[논문]MSH에 의해 자극된 B16F10세포에서 사간(射干)의 멜라닌 합성 억제 효과

김대성; 성병곤; 이장천; 이부균; 우원홍; 임규상

doi:10.6114/jkood.2011.24.1.025

[국내논문] MSH에 의해 자극된 B16F10세포에서 사간(射干)의 멜라닌 합성 억제 효과
Inhibitory Effect of Belamcandae Rhizoma on the Melanogenesis in MSH-stimulated B16F10 cells 원문보기

韓方眼耳鼻咽喉皮膚科學會誌 = The journal of Korean Medicine Ophthalmology & Otolaryngology & Dermatology, v.24 no.1, 2011년, pp.25 - 35

김대성 (원광대학교 한의학전문대학원 한약자원개발학과) , 성병곤 (원광대학교 한의학전문대학원 한약자원개발학과) , 이장천 (부산대학교 한의학전문대학원 약물학부) , 이부균 (세명대학교 본초방제학교실) , 우원홍 (원광대학교 한의학전문대학원 한약자원개발학과) , 임규상 (원광대학교 한의학전문대학원 한약자원개발학과)

Abstract ▼ AI-Helper

Objective : The present study was designed to assess the potential inhibitory activity of an ethanol extract of Belamcandae Rhizoma (EBR) on the alpha-melanocyte stimulating hormone (${\alpha}$-MSH)-induced melanogenesis signal pathway in B16F10 melanoma cells. Methods : Several experiments were performed in B16F10 melanoma cells. We studied tyrosinase activity, melanin content, cell-free tyrosinase activity and DOPA stain, and performed Western blots and RT-PCR for proteins and mRNA involved in melanogenesis. Results : ${\alpha}$-MSH-induced tyrosinase activity and melanin content were inhibited significantly by EBR. EBR markedly suppressed the protein expression level of tyrosinase in B16F10 melanoma cells. On the other hand, the expression of tyrosinase-related protein-1 (TRP-1) and -2 (TRP-2; DCT) were not affected by EBR. To elucidate the mechanism of the depigmenting property of EBR, we examined the involvement EBR in cAMP response element binding (CREB) protein phosphorylation and microphthalmia-associated transcription factor (MITF) signalling induced by ${\alpha}$-MSH. EBR did not regulate CREB phosphorylation and MITF expression by ${\alpha}$-MSH. Nevertheless, the mRNA expression of tyrosinase was significantly attenuated by EBR treatment without changes in the expression of TRP-1 and -2 mRNA. Conclusion : Our study suggested that EBR inhibits ${\alpha}$-MSH-induced melanogenesis by suppressing tyrosinase mRNA.

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AI 본문요약
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문제 정의

본 연구에서는 α-MSH에 의해 멜라닌 합성이 활성화된 세포에서 사간 에탄올추출물의 미백 효과를 조사하였으며, CREB 및 MITF의 발현에 미치는 영향을 조사하였다.
본 실험에서는 사간 에탄올추출물이 α-MSH로 유도된 tyrosinase 활성을 억제하는지 조사하였다.
본 연구에서 DOPA 염색을 통하여 사간 에탄올 추출물의 멜라닌합성 억제 효과를 형태적으로 관찰하기 위하여 사간 에탄올추출물과 α-MSH를 병용처리하고 3일간 배양한 후 대조군과 비교하였다.
본 연구에서 사간 에탄올추출물이 B16/F10 세포의 멜라닌 합성에 미치는 영향을 조사하기 위하여 α-MSH와 사간 에탄올추출물을 50 ㎍/㎖와 100 ㎍/㎖ 농도로 처리하여 3일간 배양한 후 총 멜라닌 양을 측정하였다.
본 연구에서 Western blot을 이용하여 사간 에탄올추출물이 α-MSH에 의한 과색소침착시 세포내 tyrosinase 효소의 단백질발현에 미치는 영향을 조사하였다.
사간 에탄올추출물이 tyrosinase 단백질 발현을 조절하였기 때문에 멜라닌 합성 관련 유전자에는 어떠한 영향을 주는지 조사 하였다. Tyrosinase mRNA는 α-MSH 단독 처리 시 대조군보다 증가하였고, 사간 에탄올추출물을 함께 처리하였을 때 대조군과 유사한 수준으로 억제되었지만 TRP-1, -2는 조절하지 못하였다(Fig.
본 실험에서 과색소생성시 사간 에탄올추출물의 효과를 알아보기 위하여 α-MSH로 멜라닌 합성을 자극하고 사간 에탄올추출물이 미치는 영향을 조사하였다.
이밖에도 감초^17,18), 더덕¹⁹⁾, 천화분²⁰⁾, 백출²¹⁾, 사삼²²⁾ 등의 식물추출물이 멜라닌 합성 억제 효능이 있다고 보고되었다. 본 실험에서는 사간 에탄올추출물이 멜라닌 합성과 tyrosinase 활성을 조절하는지 조사하였다.

