[국내논문]고초균 발효에 의한 홍삼박 발효물에 쑥 분말 첨가에 따른 물리화학적 및 항산화적 특성 Physicochemical and Antioxidant Properties of Red Ginseng Marc Fermented by Bacillus subtilis HA with Mugwort Powder Addition원문보기
홍삼 추출액 제조 후 생산되는 부산물인 홍삼박의 식품 소재화를 위해서 열풍 건조시킨 후 초미세 분말화 하였으며, 쑥 분말 첨가에 따른 고초균 발효 특성을 조사하였다. 홍삼박 분말에 탈지대두분말 3%와 monosodium glutamate(MSG) 2%, 쑥을 농도별(0~3%)로 첨가하여 발효하여 분석하였다. 홍삼박 발효물의 tyrosine 함량은 쑥 3% 첨가 시 581.3 mg% 로 가장 높은 함량을 나타낸 반면 protease 활성은 쑥을 첨가할수록 감소하는 경향을 나타냈으며 쑥을 첨가하지 않은 구에서 277.5 unit/g으로 가장 높은 활성을 나타냈다. 점조도 측정 결과 쑥 3% 첨가 시 $8.8\;Pa{\cdot}s^n$으로 가장 높게 나타났고, 점질물 함량은 쑥을 첨가하지 않은 구에서 11.5%로 가장 높은 함량을 나타냈다. 고분자 점질물인 PGA함량을 GPC를 이용하여 측정한 결과 쑥을 첨가하지 않은 구에서 15.9 g/kg 이었으며 분자량은 1,100 kDa으로 나타났다. 첨가된 MSG 전환율을 약 80% 정도로 나타냈으며, 쑥 첨가에 따른 전환율에 효과는 볼 수 없었다. DPPH radical 소거활성은 쑥 3% 첨가된 발효물에서 물과 70% 주정 추출물 각각 $IC_{50}$값이 0.62 mg/mL, 0.57 mg/mL로 나타났다. ABTS radical 소거 활성은 쑥 3% 첨가 시 물 과 70% 주정 추출물에서 각각 $IC_{50}$값은 1.24 mg/mL, 1.34 mg/mL로 나타났다.
홍삼 추출액 제조 후 생산되는 부산물인 홍삼박의 식품 소재화를 위해서 열풍 건조시킨 후 초미세 분말화 하였으며, 쑥 분말 첨가에 따른 고초균 발효 특성을 조사하였다. 홍삼박 분말에 탈지대두분말 3%와 monosodium glutamate(MSG) 2%, 쑥을 농도별(0~3%)로 첨가하여 발효하여 분석하였다. 홍삼박 발효물의 tyrosine 함량은 쑥 3% 첨가 시 581.3 mg% 로 가장 높은 함량을 나타낸 반면 protease 활성은 쑥을 첨가할수록 감소하는 경향을 나타냈으며 쑥을 첨가하지 않은 구에서 277.5 unit/g으로 가장 높은 활성을 나타냈다. 점조도 측정 결과 쑥 3% 첨가 시 $8.8\;Pa{\cdot}s^n$으로 가장 높게 나타났고, 점질물 함량은 쑥을 첨가하지 않은 구에서 11.5%로 가장 높은 함량을 나타냈다. 고분자 점질물인 PGA함량을 GPC를 이용하여 측정한 결과 쑥을 첨가하지 않은 구에서 15.9 g/kg 이었으며 분자량은 1,100 kDa으로 나타났다. 첨가된 MSG 전환율을 약 80% 정도로 나타냈으며, 쑥 첨가에 따른 전환율에 효과는 볼 수 없었다. DPPH radical 소거활성은 쑥 3% 첨가된 발효물에서 물과 70% 주정 추출물 각각 $IC_{50}$값이 0.62 mg/mL, 0.57 mg/mL로 나타났다. ABTS radical 소거 활성은 쑥 3% 첨가 시 물 과 70% 주정 추출물에서 각각 $IC_{50}$값은 1.24 mg/mL, 1.34 mg/mL로 나타났다.
Red ginseng marc (RGM) was fermented by the solid-state fermentation using Bacillus subtilis HA to produce biologically active compounds. The red ginseng marc fermented without mugwort possessed higher mucilage content (11.5%) and proteolytic activity (277.5 unit/g). The RGM fermented with 3% mugwor...
