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문제 정의
- 따라서 活血, 調經, 利水의 효능으로 주로 활용되는 王不留行을 생각해 볼 때, 고지혈증에 대한 효과를 검증해 볼 필요가 있다고 생각하였고, 利水 효능은 술로 인한 치료법 중에한 가지가 될 수 있으므로, 술로 유발한 고지혈증과 간 손상에 관한 王不留行과 硬葉女婁菜의 약효 차이를 비교해 보고자 하였다.
- 따라서 저자는 活血通經, 下乳消腫하는 효능을 지니고 있는 王不留行이 淸熱解毒, 利尿, 調經의 효능을 지니고 있는硬葉女婁菜와의 효능의 차이점을 연구해 볼 필요가 있다고 생각하였고, 瘀血을 풀어주고, 利水하는 효능의 차이점을 비교해 보기 위하여 장기적인 알콜 섭취로 인한 고지혈증이나 이에 관련되는 간 손상의 문제점을 극복하는 정도로써, 그 효능의 차이점을 살펴보고자 하였으며, 실험해 본 결과, 통계학적으로 유의한 성적을 얻었기에 보고하는 바이다.
- 실험동물에 알콜을 장기간 투여하게 되면, 알콜성 고지혈증이 유발되며, 또한 간 손상이 야기되는데9), 王不留行과 硬葉女婁菜를 활용하여 장기적인 술로 인한 실험동물의 문제점을 개선할 수 있는 지와 그 약효의 차이가 있는 지의 여부를 연구하였다.
제안 방법
- 실험 rat을 모두 4群으로 나누었으며, 각 군은 7마리씩 배정하여 모두 28마리를 이용하였다. 王不留行 추출물(SVS group)과 硬葉女婁菜 추출물(MFH group)은 각각 추출된 약액을 rat의 체중 100g당 1 ㎖ 씩 매일 하루 한 번씩 알콜 섭취 기간과 동일하게 8주간(55일간) 경구 투여하였다. 정상 군과 대조군은 같은 량의 생리식염수를 8주간(55일간) 같은 방식으로 투여하였다.
- 王不留行과 硬葉女婁菜는 각 100 g에 증류수 1,200 ㎖를 붓고 2시간 30분 동안 대웅약탕기(한국)로 달이고, 추출, 여과한 후 각 100 ㎖로 감압 농축하여 최종 추출물을 얻어서 실험에 이용하였다.
- 간장의 중량은 rat를 희생시켜서 복부대동맥에서 採血한다음, 간장을 적출하여 무게를 측정하였다.
- 王不留行 추출물(SVS group)과 硬葉女婁菜 추출물(MFH group)은 각각 추출된 약액을 rat의 체중 100g당 1 ㎖ 씩 매일 하루 한 번씩 알콜 섭취 기간과 동일하게 8주간(55일간) 경구 투여하였다. 정상 군과 대조군은 같은 량의 생리식염수를 8주간(55일간) 같은 방식으로 투여하였다.
- 의 방법에 따라서 알콜성 고지혈증을 유발시키면서 실험에 사용하였다. 정상군은 고형사료와 물을 임의로 섭취케 하고, 고지혈증 유발군은 고형사료와 25% 알콜 용액(C2H5OH 순도 99.8%, MERCK(Germany))을 물대신 임의로 8주간(55일간) 섭취케 하였다.
- 체중은 실험하기 직전, 실험시작 후 4주, 실험시작 후 8주에 각각 측정하였다.
- 혈청성분의 변화를 통하여 간 손상에 대하여 살펴보았다. GOT, GPT 활성의 증가는 간 실질세포의 장애가 발생하여 혈중으로 방출이 항진되어 나타나며, 알콜 흡수가 증가되면 간 손상이 있고 GOT, GPT의 수치도 높아진다27).
대상 데이터
- 200g 내외의 건강한 Sprague Dawley계 rat(대한실험동물, 한국)를 분양받아서 고형사료(rat chow, 삼양사)로 사육 하면서 물을 충분히 공급하고 약 2주일간 사육실 환경에 적응시킨 후, 평균 체중이 274.9 ± 3.0 g인 rat를 실험동물로 사용하였다.
