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문제 정의
- 또한 당뇨병 환자를 대상으로 한 임상연구를 통하여 고려홍삼 복용이 당대사조절 효과와 당뇨병에 수반되는 각종 자각증세에 대한 개선효과 가보고되었으며(15,16), 당뇨치료약과 홍삼의 병용 시 치료의 상승 효과 및 합병증 방지 등의 유용성을 확인한 결과 그 효능이 입증되어 당뇨치료 및 합병증 예방의 보조 요법제로서 활용 가능성이 높아지고 있다(10,17). 본 논문에서는 흑삼의 유용성과 기능성 평가 연구의 일환으로 항당뇨 기능성식품이나 의약품 원료로 사용하기 위한 소재 개발 등의 목적으로 혈당조절기능성 시험을 수행하였는데, 먼저 혈당조절기능을 확인하기에 앞서 흑삼의 증포별 ginsenoside 조성 변화를 분석하여 홍삼 등 다른 가공삼과의 비교되는 흑삼만의 특징을 규정하고자 하였고, in vivo 실험을 통하여 흑삼추출물의 혈당조절효과, 혈중 insulin농도변화 및 당대사 관련 효소들의 활성에 미치는 영향을 규명하고자 하였다.
제안 방법
- 2.5-100 µLTU/mL insulin 표준용액으로 표준곡선을 작도하고 모든 실험은 2회 반복하여 insulin 농도를 산출하였다.
- STZ+BG group은 STZ 주사 후 사육 7일째 흑삼추출물을 1 g/L의 농도로 물에 녹여 5 mg/kg body weight용량을 catheter로 매일 1회씩 경구 투여하면서 3주간 사육하였다. Control group과 STZ group은 흑삼추출물 대신 동일부피의 주사용 멸균 증류수를 매일 경구투여 하면서 3주간 사육하였다. 사육은 screen-bottomed cage 내에서 수행하고 환경조건으로 온도와 습도는 각각 20-25℃, 50-60% 를 유지하고 명암은 12시간 간격으로 점등 및 소등을 반복하였다.
- Glucokinase의 활성을 측정하기 위해 반응생성물인 glucose-6-phosphate가 glucose-6-phosphate dehydrogenase에 의해 산화될 때생성되는 NADPH 양을 340 nm에서의 흡광도로 측정하였는데, 50 mM Tris-HCl buffer(pH 7.5), 100 mM glucose, 5 mM MgCl2 , 5 mM ATP, 0.1 mM NADP+ 및 glucose-6-phosphate dehydrogenase 가 0.2 unit이 되도록 조성하였다. Glucose-6-phosphate에 glucose-6-phosphatase가 반응할 때 생성되는 인산을 정량함으로써 간의 glucose-6-phosphatase 효소활성을 측정하였으며, 6-phosphogluconate dehydrogenase 효소활성은 50 mM potassium phosphate buffer(pH 7.
- 2 unit이 되도록 조성하였다. Glucose-6-phosphate에 glucose-6-phosphatase가 반응할 때 생성되는 인산을 정량함으로써 간의 glucose-6-phosphatase 효소활성을 측정하였으며, 6-phosphogluconate dehydrogenase 효소활성은 50 mM potassium phosphate buffer(pH 7.6), 10 mM MgCl2, 1 mM NADP+, 5 mM 6-phosphogluconate 등으로 구성된 반응액을 사용하여 측정하였다. pH 7.
- STZ group과 STZ + BG group에 사용할 쥐는 다음의 방법으로 당뇨병을 유발시켜 실험에 사용하였는데, 5 mM citrate buffer(pH 4.5)에 녹인 streptozotocin(50 mg/kg body weight)을 쥐의 복강에 1회 주사하여 췌장의 β-세포를 파괴시켜 insulin 결핍의 영구당뇨(insulin dependent diabetes mellitus: IDDM)를 유도하였다.
