[논문]천일염 함유 청국장의 항산화효과

이재준; 김아라; 장해춘; 이명렬

천일염 함유 청국장의 항산화효과
Antioxidative Effects of Chungkukjang Preparation by Adding Solar Salt 원문보기

한국식품저장유통학회지 = Korean journal of food preservation, v.16 no.2, 2009년, pp.238 - 245

이재준 (조선대학교 식품영양학과) , 김아라 (조선대학교 식품영양학과) , 장해춘 (조선대학교 식품영양학과) , 이명렬 (조선대학교 식품영양학과)

초록
AI-Helper

본 연구에서는 천일염의 아직 밝혀지지 않은 기능성과 청국장의 효과를 감안하여 천일염으로 제조된 청국장의 기능적 우수성을 평가하기 위하여 Bacillus subtilis DJI 균주를 접종하여 발효시킨 무염청국장, 3% 천일염 첨가 청국장, 3% 정제염 첨가 청국장과 3% 정제염이 첨가되어진 시판청국장의 에탄올, 물 및 헥산 추출물의 항산화력을 비교 검토하였다. 청국장 에탄올, 헥산 및 물 추출 수율은 각각 $10.9{\sim}11.8%$, $15.7{\sim}16.9%$, $18.6{\sim}19.4%$ 범위로 청국장 용매별 간에는 서로 유사한 경향이었으며, 물 추출 수율이 가장 높게 나타났다. 추출물의 DPPH에 대한 전자소거능, 아질산염 소거능, linoleic acid에 대한 과산화물가 및 항산화지수 측정에 의한 항산화효과는 에탄올 추출 시료군이 물 추출 시료군에 비하여 높았다. 청국장 추출물의 전자소거능과 아질산염 소거능은 무염청국장과 3% 천일염 첨가 청국장 추출물이 가장 우수하였으나, 합성항산화제에 비해서는 낮은 효능을 보였다. 청국장 추출물 중 항산화지수는 3% 천일염 첨가 청국장 추출물이 가장 우수하였다. Bacillus subtilis DJI 균주를 접종하여 발효시킨 청국장인 무염청국장, 3% 천일염 첨가 청국장 및 3% 정제염 첨가 청국장이 시판청국장에 비하여 항산화효과가 우수하였으며, 균주를 접종하여 발효시킨 청국장 중 무염청국장과 3% 천일염 첨가 청국장이 3% 정제염 첨가 청국장에 비하여 항산화효과가 다소 우수하였다.

Abstract ▼ AI-Helper

The antioxidant effects of chungkukjang, a popular fermented soybean paste in Korea, prepared with solar salt were investigated in vitro. DJI chungkukjang(DJIC) was prepared using 3%(w/w) solar salt or 3%(w/w) refined salt, and fermented by Bacillus subtilis DJI. All of DJIC with no salt, DJIC with 3%(w/w) solar salt, DJIC containing 3%(w/w) refined salt, and commercial chungkukjang were extracted with ethanol, hexane, and water. Antioxidative activities were measured by 1,1-diphenyl-2-picryl hydrazyl(DPPH) free-radical generation, nitrite scavenging activity, peroxide value in the presence of linoleic acid, and the Rancimat test, in comparison with the commercial antioxidant butylated hydroxytoluene(BHT). Ethanol chungkukjang extracts showed the highest antioxdative capacities, whereas DPPH free-radical generation and scavenging activities, and linoleic acid peroxide values of DJIC extracts prepared using solar salt, and salt-free DJIC, showed the greatest values. In addition, extracts of DJIC prepared using solar salt had the highest antioxidant indices. Antioxidative activities were higher in DJIC extracts than in those of commercial chungkukjang. However, the antioxidative capacities of DJIC prepared using solar salt and DJIC with no added salt were less than those of BHT. In conclusion, these results suggest that extracts of chungkukjang prepared using solar salt are useful nutritional antioxidants and that dietary supplementation with such materials would decrease oxidative stress.

주제어

AI 본문요약
AI-Helper

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문제 정의

따라서 본 연구에서는 영양이 풍부하고 우수한 기능성 성분을 지닌 청국장에 천일염을 첨가하여 제조한 후 천일염 첨가 청국장의 항산화효과를 평가하기 위해 DPPH radical 소거능, 아질산염 소거능, linoleic acid상에서의 과산화물가, 항산화지수에 미치는 효과를 연구하였다.
본 연구에서는 천일염의 아직 밝혀지지 않은 기능성과 청국장의 효과를 감안하여 천일염으로 제조된 청국장의 기능적 우수성을 평가하기 위하여 Bacillus subtilis DJI 균주를 접종하여 발효시킨 무염청국장, 3% 천일염 첨가 청국장, 3% 정제염 첨가 청국장과 3% 정제염이 첨가되어진 시판청국장의 에탄올, 물 및 헥산 추출물의 항산화력을 비교 검토하였다. 청국장 에탄올, 헥산 및 물 추출 수율은 각각 10.

