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문제 정의
- 이에 이전에 보고되었던 Total antioxidant capacity( TAC), Oxygen radical absorbance capacity(ORAC)와 항산화 측정에 다용되는 Total phenolic content, 1, 1-Diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) 소거 활성, 지질과산화 그리고 Reactive oxygen species (ROS) 이외에 산양삼과 인삼의 항산화 효능을 비교·평가하고자 superoxide와 hydroxyl radical 소거 활성을 측정한 결과 유의한 결론을 얻었기에 보고하는 바이다.
제안 방법
- 반응물을 냉각시킨후 532nm에서 흡광도를 측정하였으며, hydroxyl radical 소거활성은 [(흡광도시료무첨가 - 흡광도시료)/흡광도시료무첨가]×100 공식으로 계산하였다.
- 산양삼 및 인삼의 항산화 효능을 비교 연구하고자 superoxide radical과 hydroxy radical 소거 활성을 측정하여 다음과 같은 결론을 얻었다.
- 따라서, 시료내 hydroxyl radical 소거활성이 존재하는 경우, 시료 첨가에 의해 deoxyribose의 분해가 억제되며 흡광도가 감소하게 된다. 시료의 hydroxyl radical 소거활성은 시료 무첨가군의 흡광도 변화를 100%로 기준하여 시료 첨가군의 흡광도 변화를 hydroxyl radical 생성 억제율로 표시하였다.
- 시료내 superoxide radical 소거활성이 존재하는 경우, 시료 첨가에 의해 formazan의 생성이 억제되며 흡광도가 감소하게 된다. 시료의 superoxide radical 소거활성은 시료 무첨가군의 흡광도 변화를 100%로 기준하여 시료 첨가군의 흡광도 변화를 superoxide radical 생성 억제율로 표시하였다.
- 0) 800㎕를 혼합한 다음, 20mM Tris 용액 80ul와 33μM phenazine methosulfate(PMS) 100㎕를 각각 첨가하였다. 즉, 비효소적으로 PMS/NADH로 유발된 superoxide radical은 NBT를 자주색의 formazan으로 환원시키며, 생성된 formazan을 측정하기 위해 560nm에서 10분 동안 반응물의 흡광도를 측정하였다. 시료의 슈퍼옥시드 라디칼 소거활성은 [(흡광도시료 무첨가 - 흡광도시료)/흡광도시료무첨가]×100의 공식으로 계산하였다.
- 희석한 시료 20㎕에 62uM nitro blue tetrazolium(NBT) 와 98μM β-nicotinamide adenine dinucleotide(NADH)를 함유한 20mM Tris 용액(pH 8.0) 800㎕를 혼합한 다음, 20mM Tris 용액 80ul와 33μM phenazine methosulfate(PMS) 100㎕를 각각 첨가하였다.
- 에 따라 측정하였다. 희석한 시료 50㎕에 2.5mM 2-deoxy-D-ribose를 함유한 10mM PBS 용액 345㎕를 혼합한 다음, 1mM FeCl3와 1.04mM EDTA 용액 50ul, 1mM ascorbate 50ul 및 0.1M H2O2 5ul를 각각 첨가하였다. 37℃에서 10분간 배양한 후, 2.
대상 데이터
- 본 연구에 사용된 산양삼은 수령 10년생으로 충남 서천시에 소재한 천방농산에서 재배한 것을 사용하였으며 인삼은 강원도 홍천군에서 재배 생산된 5년생을 본 연구의 시료로 사용하였다(Fig. 1).
- 항산화 활성 분석에 사용된 시약들은 모두 Sigma사(USA) 제품들을 사용하였으며, 2-Deoxy-D-ribose는 Bio Basic사(Canada)로부터 구입하였다. 본 연구에 사용된 모든 화학물과 용매들은 분석급 이상으로 사용하였다.
데이터처리
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3. 통계처리
처리군내 농도별 항산화 활성들은 일원 분산분석을 사용하여 조사하였으며, 처리군간 항산화 활성은 student-t test를 사용하여 조사하였다. 처리효과가 인정되는 경우 처리군별 평균값의 차이는 Student-Newman-Keuls' test13)를 사용하여 p<0.
- 처리효과가 인정되는 경우 처리군별 평균값의 차이는 Student-Newman-Keuls' test13)를 사용하여 p<0.05에서 유의성을 조사하였다.
이론/모형
- Hydroxyl radical 소거활성은 Halliwell 등의 방법12)에 따라 측정하였다. 희석한 시료 50㎕에 2.
- Superoxide radical 소거활성은 Liu의 방법11)에 따라 측정하였다. 희석한 시료 20㎕에 62uM nitro blue tetrazolium(NBT) 와 98μM β-nicotinamide adenine dinucleotide(NADH)를 함유한 20mM Tris 용액(pH 8.
성능/효과
- 1. 인삼 및 산양삼추출물의 농도가 증가함에 따라 superoxide radical 소거활성도 농도 의존적으로 증가하고 있음을 알 수 있었다. 각 농도별 인삼과 산양삼 추출물 간의 비교에서는 0.
- 2. 인삼 및 산양삼추출물의 농도가 증가함에 따라 hydroxyl radical 소거활성 역시 농도 의존적으로 증가하고 있음을 알 수 있었다. 각 농도별 인삼과 산양삼 추출물 간의 비교에서는 2.