- 5)만을 동일한 방법으로 쥐에게 주사하고 사육후, 측정한 혈당치가 70-110 mg/dL 범위의 개체를 선별하였다. STZ+BG group은 STZ 주사 후 사육 7일째 흑삼추출물을 1 g/L의 농도로 물에 녹여 5 mg/kg body weight용량을 catheter로 매일 1회씩 경구 투여하면서 3주간 사육하였다. Control group과 STZ group은 흑삼추출물 대신 동일부피의 주사용 멸균 증류수를 매일 경구투여 하면서 3주간 사육하였다.
- 간은 적출 전에 간 문맥에 0.9%(w/v) NaCl 용액을 주사하여 혈액을 제거한 다음 적출하였으며, 면도칼로 다진 후 Teflon-pestle Wheaton Elvehjem(Samsung PMC, Daegu, Korea)으로 조직을 파쇄하고 100 mM Tris/HCl, 5 mM EDTA, 10 mM β-mercaptoethanol을 함유한 150 mM KCl 용액(pH 7.4)을 사용하여 20%(w/v) 조직 파쇄액을 제조하였다.
- 4 µm membrane filter로 여과한 후, 50℃에서 감압 농축하였다. 감압 농축 잔류물을 methanol 1 mL에 용해시켜 HPLC/ MSD(Alliance 2690, Waters, Milford, MA, USA)로 분석하였다.
- 6에서 glucose-6-phosphate를 기질로 사용하였을 때 측정되는 효소활성은 glucose-6-phosphate dehydrogenase와 6-phosphogluconate dehydrogenase의 효소활성 총합이다. 따라서, glucose-6-phosphate dehydrogenase 효소활성은 두 효소의 전체 활성과 6-phosphogluconate dehydrogenase의 효소활성의 차이값으로 산출하였다. Acetyl CoA carboxylase 의 활성 측정을 위해 50 mM Tris/HCl(pH 7.
- Control group과 STZ group은 흑삼추출물 대신 동일부피의 주사용 멸균 증류수를 매일 경구투여 하면서 3주간 사육하였다. 사육은 screen-bottomed cage 내에서 수행하고 환경조건으로 온도와 습도는 각각 20-25℃, 50-60% 를 유지하고 명암은 12시간 간격으로 점등 및 소등을 반복하였다.
- 실험군을 16시간 절식 후, 채혈한 혈액을 3,000 rpm, 4℃에서 15분간 원심분리한 혈청을 혈당과 insulin 측정에 사용하였다. 간은 적출 전에 간 문맥에 0.
- 2 mL가하여 반응을 중지시켰다. 이를 5,000 rpm에서 5분간 원심분리하여 상등액을 scintillation vial에 옮긴 후, 85℃로 가온하여 60분간 건조시켜, 1 mL의 증류수에 녹이고 cocktail solution(PPO 10 g, POPOP 0.25 g, naphthalene 100 g, dioxane 1 L) 10 mL를 가한 후 tricarb liquid scintillation counter로 방사능을 측정하여 acetyl CoA 에 전이된 14CO₂및 생성된 malonyl CoA를 측정함으로써 acetyl CoA carboxylase 효소 활성을 정량하였다.
- I-insulin kit(Shibayagi, Shibukawa, Japan) 를 이용하여 radioimmuno assay를 수행하였다. 혈청시료 0.2 mL 와 anti-insulin 0.2 mL을 시험관에 넣고 0.2 mL insulin- 125I를 처리 하여 37℃에서 1시간 동안 방치하였으며, secondary antibody 0.1 mL를 넣고 섞은 후 상온에서 1시간 반응 직후 2,500 rpm에서 15분간 원심분리하여 얻은 침전물의 방사능을 gamma counter를 사용하여 측정하였다. 2.
- 혈청의 insulin 농도는 125I-insulin kit(Shibayagi, Shibukawa, Japan) 를 이용하여 radioimmuno assay를 수행하였다. 혈청시료 0.