제안 방법

4) 25 mL를 취하여 50℃에서 72시간 동안 산화시킨 후 반응액을 분획여두에 옮겨 chloroform을 가하고 3회 반복 추출하였다. Chloroform 추출액에 acetic acid 25 mL 및 KI 포화용액 1 mL를 가하고 암소에서 5분간 방치한 다음 증류수 50 mL를 가한 후 가용성 전분을 지시약으로 하여 0.01 N Na₂S₂O₃ 용액으로 적정하여 과산화물가를 측정하였다.
97이 되도록 적당량의 에탄올을 가하여 만들었다. DPPH 용액 2 mL와 청국장 추출물 시료 2 mL를 시험관에 취하고 vortex mixer로 5초간 진탕하여 517 nm에서 반응시간에 따른 환원력을 측정하였다. DPPH radical을 50% 소거시키는 시료의 농도를 RC50으로 하였으며 양성대조군으로 합성항산화제인 BHT를 사용하였다.
, USA)에 첨가하고, 초음파(Ultrasonic processor, UCX-750, USA)를 이용하여 각각의 시료와 유지가 잘 혼합되도록 하였다. Rancimat의 측정 조건은 시료 3.0 g를 반응용기에 취하고 증류수 70 mL를 측정용기에 넣은 후 110℃에서 air flow rate 20 ℓ/hr로 하여 산화안정성을 비교하였다. 항산화지수는 시료를 첨가한 실험군의 유도시간을 시료를 첨가하지 않은 대조군의 유도시간으로 나눈 값을 구하였고, 모든 측정치는 3회 반복 실험하여 얻은 값의 평균치로 표시하였다.
항산화지수는 시료를 첨가한 실험군의 유도시간을 시료를 첨가하지 않은 대조군의 유도시간으로 나눈 값을 구하였고, 모든 측정치는 3회 반복 실험하여 얻은 값의 평균치로 표시하였다. 기존의 상업용 항산화제인 BHT를 유지에 대해 첨가하여 양성대조군으로 비교 실험하였다.
4 mL를 가하여 15분간 방치한 다음 520 nm에서 흡광도를 측정하였다. 대조군은 증류수를 가하여 상기와 동일한 방법으로 측정하였으며, 아질산염 소거능은 각 추출물의 시료를 첨가하기 전과 후의 아질산염 백분율(%)로 표시하였다.
동결 건조한 무염청국장, 3% 천일염 첨가 청국장, 3% 정제염 첨가 청국장 및 시판청국장 분말은 100 g 당 80% 에탄올 500 mL에 넣어 65℃에서 환류냉각관을 부착한 65℃의 heating mantle에서 3시간 동안 3회 추출한 다음 Whatman filter paper(No. 2)로 여과하였다. 여액을 40℃ 수욕 상에서 rotary vacuum evaporator로 용매를 제거하고 감압 · 농축한 후 동결 건조시켜 고형물 함량을 산출한 다음(26), 시료의 산화방지를 위하여 -70℃에 냉동 보관하면서 사용하였다.
무염청국장, 3% 천일염 첨가 청국장, 3% 정제염 첨가 청국장 및 시판청국장의 항산화효과를 비교 검토하기 위하여 동결 건조하여 마쇄한 시료를 80% 에탄올, 헥산 및 물로 추출한 후 수율을 계산하였다. Table 1에서와 같이 모든 청국장의 에탄올, 헥산 및 물 추출 수율은 각각 10.
배양된 B. subtilis DJI은 4℃ 9,950×g에서 15분간 원심분리하여 균체를 회수하고 회수된 균체를 멸균된 3차 증류수로 2회 수세하여 사용하였다.