Red ginseng marc (RGM) was fermented by the solid-state fermentation using Bacillus subtilis HA to produce biologically active compounds. The red ginseng marc fermented without mugwort possessed higher mucilage content (11.5%) and proteolytic activity (277.5 unit/g). The RGM fermented with 3% mugwort showed lower production of mucilage and protease activity whereas higher tyrosine content (581.3 mg%) and consistency index ($8.8\;Pa{\cdot}s^n$). The mucilage produced from fermented RGM contained $\gamma$-PGA with 1,100 kDa of molecular weight, and its yield was 15.9 g/kg. 70% ethanol extract from the RGM fermented with 3% mugwort had the highest DPPH radical scavenging effect ($IC_{50}$ value of 0.57 mg/mL), and the water extract showed the highest ABTS radical scavenging effect, indicating $IC_{50}$ value of 1.24 mg/mL. Overall, the RGM fermented by B. subtilis HA with mugwort contained various biologically active compounds having antioxidant effects.
Red ginseng marc (RGM) was fermented by the solid-state fermentation using Bacillus subtilis HA to produce biologically active compounds. The red ginseng marc fermented without mugwort possessed higher mucilage content (11.5%) and proteolytic activity (277.5 unit/g). The RGM fermented with 3% mugwort showed lower production of mucilage and protease activity whereas higher tyrosine content (581.3 mg%) and consistency index ($8.8\;Pa{\cdot}s^n$). The mucilage produced from fermented RGM contained $\gamma$-PGA with 1,100 kDa of molecular weight, and its yield was 15.9 g/kg. 70% ethanol extract from the RGM fermented with 3% mugwort had the highest DPPH radical scavenging effect ($IC_{50}$ value of 0.57 mg/mL), and the water extract showed the highest ABTS radical scavenging effect, indicating $IC_{50}$ value of 1.24 mg/mL. Overall, the RGM fermented by B. subtilis HA with mugwort contained various biologically active compounds having antioxidant effects.
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문제 정의
본 연구에서는 홍삼 추출 후 부산물로 생산되는 홍삼박을 열풍 건조하여 초미세 분말화 한 후 쑥 농도별 첨가에 따른 유용 고초균을 이용하여 고체 발효를 하였으며, 기능성 점질물 PGA, 펩타이드, 단백질 가수분해효소 및 항산화 활성을 포함하는 발효물의 생리활성물질 생산을 위한 자료를 제공 하고자하였다.
제안 방법
250 mL 비커에 홍삼박 10 g과 탈지대두분말 3 g을 혼합한 후 증류수를 첨가하였다. 혼합된 시료는 autoclave(MLS-3020, Sanyo Electric Co.
홍삼박에 포함된 saponin 중 Rg1과 Rb1의 분석은 HPLC를 이용하여 분석하였으며 홍삼박 분말 10 g에 70% 메탄올을 200 mL 첨가하여 80℃에서 1시간 동안 환류냉각 추출한 후 여과, 농축하고 동결 건조하여 분석에 이용하였다. HPLC 분석 조건은 용매로는 A용매(10% acetonitrille, 90% water)와 B용매(90% acetonitrille, 10% water)를 사용하여 A와 B용매를 20:80으로 혼합하여 5분까지 유지하다가 점차 A용매의 농도를 증가시켜 60분까지 95%에 이르도록 하여 분석하였다. 사용된 column은 Capcell pak MG C18(Shiseido Co.
표준곡선은 각기 다른 분자량을 가진 dextran(American Polymer Corporation, Mentor, OH, USA)을 이용하여 작성하였다. PGA의 함량은 정제한 PGA를 표준물질로 사용하였으며 GPC 분석을 실시하고 생성된 peak 면적을 이용하여 계산하였다.
Protease 활성은 Anson의 방법(21)을 변형하여 측정하였으며, 홍삼박 발효물 2 g에 0.02 M phosphate buffer(pH 7.0) 18 mL을 첨가한 뒤 실온에서 진탕 후 1,500 × g에서 15분간 원심분리 하여 상등액으로부터 조효소액을 조제한 다음 효소활성을 측정하였다.
2 mL를 가하여 실온에서 30분 방치한 후 517 nm에서 흡광도를 측정하였다. 각 시료 추출물의 유리 라디칼 소거활성은 시료를 첨가하지 않은 대조구의 흡광도를 측정하였다. 각 시료 추출물의 유리 라디칼 소거활성은 시료를 첨가하지 않은 대조구의 흡광도를 1/2로 환원시키는데 필요한 시료의 농도인 IC50값으로 나타내었다.
