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문제 정의
- 본 실험은 국내의 산란계 농장에서 임상적으로 FLHS가 발생된 계군(FLHS)과 발생되지 않은 계군(Non-FLHS)을 선정하여 두 계군 간의 혈액화학치 차이를 평가하고자 하였다. 혈액화학치 검사 대상 항목으로 aspartate aminotransferase(AST), lactate dehydrogenase(LDH), alanine aminotransferase(ALT), creatine kinase(CK), serum cholesterol, serum calcium를 선정하였다.
- 그 이유는 FLHS의 진단이 주로 농장 수준에서 폐사계의 부검을 통해서 이루어지고 있어 전반적인 발생 현황이 통계처리가 되지 못하기 때문이며, 이로 인한 경제적 손실 또한 확인하기 어려워 FLHS에 대한 효율적인 대처도 어려운 실정이다. 이러한 FLHS에 대한 문제점을 극복하기 위하여 생체에서 진단이 가능한 기법을 개발하고자본 실험을 실시하였다.
제안 방법
- 아직까지 국내에서는 닭의 혈액화학검사가 활발하게 이루어지고 있지 않지만, FLHS와 관련된 혈액화학치 항목을 측정하여 산란계군의 간 손상 정도를 파악하는 것이 FLHS의 조기 진단에 도움이 될 것이다. 따라서, 본 실험에서는 실용 산란계 농장에서 FLHS 병력이 있는 계군과 없는 계군을 선정하여 각 계군에 대한 혈액화학치를 측정한 후, 간 조직을 채취하여 지방 변성 여부를 혈액화학치와 비교 확인하였다. 지방 변성 여부가 비교 확인된 두 실험계군의 혈액화학치를 비교 분석함으로써, 혈액화학치를 측정하는 것이 FLHS를 진단하는데 있어서 가치가 있는지의 여부와 가장 유용성이 있는 항목은 어느 것인지를 평가하였다.
- 따라서, 본 실험에서는 실용 산란계 농장에서 FLHS 병력이 있는 계군과 없는 계군을 선정하여 각 계군에 대한 혈액화학치를 측정한 후, 간 조직을 채취하여 지방 변성 여부를 혈액화학치와 비교 확인하였다. 지방 변성 여부가 비교 확인된 두 실험계군의 혈액화학치를 비교 분석함으로써, 혈액화학치를 측정하는 것이 FLHS를 진단하는데 있어서 가치가 있는지의 여부와 가장 유용성이 있는 항목은 어느 것인지를 평가하였다.
- 혈액화학치 검사 대상 항목으로 aspartate aminotransferase(AST), lactate dehydrogenase(LDH), alanine aminotransferase(ALT), creatine kinase(CK), serum cholesterol, serum calcium를 선정하였다. 또한, 검사 대상 산란계의 실제 지방 변성 여부를 확인하고, 발생 여부에 대한 기준으로 간의 지방 함량 수치와 조직 병리학적 소견을 비교하였다. 통계학적으로 두 계군이 독립표본임을 확인하기 위해서 t-검정과 Mann-Whitney 검정을 실시하였으며, 두 계군의 FLHS 정도를 분석하기 위해 MINITAB을 이용한 판별 분석을 실시하였다.
- 혈청 효소(AST, LDH, CK)는 보관 조건에 따라 영향을 받기 때문에(Lumeij, 1997), 농장에서 채취한 혈액은 농장에서 바로 혈청 분리한 후, 당일 검사실로 운반하여 혈청 효소를 측정하였다. 하루 동안에 많은 양의 혈청을 분리하고 운송할 수 없으므로, 일주일 간격을 두고 동일한 조건 하에 3회 반복 채혈하였다.
- 혈청 효소(AST, LDH, CK)는 보관 조건에 따라 영향을 받기 때문에(Lumeij, 1997), 농장에서 채취한 혈액은 농장에서 바로 혈청 분리한 후, 당일 검사실로 운반하여 혈청 효소를 측정하였다. 하루 동안에 많은 양의 혈청을 분리하고 운송할 수 없으므로, 일주일 간격을 두고 동일한 조건 하에 3회 반복 채혈하였다. 혈액은 각각의 계군에서 30수를 무작위 선발하여 채취하였으며, 일주일 간격으로 총 3회 실시하였다.