대상 데이터

80% 청국장 에탄올 추출물을 separating funnel에 의한 용매별 분획으로 n-hexane과 물로 연속 추출한(27) 후 각 분획물을 rotary vacuum evaporator로 감압 · 농축한 다음 동결 건조시켜 Table 1과 같이 수율을 계산하고, 항산화 활성 측정용 시료로 사용하였다.
DPPH 용액 2 mL와 청국장 추출물 시료 2 mL를 시험관에 취하고 vortex mixer로 5초간 진탕하여 517 nm에서 반응시간에 따른 환원력을 측정하였다. DPPH radical을 50% 소거시키는 시료의 농도를 RC50으로 하였으며 양성대조군으로 합성항산화제인 BHT를 사용하였다.
위와 같이 제조한 청국장에 소금을 첨가하지 않은 생청국장(무염청국장), 광주 H마트에서 판매되고 있는 S사 제품의 천일염과 H사 제품의 정제염을 각각 3% 첨가하여 다시 제조한 천일염 첨가 청국장과 정제염 첨가 청국장을 동결건조한 후 분쇄하여 진공 포장한 다음 -70℃에 보관하면서 이후 실험에 사용하였다. 또한 양성대조군으로 사용하기 위하여 3% 정제염이 첨가된 시판청국장은 전국 대부분의 마트에서 쉽게 구입할 수 있는 J사 제품을 구입하여 조제한 청국장과 동일한 방법으로 시료를 준비하였다.
, Korea)에서 11시간 동안 발효하였다. 위와 같이 제조한 청국장에 소금을 첨가하지 않은 생청국장(무염청국장), 광주 H마트에서 판매되고 있는 S사 제품의 천일염과 H사 제품의 정제염을 각각 3% 첨가하여 다시 제조한 천일염 첨가 청국장과 정제염 첨가 청국장을 동결건조한 후 분쇄하여 진공 포장한 다음 -70℃에 보관하면서 이후 실험에 사용하였다. 또한 양성대조군으로 사용하기 위하여 3% 정제염이 첨가된 시판청국장은 전국 대부분의 마트에서 쉽게 구입할 수 있는 J사 제품을 구입하여 조제한 청국장과 동일한 방법으로 시료를 준비하였다.
청국장 제조는 조선대학교 식품영양학과 식품미생물실험실에서 제조한 것을 사용하였는데, 된장에서 분리한 Bacillus subtilis DJI 균주를 종균으로 사용하였다. 균은 37℃에서 24시간 전배양하여 LB 액체배지(Duchefa biochemie, bacto-tryptone 10%, yeast-extract 5%, sodium chloride 10%)에 1% 접종한 후 9시간 배양한 것으로 준비하였다.
subtilis DJI은 4℃ 9,950×g에서 15분간 원심분리하여 균체를 회수하고 회수된 균체를 멸균된 3차 증류수로 2회 수세하여 사용하였다. 청국장 제조에 사용된 콩은 국내에서 생산되는 콩나물 콩을 사용하였으며, 콩은 정선 및 수세하여 콩에 해당하는 3배의 물에 20시간 침지 한 후 이를 고압 멸균기에서 50분간 증자한 후 40℃로 냉각한 다음 배양된 종균을 원료의 1%(v/w) 접종하고 37℃ incubator(SW-90S, Sangwoo Scientific Co., Korea)에서 11시간 동안 발효하였다. 위와 같이 제조한 청국장에 소금을 첨가하지 않은 생청국장(무염청국장), 광주 H마트에서 판매되고 있는 S사 제품의 천일염과 H사 제품의 정제염을 각각 3% 첨가하여 다시 제조한 천일염 첨가 청국장과 정제염 첨가 청국장을 동결건조한 후 분쇄하여 진공 포장한 다음 -70℃에 보관하면서 이후 실험에 사용하였다.

데이터처리

본 실험은 독립적으로 3회 이상 반복 실시하여 얻은 결과로 결과는 실험군당 평균으로 나타내었고, SPSS 통계 package를 이용하여 일원배치 분산분석(one-way analysis of variance)을 한 후 p<0.05 수준에서 Tukey's test에 의하여 각 실험군의 평균치간의 유의성을 검정하였다.