가설 설정

3. 사간 에탄올추출물은 CREB의 활성화와 MITF의 발현에 관여하지 않았다.

제안 방법

실험에 사용된 사간(射干, Belamcandae Rhizoma)은 한약재시장에서 구입한 것을 원광대학교 한의학전문대학원의 약재보관 냉동고에 보관하며 사용하였다. 사간 200 g에 100% 에탄올 2000 ㎖를 가하고 밀봉하여 24시간 동안 실온에서 진탕하고 1시간 초음파분쇄기로 처리하였으며, 동일한 과정을 3회 반복하였다. 이를 거즈로 여과하여 감압농축하고, 동결건조하여 시료 9.
각 군당 2×106 개의 세포를 수거하여 멜라닌을 측정하였다.
24-well plate에 B16/F10 세포를 5×103 개를 분주하여 24시간동안 배양한 후 사간 에탄올추출물을 농도별로 처리하고 24시간 배양하였다. 배양완료 후 0.5 ㎎/㎖ MTT용액을 넣어 3시간 37℃에서 배양한 다음 상층액을 제거하고 formazan을 DMSO 1㎖를 넣어 30분간 실온에서 방치한 후 570 ㎚의 파장에서 ELISA reader로 흡광도를 측정하여 세포생존율을 측정하였다.
멜라닌 정량은 Hosei 등의 방법¹¹⁾을 변형하여 사용하였다. B16/F10 세포를 직경 10 ㎝ 배양용기에 3×105 cells/dish로 분주하여 24시간 동안 부착 시킨 후, 사간 에탄올추출물과 α-MSH(100 nM)를 각각 처리하여 3일 동안 배양하였다.
B16F10 세포를 6 ㎝ 배양 용기에 5×105 개씩 분주한 후 24시간 배양한 다음 사간 에탄올추출물 25, 50, 100 ㎍/㎖ 씩을 처리하고 24시간 배양한 후 easy-BlueTM Total RNA extraction kit (iNtRON Biotechnology, Korea)를 사용하여 mRNA를 추출하여 mRNA 함량을 측정하였다.
4℃, 13,000 rpm에서 30분간 원심분리를 하여 얻은 상층액을 tyrosinase 활성측정 용액으로 사용하였고, Bradford 법으로 595 nm에서 흡광도를 측정, 동량의 단백질 양을 계산하였다. 시료 50 ㎕와 0.1 M sodium phosphate buffer 150 ㎕, 0.1%(W/V) L-DOPA 50 ㎕를 분주하여 혼합한 후 ELISA reader기로 37℃에서 405 nm의 파장으로 1시간동안 30분 간격으로 흡 광도의 변화를 측정하였다. 활성율은 대조군의 흡광도를 기준으로 한 백분율로 환산하여 결과로 나타내었다.
4℃, 13,000 rpm에서 30분간 원심분리를 하여 얻은 상층액을 tyrosinase 활성측정 용액으로 사용하였다. 시료 50 ㎕와 0.1M sodium phosphate buffer 150 ㎕, 0.1%(W/V) L-DOPA 50 ㎕를 각각 분주하여 혼합한 후 ELISA reader기로 37℃에서 405 nm의 파장으로 1시간동안 30분 간격으로 흡광도의 변화를 측정하였다. tyrosinase 활성도는 대조군의 흡광도를 기준으로 한 백분율로 환산하여 결과로 나타내었다.
배양한 배지를 버리고 PBS로 3회 세척하고 5%(V/V) formalin 용액으로 고정하였다. 0.1%(W/V) L-DOPA 용액으로 실온에서 4시간 염색하고 탈수하여 봉입한 후 광학현미경으로 관찰하였다¹²⁾.