- 하루 동안에 많은 양의 혈청을 분리하고 운송할 수 없으므로, 일주일 간격을 두고 동일한 조건 하에 3회 반복 채혈하였다. 혈액은 각각의 계군에서 30수를 무작위 선발하여 채취하였으며, 일주일 간격으로 총 3회 실시하였다. 혈액을 반복 채취하는데 동일한 조건을 부여하기 위하여, 채혈은 모두 오전 10～12시 사이에 실시하였으며, 농장에서 채혈하는데 소요된 시간은 평균 2시간이었다.
- 혈액은 각각의 계군에서 30수를 무작위 선발하여 채취하였으며, 일주일 간격으로 총 3회 실시하였다. 혈액을 반복 채취하는데 동일한 조건을 부여하기 위하여, 채혈은 모두 오전 10～12시 사이에 실시하였으며, 농장에서 채혈하는데 소요된 시간은 평균 2시간이었다. 채취한 혈액은 모두 2시간 이내에 농장에서 2,500 rpm으로 20분간 원심하여 혈청을 분리하였다.
- 준비한 각각의 혈청은 채혈 당일에 자동 혈액 화학 분석기(PRONTO; BPC + Biosed, Italy)를 이용하여 serum cholesterol, serum calcium, AST, LDH 그리고 CK를 측정하였다. 각각의 수치는 자동으로 측정되어 컴퓨터에 기록되었으며, 반응 온도는 37 ℃, 시약 온도는 4 ℃이었다.
- , 1999). 농장에서 직접 부검한 1동(Non-FLHS) 계군 20수는 시료 용기 당 5수의 간 조직을 pooling하여 총 4그룹으로 편성하여 실험을 실시하였다. 실험실로 운송하여 부검한 2동(FLHS) 계군 20수는 각각의 간 조직을 채취하여 각각에 대한 지방 함량 수치를 구하였다.
- 농장에서 직접 부검한 1동(Non-FLHS) 계군 20수는 시료 용기 당 5수의 간 조직을 pooling하여 총 4그룹으로 편성하여 실험을 실시하였다. 실험실로 운송하여 부검한 2동(FLHS) 계군 20수는 각각의 간 조직을 채취하여 각각에 대한 지방 함량 수치를 구하였다.
- 지방 시료를 함유한 비이커의 무게에서 앞서 측정된 비이커 무게를 제외하여 지방 시료의 무게를 구하였다. 각각의 지방 시료 무게를 건조된 간 시료 무게로 나누어 각각의 지방 함량(%)을 수치화하였다.
- 10% 포르말린용액이 담긴 용기에 고정된 두 계군의 각각의 간 조직에 대하여, FLHS의 주된 조직병리학적 소견인 지방 공포 형성 여부를 현미경적으로 확인하였다. 확인된 지방 공포 형성(vacuolation)은 정도에 따라 1～4등급으로 vacuolation score를 표기하였다.
- 확인된 지방 공포 형성(vacuolation)은 정도에 따라 1～4등급으로 vacuolation score를 표기하였다. 공포가 없으면 1등급, 1개 이상의 공포가 관찰되면 2등급, 여러 곳에서 다양하게 공포(multi-focal)가 있으면 3등급, 검사한 슬라이드에 전반적으로 공포가 있으면 4등급으로 정하여 수치화하였다. 조직 판별시의 오류를 줄이기 위하여 각 조직은 blind method를 활용하여 검사하였으며, 2회 반복 조사하였다.
- 공포가 없으면 1등급, 1개 이상의 공포가 관찰되면 2등급, 여러 곳에서 다양하게 공포(multi-focal)가 있으면 3등급, 검사한 슬라이드에 전반적으로 공포가 있으면 4등급으로 정하여 수치화하였다. 조직 판별시의 오류를 줄이기 위하여 각 조직은 blind method를 활용하여 검사하였으며, 2회 반복 조사하였다.
- Non-FLHS와 FLHS를 집단을 구분하는 분류 변수로 정하고, 측정된 혈액화학치 중에서 유의수준 0.05에서 통계적으로 유의한 차이를 보인 cholesterol, AST 그리고 LDH를 설명 변수로 정하여 FLHS 판별 정도를 분석하였다. FLSH의 크기 (N1)가 53개, Non-FLHS의 크기(N2)가 80개인 두 집단에 대한 Fisher의 판별 방법은 다음과 같다.