이론/모형

과산화물가의 측정은 Hayase와 Katod의 방법(30)에 준하여 삼각플라스크에 linoleic acid 1 mL, 에탄올 20 mL, 추출물 시료 0.1 mL 및 0.2 M phosphate buffer(pH 7.4) 25 mL를 취하여 50℃에서 72시간 동안 산화시킨 후 반응액을 분획여두에 옮겨 chloroform을 가하고 3회 반복 추출하였다. Chloroform 추출액에 acetic acid 25 mL 및 KI 포화용액 1 mL를 가하고 암소에서 5분간 방치한 다음 증류수 50 mL를 가한 후 가용성 전분을 지시약으로 하여 0.
시료 추출물의 전자공여능 측정은 Blois의 방법(28)에 준하여 실시하였으며, DPPH에 대한 수소공여능을 측정하였다. DPPH 용액은 DPPH 16 mg을 에탄올 100 mL에 용해하고 20초간 진탕한 후 517 nm에서 흡광도가 0.
아질산염 소거능(nitrite scavenging ability, NSA) 측정은 Kato 등의 방법(29)에 준하여 1 mM NaNO₂ 용액 1 mL에 추출물 시료 0.02 mL를 가하고 0.1 N HCl(pH 1.2), 0.2 M citrate phosphate buffer(pH 4.2, pH 6.0)로 각각 pH를 보정한다음 반응액의 부피를 10 mL로 정용하였다. 용액을 37℃에서 1시간 반응시킨 후 1 mL 씩 취하고 2% 초산 5 mL와 30% 초산에 용해한 Griess 시약(1% sulfanylic acid : 1% naphthylamine = 1 : 1) 0.
항산화지수

항산화지수(antioxidant index, AI)는 Joo와 Kim의 방법(31)에 의하여 Rancimat(Metrohm model 679, Herisan, Switzerland)을 이용하여 측정하였는데, 추출물 시료에 포함된 용매를 완전히 제거한 후 각 분획물의 함량이 600 ppm이 되도록 soybean oil(Sigma Co., USA)에 첨가하고, 초음파(Ultrasonic processor, UCX-750, USA)를 이용하여 각각의 시료와 유지가 잘 혼합되도록 하였다. Rancimat의 측정 조건은 시료 3.

