선택한 단어 수는 입니다.
최소 단어 이상 선택하여야 합니다.
최소 단어 이상 선택하여야 합니다.
선택한 단어 수는 30입니다.
최대 10 단어까지만 선택 가능합니다.
최대 10 단어까지만 선택 가능합니다.
문제 정의
- 그러나 청국장의 펩티드 생성 과정을 분석한 결과는 없다. 본 연구는 자연 상태에서 발효시킨 청국장의 pH, 산도, protease, 단백질, 아미노산, 당 등의 경시적 변화와, HPLC로 단백질이 펩티드와 아미노산으로 분해되어 가는 형태를 분석한 결과로, 청국장에서 생리활성 펩티드 등을 생산하기 위한 기본 자료로 제시한다.
제안 방법
- TCA(trichloro acetic acid) 처리 시료는 시료 2 ㎖에 TCA 3㎖를 가하여 Toyo No. 6 여과지(0.2 ㎛)로 여과하여 흡광도를 측정하였다.
- 5㎖에 가하여 37℃에서 2시간 반응시켰다. 가수분해물은 210㎚와 280 ㎚에서 HPLC로 분석하였다.
- 단백질, 펩티드, 아미노산은 일본 시마쯔 HPLC 장치(LC10AD 펌프, SPD-10A 분광광도 검출기, 크로마토팩 C-R5A)로 0.2 M NaCl을 함유한 증류수를 이동상으로 하고, Superose 12(1.0×30 ㎝ Pharmacia 스웨덴)를 고정상으로 사용하여 유속 1.0 ㎖/min로 210 ㎚ 및 280 ㎚에서 분석하였다.
- 발효장치는 플라스틱 용기(60 ㎝×80 ㎝×높이 45 ㎝)에 물을 30 ㎝ 높이로 채우고, 그 위에 10 ㎝ 두께 스티로폼 판을 띄우고 온도조절기가 있는 돼지꼬리 파이프히터(3 ㎾, 삼우사)를 넣고 물의 온도를 40℃로 유지시켰다.
- UV용과 HPLC용은 한일 마이크로 17TR 원심분리기로 15,000 rpm에서 10분간 원심분리하여 상징액을 사용하였다. 청국장 발효는 국산 황태콩 8 ㎏을 물에 12시간 담갔다가 6시간 삶아서 청국장 발효기에 비닐, 짚, 헝겊을 깐 다음 그 위에 10 ㎝ 높이로 펴서 온도가 떨어지지 않도록 천으로 덮고서 40℃로 발효시키면서 0, 12, 24, 36, 48, 72, 98, 120, 180시간에 시료를 채취하여 발효와 부패과정을 분석하였다.
- 청국장으로부터 펩티드 생산 가능성을 알아보기 위하여 청국장을 40℃에서 180시간 발효시키면서 성분 변화와 펩티드의 형태를 분석하였다. pH는 초기에 7.
대상 데이터
- 발효장치는 플라스틱 용기(60 ㎝×80 ㎝×높이 45 ㎝)에 물을 30 ㎝ 높이로 채우고, 그 위에 10 ㎝ 두께 스티로폼 판을 띄우고 온도조절기가 있는 돼지꼬리 파이프히터(3 ㎾, 삼우사)를 넣고 물의 온도를 40℃로 유지시켰다. 시료는 청국장 10 g을 마쇄하고 물을 가해 100 ㎖로 한 다음 자석교반기로 20분간 교반하고 Whatman No. 2 여과지(5.0 ㎛)로 여과하여 시료로 하였다. UV용과 HPLC용은 한일 마이크로 17TR 원심분리기로 15,000 rpm에서 10분간 원심분리하여 상징액을 사용하였다.
- 청국장에서 분비되는 점질물은 글루탐산 중합체인 γ-polyglutamic acid(γ-PGA)와 프룩토오스 중합체인 레반(levan)이다.
- 2 ㎖를 가하고 100℃에서 15분간 가열한 다음, 60% 에탄올 10 ㎖를 가하여 Varian Cary 100 Conc 분광광도계로 570 ㎚에서 비색정량하였다. 표준물질은 글리신을 사용하였다.
이론/모형
- Ninhydrin법(안용근 1995)에 따라 시료 1 ㎖에 0.2 M 아세트산 완충액(pH 4.8) 0.5 ㎖와 닌히드린 시약 1.2 ㎖를 가하고 100℃에서 15분간 가열한 다음, 60% 에탄올 10 ㎖를 가하여 Varian Cary 100 Conc 분광광도계로 570 ㎚에서 비색정량하였다. 표준물질은 글리신을 사용하였다.
- 총당은 페놀-황산법(Dubois 등 1956), 환원당은 소모기-넬슨법(Nelson N 1944)을 사용하여 분광광도계(Varian Cary 100 Conc 미국)로 490 ㎚ 및 500 ㎚에서 비색정량하였다.
- 흡광법(안용근 1994)에 따라 분광광도계(Varian Cary 100 Conc 미국)로 280 ㎚에서 흡광도를 측정하였다.
성능/효과
- 12였다. HPLC 분석 결과, 발효가 진행될수록 큰 분자량의 단백질은 여러 크기의 펩티드와 아미노산으로 분해되었고, 48시간 후는 유형이 거의 같았다. Protease 활성은 발효 36시간에 0.
- 겔 크로마토그래피 컬럼을 사용한 HPLC로 280 ㎚에서 청국장 추출물의 단백질과 펩티드를 분석한 결과, Fig. 5와 같이 메주콩의 단백질 주피크(0 hr)는 발효로 저분자 펩티드와 아미노산(오른쪽 피크)으로 분해되어 높이와 면적이 감소하였다.
- 011 unit/㎖로 가장 높았고, 이후 저하하였다. 이상과 같이 청국장은 발효 100시간 후부터 아미노산의 탈아미노화가 많이 시작되었으므로 펩티드 같은 유용물질은 발효 100시간 이내에 생산하는 것이 바람직한 것으로 나타났다.
- 이상과 같이 청국장을 40℃에서 180시간 발효시키면서 단백질가수분해효소 활성, 단백질, 펩티드, 아미노산의 변화를 분석한 결과, 100시간부터 아미노산의 탈아미노화, 즉 부패가 심해졌으므로 청국장 펩티드는 100시간 이내에 생산하는 것이 좋다.
- 95%라고 보고하였다. 이차원 TLC는 단백질과 큰 분자량의 펩티드는 분석되지 않지만, 본 결과에서는 겔크로마토그래피로 분자량별로 폭넓은 분포를 보였다.
- 청국장 추출물의 단백질가수분해효소를 카제인 기질과 2시간 반응시켜서 생성된 물질을 HPLC로 분석한 결과, 280 ㎚에서는 Fig. 9의 A와 같이 카제인 기질의 단백질(A의 왼쪽 피크)이 분해되어 분자량이 작은 펩티드(B의 왼쪽)와 아미노산(B의 오른쪽) 피크가 증가하였다. Fig.
- 청국장 추출액을 분광광도계로 스캐닝한 결과, Fig. 7과 같이 210～400 ㎚에서 흡광하며, 280 ㎚에서 피크를 나타내는 전형적 단백질 피크유형을 나타냈다. 발효가 진행될수록 흡광도가 증가한 것은 단백질가수분해효소에 의해 용해성 단백질과 아미노산의 양이 많아졌기 때문이다.
※ AI-Helper는 부적절한 답변을 할 수 있습니다.