- Fisher의 판별분석을 위해 Non-FLHS와 FLHS를 집단을 구분하는 분류 변수로 정하고, vacuolation score와 지방 함량 (%)를 설명변수로 이용하였다.
- FLHS 병력계군(FLHS)과 비병력계군(Non-FLHS)에 대한 각각의 혈액화학치를 측정하였다. FLHS 계군은 노계 출하 관계로 실험기간이 단축되어 일주일 간격으로 2회 실시하였고, Non-FLHS 계군은 3회 실시하였다.
- FLHS 병력계군(FLHS)과 비병력계군(Non-FLHS)에 대한 각각의 혈액화학치를 측정하였다. FLHS 계군은 노계 출하 관계로 실험기간이 단축되어 일주일 간격으로 2회 실시하였고, Non-FLHS 계군은 3회 실시하였다.
- Non-FLHS와 FLHS를 집단을 구분하는 분류변수로 정하고, 앞서 두 계군에 대하여 유의수준 0.05에서 통계적으로 유의한 차이를 보인 cholesterol, AST, LDH를 판별 정도를 분석하기위한 설명변수로 이용하였다.
- Non-FLHS와 FLHS를 집단을 구분하는 분류변수로 정하고, vacuolation score와 지방 함량(%)를 판별 정도를 분석하기 위한 설명 변수로 이용하였다. 판별 결과 Non-FLHS군이 정상 95% FLHS군이 FLHS 70%로, 전체(N = 40)중 33개가 올바르게 판별이 되어 total proportion correct가 82.
- 앞서 FLHS 병력을 지닌 계군과 병력을 보이지 않은 계군의 혈액화학치를 측정한 후, 두 계군이 Non-FLHS와 FLHS임을 명확하게 확인하기 위하여 간 조직을 채취하여 지방 함량 수치와 조직 병리학적 소견을 비교하였다. Diaz et al.
- 국내 실용 산란계 농장에서 FLHS 병력을 지닌 계군과 정상계군에 대한 특정 혈액화학치를 비교 측정하여 다음과 같은 결과를 얻었다.
대상 데이터
- 본 실험은 국내의 산란계 농장에서 임상적으로 FLHS가 발생된 계군(FLHS)과 발생되지 않은 계군(Non-FLHS)을 선정하여 두 계군 간의 혈액화학치 차이를 평가하고자 하였다. 혈액화학치 검사 대상 항목으로 aspartate aminotransferase(AST), lactate dehydrogenase(LDH), alanine aminotransferase(ALT), creatine kinase(CK), serum cholesterol, serum calcium를 선정하였다. 또한, 검사 대상 산란계의 실제 지방 변성 여부를 확인하고, 발생 여부에 대한 기준으로 간의 지방 함량 수치와 조직 병리학적 소견을 비교하였다.
- 본 실험에 선정된 계군의 품종은 충북 지역의 실용 산란계 농장에서 사육중인 하이라인 브라운(Hyline Brown)으로, 외부 중추농장에서 위탁사육되어 100일령 전후에 본 농장에 이동되었다. 대상 농장은 10만수 규모의 산란 농장으로 27주령의 5만수 계군(1동)과 97주령의 5만수 계군(2동)이 있었다.
- 본 실험에 선정된 계군의 품종은 충북 지역의 실용 산란계 농장에서 사육중인 하이라인 브라운(Hyline Brown)으로, 외부 중추농장에서 위탁사육되어 100일령 전후에 본 농장에 이동되었다. 대상 농장은 10만수 규모의 산란 농장으로 27주령의 5만수 계군(1동)과 97주령의 5만수 계군(2동)이 있었다. 이 두 계군을 모니터링 한 결과, 2동의 닭(97주령)은 폐사수가 비정상적으로 높았고 FLHS 부검 소견이 지속적으로 확인된 반면, 1동의 닭은 폐사율과 부검 소견에서 별다른 이상을 보이지 않은 계군이었다(Fig.
- 1). 따라서, 이 산란 농장에는 FLHS 비발생 계군(1동, Non-FLHS)과 발생 계군(2동, FLHS)이 병존하는 것으로 판단되어 실험 농장으로 선정하였다.