TBST로 3회 세척한 후, tyrosinase는 anti-rabbit HRP로, actin, TRP-1 및 TRP-2는 goat polyclonal IGg로 2차 antibody를 1:3000으로 희석하여 실온에서 1시간 반응시켰다. TBST로 세척한 후, Enhanced chemiluminescence(ECL) 용액으로 발광 후 image analysis 기기(ChemidocXRS)를 이용하여 band의 사진을 촬영하였다.
Total RNA extraction kit (iNtRON Biotechnology, Korea)를 사용하여 mRNA를 추출하여 mRNA 함량을 측정하였다. 측정된 mRNA는 Maxime RT PreMix Oligo dT primer(iNtRON Biotechnology, Korea)에 넣어 최종 부피 20 ㎕가 되게 DEPC가 처리된 물을 넣어 혼합하고, RT-PCR 기계를 사용하여 45℃에서 1시간, 95℃에서 5분, 1회 반응시킴으로써 역전사를 수행하여 cDNA를 합성하였다. 합성된 cDNA 2 ㎕와 tyrosinase primer(1.
191 bp)의 염기서열은 forward; (5')-CATTTTTGATTTGAGTGTTCT-(3') 와 reverse; (5')-TGTGGTAGTCGTCTTTGTCC-(3'), TRP-1 primer(784 bp)의 염기서열은 forward; (5')-CTTTCTCCCTTCCTTACTGG-(3')와 reverse; (5')-TGGCTTCATTCTTGGTGCTT-(3'), TRP-2 primer (518 bp)의 염기서열은 forward; (5')-TGAGAAG AAACAAAGTAGGCACAA-(3')와 reverse; (5')- CAACCCCAAGAGCAAGACGAAAGC-(3'), 그리고 actin primer(500 bp)의 염기서열은 foward; (5')-TCAGAAGGACTCCTATGTGG-(3')와 reverse; (5')-TCTCTTTGATGTCAGCACG-(3')이다. 각각의 forward 1 ㎕(10 pM)와 reverse 1 ㎕ (10 pM)를 I-Master mix PCR kit(iNtRON Biotechnology, Ko- rea)를 사용하여 섭씨 94℃에서 20초, 55℃에서 10초, 72℃에서 40초로 모두 30~40 회 반복 하였고, 2% agarose gel에 전기영동 하였다.
사간 에탄올추출물이 B16/F10세포의 세포독성에 미치는 영향을 알아보기 위하여 25, 50, 100 ㎍/㎖농도로 처리하고 24시간 후 MTT assay 방법으로 세포독성 조사하였다. 실험 결과 사간 에탄올추출물 25, 50, 100 ㎍/㎖ 농도에서 B16/F10 세포의 생존율이 대조군을 100%로 했을 때 각각 100.
사간 에탄올추출물은 α-MSH로 증가된 tyrosinase 활성을 유의성 있게 억제하였다. 이러한 효과가 직접적으로 tyrosinase 효소의 활성을 억제하였기 때문인지 조사하기 위하여 배양된 B16/F10 세포에서 얻은 효소 액에 사간 에탄올추출물을 직접 처리하였다. 실험 결과 사간 에탄올추출물 25, 50, 100㎍/㎖ 농도에서 각각 93.
Tyrosinase mRNA 의 전사는 MITF와 CREB에 의해 조절되므로 사간 에탄올추출물이 α-MSH에 의해 증가된 MITF와 p-CREB의 발현에 영향을 미치는지 조사하였다.
사간 에탄올추출물이 α-MSH로 과색소침착을 유도한 B16F10 세포에서 멜라닌 합성과 tyrosinase 활성에 미치는 영향을 조사하였고, 형태학적 변화, 단백질 발현, mRNA 발현, 전사인자를 조사하여 다음과 같은 결론을 얻었다.