성능/효과

1)CJN: DJI chungkukjang with no salt, CJS: DJI chungkukjang added with 3% of solar salt, CJR: DJI chungkukjang added with 3% of refined salt, CCJ: Commercial chungkukjang.
항산화지수를 용매별로 살펴보면, 에탄올 추출물이 물 추출물에 비하여 높게 나타났으며, 청국장 에탄올과 물 추출물 모두 시료를 첨가하지 않은 대조군에 비하여 항산화지수 보다 높게 나타났다. 3% 천일염 첨가 청국장 에탄올과 물 추출물 모두 항산화지수가 가장 높게 나타났다. 천일염의 이물질 유입 및 중금속 오염 등 안정상에 의문이 제기되면서 그동안 저평가되었던 천일염이 본 연구 결과 천일염을 청국장에 첨가하였을 때 항산화지수는 소금을 첨가하지 않은 무염청국장에 비하여 증가시키는 것으로 보아 청국장 발효 후 맛을 향상시키거나 저장성을 증가시키기 위하여 천일염을 첨가하는 것이 기능성에 오히려 도움을 주는 것으로 사료된다.
청국장 에탄올과 물 추출물의 경우 무염청국장과 3% 천일염 첨가 청국장 추출물에서 아질산염 소거능이 가장 우수하였으며, 합성항산화제인 BHT의 아질산염 소거능에 비해서는 낮은 효능을 보였다. Bacillus subtilis DJI 균주를 접종하여 발효시킨 무염청국장, 3% 천일염 첨가 청국장 및 3% 정제염 첨가 청국장의 에탄올과 물 추출물 모두 시판청국장 에탄올과 물 추출물에 비하여 아질산염 소거능이 높은 것으로 나타났다. Shon 등(37)은 균주를 첨가하여 발효시킨 청국장 메탄올 추출물은 아질산염 소거능이 우수하였으나, 첨가한 균 종 간에는 차이가 나타나지 않았다고 보고하였다.
청국장 추출물 중 항산화지수는 3% 천일염 첨가 청국장 추출물이 가장 우수하였다. Bacillus subtilis DJI 균주를 접종하여 발효시킨 청국장인 무염청국장, 3%천일염 첨가 청국장 및 3% 정제염 첨가 청국장이 시판청국장에 비하여 항산화효과가 우수하였으며, 균주를 접종하여 발효시킨 청국장 중 무염청국장과 3% 천일염 첨가 청국장이 3% 정제염 첨가 청국장에 비하여 항산화효과가 다소 우수하였다.
항산화 활성을 나타내는 전자공여능은 노화억제 및 항산화효과와 관련된 중요한 생리기능을 나타내는 지표(34)이다. Table 2에서와 같이 용매별로 전자소거능을 살펴보면, 에탄올 추출물이 가장 우수한 전자소거능을 보였고 다음으로는 물 추출물이었으며, 헥산 추출물이 가장 낮게 나타났다. Choi 등(35)도 에탄올 추출물이 물 추출물보다 항산화효과가 우수하다고 보고하면서 추출 용매별로 항산화효과에 차이가 있다고 보고하였다.
청국장 헥산 추출물 간에는 차이가 관찰되지 않았다. 균주로 접종하여 제조한 청국장에 혼합되는 부재료인 소금이 전자소거능에 미치는 영향을 살펴보면, 천일염을 첨가한 청국장이 정제염을 첨가한 청국장 보다 전자소거능이 우수하였다. Kim 등(25)의 연구에서도 소금의 종류를 달리하여 제조한 청국장의 항산화효능을 측정한 결과 발효된 청국장에 천일염을 가공 처리한 죽염, 천일염 및 정제염을 각각 2% 첨가하여 제조한 후 메탄올로 추출한 다음 전자소거능을 관찰하였는데, 기능성 소금인 죽염 첨가 청국장의 전자소거능이 가장 우수하였고, 다음으로 천일염 첨가 청국장이었고 무염청국장과 정제염 청국장은 가장 낮은 효과를 보였는데 이는 청국장 제조 후 어떤 소금을 사용하느냐가 청국장의 기능성에 중요한 영향을 끼친다고 하였다.
또한 Bacillus subtilis DJI 균주로 접종하여 제조한 청국장인 무염청국장, 3% 천일염 첨가 청국장 및 3% 정제염 첨가 청국장이 3% 정제염이 첨가된 시판청국장에 비하여 항산화효능이 우수한 것으로 나타났다. 균주로 접종한 청국장 중에서 천일염 첨가 청국장이 정제염 첨가 청국장에 비하여 항산화 효과가 우수하였으며, 천일염 첨가 청국장은 소금을 첨가하지 않은 무염청국장과 비슷하거나 다소 증가된 항산화효과를 보였다. Kim 등(25)의 연구에서는 청국장을 제조 시 발효 후 소금을 넣은 청국장의 경우 암예방효과 및 in vitro 항암효과를 증진시켰으며, 소금의 종류 중 천일염으로 가공한 죽염을 넣었을 때 그 효과가 가장 높았고 다음으로 천일염으로 나타났다.