- 휘발하고 남은 지방 시료를 건열멸균기에서 30분간 더 건조시켜 남아있을지 모르는 수분도 제거하였다. 지방 시료를 함유한 비이커의 무게에서 앞서 측정된 비이커 무게를 제외하여 지방 시료의 무게를 구하였다. 각각의 지방 시료 무게를 건조된 간 시료 무게로 나누어 각각의 지방 함량(%)을 수치화하였다.
- 본 실험에서는 생체에서 실시할 수 있는 혈액화학검사 항목으로 FLHS 발병 시 상승하는 것으로 알려진 serum cholesterol, serum calcium(Harms and Simpson, 1979; Miles and Harms, 1981)과 간 손상과 관련이 있는 AST, LDH 그리고 간 손상에 영향을 받지 않는 것으로 알려진 CK를 선택하였다(Diaz et al., 1999; Lumeij, 1997). 측정하고자 하는 혈액화학치 중에서 serum cholesterol은 간 질병에 의해 증가되기도 하지만, 기아와 관련해서도 영향을 받을 수 있기 때문에(Langslow et al.
데이터처리
- 또한, 검사 대상 산란계의 실제 지방 변성 여부를 확인하고, 발생 여부에 대한 기준으로 간의 지방 함량 수치와 조직 병리학적 소견을 비교하였다. 통계학적으로 두 계군이 독립표본임을 확인하기 위해서 t-검정과 Mann-Whitney 검정을 실시하였으며, 두 계군의 FLHS 정도를 분석하기 위해 MINITAB을 이용한 판별 분석을 실시하였다. p<0.
- 본 실험을 통해 얻어진 검사 결과에 대한 통계학적 유의성은 SPSS(Windows Release 10.07; SPSS, 한글판)를 이용하여 독립 t-검정과 Mann-Whitney 검정을 실시하였으며, MINITAB (Windows Release 13.2; MINITAB, 한글판)을 이용하여 판별 분석을 실시하였다. p<0.
- 두 실험 계군의 독립 표본 검정을 위해, 간 조직검사를 통하여 획득한 공포 형성 수치(vacuolation score)에 대하여 두 계군 간의 평균 동일성에 대한 t-검정을 실시하였으며, soxhlet방법을 통한 지방 함량(%)에 대해서는 Mann-Whitney 검정을 실시하였다.
이론/모형
- 같은 개체에서 채취한 두 개의 간 조직 중 하나는 간의 지방 함량을 측정하기 위하여 소독된 50 mL 플라스틱에 일시적으로 냉장 보관 후, 동결 건조하였다. 건조된 각각의 간 조직에 대하여 Soxhlet 방법으로 지방 함량을 측정하였다(Diaz et al., 1999). 농장에서 직접 부검한 1동(Non-FLHS) 계군 20수는 시료 용기 당 5수의 간 조직을 pooling하여 총 4그룹으로 편성하여 실험을 실시하였다.
성능/효과
- 대상 농장은 10만수 규모의 산란 농장으로 27주령의 5만수 계군(1동)과 97주령의 5만수 계군(2동)이 있었다. 이 두 계군을 모니터링 한 결과, 2동의 닭(97주령)은 폐사수가 비정상적으로 높았고 FLHS 부검 소견이 지속적으로 확인된 반면, 1동의 닭은 폐사율과 부검 소견에서 별다른 이상을 보이지 않은 계군이었다(Fig. 1). 따라서, 이 산란 농장에는 FLHS 비발생 계군(1동, Non-FLHS)과 발생 계군(2동, FLHS)이 병존하는 것으로 판단되어 실험 농장으로 선정하였다.
- 계사 운영 시스템이 동일한 두 동은 6단 10열의 무창 계사로, 케이지당 6수씩 입식하여 사육하고 있었다. 환기 시스템이 동일한 두 계군(FLHS, Non-FLHS)은 동일한 사료 회사의 동일한 제품을 급이하고 있었으며, 급이 횟수도 1일 8회로 동일하였다.
- 첫 번째 채혈일의 결과는 Non-FLHS 계군의 평균이 18.2±3.7 mg/dL로, FLHS 계군의 평균 23.3±2.9 mg/dL보다 낮은 수준을 기록하였다.