대상 데이터

실험에 사용된 사간(射干, Belamcandae Rhizoma)은 한약재시장에서 구입한 것을 원광대학교 한의학전문대학원의 약재보관 냉동고에 보관하며 사용하였다. 사간 200 g에 100% 에탄올 2000 ㎖를 가하고 밀봉하여 24시간 동안 실온에서 진탕하고 1시간 초음파분쇄기로 처리하였으며, 동일한 과정을 3회 반복하였다.
Dulbecco's Modified Eagle Medium(DMEM), fetal bovine serum(FBS)은 Gibco사(USA) 제품을, dimethylsulfoxide (DMSO), α-melanocyte stimulating hormone(α-MSH), ethylenediamine tetraacetic acid(EDTA), phenylmethyl sulfonyl fluoride(PMSF), triton X-100, L-3,4- dihydroxyphenylalanine(L-DOPA), thiazolyl blue tetrazolium bromide는 Sigma사(USA) 제품을, protein assay 시약은 Bio-rad사(USA) 제품을 사용하였고, 3-(4,5-Dimethylithiazol-2-yl)-2,5-diphenyl tetrazolium bromide(MTT) 시약은 Sigma사(USA) 제품을 사용하였다.
실험에 사용한 세포주는 B16/F10 멜라닌 세포 주를 사용하였으며, 5% fetal bovine serum(FBS)이 첨가된 Dulbecco's Modified Eagle Medium(DMEM)을 사용하여 CO2 incubator(37℃, 5% CO2)에서 배양하였다.

데이터처리

실험 결과는 student's t-test를 이용하여 p-value를 구하였으며, p<0.05인 경우 *, p<0.01인 경우**로 유의성이 있다고 표시하였다.

이론/모형

세포생존율 측정은 Mosmann의 방법⁹⁾에 의하여 실시하였다. 24-well plate에 B16/F10 세포를 5×103 개를 분주하여 24시간동안 배양한 후 사간 에탄올추출물을 농도별로 처리하고 24시간 배양하였다.
세포내 tyrosinase 활성은 Martinez-Esparza 등의 방법¹⁰⁾으로 측정하였다. B16/F10 세포를 6-well 배양용기에 8×10⁴ cells/well씩 분주하여 24시간 동안 배양한 후 사간 에탄올추출물과 α-MSH(100nM)을 처리하고 3일간 배양하였다.
1 mM PMSF}로 세포를 용해하였다. 4℃, 13,000 rpm에서 30분간 원심분리를 하여 얻은 상층액을 tyrosinase 활성측정 용액으로 사용하였고, Bradford 법으로 595 nm에서 흡광도를 측정, 동량의 단백질 양을 계산하였다. 시료 50 ㎕와 0.
총 단백질 량은 Bradford 방법을 이용하여 정량하였고, 40㎍ 단백질과 2X sample buffer(1 ㎖ of glycerol, 0.5 ㎖ of β-mercaptoethanol, 3 ㎖ of 10% W/V) SDS, 1.25 ㎖ of 1 M Tris-HCl, 1~2 ㎍ of bromophenol blue)를 동량으로 혼합한 후 7.5% SDS polyacrylamide gel에서 전기영동 하였다.