총 폴리페놀 함량과 총 플라보노이드 함량을 측정하기 위하여 쑥 분말 3 g에 물과 에탄올을 각각 50 mL씩 넣고 25℃에서 6시간 동안 교반 추출하였다. 감압 농축기를 이용하여 농축하여 용매를 제거한 후 동결 건조하여 총 폴리페놀 함량은 AOAC법(17)에 의하여 측정하였고, 총 플라보노이드 함량은 Moreno 등의 방법(19)을 일부 변형하여 측정하였다.
건조한 점질물을 0.1 M Na2SO4 /0.05 M NaN3 용액(glacial acetic acid로 pH를 4로 조정)에 1% 되게 녹인 다음, 원심분리 후 상층액을 0.45 μm syringe filter로 여과하여 GPC(gel permeation chromatography)로 분석하였다.
subtilis HA starter를 고형분 무게의 1%씩 접종하여 42℃에서 24시간 동안 발효하였다. 또한 쑥을 농도별(0~3%)로 첨가하여 발효 후 동결 건조하여 분석하였다.
발효물의 펩타이드 생성 정도를 측정하기 위하여 Folin phenol 시약을 이용하여 발효물 중에 존재하는 tyrosine 함량을 측정하였다(20). 홍삼박 발효물 2 g을 증류수 18 mL로 희석하여 균질화 한 시료를 test-tube에 취하여 15분간 원심분리(1,500 × g) 한다.
홍삼박의 고체발효를 위해서 이용된 고초균은 glutamate 의존성 균주로서 기질로서 glutamate를 이용하여 glutamic acid의 중합체인 γ-PGA을 포함하는 점질물을 생산한다. 발효물중의 glutamate의 이용능을 측정하는 수단으로 발효물에 잔존하는 glutamate 잔존량을 TLC로 분석하였으며, 결과는 Fig. 1과 같다. 홍삼박 발효물의 glutamate 전환율은 약 80%로 나타났으나 쑥의 첨가에 따른 glutamate 전환율의 변화는 없었다(Fig 1a).
분석조건은 표준물질(1, 5, 10 mg/mL L-glutamic acid)과 여과액을 각각 2 μL씩 cellulose plate에 점적하여 전개용매(1-butanol : acetate : water=5:4:3, ethanol : water=63:37)로 전개하고 건조한 후 발색시약(0.2% ninhydrin in acetone)을 spraying 한 후 105℃에서 1분 동안 건조한 후 확인하였다.
회수된 상등액에 2배의 isopropanol을 첨가하여 혼합한 후 형성된 점질물은 95% ethyl alcohol를 이용하여 세척한 후 회수한 점질물을 건조하여 실험에 사용하였다. 상기에서 회수된 건조 점질물을 50℃에서 항량이 될 때까지 감압건조기를 이용하여 건조 후, 건조중량으로 측정하였다(23).
상기의 isopropanol 함유 용액을 50℃에서 10 mL까지 농축하여 원심분리 한 후 0.45 μm syringe filter로 여과한 후 thin layer chromatography(TLC) pattern을 이용하여 잔존량을 분석하였다.
수분 흡습력 측정 실험은 쑥 분말 1 g에 증류수 25 mL를 가한 뒤 30℃ 항온 수조에서 30분간 교반한 후 1,000×g에서 20분간 원심분리하고 남은 침전물의 무게를 측정하여 수분 흡착 지수(WAI, Water absorption index)를 구하였다.
5 cm diameter)를 장착하여 측정하였다. 시료 1 mL을 plate에 올려 구간 당 10초 동안의 평균값이 측정되어 얻은 값을 shear rate(1/s)와 shear stress(Pa)로 나타내어 점조도를 측정하였다. 측정온도는 20℃에서 전단속도(ѓ)는 1~100 s-1의 범위로 유동특성을 알아보았고, 점조도 지수는 power law model로 측정하였다(22).
홍삼박 발효물의 glutamate 전환율은 약 80%로 나타났으나 쑥의 첨가에 따른 glutamate 전환율의 변화는 없었다(Fig 1a). 쑥은 첨가하지 않고 glutamate를 2% 첨가하여 발효한 홍삼박 발효물의 발효시간에 따른 glutamate 전환율을 측정하였다(Fig. 1b). 발효시간이 길어질수록 잔존하는 glutamate 함량이 약간 감소되는 것을 TLC 분석으로 확인할 수 있었다.
이와 비교 시 홍삼박의 점질물 함량은 두부 부산물인 비지 발효물보다 점질물 생성이 우수하며 점질물의 생산에는 원료 종류 및 발효 균주가 큰 영향을 미칠 것이라고 추측되어진다. 점조도는 홍삼박 발효물을 증류수로 5배 희석하여 여과한 추출액을 이용하여 측정하였다. 홍삼박 발효물의 점조도 측정 결과 쑥을 첨가할수록 증가하였으며, 쑥을 첨가하지 않은 홍삼박 발효물의 점조도 값은 1.