- 흑삼추출물 제조를 위하여 흑삼분말 500 g과 80% ethanol 5 L 를 10 L 플라스크에 취한 후 환류냉각기를 부착하여 멘털히터에 설치하고 50℃에서 12시간 교반 추출한 다음 Whatman No. 1 여지로 여과 하여 그 여액을 모았다(1차 추출물). 추출액을 분리한 흑삼잔류물에 50%(v/v) ethanol 4 L를 가하고 80 ± 5℃에서 10시간 동안 재 추출하여 1차 추출과정과 동일하게 여과한 후 추출 액을 분리하였다(2차 추출물).
대상 데이터
- 5 L를 가하여 90 ± 5℃에서 8시간 동안 추출하여 여과하였다(4차 추출물). 1차에서 4차 추출 과정을 경유하여 분리한 추출액을 합쳐서 60℃ 이하에서 감압농축 한 후 speed vacuum concentrator(Savant SC 100A, Holbrook, NY, USA)를 이용하여 건조 분말화함으로써 실험용 시료로 사용 하였다.
- Methanol, isopropanol, acetonitrile 등 HPLC/MS 분석에 사용된 용매는 J. T. Baker (Phillipsburg, NJ, USA) 제품을, ginsenosides 표준품 8종(Rg1, Re, Rb1, Rc, Rb2, Rd, Rg3, Rh1)은 Wako(Osaka, Japan) 제품을 사용하고, α-glucosidase 등 효소활성실험에서 사용된 각 종 효소 및 시약은 Sigma (St. Louis, MO, USA)에서 구입하여 사용하였다.
- 또한, 증포별 성분의 변화는 1포에서 9포까지 증포별로 구분된 증삼을 시험재료로 사용하였으며, 항당뇨 효능 연구재료는 9포의 흑삼을 사용하였다. 구입한 흑삼은 분쇄기로 분쇄를 하여 100 mesh sieve를 통과한 부드러운 분말(이하 흑삼분말)을 이화학적 성분분석 시료 및 흑삼추출물 추출재료로 사용하였다. 흑삼의 항당뇨 실험용 동물은 Sprague Dawley(몸무게 150-170 g)계 rat를 (주)오리엔트 바이오(Seongnam, Korea)에서 구입하여 사용하였다.
- 본 실험에서 사용한 흑삼은 금산지역에서 재배된 6년근 수삼으로서 금산 수삼센터에서 구입하여 세척한 후, 특수 제작한 시루에서 증기로 찐 다음 열풍 건조기를 이용하여 50℃에서 24시간 건조하기를 9회 반복하여 제조한 (주)비엘(Geumsan, Korea)의흑삼제품을 구입하여 사용하였다. 또한, 증포별 성분의 변화는 1포에서 9포까지 증포별로 구분된 증삼을 시험재료로 사용하였으며, 항당뇨 효능 연구재료는 9포의 흑삼을 사용하였다. 구입한 흑삼은 분쇄기로 분쇄를 하여 100 mesh sieve를 통과한 부드러운 분말(이하 흑삼분말)을 이화학적 성분분석 시료 및 흑삼추출물 추출재료로 사용하였다.
- 당대사 조절 실험에 필요한 동물의 사육은 Joo 등의 방법(11-13)에 준하여 수행하였다. 본 실험에 사용한 실험동물은 4주령 Sprague Dawley계 수컷 흰쥐를 (주)오리엔트 바이오에서 구입하고, 1주일간 사육하여 안정화 시킨 후 250-300 g 정도 되는 건강한 쥐들을 선별 5마리씩 그룹화 하여 정상대조군(control group), streptozotocin 당뇨병 유발군(STZ group), STZ 당뇨병 유발 후 흑삼추출물을 투여한 STZ+흑삼추출물투여군(STZ + BG group)으로 구분하여 동물실험을 수행하였다. STZ group과 STZ + BG group에 사용할 쥐는 다음의 방법으로 당뇨병을 유발시켜 실험에 사용하였는데, 5 mM citrate buffer(pH 4.