성능/효과

사간 에탄올추출물은 α-MSH로 증가된 tyrosinase 활성을 유의성 있게 억제하였다.
실험 결과 α-MSH 처리군은 tyrosinase 활성이 484 ± 43%로 대조군보다 약 5배 증가하였으나, 사간 에탄올추출물과 α-MSH를 병용 처리군의 경우 50과 100 ㎍/㎖ 농도에서 각각 461 ±45%, 313 ± 30%로 감소하였다(Table 1).
사간 에탄올추출물이 B16/F10세포의 세포독성에 미치는 영향을 알아보기 위하여 25, 50, 100 ㎍/㎖농도로 처리하고 24시간 후 MTT assay 방법으로 세포독성 조사하였다. 실험 결과 사간 에탄올추출물 25, 50, 100 ㎍/㎖ 농도에서 B16/F10 세포의 생존율이 대조군을 100%로 했을 때 각각 100.5%, 87.1%, 72.6%로 나타났다(Fig. 1)
실험 결과 사간 에탄올추출물 25, 50, 100㎍/㎖ 농도에서 각각 93.9 ± 2%, 92.1 ± 1%, 93.2 ± 2%로 나타났다(Table 2).
또한 α-MSH군은 대조군에 비하여 수지상 가지돌기가 현저히 발달하였고, α-MSH와 사간 병용처리군의 경우 α-MSH군에 비하여 수지상 돌기가 감소하였음을 관찰 할 수 있었다(Fig. 3).
Tyrosinase의 DOPA oxidase 활성을 관찰한 결과 α-MSH 처리군은 대조군에 비하여 활성이 현저히 증가하였으며, α-MSH와 사간 에탄올추출물 100㎍/㎖ 병용처리군은 α-MSH군에 비해 tyrosinase 의 활성이 크게 감소하였다.
실험 결과 α-MSH 처리군은 총 멜라닌 양이 513 ± 55%로 대조군의 약 5배 증가하였으며, 사간 에탄올추출물과 병용 처리 군의 경우 50 ㎍/㎖와 100 ㎍/㎖ 농도에서 각각 370 ± 52%, 252 ± 30%로 감소하였다(Fig. 2).
실험 결과 α-MSH 처리군은 대조군에 비하여 tyrosinase 발현이 현저히 높아졌고, α-MSH와 사간 에탄올추출물 100 ㎍/㎖을 병용처리한 군은 tyrosinase 발현이 효과적으로 감소하였다 (Fig. 4).
Tyrosinase mRNA 의 전사는 MITF와 CREB에 의해 조절되므로 사간 에탄올추출물이 α-MSH에 의해 증가된 MITF와 p-CREB의 발현에 영향을 미치는지 조사하였다. 실험 결과 사간 에탄올추출물은 전사인자 발현에 영향을 미치지 않는 것으로 나타났다(Fig. 6). 이상의 결과로 볼 때 사간 에탄올추출물은 tyrosinase mRNA에 작용하여 멜라닌 합성을 조절하는 것으로 생각된다.
6). 이상의 결과로 볼 때 사간 에탄올추출물은 tyrosinase mRNA에 작용하여 멜라닌 합성을 조절하는 것으로 생각된다.
본 실험 결과 α-MSH에 의하여 B16F10 세포의 가지돌기가 증가하였으나, 사간 에탄올추출물을 투여하였을 때 가지돌기의 형성이 억제되었을 뿐만 아니라 DOPA oxidase 활성 또한 감소되었음을 관찰 할 수 있었다.
α-MSH는 B16/F10세포의 tyrosinase 활성과 멜라닌 생성을 증가시켰고, 사간 에탄올추출물은 α-MSH에 의해 증가된 tyrosinase와 멜라닌 생성을 매우 효과적으로 감소시켰다.
본 실험에서는 α-MSH에 의해 증가된 tyrosinase 단백질 발현이 사간 에탄올추출물에 의해 유의하게 감소하였으며, tyrosinase mRNA의 발현도 감소하였다.
1. 사간 에탄올추출물을 50 ㎍/㎖, 100 ㎍/㎖로 처리한 결과 α-MSH로 유도된 멜라닌 합성과 tyrosinase 활성을 유의성 있게 억제하였으며, 증가된 가지돌기와 DOPA oxidase 활성을 효과적으로 감소시키는 것으로 나타났다.
이상의 결과로 미루어보아 사간 에탄올추출물은 tyrosinase mRNA를 조절함으로써 tyrosinase 단백질 발현을 억제하고 최종적으로 멜라닌 합성을 감소시키는 것으로 생각된다.
2. 사간 에탄올추출물 100 ㎍/㎖ 처리군은 α-MSH에 의해 증가된 tyrosinase 단백질 발현과 mRNA의 발현이 현저하게 억제되었다.
이상의 결과로 볼 때 사간 에탄올추출물은 α-MSH에 의해 증가된 tyrosinase mRNA를 조절함으로써 멜라닌 합성을 효과적으로 억제하였다. 따라서 사간 에탄올추출물은 미백화장품을 개발에 응용할 수 있는 좋은 소재가 될 것이다.