250 mL 비커에 홍삼박 10 g과 탈지대두분말 3 g을 혼합한 후 증류수를 첨가하였다. 혼합된 시료는 autoclave(MLS-3020, Sanyo Electric Co., Ltd., Osaka, Japan)를 이용하여 121℃에서 15분간 멸균시킨 후, 실온(25~30℃)에서 충분히 식히고, MSG 2%를 첨가한 후 B. subtilis HA starter를 고형분 무게의 1%씩 접종하여 42℃에서 24시간 동안 발효하였다. 또한 쑥을 농도별(0~3%)로 첨가하여 발효 후 동결 건조하여 분석하였다.
홍삼 추출액 제조 후 생산되는 부산물인 홍삼박의 식품 소재화를 위해서 열풍 건조시킨 후 초미세 분말화 하였으며, 쑥 분말 첨가에 따른 고초균 발효 특성을 조사하였다. 홍삼박 분말에 탈지대두분말 3%와 monosodium glutamate(MSG) 2%, 쑥을 농도별(0∼3%)로 첨가하여 발효하여 분석하였다.
홍삼박 발효물에 존재하는 glutamate 잔존량 및 전환율은 TLC 분석으로 측정하였다(24). 상기의 isopropanol 함유 용액을 50℃에서 10 mL까지 농축하여 원심분리 한 후 0.
수분은 상압가열건조법, 조단백질은 단백질 자동분석기(Buchi 339, Buchi Labortechnik AG, Flawil, Switzerland)를 사용하여 질소함량을 측정하였으며, 조지방은 Soxhlet 추출법, 조섬유는 Johansson과 Hallmer(18)를 이용하여 정량하였다. 홍삼박에 포함된 saponin 중 Rg1과 Rb1의 분석은 HPLC를 이용하여 분석하였으며 홍삼박 분말 10 g에 70% 메탄올을 200 mL 첨가하여 80℃에서 1시간 동안 환류냉각 추출한 후 여과, 농축하고 동결 건조하여 분석에 이용하였다. HPLC 분석 조건은 용매로는 A용매(10% acetonitrille, 90% water)와 B용매(90% acetonitrille, 10% water)를 사용하여 A와 B용매를 20:80으로 혼합하여 5분까지 유지하다가 점차 A용매의 농도를 증가시켜 60분까지 95%에 이르도록 하여 분석하였다.
희석된 용액 990 μL에 sample 10 μL를 가하여 정확히 1분 동안 방치한 후 흡광도를 측정하였다.
대상 데이터
MRS broth는 Difco사(Sparks, MD, USA)의 제품을 구입하여 사용하였으며, 점질물 향상을 위해 첨가된 mono sodium glutamate(MSG)는 Wei-chuan Foods사(Taipei city, Taiwan)의 제품을 사용하였다. HPLC에 사용된 water와 acetonitrile은 HPLC 등급용 용매(J.T. Baker, Phillipsburg, NJ, USA)를 사용하였으며, 그 외의 시약들은 Sigma사(St. Louis, MO, USA)의 제품을 구입하여 사용하였다.
MRS broth는 Difco사(Sparks, MD, USA)의 제품을 구입하여 사용하였으며, 점질물 향상을 위해 첨가된 mono sodium glutamate(MSG)는 Wei-chuan Foods사(Taipei city, Taiwan)의 제품을 사용하였다. HPLC에 사용된 water와 acetonitrile은 HPLC 등급용 용매(J.
각 시료 추출물의 유리 라디칼 소거활성은 시료를 첨가하지 않은 대조구의 흡광도를 1/2로 환원시키는데 필요한 시료의 농도인 IC50값으로 나타내었다. 이때 상대 활성의 비교를 위하여 대조군으로 butylated hydroxy anisole(BHA), vitamin C를 사용하였다.
희석된 용액 990 μL에 sample 10 μL를 가하여 정확히 1분 동안 방치한 후 흡광도를 측정하였다. 이때 상대 활성의 비교를 위하여 대조군으로 vitamin C, trolox를 사용하였다.
재래식 청국장에서 분리한 후 한국미생물보존센터에 기탁한 B. subtilis HA(KCCM 10775P) 균주를 사용하였다. 스타터 배양액은 탈지대두분말 5% 용액(w/v)을 균질화한 후 121℃에서 15분간 멸균한 액체 배지 50 mL에 MRS agar plate에서 42℃로 24시간 동안 배양한 균주를 1회 접종한 뒤 진탕배양기(SI-900R, JEIO TECH Co.