- 두 계군의 serum cholesterol에 대한 수치는 Table 1에 요약 하였다. Non-FLHS 계군의 cholesterol은 전반적으로 200 mg/ dL 미만의 수치를 안정적으로 나타냈으며, 총 81시료 중 4시료인 4.9%만이 이 수치보다 높았다. FLHS 계군은 총 53시료중 12시료가 200 mg/dL 이상을 나타내어 22.
- 9%만이 이 수치보다 높았다. FLHS 계군은 총 53시료중 12시료가 200 mg/dL 이상을 나타내어 22.6%가 이 수치보다 높았으며, 그 중 6시료(11.3%)가 400 mg/dL 이상의 수치를 나타내었다. Non-FLHS와 FLHS 계군의 serum cholesterol 수치는 유의수준 0.
- 9 mg/dL보다 낮은 수준을 기록하였다. 그러나, 첫 번째 채혈일 이후, NonFLHS 계군에 난각 강화를 위하여 농장주에 의하여 굴 껍질 제제를 사료에 부가적으로 첨가되었으며, serum calcium 수치도 FLHS 계군의 평균 수준과 비슷한 정도로 상승하였다. NonFLHS와 FLHS 계군은 serum calcium에 대하여 유의수준 0.
- 두 계군의 AST에 대한 활성치는 Table 1에 요약하였다. Non-FLHS 계군의 AST 활성치는 전반적으로 200 IU/L 미만의 수치를 안정적으로 나타냈으며, 총 81시료 중 5시료인 6.2%만이 이 수치보다 높았다. FLHS 계군은 총 53시료 중 8시료가 200 IU/L 이상을 나타내어 15.
- 2%만이 이 수치보다 높았다. FLHS 계군은 총 53시료 중 8시료가 200 IU/L 이상을 나타내어 15.1%가 이 수치보다 높은 수준을 나타냈다. 그 중 4 시료(7.
- 5%)가 250 IU/L 이상의 수치를 나타낸 반면, Non-FLHS 계군에서는 250 IU/L를 넘어서는 개체가 전혀 없었다. Non-FLHS와 FLHS 계군은 AST에 대하여 유의수준 0.05에서 유의확률이 0.01로 통계적으로 매우 유의한 차이가 있었다.
- 5%)이 있었다. Non-FLHS과 FLHS 계군은 LDH에 대하여 유의수준 0.05에서 유의확률이 0.000으로 통계적으로 매우 유의한 차이가 있었다.
- 두 계군의 CK에 대한 활성치는 Table 1에 요약하였다. NonFLHS 계군은 총 81시료 중 4시료(4.9%)가 2,000 IU/L 이상을 나타냈으며, FLHS 계군은 총 53시료 중 5시료(9.4%)가 이 수치보다 높았다. 이 두 계군의 CK 활성치는 전반적으로 비슷한 평균과 분포도를 나타냈다.
- FLHS 계군 53개, Non-FLHS 계군 80개 시료를 대상으로 판별 분석한 결과 Non-FLHS 계군이 정상 80%, FLHS 계군이 FLHS 62.3%로, 전체(N = 133)중 97개가 올바르게 판별이 되어 total proportion correct가 72.9%로 높은 적중률(Hit-ratio)를 보였다. 결과적으로, Non-FLHS 계군의 cholesterol, AST, LDH 수치가 정상 80%를 차지하였고, FLHS 계군의 cholesterol, AST, LDH 수치가 FLHS 62.
- 9%로 높은 적중률(Hit-ratio)를 보였다. 결과적으로, Non-FLHS 계군의 cholesterol, AST, LDH 수치가 정상 80%를 차지하였고, FLHS 계군의 cholesterol, AST, LDH 수치가 FLHS 62.3%를 차지함으로써, FLHS를 구분하는데 위 3가지 항목이 유익한 것으로 판별되었다. 그 중에서도 AST의 판별 추정 계수가 cholesterol이나 LDH보다 큰 수치를 나타내어, AST가 FLHS을 판별하는데 더 큰 의미를 부여하였다.
- 두 계군의 vacuolation scoring 결과, FLHS 병력을 지니지 않은 Non-FLHS 계군의 평균 수치는 1.1 ± 0.2였으며, FLHS 병력을 지닌 FLHS 계군은 2.2 ± 1.1이었다.