- 본 실험에서 사용한 흑삼은 금산지역에서 재배된 6년근 수삼으로서 금산 수삼센터에서 구입하여 세척한 후, 특수 제작한 시루에서 증기로 찐 다음 열풍 건조기를 이용하여 50℃에서 24시간 건조하기를 9회 반복하여 제조한 (주)비엘(Geumsan, Korea)의흑삼제품을 구입하여 사용하였다. 또한, 증포별 성분의 변화는 1포에서 9포까지 증포별로 구분된 증삼을 시험재료로 사용하였으며, 항당뇨 효능 연구재료는 9포의 흑삼을 사용하였다.
- 5)에 녹인 streptozotocin(50 mg/kg body weight)을 쥐의 복강에 1회 주사하여 췌장의 β-세포를 파괴시켜 insulin 결핍의 영구당뇨(insulin dependent diabetes mellitus: IDDM)를 유도하였다. 사육 6일째 16시간 절식 후 꼬리정맥에서 혈액을 채취하여 혈당을 검사하고, 혈당치가 240 mg/dL 이상인 쥐만을 실험동물로 선별하였다. Control group은 5 mM citrate buffer(pH 4.
- 구입한 흑삼은 분쇄기로 분쇄를 하여 100 mesh sieve를 통과한 부드러운 분말(이하 흑삼분말)을 이화학적 성분분석 시료 및 흑삼추출물 추출재료로 사용하였다. 흑삼의 항당뇨 실험용 동물은 Sprague Dawley(몸무게 150-170 g)계 rat를 (주)오리엔트 바이오(Seongnam, Korea)에서 구입하여 사용하였다. Methanol, isopropanol, acetonitrile 등 HPLC/MS 분석에 사용된 용매는 J.
데이터처리
- 모든 결과는 측정치의 평균과 표준오차로 표시하였고 유의성검정은 Student's t-test, 분산분석(ANOVA) 및 다중범위검정 (Duncan's multiple range test)을 사용하여 5% 수준에서 그 유의성을 검증하였다.
이론/모형
- Ginsenoside의 분석은 Li와 Fitzloff 방법(18,19) 및 Povovich와 Kitts 방법(20)에 준하여 수행하였다. 흑삼분말 0.
- 당대사 조절 실험에 필요한 동물의 사육은 Joo 등의 방법(11-13)에 준하여 수행하였다. 본 실험에 사용한 실험동물은 4주령 Sprague Dawley계 수컷 흰쥐를 (주)오리엔트 바이오에서 구입하고, 1주일간 사육하여 안정화 시킨 후 250-300 g 정도 되는 건강한 쥐들을 선별 5마리씩 그룹화 하여 정상대조군(control group), streptozotocin 당뇨병 유발군(STZ group), STZ 당뇨병 유발 후 흑삼추출물을 투여한 STZ+흑삼추출물투여군(STZ + BG group)으로 구분하여 동물실험을 수행하였다.
성능/효과
- 흑삼추출물 투여가 간의 효소활성에 미치는 영향을 확인하고자 간의 효소활성을 분석하여 Table 3에 나타내었다. Glucokinase 활성은 STZ군에서 18 unit/mg으로 control group의 56 unit/mg의 32%수준의 활성을 유지하고 있었고, STZ+BG group의 glucokinase 활성이 49 unit/mg정도로 STZ group보다 2.7배 높은 활성이었으며 control group의 활성의 87%를 상회하는 수준이었다. 즉, 본 실험의 결과로부터 흑삼추출물은 저하된 glucokinase 활성 회복에 상당한 효능을 발휘하고 있음을 확인할 수 있었다.