- 실험 rat을 모두 4群으로 나누었으며, 각 군은 7마리씩 배정하여 모두 28마리를 이용하였다. 王不留行 추출물(SVS group)과 硬葉女婁菜 추출물(MFH group)은 각각 추출된 약액을 rat의 체중 100g당 1 ㎖ 씩 매일 하루 한 번씩 알콜 섭취 기간과 동일하게 8주간(55일간) 경구 투여하였다.
- 실험재료인 王不留行(중국산)은 중국 河南中醫學院에서 직접 구입하였고, 硬葉女婁菜는 계림약업사(대구, 한국산)에서 구입하여 대구한의대학교 본초학교실에서 감정한 다음, 실험에 이용하였다.
데이터처리
- 각 群間의 실험결과 분석은 Student's t-test를 하여 통계적 有意性(p<0.05 수준)을 검증하였다.
이론/모형
- King-King법에 의하여 측정하였는데, 알칼리성포스파타제 측정용 시액(아산제약)을 사용하여 SEQUOIA-TURNER model-340 spectrophotometer(U.S.A) 기기로 파장 500㎚로 분석하였다.
- Reitman-Frankel법에 의하여 측정하였는데, 혈청 transaminase 측정용 시액을 사용하여 SEQUOIATURNER model-340 spectrophotometer(U.S.A) 기기로 파장 505 ㎚로 분석하였다.
- Sprague Dawley계 rat를 Liu 등9)의 방법에 따라서 알콜성 고지혈증을 유발시키면서 실험에 사용하였다. 정상군은 고형사료와 물을 임의로 섭취케 하고, 고지혈증 유발군은 고형사료와 25% 알콜 용액(C2H5OH 순도 99.
- cholesterol 함량의 측정10) 효소법(5분법)에 의하여 측정하였는데, HDL-CHOLESTASE (아산제약)을 사용하여 SEQUOIA-TURNER model-340 spectrophotometer(U.S.A) 기기로 파장 500 ㎚로 분석하였다.
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효소법(5분법)에 의하여 측정하였는데, 총 콜레스테롤 측정 용시액(아산제약)을 사용하여 SEQUOIA-TURNER model340 spectrophotometer(U.S.A) 기기로 파장 500 ㎚로 분석하였다.
- 효소법(젖산 기질법)에 의하여 측정하였는데, 젖산탈수소 효소측정용 試液(아산제약)을 사용하여 SEQUOIA-TURNER model-340 spectrophotometer(U.S.A) 기기로 파장 570㎚로 분석하였다.
- 효소법에 의하여 측정하였는데, Cleantech TG-S 試液(아산제약)을 사용하여 SEQUOIA-TURNER model-340 spectrophotometer(U.S.A)기기로 파장 550 ㎚로 분석하였다.
성능/효과
- 1. 장기적인 알콜 투여로 인한 고지혈증에 미치는 영향을 살펴보았는데, 혈청 중 total cholesterol의 변화에서는 王不留行과 硬葉女婁菜投與群에서는 대조군에 비하여 감소하였으나, 통계적으로 유의성은 없었다. HDL(high-density lipoprotein) cholesterol의 변화를 보면, 王不留行과 硬葉女婁菜投與群에서는 대조군에 비하여 통계적으로 유의성 있게 증가하였다.
- 2. 장기적인 알콜 투여로 인한 간 손상에 미치는 영향을 살펴보았는데, 혈청 중 GOT, GPT, ALP 및 젖산탈수소효소(LDH)의 변화를 보면, 王不留行과 硬葉女婁菜의 投與群에서 모두 대조군에 비하여 통계적으로 유의성 있게 감소하였다. 간의 무게 변화에서는 王不留行投與群에서는 대조군에 비하여 통계적으로 유의성 있게 증가하였다.
- HDL(high-density lipoprotein) cholesterol의 변화를 보면, 정상군이 36.77 ± 2.00(㎎/㎗)인데 비하여, 대조군은 21.98 ± 2.96으로 정상군에 비하여 통계적으로 유의성 있게 감소되었다.