- hydroxyl radical 소거활성 역시 각 농도별 인삼과 산양삼 추출물 간의 hydroxyl radical 소거활성을 비교해 보면, 1, 2.5 및 5㎎/㎖ 농도에서 산양삼의 hydroxyl radical 소거활성이 인삼에 비해 유의한 수준으로 높게 (p<0.05) 나타남을 알 수 있었다.
- 각 농도별 인삼과 산양삼 추출물 간의 hydroxyl radical 소거활성을 비교해 보면, 1, 2.5 및 5㎎/㎖ 농도에서 산양삼의 hydroxyl radical 소거활성이 인삼에 비해 높게 (p<0.05) 나타났다.
- 각 농도별 인삼과 산양삼 추출물 간의 superoxide radical 소거활성을 비교해 보면, 0.25 및 0.5㎎/㎖ 농도에서 산양삼의 superoxide radical 소거활성이 인삼에 비해 높게 (p<0.05) 나타났다.
- 각 농도별 인삼과 산양삼 추출물 간의 superoxide radical 소거활성을 비교해 보면, 0.25 및 0.5㎎/㎖ 농도에서 산양삼의 superoxide radical 소거활성이 인삼에 비해 유의한 수준으로 높게 (p<0.05) 나타났다.
- 인삼 및 산양삼추출물의 농도가 증가함에 따라 superoxide radical 소거활성도 농도 의존적으로 증가하고 있음을 알 수 있었다. 각 농도별 인삼과 산양삼 추출물 간의 비교에서는 0.25 및 0.5㎎/㎖ 농도에서 산양삼의 superoxide radical 소거활성이 인삼에 비해 유의한 수준으로 높게 나타났다.
- 인삼 및 산양삼추출물의 농도가 증가함에 따라 hydroxyl radical 소거활성 역시 농도 의존적으로 증가하고 있음을 알 수 있었다. 각 농도별 인삼과 산양삼 추출물 간의 비교에서는 2.5 및 5㎎/㎖ 농도에서 산양삼의 hydroxyl radical 소거활성이 인삼에 비해 유의한 수준으로 높게 나타남을 알 수 있었다.
- 따라서 기존에 보고된 삼의 효능 즉, 항암, 면역계의 작용 조절, 염증의 억제 등의 기전 해석에 대하여 산양삼의 항산화능이 인삼보다 우수할 뿐만 아니라 이에 대한 중요한 기전으로 작용하고 있다는 가설을 설정하여도 어느 정도 일리가 있을 것이라는 추론을 할 수 있었다. 향후 이에 대한 보다 광범위한 연구가 이루어지길 기대한다.
- 반면에, 산양삼 추출물 0.01, 0.1, 1, 2.5 및 5㎎/㎖ 농도의 흡광도는 0.695±0.004, 0.670±0.009, 0.548±0.011, 0.411±0.006 및 0.305±0.018로 측정되어, hydroxyl radical 생성 억제율은 각각 6.46±0.54, 9.83±1.23, 26.24±1.44, 44.64±0.75 및 58.95±2.36%로 나타났다.
- 본 연구 결과에서도 인삼 및 산양삼추출물 농도가 증가함에 따라 superoxide radical 소거활성도 농도 의존적으로 증가하고 있음을 알 수 있었다. 각 농도별 인삼과 산양삼 추출물 간의 superoxide radical 소거활성을 비교해 보면, 0.
- 이와 같이 인삼 및 산양삼추출물 농도가 증가함에 따라 hydroxyl radical 소거활성도 농도 의존적으로 증가하고 있음을 알 수 있었다. 각 농도별 인삼과 산양삼 추출물 간의 hydroxyl radical 소거활성을 비교해 보면, 1, 2.
- 이와 같이 인삼 및 산양삼추출물 농도가 증가함에 따라 superoxide radical 소거활성도 농도 의존적으로 증가하고 있음을 알 수 있었다. 각 농도별 인삼과 산양삼 추출물 간의 superoxide radical 소거활성을 비교해 보면, 0.
- 인삼 추출물 0.01, 0.1, 1, 2.5 및 5㎎/㎖ 농도의 흡광도는 0.693±0.010, 0.663±0.010, 0.589±0.006, 0.508±0.014 및 0.439±0.016으로 측정되어, hydroxyl radical 생성 억제율은 각각 6.73±1.40, 10.72±1.34, 20.73±0.81, 31.63±1.94 및 40.87±2.11%로 나타났다.
후속연구
- 따라서 본 연구 결과 산양삼은 인삼에 비해 우수한 것으로 나타나 산화 관련 질병 예방과 치료에 산양삼이 더욱 활용될 수 있을 것으로 사료되는 바이다.
- 따라서 기존에 보고된 삼의 효능 즉, 항암, 면역계의 작용 조절, 염증의 억제 등의 기전 해석에 대하여 산양삼의 항산화능이 인삼보다 우수할 뿐만 아니라 이에 대한 중요한 기전으로 작용하고 있다는 가설을 설정하여도 어느 정도 일리가 있을 것이라는 추론을 할 수 있었다. 향후 이에 대한 보다 광범위한 연구가 이루어지길 기대한다.
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