- 이는 식물추출물 복합제가 각 장기 조직에 부정적인 영향을 주지 않는다는 것을 보여주는 결과이다. 본 실험에서는 조직 별로 현미경 사진 분석만 하고 닭의 면역 장기인 간, 비장 및 F-낭의 크기 및 무게를 분석하지 않았으나 앞으로는 식물추출물 복합제가 면역 장기들의 크기나 무게에 어떤 영향을 미칠 수 있을 지에 대한 좀 더 심도 있는 연구가 수행되어야 할 것으로 사료된다.
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