홍삼박(red ginseng marc, RGM)은 주식회사 정문(Gyeongsan, Korea)으로부터 제공받았으며, 부재료로 탈지대두분말(deffated soybean flour, DSF)은 Archer Daniels Midland사(Decatur, IL, USA)의 제품을 구입하였고, 쑥 분말은 열매누리(Seoul, Korea)로부터 구입하여 사용하였다.
데이터처리
Means with the different letters in each column are significantly different (p<0.05) by Duncan’s multiple range test.
실험 결과는 SPSS statistical package program(V.17.0)을 이용하여 평균과 표준오차(mean±SD)를 구하였으며, 각 집단 간 평균치 차이를 검증하기 위하여 one way-ANOVA 및 Duncan's multiple range test를 적용하였다.
이론/모형
ABTS radical을 이용한 항산화력 측정은 ABTS + cation decolorization assay 방법(27)에 의하여 시행하였다. 7 mM 2,2-azino-bis(3-ethylbenzthiazoline-6-sulfonic acid)와 2.
초미세 분말화한 홍삼박의 수분, 조단백질, 조지방 함량은 AOAC법(17)에 따라 정량하였다. 수분은 상압가열건조법, 조단백질은 단백질 자동분석기(Buchi 339, Buchi Labortechnik AG, Flawil, Switzerland)를 사용하여 질소함량을 측정하였으며, 조지방은 Soxhlet 추출법, 조섬유는 Johansson과 Hallmer(18)를 이용하여 정량하였다. 홍삼박에 포함된 saponin 중 Rg1과 Rb1의 분석은 HPLC를 이용하여 분석하였으며 홍삼박 분말 10 g에 70% 메탄올을 200 mL 첨가하여 80℃에서 1시간 동안 환류냉각 추출한 후 여과, 농축하고 동결 건조하여 분석에 이용하였다.
, Seoul, Korea)를 이용하여 분말화하여 사용하였다. 초미세 분말화한 홍삼박의 수분, 조단백질, 조지방 함량은 AOAC법(17)에 따라 정량하였다. 수분은 상압가열건조법, 조단백질은 단백질 자동분석기(Buchi 339, Buchi Labortechnik AG, Flawil, Switzerland)를 사용하여 질소함량을 측정하였으며, 조지방은 Soxhlet 추출법, 조섬유는 Johansson과 Hallmer(18)를 이용하여 정량하였다.
시료 1 mL을 plate에 올려 구간 당 10초 동안의 평균값이 측정되어 얻은 값을 shear rate(1/s)와 shear stress(Pa)로 나타내어 점조도를 측정하였다. 측정온도는 20℃에서 전단속도(ѓ)는 1~100 s-1의 범위로 유동특성을 알아보았고, 점조도 지수는 power law model로 측정하였다(22).
성능/효과
62 mg/mL로 나타났다. 70% 주정 추출구 역시 쑥을 첨가할수록 우수한 소거활성을 나타냈으며 쑥 3% 첨가 시 IC50값이 0.57 mg/mL로 물 추출구보다 높은 소거활성을 나타났다.
ABTS radical 소거 활성법을 이용한 홍삼박 발효물의 물추출구 및 70% 주정 추출구의 항산화력을 측정한 결과는 Table 4와 같다. ABTS radical 소거활성은 DPPH radical 소거활성과 같이 쑥을 첨가할수록 우수한 소거활성을 나타냈으며 쑥 3% 첨가 시 물 추출구에서는 IC50값이 1.24 mg/ mL으로 나타났고, 주정 추출구에서는 1.34 mg/mL로 나타났다. DPPH radical 소거활성은 물 추출물보다 70% 주정 추출물에서 더 우수한 활성을 나타낸 반면 ABTS radical 소거활성은 물 추출물에서 더 우수한 활성을 나타냈다.
B. subtilis HA를 이용한 홍삼박 발효 시 protease 활성 측정 결과 쑥을 첨가하지 않은 구에서 277.5 unit/g으로 가장 높은 활성을 나타냈으며 쑥의 농도가 높아질수록 감소하는 경향을 나타냈다. 쑥은 고초균의 생육을 억제하는 작용이 있어 생균수를 감소시키는 결과를 나타냈으며(Table 1), 이와 관련하여 protease 활성 역시 쑥의 농도가 높아질수록 감소하는 경향을 보인 것이라 생각된다.