이상의 결과 에탄올로 추출한 청국장의 항산화능이 물로 추출한 청국장에 비하여 높았으며 헥산으로 추출한 청국장이 가장 낮았다. 또한 Bacillus subtilis DJI 균주로 접종하여 제조한 청국장인 무염청국장, 3% 천일염 첨가 청국장 및 3% 정제염 첨가 청국장이 3% 정제염이 첨가된 시판청국장에 비하여 항산화효능이 우수한 것으로 나타났다. 균주로 접종한 청국장 중에서 천일염 첨가 청국장이 정제염 첨가 청국장에 비하여 항산화 효과가 우수하였으며, 천일염 첨가 청국장은 소금을 첨가하지 않은 무염청국장과 비슷하거나 다소 증가된 항산화효과를 보였다.
Shon 등(40)은 검정콩 청국장 메탄올 추출물의 과산화물가를 측정한 결과 청국장 메탄올 추출물을 첨가하지 않은 대조군에 비하여 크게 감소하여 항산화 효과가 우수하였고, Bacillus 균주를 접종하여 제조한 검정콩 청국장 추출물을 첨가한 실험군의 과산화물가가 균주를 첨가하지 않은 검정콩 청국장 추출물 첨가군보다 낮게 나타났다. 본 연구 결과에서도 Bacillus subtilis DJI 균주로 접종하여 제조한 청국장 추출물이 시판청국장에 비하여 과산화물가 낮은 경향이었다. 소금 첨가 혹은 소금의 종류에 따른 지질과산화에 미치는 영향에 관한 연구도 다양하게 수행되었는데, 식품에 NaCl 을 첨가할 경우 일반적으로 식품의 지질산화를 촉진하는 것으로 알려져 있는데(11), Rhee 등(41)은 NaCl을 KCl로 대처할 경우 지질산화가 촉진되는 것을 감소시켰다.
이는 소금 중의 무기질 함량의 차이에 기인되며, Na 함량이 높고 Mg이나 Ca 함량이 전혀 들어 있지 않은 기계염이 K 함량이 높은 천일염, 가공염 혹은 죽염에 비하여 과산화 촉진작용이 있다고 하였다. 본 연구결과에서도 무염청국장과 3% 천일염 첨가 청국장의 과산화물가가 가장 낮았으며, 천일염 첨가 청국장이 정제염 첨가 청국장에 비하여 과산화물가가 낮았다.
2에서만 측정하였다. 용매별 아질산염 소거능을 살펴보면, 물 추출물에 비하여 에탄올 추출물이 높게 나타났으며, 헥산 추출물에서 가장 낮은 아질산염 소거능을 보였다. 본 연구 결과를 토대로 항산화효능 평가를 위하여 용매별 추출물 중 헥산 추출물이 전자소거능과 아질산염 소거능이 가장 낮은 항산화 활성을 보였기에 이후의 연구에서는 제외시켰다.
이상의 결과 에탄올로 추출한 청국장의 항산화능이 물로 추출한 청국장에 비하여 높았으며 헥산으로 추출한 청국장이 가장 낮았다. 또한 Bacillus subtilis DJI 균주로 접종하여 제조한 청국장인 무염청국장, 3% 천일염 첨가 청국장 및 3% 정제염 첨가 청국장이 3% 정제염이 첨가된 시판청국장에 비하여 항산화효능이 우수한 것으로 나타났다.
3% 천일염 첨가 청국장 에탄올과 물 추출물 모두 항산화지수가 가장 높게 나타났다. 천일염의 이물질 유입 및 중금속 오염 등 안정상에 의문이 제기되면서 그동안 저평가되었던 천일염이 본 연구 결과 천일염을 청국장에 첨가하였을 때 항산화지수는 소금을 첨가하지 않은 무염청국장에 비하여 증가시키는 것으로 보아 청국장 발효 후 맛을 향상시키거나 저장성을 증가시키기 위하여 천일염을 첨가하는 것이 기능성에 오히려 도움을 주는 것으로 사료된다.
Esakai 등(39)의 연구 결과에서도 대두발효식품의 항산화력이 메탄올, 에틸아세테이트, 헥산 순으로 감소하였으며, Oh와 Kim(32)의 연구에서도 200 ppm에서 측정한 청국장 추출물의 과산화물가도 메탄올, 물, 헥산 순으로 높은 경향을 보여 용매 종류에 따라 과산화물가가 다르다고 보고하였다. 청국장 시료 중 무염청국장과 3%천일염 첨가 청국장의 에탄올과 물 추출물의 과산화물가는 가장 낮게 나타났으며, 합성항산화제인 BHT와 유사한 경향을 보여 가장 높은 항산화효과를 나타내었다. Shon 등(40)은 검정콩 청국장 메탄올 추출물의 과산화물가를 측정한 결과 청국장 메탄올 추출물을 첨가하지 않은 대조군에 비하여 크게 감소하여 항산화 효과가 우수하였고, Bacillus 균주를 접종하여 제조한 검정콩 청국장 추출물을 첨가한 실험군의 과산화물가가 균주를 첨가하지 않은 검정콩 청국장 추출물 첨가군보다 낮게 나타났다.
청국장 에탄올 추출물을 첨가한 모든 시료에서 전자소거능의 효과가 나타났는데, 특히 3% 천일염 첨가 청국장과 무염 청국장 에탄올 추출물의 전자공여능이 가장 우수하였으나, 합성항산화제인 BHT에 비해서는 떨어졌다. 대두, 대립 및 소립 검정콩을 이용하여 발효시킨 청국장의 메탄올 추출물의 경우도 전자공여능은 BHT를 첨가한 것 보다 효과가 낮게 나타났지만 모든 청국장 메탄올 추출물에서 상당한 항산화효과가 나타났다고 보고(37)하였으며, 이는 원료콩 자체의 isoflavone을 비롯한 여러 물질 및 발효과정 중 생성되는 물질에 의한 것이라고 결론지었다.