후속연구

이상의 결과로 볼 때 사간 에탄올추출물은 α-MSH에 의해 증가된 tyrosinase mRNA를 조절함으로써 멜라닌 합성을 효과적으로 억제하였다. 따라서 사간 에탄올추출물은 미백화장품을 개발에 응용할 수 있는 좋은 소재가 될 것이다.

질의응답

핵심어	질문	논문에서 추출한 답변
	멜라닌의 기능은?	멜라닌은 표피 기저층에 존재하는 멜라닌세포의 멜라닌소체(melanosome)에서 합성되어 수상돌기를 통해 표피의 각질화세포(keratinocyte)로 이동되어 피부의 색을 나타내고, 자외선이나 외부자극으로부터 피부를 보호하는 긍정적인 기능을 하고 있다. 그러나 과도한 멜라닌 생성과 비정상적인 분포는 기미와 주근깨를 형성하거나 노화로 인한 반점 같은 비정상적인 과색소침착의 원인이 될 수 있다.
	멜라닌 합성은 어떻게 시작되는가?	멜라닌 합성은 tyrosinase에 의해 아미노산의 일종인 tyrosine이 dopaquinone으로 전환되는 반응에 의해 시작된다. Dopaquinone은 티올 그룹(thiol group) 존재 하에서 dopachrome으로 전환되고, tyrosinase related protein(TRP)-2에 의해 dopachrome을 5,6-dihydroxyindole-2-carboxylic acid로, TRP-1에 의해 indole-5,6-quinone-2- carboxylic acid로 전환되는 일련의 반응을 거쳐 멜라닌이 형성된다1,2).
	사간 에탄올추출물이 α-MSH로 과색소침착을 유도한 B16F10 세포에서 멜라닌 합성과 tyrosinase 활성에 미치는 영향을 조사하였고, 형태학적 변화, 단백질 발현, mRNA 발현, 전사인자를 조사하여 얻은 결론은?	1. 사간 에탄올추출물을 50 ㎍/㎖, 100 ㎍/㎖로 처리한 결과 α-MSH로 유도된 멜라닌 합성과 tyrosinase 활성을 유의성 있게 억제하였으며, 증가된 가지돌기와 DOPA oxidase 활성을 효과적으로 감소시키는 것으로 나타났다. 2. 사간 에탄올추출물 100 ㎍/㎖ 처리군은 α-MSH에 의해 증가된 tyrosinase 단백질 발현과 mRNA의 발현이 현저하게 억제되었다. 3. 사간 에탄올추출물은 CREB의 활성화와 MITF의 발현에 관여하지 않았다.