- 024로 통계적으로 유의한 차이가 인정되었다. Non-FLHS 계군의 간 조직 내 지방 함량(%)은 각각의 시료에 대한 건조 중량 대비 평균이 유사하고 17%를 넘지 않는 반면, FLHS 계군의 간 조직 내 지방 함량(%)은 7수를 제외하고 13수가 Non-FLHS 계군 평균 이상의 수치를 기록하였다. FLHS 계군 중에는 간 건조 중량 대비 89.
- 9%의 지방 함량을 보인 1수도 있었다. 또한, 간 지방 함량(%)이 높았던 개체의 vacuolation score가 전반적으로 일치되게 높은 것으로 확인되었다.
- 1이었다. 이 두 계군이 독립적으로 다른 계군임을 확인하기 위한 독립 t-검정 결과에서, vacuolation score에 대하여 유의수준 0.05에서 유의 확률이 0으로 통계적으로 매우 유의한 차이를 보였다. Non-FLHS 계군의 vacuolation score는 1수를 제외하고 19수가 공포가 없는 1등급을 보인 반면, FLHS 계군의 vacuolation score는 1등급 6수, 2등급 8수, 3등급 4수, 4등급 2수로 Non-FLHS보다 높은 vacuolation score를 기록하였다.
- 05에서 유의 확률이 0으로 통계적으로 매우 유의한 차이를 보였다. Non-FLHS 계군의 vacuolation score는 1수를 제외하고 19수가 공포가 없는 1등급을 보인 반면, FLHS 계군의 vacuolation score는 1등급 6수, 2등급 8수, 3등급 4수, 4등급 2수로 Non-FLHS보다 높은 vacuolation score를 기록하였다.
- Non-FLHS와 FLHS를 집단을 구분하는 분류변수로 정하고, vacuolation score와 지방 함량(%)를 판별 정도를 분석하기 위한 설명 변수로 이용하였다. 판별 결과 Non-FLHS군이 정상 95% FLHS군이 FLHS 70%로, 전체(N = 40)중 33개가 올바르게 판별이 되어 total proportion correct가 82.5%로 높은 적중률(Hit-ratio)를 보였다. 결과적으로, FLHS 병력을 지니지 않은 1동 계군은 정상 95%를 차지함으로써, Non-FLHS로 판정하였고, FLHS 병력을 지닌 2동 계군은 FLHS 70%를 차지함으로써 FLHS로 판정하였다.
- 5%로 높은 적중률(Hit-ratio)를 보였다. 결과적으로, FLHS 병력을 지니지 않은 1동 계군은 정상 95%를 차지함으로써, Non-FLHS로 판정하였고, FLHS 병력을 지닌 2동 계군은 FLHS 70%를 차지함으로써 FLHS로 판정하였다.
- 본 실험의 Non-FLHS 계군은 3회 평균 139 ± 87.2 mg/ dL으로 정상 범위에 속하나, FLHS 계군의 2회 평균 210 ±173.2 mg/dL로 정상 범위보다 높은 수치를 보여주었다.
- 본 실험에서는 serum LDH에 대한 FLHS 계군의 2회 평균이 1,694.9 ± 691.3 IU/L로, Non-FLHS 계군의 3회 평균 1,238.3 ± 475.2 IU/L보다 높은 수치를 나타내었다.
- 본 실험에서 serum AST는 Non-FLHS과 FLHS 계군에 대하여 각각 3회 평균 153.6 ±23.1 IU/L와 2회 평균 174.3 ± 53.5 IU/L를 나타내어, Non-FLHS 보다 FLHS 계군의 평균 수치가 높았다.
- 본 실험에서는 Non-FLHS의 첫 번째 혈청 결과 평균이 18.2 ± 3.7 mg/dL로 정상 범주에 가까웠으나, 2회와 3회째 혈청 결과는 각각 평균 26.8 ± 3.6 mg/dL와 28.2 ±2.1 mg/dL로 수치가 상승했다.
- 5 IU/L를 나타내어, Non-FLHS 보다 FLHS 계군의 평균 수치가 높았다. 그리고, FLHS 계군 전체 53 수중에서 4수(7.5%)가 250 IU/L 이상의 수치를 나타냈으며, Non-FLHS 계군에는 250 IU/L 이상을 나타내는 개체가 없었다. Serum AST는 간 손상 시 수치가 상승한 것으로 보고하였다(Diaz et al.