본 연구에서는 천일염의 아직 밝혀지지 않은 기능성과 청국장의 효과를 감안하여 천일염으로 제조된 청국장의 기능적 우수성을 평가하기 위하여 Bacillus subtilis DJI 균주를 접종하여 발효시킨 무염청국장, 3% 천일염 첨가 청국장, 3% 정제염 첨가 청국장과 3% 정제염이 첨가되어진 시판청국장의 에탄올, 물 및 헥산 추출물의 항산화력을 비교 검토하였다. 청국장 에탄올, 헥산 및 물 추출 수율은 각각 10.9～11.8%, 15.7～16.9%, 18.6～19.4% 범위로 청국장 용매별 간에는 서로 유사한 경향이었으며, 물 추출 수율이 가장 높게 나타났다. 추출물의 DPPH에 대한 전자소거능, 아질산염 소거능, linoleic acid에 대한 과산화물가 및 항산화지수 측정에 의한 항산화효과는 에탄올 추출 시료군이 물 추출 시료군에 비하여 높았다.
본 연구 결과를 토대로 항산화효능 평가를 위하여 용매별 추출물 중 헥산 추출물이 전자소거능과 아질산염 소거능이 가장 낮은 항산화 활성을 보였기에 이후의 연구에서는 제외시켰다. 청국장 에탄올과 물 추출물의 경우 무염청국장과 3% 천일염 첨가 청국장 추출물에서 아질산염 소거능이 가장 우수하였으며, 합성항산화제인 BHT의 아질산염 소거능에 비해서는 낮은 효능을 보였다. Bacillus subtilis DJI 균주를 접종하여 발효시킨 무염청국장, 3% 천일염 첨가 청국장 및 3% 정제염 첨가 청국장의 에탄올과 물 추출물 모두 시판청국장 에탄올과 물 추출물에 비하여 아질산염 소거능이 높은 것으로 나타났다.
청국장 추출물의 전자소거능과 아질산염 소거능은 무염청국장과 3% 천일염 첨가 청국장 추출물이 가장 우수하였으나, 합성항산화제에 비해서는 낮은 효능을 보였다. 청국장 추출물 중 항산화지수는 3% 천일염 첨가 청국장 추출물이 가장 우수하였다. Bacillus subtilis DJI 균주를 접종하여 발효시킨 청국장인 무염청국장, 3%천일염 첨가 청국장 및 3% 정제염 첨가 청국장이 시판청국장에 비하여 항산화효과가 우수하였으며, 균주를 접종하여 발효시킨 청국장 중 무염청국장과 3% 천일염 첨가 청국장이 3% 정제염 첨가 청국장에 비하여 항산화효과가 다소 우수하였다.
추출물의 DPPH에 대한 전자소거능, 아질산염 소거능, linoleic acid에 대한 과산화물가 및 항산화지수 측정에 의한 항산화효과는 에탄올 추출 시료군이 물 추출 시료군에 비하여 높았다. 청국장 추출물의 전자소거능과 아질산염 소거능은 무염청국장과 3% 천일염 첨가 청국장 추출물이 가장 우수하였으나, 합성항산화제에 비해서는 낮은 효능을 보였다. 청국장 추출물 중 항산화지수는 3% 천일염 첨가 청국장 추출물이 가장 우수하였다.
Kim 등(25)의 연구에서는 청국장을 제조 시 발효 후 소금을 넣은 청국장의 경우 암예방효과 및 in vitro 항암효과를 증진시켰으며, 소금의 종류 중 천일염으로 가공한 죽염을 넣었을 때 그 효과가 가장 높았고 다음으로 천일염으로 나타났다. 청국장의 기능성은 재료, starter의 종류, 발효기간 및 부재료의 첨가 등에 의해 달라지는 것으로 사료되며, 청국장 제조과정에 있어서 천일염의 첨가는 항산화효과를 그대로 유지하거나 약간 증가시키는 역할을 하는 것으로 확인할 수 있었다. 따라서 청국장 발효 후 천일염의 첨가는 청국장 기능성에 영향을 미치는 것으로 사료되며, 천일염 첨가 청국장의 항산화효과는 청국장의 원료 및 발효과정 중 생성되는 항산화물질에 의한 효과인지 천일염에 의한 효과인지 그 작용기작은 추후 더 연구해야 할 것으로 사료된다.
4% 범위로 청국장 용매별 간에는 서로 유사한 경향이었으며, 물 추출 수율이 가장 높게 나타났다. 추출물의 DPPH에 대한 전자소거능, 아질산염 소거능, linoleic acid에 대한 과산화물가 및 항산화지수 측정에 의한 항산화효과는 에탄올 추출 시료군이 물 추출 시료군에 비하여 높았다. 청국장 추출물의 전자소거능과 아질산염 소거능은 무염청국장과 3% 천일염 첨가 청국장 추출물이 가장 우수하였으나, 합성항산화제에 비해서는 낮은 효능을 보였다.
Rancimat에 의한 항산화지수는 시료를 첨가 후 유지의 복잡한 산화과정 중 유도기간 마지막에 상당량의 저분자량 휘발성 카보닐산이 유리되는 양으로 측정한다(42). 항산화지수를 용매별로 살펴보면, 에탄올 추출물이 물 추출물에 비하여 높게 나타났으며, 청국장 에탄올과 물 추출물 모두 시료를 첨가하지 않은 대조군에 비하여 항산화지수 보다 높게 나타났다. 3% 천일염 첨가 청국장 에탄올과 물 추출물 모두 항산화지수가 가장 높게 나타났다.