참고문헌 (31)

Tsukamoto K, Jackson IJ, Urabe K, Montague PM, Hearing VJ. A second tyrosinase-related protein, TRP-2, is a melanogenic enzyme termed DOPAchrome tautomerase. EMBO J. 1992;11(2):519-26.

상세보기
Boissy RE, Sakai C, Zhao H, Kobayashi T, Hearing VJ. Human tyrosinase related protein-1 (TRP-1) does not function as a DHICA oxidase activity in contrast to murine TRP-1. Exp Dermatol. 1998;7(4):198-204.

상세보기
Busca R, Ballotti R. Cyclic AMP a key messenger in the regulation of skin pigmentation. Pigment Cell Res. 2000;13(2):60-9.

상세보기
Saha B, Singh SK, Sarkar C, Bera R, Ratha J, Tobin DJ, Bhadra R. Activation of the Mitf promoter by lipid-stimulated activation of p38-stress signalling to CREB. Pigment Cell Res. 2006;29(6):595-605.
Chakraborty AK, Funasaka Y, Slominski A, Ermak, G, Hwang J, Pawelek JM, Ichihasi M. Production and release of pro-opiomelanocortin (POMC) derived peptides by human melanocytes and keratinocytes in culture: regulation by ultraviolet B. Biochim Biophys Acta. 1996;1313:130-8.
Pan CH, Kim ES, Jung SH, Nho CW, Lee JK. Tectorigenin inhibits IFN-/LPS-induced inflammatory responses in murine macrophage RAW 264.7 Cells. Arch Pharm Res. 2008;31:1447-056

원문보기 상세보기
Thelen P, Scharf JG, Burfeind P, Hemmerlein B, Burfeind P W, Spengler B, Christoffel V, Ringert RH, Wuttke DS. Tectorigenin and other phytochemicals extracted from leopard lily Belamacanda chinensis affect new and established targets for therapies in prostate cancer. 2005;26:1360-7.

상세보기
申佶求. 申氏本草學, 서울:수문사. 1987:708-9.
Mosmann T. Rapid colorimetric assay for the cellular growth and survival; application to proliferation and cytotoxic assay. J Immun Methods. 1983;65:55-63.
Martinez.Esparza M, Jimenez-Cervantes C, Solano F, Lozano JA., Garcia.Borron JC. Mechanism of melanogenesis inhibition by tumor necrosis factoralpha in B16/F10 mouse melanoma cells. Eur J Biochem. 1998;255:139-46.

상세보기
Hosoi J, Abe E, Suda T, Kuroki T. Regulation of melanin synthesis of B16 mouse melanoma cells by $1{\alpha}$ ,25.dehydroxyvitamin D3 and retinoic acid. Cancer Res. 1985;45:1474-8.

상세보기
전국임상병리교수협의회. 조직검사학, 서울:고려의학. 제3판, 1998;343-4.
Ranson M, Psen S, Mason RS. Human melanocytes as a target tissue for hormones : in vitro studies with 1 $\alpha$ -25 dihydroxyvitamine D3, $\alpha$ -melanocyte stimulating hormone, and beta estradiol. J Invest Dermatol. 1988;91:593-8.

상세보기
Prota G. Recent advances in the chemistry of melanogenesis in mammals. J Invest Dermatol. 1980;75:122-7.

상세보기
Dawley RM, Flurkey WH. 4-hexylresocinol, a potent inhibitor of mushroom tyrosinase. J Food Sci. 1993;58:609-10.