- , 1999; Lumeij, 1997), 본 실험 결과에서도 FLHS 계군이 Non-FLHS 계군보다 수치가 상승된 개체를 더 많이 포함하고 있었다. 이는 FLHS의 진단을 위한 혈액화학검사 항목으로 serum AST를 측정하여 평균 수치의 상승 여부를 확인하고, 그 중에서 250 IU/L 이상을 보이는 개체의 수를 분석하는 것이 유의성이 있는 것으로 판단된다.
- 본 실험에서는 serum CK에 대한 FLHS 계군의 2회 평균이 1,104.9 ±472.9 IU/L, Non-FLHS 계군의 3회 평균이 1,107.3 ± 422.89 IU/L으로 나타나서, FLHS 계군의 수치가 Non-FLHS보다 높지 않고 비슷한 수준을 나타내었다.
- Non-FLHS와 FLHS 계군의 다섯 가지의 혈액화학치를 측정한 결과, cholesterol, AST, LDH의 평균 수치가 Non- FLHS 계군보다 FLHS 계군이 높았으며, FLHS를 확인하는데 cholesterol, AST, LDH가 유의성 있는 항목임을 알 수 있었다(p<0.05).
- FLHS 계군의 간의 지방 함량과 vacuolation score가 NonFLHS 계군보다 높게 나타났으며, FLHS를 확인하는데 간의 지방 함량과 조직 병리학적 소견을 평가하는 것이 유의성이 있음을 확인할 수 있었다(p<0.05).
- 측정된 다섯 가지의 혈액화학치를 전체적으로 통계처리한 결과, cholesterol, AST, LDH의 평균 수치가 Non-FLHS 계군보다 FLHS 계군이 높았으며, 통계적으로도 유의한 차이를 보였다(p<0.05).
- 89 IU/L으로 나타나서, FLHS 계군의 수치가 Non-FLHS보다 높지 않고 비슷한 수준을 나타내었다. 결과적으로, 본 실험의 FLHS 계군은 Non-FLHS 계군보다 CK는 높지 않으면서, AST 가 높게 나타났다. 이로써, FLHS를 진단하기 위해 AST를 측정할 때, serum CK를 비교 항목으로 이용하는 것이 유용하다는 것을 확인할 수 있었다.
- 결과적으로, 본 실험의 FLHS 계군은 Non-FLHS 계군보다 CK는 높지 않으면서, AST 가 높게 나타났다. 이로써, FLHS를 진단하기 위해 AST를 측정할 때, serum CK를 비교 항목으로 이용하는 것이 유용하다는 것을 확인할 수 있었다.
- 976으로 통계적으로 두 계군 간에 유의한 차이를 보이지 않았다. 특히, MINITAB을 이용하여 판별 분석을 실시한 결과에서도 Non-FLHS 계군의 cholesterol, AST, LDH 수치가 정상 80%를 차지하였고, FLHS 계 군의 cholesterol, AST, LDH 수치가 FLHS 62.3%를 차지함으로써, FLHS를 구분하는데 위 3가지 항목이 유의성이 있는 것으로 판별되었다. 유의성 있는 3가지 항목의 판별 추정 계수는 AST가 FLHS 계군이 0.
- 3%를 차지함으로써, FLHS를 구분하는데 위 3가지 항목이 유의성이 있는 것으로 판별되었다. 유의성 있는 3가지 항목의 판별 추정 계수는 AST가 FLHS 계군이 0.115, Non-FLHS 계군이 0.102를 나타내었고, cholesterol이 FLHS 계군이 0.003, Non-FLHS 계군이 0.001, LDH의 경우 FLHS계군이 0.004, Non-FLHS 계군이 0.003을 나타냄으로써 판별 추정 계수가 cholesterol과 LDH 보다 큰 AST가 FLHS을 판별하는데 더 큰 의미를 부여하는 유용한 항목임을 확인할 수 있었다.