- 이상의 결과들을 요약하면, 흑삼추출물이 insulin 생성에는 직접 작용치 못하지만 이와 관련된 중요 효소들을 활성화함으로써 혈당을 강하하는 것으로 판단된다. 단, STZ+BG group으로부터 적출된 간 효소의 상대활성도를 산출하면 Table 4의 결과를 얻을수 있는데, 6-phosphogluconate dehydrogenase 활성도의 회복정도가 118%로서 control group을 상회할 뿐 나머지는 control group 효소활성의 30-60% 범위에서 회복되고 있음을 확인할 수 있다. 즉, insulin 부족으로 촉발되는 효소활성의 소실분을 흑삼추출물이 100% 회복시키지 못하며 효소활성 회복에 60% 이하의 수준으로 기여하며 는 이러한 결과만으로는 Table 3에서 보여주는 정상치에 가까운 혈당치로 강하된 STZ+BG group의 혈당치 102 mg/dL 대하여 완벽한 설명을 하기가 어렵다.
- 최근 Yuan 등(21)은 제2형 당뇨병(insulin 비의존형 당뇨병) 모델인 db/db mouse를 이용한 실험에서 홍삼을 포함한 생약복합물의 혈당저하 효과를 확인하였으며, 이러한 혈당 저하효과는 insulin 의 민감성 증가와 간 조직의 peroxisome proliferator-acitivated receptor(PPAR)-αmRNA와 지방조직의 PPAR-γ mRNA단백질 발현의 증가를 통한 지방대사조절 작용으로 저혈당 효과를 나타내는것으로 해석하였다. 따라서, 본 실험의 STZ+BG group에서 insulin 농도는 증가하지 않았으나 혈당치는 낮은 수준을 보인 이유에 대해서는 insulin 분비 촉진 보다는 부분적으로 insulin 민감성 증대에 기인할 수 있다는 것을 배제할 수 없으며, 간에서 포도당 이용촉진 또는 당대사 관련 효소활성의 개선이 혈당 저하의 한 요인으로 작용한 것으로 판단된다.
- 1 ng/mL의 극소량이 측정됨으로써 흑삼추출물이 insulin의 증가에는 전혀 영향을 주지 못하였다. 따라서, 흑삼 추출물 투여에 의한 혈당량 강하결과는 insulin이 아닌 다른 원인에 의한 것으로 추측되었는데, 이러한 결과는 Joo 등(12)에 의한 당뇨병유발 쥐의 혈중 insulin 농도가 인삼사포닌 혼합물의 투여로 증가하였다는 결과와는 상반되었다.
- STZ+BG group의 혈당치는 control group과 비교하면 높은 수치를 보였지만, 공복 시 정상인의 혈당치가 70-100 mg/dL인 점을 고려하면 정상에 가까운 혈당치로 볼 수 있다. 또한 STZ+BG group의 혈당치는 당뇨유발대조군 혈당치의 70% 이상 감소된 값이며, 이 결과는 Joo 등(12)에 의한 홍삼의 혈당 강하효과로 보고한 35%보다는 월등히 높은 것으로서 흑삼추출물이 현저한 혈당강하 기능이 있음을 확인할 수 있었다.
- 또한, 흑삼추출물의 glucose-6-phosphatase 효소활성에 미치는 영향을 확인하기 위하여 STZ당뇨병유발 쥐에게 흑삼추출물을 투여한 후 glucose-6-phosphatase의 활성을 측정한 결과, STZ+BG group은 control group의 6배 수준을 상회하는 활성증대를 보였고, STZ group보다 1.5배 높은 활성증대를 나타냄으로써 흑삼추출물투여가 glucose-6-phosphatase활성저하에 기여하지 못하였으며, 오히려 glucose-6-phosphatase활성을 증대시키는 역작용을 하는 것으로 확인하였다.
- 다른 한편, 6-phosphogluconate에서 D-ribulose-5-phosphate로 전환시키는 6-phosphogluconate dehydrogenase 활성을 측정한 결과 control group이 40 unit/mg, STZ group이 5 unit/mg을 나타냈다. 반면 STZ+BG group에서는 control group보다도 높은 53 unit/mg 을 보였으며, 흑삼추출물이 6-phosphogluconate dehydrogenase 활성에 크게 기여하고 있음을 확인할 수 있었다. 또한, acetyl CoA carboxylase 활성은 control group에서 0.