상세보기
Maeda K., Fukuda M. In vivo effectiveness of several whitening cosmetic components in human melanocytes. J Soc Cosmet Chem. 1991;42:361-8.
이주상, 김정아, 조세훈, 손애량, 장태수, 소명숙, 정시련, 이승호. 감초의 tyrosinase 활성 억제 성분. Kor J Pharmacogn. 2003;34(1):33-9.
문연자, 김진, 임난영, 이승연, 곽섭, 황충연, 우원홍. 감초 물추출물의 멜라닌 형성 억제효과. 동의생리병리학회지. 2002;16(6):1230-5.

원문보기 상세보기
이승연, 김진만, 오현철, 임숙정, 황충연, 문연자, 우원홍. 더덕추출물이 멜라닌생성에 미치는 영향. 대한한의학 방제학회지. 2002;10(2):199-211.

원문보기 상세보기
문연자, 이성원, 임숙정, 송채석, 이관순, 임규상, 우원홍. 천화분 수추출물이 B16 흑색종 세포의 멜라닌 생성 억제 효과. 한국전통의학지. 2000;10(2):149-590.
천현자, 최은영, 윤성찬, 남항우, 백승화, 우원홍. 백출의 에탄올 추출물에 의한 melanin 생성 억제 효과. 약학회지. 2001;45(3):269-75.

원문보기 상세보기
임난영, 권강주, 김윤석, 백순기, 임주락, 문연자, 우원홍. 사삼메탄올 추출물의 멜라닌 생성억제 효과. 동의생리병리학회지. 2004;18(3):747-53.

원문보기 상세보기
Provance DW, Jr, Wei M, Ipe V, Mercer JA. Cultured melanocytes from dilute mutant mice exhibit dendritic morphology and altered melanosome distribution. Proc Natl Acad Sci USA. 1996;93:14554-8.

상세보기
Hunt G, donatien PD, Lunec J. Cultured human melanocytes respond to MSH peptides and ACTH. Pigment Cell Res. 1994;7:217-21.

상세보기
Busca R, Bertolotto C, Abbe P, Englaro W, Ishizaki T, Narumiya S, Boquet P, Ortonne JP, Ballotti R. Inhibition of Rho is required for cAMP-induced melanoma cell differentiation. Mol Biol Cell. 1998;9:1367-78.

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De Leeuw SM, Smit NP, Van Veldhoven M, Pennings EM, Pavel S, Simons JW, Schothorst AA. Melanin content of cultured human melanocytes and UV-induced cytotoxicity. J Photochem Photobiol B. 2001;61(3):106-13.
Englaro W, Bahadoran P, Bertolotto C, Busca R, Derijard B, Livolsi A, Peyron JF, Ortonne JP, Ballotti R. Tumor necrosis factor alpha-mediated inhibition of melanogenesis is dependent on nuclear factor kappa B activation. Oncogene. 1999;18:1553-9.

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Lerner AB. The discovery of the melanotropins:a history of pituitary endocrinology. Ann NY Acad Sci. 1993;680:1-12.
Ranson M, Psen S, Mason RS. Human melanocytes as a target tissue for hormones : in vitro studies with 1 $\alpha$ -25 dihydroxyvitamine D3, $\alpha$ -melanocyte stimulating hormone, and beta estradiol. J Invest Dermatol. 1988;91:593-8.

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Im S, Kim J, On WY, Kang WH. Increased expression of $\alpha$ -Melanocytestimulating hormone in the lesion skin of melasma. Br J Dermatol. 2002;146:165-7.

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Kim DS, Kim SY, Chung JH, Kim KH, Eun HC, Park KC. Delayed ERK activation by ceramide reduces melanin synthesis in human melanocytes. Cell Signal. 2002;14:779-85.

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표제어: PCR

동의어: Packet Collision Rate

용어 설명 출처 목록 (6)

용어 설명: PCR은 세균 특이성이 있는 primer를 이용하여 적은 수의 세균이 있을지라도 쉽게 검출할 수 있는 유용한 방법이며, 이를 이용하여 구강 내 치면세균막이나 타액에서 직접 세균을 검출할 수 있게 되었다[8].

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