후속연구

청국장의 기능성은 재료, starter의 종류, 발효기간 및 부재료의 첨가 등에 의해 달라지는 것으로 사료되며, 청국장 제조과정에 있어서 천일염의 첨가는 항산화효과를 그대로 유지하거나 약간 증가시키는 역할을 하는 것으로 확인할 수 있었다. 따라서 청국장 발효 후 천일염의 첨가는 청국장 기능성에 영향을 미치는 것으로 사료되며, 천일염 첨가 청국장의 항산화효과는 청국장의 원료 및 발효과정 중 생성되는 항산화물질에 의한 효과인지 천일염에 의한 효과인지 그 작용기작은 추후 더 연구해야 할 것으로 사료된다.

질의응답

핵심어	질문	논문에서 추출한 답변
	우리나라 고유의 전통 발효식품의 하나인 청국장은 발효 및 숙성과정 중에 새로 생성된 무슨 황산화물질을 함유하고 있는가?	우리나라 고유의 전통 발효식품의 하나인 청국장은 대두를 충분히 불려 익힌 후 미생물을 번식시켜 만든 단기 발효 식품으로 고유한 풍미를 지니고 있으며, 영양적으로 우수한 단백질 공급원으로서 된장이나 고추장보다 단백질과 지방 함량이 높은 양질의 콩 발효식품이다. 청국장은 대두에 함유되어 있는 항산화물질 뿐만 아니라 발효 및 숙성과정 중에 새로 생성된 항산화 물질인 이소플라본의 aglycones, 유리아미노산, 펩타이드, 갈변물질 등을 함유하고 있으며(16-17), 국내의 대두발효식품 중 청국장의 isoflavone 함량이 가장 높은 것으로 나타났으며, 많은 양의 isoflavone이 배당체보다 생체 이용성이 우수한 aglycone의 형태로 존재하고 있다(18-19). 그 외의 청국장에 다량 함유 되어 있는 생리활성 물질로는 식이섬유소, 인지질, phenolic acids, saponins, trypsin inhibitor, phytic acid 등의 성분이 들어있어 심장병, 동맥경화, 당뇨병 예방효과 외에 혈전용해능, 혈압상승 억제효과, 지질대사 개선효과, 항돌연변이성 및 항암, 항균작용 등의 생리활성효과가 알려지면서 새로운 건강기능식품으로 관심이 모아지고 있다(20).
	소금은 무엇인가?	소금은 모든 식품, 특히 우리나라의 전통발효식품인 김치, 된장 등에 많이 사용되어 식품의 저장성과 풍미에 영향을 주며 짠맛을 내는 조미료뿐만 아니라 방부력을 갖는 보존료로, KS 규격에 따라 크게 천일염과 정제염으로 나뉘며 정제염은 기계염과 가공염으로 분류되고 있다(1). 소금은 생리적으로 체내의 신경이나 근육 흥분성을 유지하고 신진대사를 왕성하게 할 뿐만 아니라 체내의 삼투압 조절 및 산과 알칼리의 균형을 이루게 하며(2-5), 또한 김치류, 장류, 젓갈류 등 발효식품의 미생물 생육과 발효과정에서 무기물의 공급원으로서도 중요한 역할을 한다.
	천일염은 무엇인가?	국내 유통되고 있는 많은 소금의 종류 중 천일염은 태양열과 바람 등 자연을 이용하여 해수를 저류지로 유입해 바닷물을 농축시켜 염의 결정으로 석출시킨 것으로(6), 99.8%의 NaCl을 함유하고 있는 정제염에 비하여 천일염은 NaCl을 92.4～94.4% 정도 함유하고 있으며(2), Ca, K, Mg 및 S와 같은 많은 무기질을 함유하고 있다(7). 천일염에 관한 연구로는 국내산 천일염으로 제조한 된장이 정제염 및 NaCl 함량이 높은 소금을 사용할 경우에 비하여 관능적 품질이 우수하였고(9), 김치의 발효특성에도 천일염이 기계염보다 우수한 것으로 나타내었다(10).

참고문헌 (42)

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표제어: PCR

동의어: Packet Collision Rate

용어 설명 출처 목록 (6)

용어 설명: PCR은 세균 특이성이 있는 primer를 이용하여 적은 수의 세균이 있을지라도 쉽게 검출할 수 있는 유용한 방법이며, 이를 이용하여 구강 내 치면세균막이나 타액에서 직접 세균을 검출할 수 있게 되었다[8].

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