- 1) 및 ginsenoside(Table 1)의 함량을 나타내었는데, 조사포닌의 함량은 1포에서 가장 높은 52 mg/g을 보였고, 증포 횟수가 많아질수록 함량이 점차적으로 줄어들어 최종적으로 9포에서는 1포의 42% 수준인 22 mg/g을 나타냈다. 이 결과로부터 인삼의 증포 횟수가 증가함에 따라 사포닌은 분해 및 소실됨을 알 수 있었다. 특이한 것은 4포와 5포 사이에서는 사포닌의 함량이 급격히 감소했는데, 이는 4포에서 5포 단계는 홍삼단계에서 흑삼단계로 넘어가는 시점이며, 흑색화가 시작될 때 많은 양의 사포닌이 분해 소실되는 것으로 판단되었다.
- , 및 ginsenoside-Rd는 전반적으로 함량이 줄어가는 경향을 보였고, 이러한 경향은 증포별 조사포닌 함량 변화 경향과 일치하고 있다. 이 결과로부터 증포횟수를 높일수록 조사 포닌 함량이 감소하는 원인이 ginsenoside-Rg1, ginsenoside-Re, ginsenoside-Rb1, ginsenoside-Rc, ginsenoside-Rb2, 및 ginsenoside-Rd 의 감소에 기인하는 것으로 판단되었다. 이와는 반대로, ginsenosideRg3는 증포를 반복할수록 그 함량이 증가하고, 또한 극소량이긴 하지만 ginsenoside-Rh1에서도 동일한 경향이 나타났다.
- 이상의 결과들을 요약하면, 흑삼추출물이 insulin 생성에는 직접 작용치 못하지만 이와 관련된 중요 효소들을 활성화함으로써 혈당을 강하하는 것으로 판단된다. 단, STZ+BG group으로부터 적출된 간 효소의 상대활성도를 산출하면 Table 4의 결과를 얻을수 있는데, 6-phosphogluconate dehydrogenase 활성도의 회복정도가 118%로서 control group을 상회할 뿐 나머지는 control group 효소활성의 30-60% 범위에서 회복되고 있음을 확인할 수 있다.
- 이와는 반대로, ginsenosideRg3는 증포를 반복할수록 그 함량이 증가하고, 또한 극소량이긴 하지만 ginsenoside-Rh1에서도 동일한 경향이 나타났다. 즉, ginsenosideRg3의 함량 증가는 증포 횟수에 비례적이며 마지막 9포에서 최대의 함량인 9 mg/g의 함량을 보였는데, 이것은 홍삼으로 분류할수 있는 1-3포의 함량보다 약 5배정도로 높은 함량이며, 이것은 ginsenoside의 Protopanaxa diol(PD)/Protopanaxa triol(PT)를 급격히 높여주는 결과로 나타났다. 증포횟수의 증가와 함께 ginsenosidesRg3와 ginsenoside-Rh1의 함량증가 현상을 증포과정의 반복과 함께 그함량이 줄어들고 있는 ginsenoside-Rg1, ginsenoside-Re, ginsenosideRb1, ginsenoside-Rc, ginsenoside-Rb2, 및 ginsenoside-Rd 등의 결과를 고려해 보면, ginsenoside-Rg3와 ginsenoside-Rh1는 증숙과정 중에 소실되고 있는 일부 ginsenoside가 전환된 것으로 추측할 수있다.
- 7배 높은 활성이었으며 control group의 활성의 87%를 상회하는 수준이었다. 즉, 본 실험의 결과로부터 흑삼추출물은 저하된 glucokinase 활성 회복에 상당한 효능을 발휘하고 있음을 확인할 수 있었다.