34 mg/mL로 나타났다. DPPH radical 소거활성은 물 추출물보다 70% 주정 추출물에서 더 우수한 활성을 나타낸 반면 ABTS radical 소거활성은 물 추출물에서 더 우수한 활성을 나타냈다.
첨가된 MSG 전환율을 약 80% 정도로 나타냈으며, 쑥 첨가에 따른 전환율에 효과는 볼 수 없었다. DPPH radical 소거활성은 쑥 3% 첨가된 발효물에서 물과 70% 주정 추출물 각각 IC50값이 0.62 mg/mL, 0.57 mg/mL로 나타났다. ABTS radical 소거 활성은 쑥 3% 첨가 시 물 과 70% 주정 추출물에서 각각 IC50값은 1.
5%로 가장 높은 함량을 나타냈다. 고분자 점질물인 PGA함량을 GPC를 이용하여 측정한 결과 쑥을 첨가하지 않은 구에서 15.9 g/kg이었으며 분자량은 1,100 kDa으로 나타났다. 첨가된 MSG 전환율을 약 80% 정도로 나타냈으며, 쑥 첨가에 따른 전환율에 효과는 볼 수 없었다.
5배 높은 활성을 나타났다. 따라서 고체 발효 시 발효 원료에 따른 단백질 가수분해효소 활성이 차이가 있음을 확인할 수 있었다. 홍삼박 발효물의 단백질 가수분해활성에 기인한 펩타이드 함량을 간접적으로 측정하는 방법으로 tyrosine 함량을 측정한 결과 홍삼박에 쑥을 첨가할수록 tyrosine 함량이 증가하였다.
1% 를 차지하였으며 대부분 탄수화물로 구성되어 있고, 특히 식이섬유 함량이 높게 나타났다. 또한 홍삼박 중에 함유된 saponin 중 Rb1과 Rg1은 검출되지 않아 홍삼 추출 시 모두 추출된 것으로 나타났다.
DPPH radical 소거 활성법을 이용한 홍삼박 발효물의 물추출구 및 70% 주정 추출구의 항산화력을 측정한 결과는 Table 3과 같다. 물 추출구에서는 쑥을 첨가할수록 우수한 소거활성을 나타냈으며 쑥 3% 첨가 시 IC50값이 0.62 mg/mL로 나타났다. 70% 주정 추출구 역시 쑥을 첨가할수록 우수한 소거활성을 나타냈으며 쑥 3% 첨가 시 IC50값이 0.
발효물의 점질물 함량은 쑥을 첨가하지 않은 구에서 11.5%로 가장 높게 나타났고, 발효물 중의 γ-PGA 함량 역시 쑥을 첨가하지 않은 구에서 15.9 g/kg으로 가장 높게 나타났다.
1b). 발효시간이 길어질수록 잔존하는 glutamate 함량이 약간 감소되는 것을 TLC 분석으로 확인할 수 있었다. 홍삼박의 고체 발효 중첨가된 glutamate의 전환은 24시간 이내로 대부분 이루어지며, 발효시간을 늘릴수록 glutamate 전환율은 다소 증가될 수 있지만, 홍삼박 발효물의 냄새 등을 고려할 때 발효시간은 24시간이 적당한 것으로 사료된다.
8%로 탄수화물 함량이 가장 높았다. 수분 흡착 지수(WSI)는 5.9 g/g, 총 폴리페놀 함량은 물 추출물이 60.1 mg%, 에탄올 추출물이 49.2 mg%로 물 추출물의 함량이 조금 높았다. 총플라보노이드 함량 역시 물 추출물이 38.
쑥 분말의 일반성분을 측정한 결과 pH는 5.6으로 나타났고 수분이 8.45%, 단백 9.8%, 조지방 3.6%, 탄수화물 65.8%로 탄수화물 함량이 가장 높았다. 수분 흡착 지수(WSI)는 5.
고초균을 이용하여 고체 발효시킨 홍삼박 발효물의 pH, 수분함량 및 생균수 변화는 Table 1과 같다. 쑥을 첨가하지 않은 홍삼박 발효물은 pH 6.2를 나타났으며, 쑥 첨가에 따라 발효물의 pH는 약간 감소하는 경향을 보였다. 홍삼박 발효 물의 수분함량은 쑥 분말을 첨가할수록 감소하는 경향을 나타냈으며, 홍삼박 발효물의 생균수 측정 결과 쑥을 첨가할수록 감소하는 경향을 나타내었다.