- (1999)이 보고한 실험을 보면, FLHS에 대한 유전적인 질병 성향을 지닌 UCD-003라인과 정상적인 라인의 화이트 레그혼(SCWL)을 선택하여 두 계군 간의 특정 효소 활성치를 비교한 바 있다. 이 실험에서는 두 계군이 지방간 여부를 비교 확인하기 위하여 건조중량 대비 간의 지방 함량(%)과 hemorrhagic score를 측정하였는데, 지방 함량(%) 평균과 hemorrhagic score가 UCD-003 계군이 정상적인 산란계군보다 높았다. 본 실험에서도 FLHS 병력을 지닌 계군(FLHS)의 간의 지방 함량과 조직 병리학적 소견으로써의 vacuolation score가 FLHS 병력을 지니지 않은 계군(Non-FLHS)보다 높게 나타났다.
- 이 실험에서는 두 계군이 지방간 여부를 비교 확인하기 위하여 건조중량 대비 간의 지방 함량(%)과 hemorrhagic score를 측정하였는데, 지방 함량(%) 평균과 hemorrhagic score가 UCD-003 계군이 정상적인 산란계군보다 높았다. 본 실험에서도 FLHS 병력을 지닌 계군(FLHS)의 간의 지방 함량과 조직 병리학적 소견으로써의 vacuolation score가 FLHS 병력을 지니지 않은 계군(Non-FLHS)보다 높게 나타났다. 이와 같은 결과로, FLHS를 확인하는데 간의 지방 함량(%)과 조직병리학적 소견을 평가하는 것이 유의성이 있음을 알 수 있다.
- 본 실험에서도 FLHS 병력을 지닌 계군(FLHS)의 간의 지방 함량과 조직 병리학적 소견으로써의 vacuolation score가 FLHS 병력을 지니지 않은 계군(Non-FLHS)보다 높게 나타났다. 이와 같은 결과로, FLHS를 확인하는데 간의 지방 함량(%)과 조직병리학적 소견을 평가하는 것이 유의성이 있음을 알 수 있다. 그러나, 본 실험에서 간의 지방 함량(%)과 조직병리학적 소견을 평가한 것은 두 계군의 명확한 구별을 위한 것이었기 때문에 혈청화학적 검사 항목에서 나타난 두 계군 간의 차이는 충분히 인정이 되는 것으로 판단된다.
- 본 실험의 결과는 국내의 대부분의 산란계 농장에서 FLHS이 산발적으로 발생하고 있지만, 발병 후 진단이 되거나 발병으로 인한 피해 여부를 제대로 파악되지 못하는 실정에서, 생체에서 혈액을 이용한 혈액화학치를 주기적으로 모니터링하는 기법을 개발함으로써, 실용 산란계의 FLHS 발병을 사전에 인지하여 경제적 손실을 줄일 수 있음을 보여주었다.
- 05). 또한, FLHS 계군과 NonFLHS계군이 실험군으로서 명확하게 구분이 되었다.
- FLHS 계군은 Non-FLHS 계군보다 CK는 높지 않으면서, AST가 높게 나타났으며, FLHS를 진단하기 위해 AST를 측정할때, CK를 비교 항목으로 이용하는 것이 유용하다는 것을 확인할 수 있었다.
- MINITAB을 이용하여 판별 분석을 실시한 결과, AST의 판별 추정 계수가 cholesterol이나 LDH보다 큰 수치를 나타내어, AST가 FLHS의 판별에 더 큰 의미를 부여하는 유용한 항목임을 다시 확인할 수 있었다.
후속연구
- Non-FLHS 계군과 FLHS 계군이 접종 1주차와 달리 접종 2주차부터 수치의 차이가 없는 이유는 농장주의 요청에 따라 FLHS 계군에 칼슘 공급원으로 굴 껍질 제제를 사료에 추가로 첨부하여 serum calcium 수치가 상승하였기 때문이다. 접종 1주차 성적에서는 Non-FLHS 계군의 serum calcium 농도가 FLHS 계군의 평균 수치보다 낮았기 때문에 두 계군 간의 수치적 차이는 일부 인정이 되나, 국내의 많은 산란계 농장에서 난각 강화를 위해 다양하게 칼슘제를 사료 첨가하는 현실을 감안할 때, FLHS의 진단을 위한 혈액화학검사 항목으로 serum calcium을 선택할 때는 주의하여야 할 것으로 판단된다.
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