- 증포별 흑삼의 ginsenoside 조성을 HPLC/MSD를 이용하여 분석한 결과, ginsenoside-Rg1, ginsenoside-Re, ginsenoside-Rb1, ginsenosideRc, ginsenoside-Rb2, 및 ginsenoside-Rd는 전반적으로 함량이 줄어가는 경향을 보였고, 이러한 경향은 증포별 조사포닌 함량 변화 경향과 일치하고 있다. 이 결과로부터 증포횟수를 높일수록 조사 포닌 함량이 감소하는 원인이 ginsenoside-Rg1, ginsenoside-Re, ginsenoside-Rb1, ginsenoside-Rc, ginsenoside-Rb2, 및 ginsenoside-Rd 의 감소에 기인하는 것으로 판단되었다.
- 즉, ginsenosideRg3의 함량 증가는 증포 횟수에 비례적이며 마지막 9포에서 최대의 함량인 9 mg/g의 함량을 보였는데, 이것은 홍삼으로 분류할수 있는 1-3포의 함량보다 약 5배정도로 높은 함량이며, 이것은 ginsenoside의 Protopanaxa diol(PD)/Protopanaxa triol(PT)를 급격히 높여주는 결과로 나타났다. 증포횟수의 증가와 함께 ginsenosidesRg3와 ginsenoside-Rh1의 함량증가 현상을 증포과정의 반복과 함께 그함량이 줄어들고 있는 ginsenoside-Rg1, ginsenoside-Re, ginsenosideRb1, ginsenoside-Rc, ginsenoside-Rb2, 및 ginsenoside-Rd 등의 결과를 고려해 보면, ginsenoside-Rg3와 ginsenoside-Rh1는 증숙과정 중에 소실되고 있는 일부 ginsenoside가 전환된 것으로 추측할 수있다. 20(S)-ginsenoside-Rg3와 20(R)-ginsenoside-Rh1은 백삼이나 수삼에는 원래 존재하지 않았지만 인삼을 가열할 경우 생성되는 성분으로 보고되어 있으며, 홍삼의 증숙과정 중 가수분해 반응으로 ginsenoside-Rb1, ginsenoside-Rb2, ginsenoside-Rc, ginsenosideRd 등과 같은 PD계 ginsenosides는 ginsenoside-Rg3로, 다른 한편 ginsenoside-Re, ginsenoside-Rh1과 같은 PT계 ginsenoside는 20(R)-ginsenoside-Rh2 혹은 20(R)-ginsenoside-Rh로 전환된다고 Nam(2) 은 보고하였다.
- 이 결과로부터 인삼의 증포 횟수가 증가함에 따라 사포닌은 분해 및 소실됨을 알 수 있었다. 특이한 것은 4포와 5포 사이에서는 사포닌의 함량이 급격히 감소했는데, 이는 4포에서 5포 단계는 홍삼단계에서 흑삼단계로 넘어가는 시점이며, 흑색화가 시작될 때 많은 양의 사포닌이 분해 소실되는 것으로 판단되었다.
- 흑삼의ginsenoside 조성을 분석하여 증포별 조사포닌(Fig. 1) 및 ginsenoside(Table 1)의 함량을 나타내었는데, 조사포닌의 함량은 1포에서 가장 높은 52 mg/g을 보였고, 증포 횟수가 많아질수록 함량이 점차적으로 줄어들어 최종적으로 9포에서는 1포의 42% 수준인 22 mg/g을 나타냈다. 이 결과로부터 인삼의 증포 횟수가 증가함에 따라 사포닌은 분해 및 소실됨을 알 수 있었다.
- 흑삼추출물의 glucose-6-phosphate dehydrogenase 활성에 미치는 영향을 확인하기 위하여 STZ당뇨병 유발군에게 흑삼추출물을 투여한 후, 적출한 간의 glucose-6-phosphate dehydrogenase 활성을 측정한 결과, control group에서 400 unit/mg, STZ group에서 51 unit/mg, STZ+BG group에서 190 unit/mg을 나타냄으로써 흑삼추 출물이 glucose-6-phosphate dehydrogenase 활성을 회복시켰는데, control group의 13%수준이었던 STZ당뇨병 유발군의 glucose-6-phosphate dehydrogenase의 활성을 흑삼을 투여함으로써 48% 수준까지 상승시킨 것으로 나타났다.
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