홍삼박 발효물의 단백질 가수분해활성에 기인한 펩타이드 함량을 간접적으로 측정하는 방법으로 tyrosine 함량을 측정한 결과 홍삼박에 쑥을 첨가할수록 tyrosine 함량이 증가하였다. 쑥이 첨가되지 않은 홍삼박 발효물의 tyrosine 함량은 485.0 mg%로 나타났으며 쑥 3% 첨가 시 581.3 mg%로 가장 높은 함량을 나타냈다(Table 1). 쑥 첨가 경우에 홍삼박 발효물의 단백질 가수분해효소의 활성이 감소하였지만 발효 원료에 존재하는 단백질의 함량이 증가되어 최종 단백질 가수 분해물을 나타내는 tyrosine 함량이 높게 측정된 것으로 추측된다.
열풍 건조된 홍삼박을 초미세로 분쇄한 분말의 입자 크기는 20 μm로 나타났다. 일반성분 분석결과 수분이 11.1%, 조단백 18.0%, 조지방 4.0%, 탄수화물은 73.1%, 조섬유 20.1% 를 차지하였으며 대부분 탄수화물로 구성되어 있고, 특히 식이섬유 함량이 높게 나타났다. 또한 홍삼박 중에 함유된 saponin 중 Rb1과 Rg1은 검출되지 않아 홍삼 추출 시 모두 추출된 것으로 나타났다.
5 unit/g으로 가장 높은 활성을 나타냈다. 점조도 측정 결과 쑥 3% 첨가 시 8.8 Paㆍsn으로 가장 높게 나타났고, 점질물 함량은 쑥을 첨가하지 않은 구에서 11.5%로 가장 높은 함량을 나타냈다. 고분자 점질물인 PGA함량을 GPC를 이용하여 측정한 결과 쑥을 첨가하지 않은 구에서 15.
9 g/kg이었으며 분자량은 1,100 kDa으로 나타났다. 첨가된 MSG 전환율을 약 80% 정도로 나타냈으며, 쑥 첨가에 따른 전환율에 효과는 볼 수 없었다. DPPH radical 소거활성은 쑥 3% 첨가된 발효물에서 물과 70% 주정 추출물 각각 IC50값이 0.
2 mg%로 물 추출물의 함량이 조금 높았다. 총플라보노이드 함량 역시 물 추출물이 38.0 mg%, 에탄올 추출물이 36.0 mg%로 물 추출물의 함량이 높게 나타났다.
subtilis HA를 이용한 홍삼박 발효물의 점조도 변화와 생산되는 점질물 함량 변화는 Table 2와 같다. 홍삼박 발효 물로부터 추출된 수용성 성분의 알코올 침전에 의해서 얻어진 점질물 함량은 쑥을 첨가하지 않은 구에서 11.5%로 가장 높은 함량을 나타냈으며 쑥을 첨가할수록 감소하면서 쑥 3% 첨가 시 점질물 함량은 7.2%로 나타났다. 이는 쑥 첨가에 따른 고초균의 생육 억제에 따른 결과로 생각된다.
2를 나타났으며, 쑥 첨가에 따라 발효물의 pH는 약간 감소하는 경향을 보였다. 홍삼박 발효 물의 수분함량은 쑥 분말을 첨가할수록 감소하는 경향을 나타냈으며, 홍삼박 발효물의 생균수 측정 결과 쑥을 첨가할수록 감소하는 경향을 나타내었다. 쑥이 첨가되지 않은 홍삼박 발효물은 9.
홍삼박 발효물의 tyrosine 함량은 쑥 3% 첨가 시 581.3 mg% 로 가장 높은 함량을 나타낸 반면 protease 활성은 쑥을 첨가할수록 감소하는 경향을 나타냈으며 쑥을 첨가하지 않은 구에서 277.5 unit/g으로 가장 높은 활성을 나타냈다.
따라서 고체 발효 시 발효 원료에 따른 단백질 가수분해효소 활성이 차이가 있음을 확인할 수 있었다. 홍삼박 발효물의 단백질 가수분해활성에 기인한 펩타이드 함량을 간접적으로 측정하는 방법으로 tyrosine 함량을 측정한 결과 홍삼박에 쑥을 첨가할수록 tyrosine 함량이 증가하였다. 쑥이 첨가되지 않은 홍삼박 발효물의 tyrosine 함량은 485.
점조도는 홍삼박 발효물을 증류수로 5배 희석하여 여과한 추출액을 이용하여 측정하였다. 홍삼박 발효물의 점조도 측정 결과 쑥을 첨가할수록 증가하였으며, 쑥을 첨가하지 않은 홍삼박 발효물의 점조도 값은 1.5 Paㆍsn으로 나타났고 쑥 3% 첨가 시 점조도 값은 8.8 Paㆍsn으로 쑥을 첨가하지 않은 발효물보다 약 6배 높은 점조도 값을 나타냈다. 쑥 첨가에 따른 홍삼박 발효물의 점조도 증가는 수분 함량의 차이 및 쑥 분말과 점질물 등을 함유한 발효물 사이의 상호 결합에 의한 결과라 사료된다.
발효시간이 길어질수록 잔존하는 glutamate 함량이 약간 감소되는 것을 TLC 분석으로 확인할 수 있었다. 홍삼박의 고체 발효 중첨가된 glutamate의 전환은 24시간 이내로 대부분 이루어지며, 발효시간을 늘릴수록 glutamate 전환율은 다소 증가될 수 있지만, 홍삼박 발효물의 냄새 등을 고려할 때 발효시간은 24시간이 적당한 것으로 사료된다. PGA 생산을 위한 glutamate 첨가 시 액체발효에서는 균주에 따라 전환율의차이를 보이며, B.
후속연구
쑥 첨가에 따른 홍삼박 발효물의 점조도 증가는 수분 함량의 차이 및 쑥 분말과 점질물 등을 함유한 발효물 사이의 상호 결합에 의한 결과라 사료된다. 따라서 홍삼박 발효 시에 첨가되는 쑥은 고초균에 의한 점질물 생산을 저해하는 반면에, 발효물의 점조도는 증가시키는 경향을 보이면서 홍삼박 발효물의 물성 조절이 가능하며, 다양한 식품소재로 활용이 기대된다.
subtilis에 대한 항균 작용을 나타낸다고 보고한바 있으며 이에 따라 쑥의 농도가 높을수록 고초균 생육이 점차 억제되어 생균수의 감소가 나타난 것이라 생각된다. 이 결과로 쑥은 전통발효식품 제조 시 고초균에 의한 생육을 억제시키는 천연물 소재로 활용이 가능할 것으로 사료된다.
질의응답
핵심어
질문
논문에서 추출한 답변
인삼을 사용하는 국가는?
A. Meyer)은 한국과 중국 등에서 2,000년 이상 가장 고귀한 생약제로 사용되어 왔으며, 홍삼은 수삼을 증숙한 후 건조함으로써 갈변화 등을 포함한 품질 변화가 수반된다. 홍삼의 약리 효능은 사포닌, 단백질, 펩타이드나 비전분성 다당체에 관한 연구가 이루어져 항산화, 항염증, 면역기능증진, 신경조절, 간 보호, 혈당저하, 지방흡수 조절작용 등의 생리활성 기능이 보고되고 있다(1).
홍삼 잔사인 홍삼박에 관한 기존의 연구로는 어떤 것들이 있는가?
이러한 홍삼박에는 홍삼의 향 및 고유한 색을 유지하고 다당체를 포함한 여러 가지 유효성분이 함유된 것으로 보고되었으며 식이섬유가 풍부하다(3). 지금까지 보고된 홍삼박에 관한 연구로는 홍삼박 분말을 첨가한 식빵의 품질 특성 (4), 홍삼박 분말을 첨가한 반죽의 특성(5) 등 홍삼박 분말 첨가에 따른 제과․제빵의 품질특성에 관하여 연구되어 왔으며, 그 밖의 볶음 처리한 홍삼박의 향기성분과 관능적 특성(6), 홍삼박으로부터 산성 다당체의 추출조건 조사(7), 효모생육에 미치는 홍삼박의 영향(8)에 관하여 보고되었다. 이처럼 홍삼박의 식품소재로 이용에 관한 연구는 주로 건조 및 가공소재로 이용에 한정되며, 홍삼박의 발효에 관한 연구는 미흡한 실정이다.
홍삼은 어떤 기능이 있는가?
Meyer)은 한국과 중국 등에서 2,000년 이상 가장 고귀한 생약제로 사용되어 왔으며, 홍삼은 수삼을 증숙한 후 건조함으로써 갈변화 등을 포함한 품질 변화가 수반된다. 홍삼의 약리 효능은 사포닌, 단백질, 펩타이드나 비전분성 다당체에 관한 연구가 이루어져 항산화, 항염증, 면역기능증진, 신경조절, 간 보호, 혈당저하, 지방흡수 조절작용 등의 생리활성 기능이 보고되고 있다(1). 홍삼의 효능이 과학적으로 밝혀지면서 다양한 기능성식품의 소재로 응용되어 전 세계적으로 홍삼의 유통량은 급격한 증가 추세를 나타내고 있다(2).
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