- Total cholesterol의 변화를 보면, 정상군이 80.76 ±2.63(㎎/㎗)인데 비하여, 대조군은 96.03 ± 3.09로 정상군에 비하여 통계적으로 유의성 있게 증가하였다.
- Triglyceride의 변화를 보면, 정상군이 35.50 ± 1.78(㎎/㎗)인데 비하여, 대조군은 64.31 ± 6.63으로 정상군에 비하여 통계적으로 유의성 있게 증가하였다.
- 먼저, 알콜 섭취의 편차가 실험군 간에 없어야 정확하게 실험 결과를 파악할 수 있는데, 본 실험에서 알콜의 섭취는 총 55일 동안 섭취하였으며, 섭취량의 1일 평균값을 측정한 결과, 王不留行과 硬葉女婁菜 投與群에서는 대조군의 1일 알콜 섭취량에 비하여 별다른 변화를 나타내지 않았다. 王不留行과 硬葉女婁菜 投與群 사이에도 알콜 섭취량의 유의성 있는 차이는 없었다(Table Ⅰ).
- . 본 실험에서 체중의 변화를 보면, 실험을 시작한 후 4주, 8주의 체중측정에서 王不留行 投與群에서는 대조군에 비하여 체중이 통계적으로 유의성 있게 증가되었으나, 硬葉女婁菜 投與群에서는 대조군에 비하여 체중이 증가되었으나, 통계적으로 유의성은 없었다. 한편, 王不留行과 硬葉女婁菜 사이에 체중의 함량에는 8주의 측정에서 통계적으로 유의성 있는 차이가 있었는데, 硬葉女婁菜가 王不留行에 비하여 통계적으로 유의성 있게 낮았다(Table Ⅴ).
- . 본 실험에서 혈청 중 ALP의 변화를 보면, 王不留行과 硬葉女婁菜 投與群에서는 대조군에 비하여 모두 통계적으로 유의성 있게 감소하였다. 한편, 王不留行과 硬葉女婁菜 사이에 ALP의 변화에는 통계적으로 유의성 있는 차이가 없었다(Table Ⅷ).
- , 반대로 고지혈증이 개선된다면 혈청 중에서 HDL(high-density lipoprotein) cholesterol의 비율은 상승하게 된다. 본 실험에서 혈청 중 HDL(high-density lipoprotein) cholesterol의 변화를 보면, 王不留行과 硬葉女婁菜 投與群에서는 대조군에 비하여 통계적으로 유의성 있게 증가하였다. 한편, 王不留行과 硬葉女婁菜 사이에 HDL(high-density lipoprotein) cholesterol의 함량에는 통계적으로 유의성 있는 차이가 없었다(Table Ⅲ).
- . 본 실험에서 혈청 중 젖산탈 수소효소(LDH)의 변화를 보면, 王不留行과 硬葉女婁菜 投與群에서는 대조군에 비하여 모두 통계적으로 유의성 있게 감소 하였다. 한편, 王不留行과 硬葉女婁菜 사이에 LDH의 변화에는 통계적으로 유의성 있는 차이가 없었다(Table Ⅸ).
- 실험을 시작한 후 4주의 체중측정에서는 정상군에서는 372.14 ± 10.09(g)이었으나, 대조군의 체중은 272.28 ±13.13으로 나타나 정상군에 비하여 체중의 증가가 통계적으로 유의성 있게 감소되었다.
- 실험을 시작한 후 8주의 체중측정에서는 정상군에서 405.71± 9.24(g)이었으나, 대조군의 체중은 297.71 ±16.47로 나타나 정상군에 비하여 체중의 증가가 통계적으로 유의성 있게 감소되었다.
- 알콜의 섭취는 총 55일 동안 섭취하였으며, 섭취량의 1일 평균값을 측정한 결과, 대조군은 13.36 ± 0.90(mL/day)로 나타났다.
- 이상의 결과로 보아, 王不留行과 硬葉女婁菜는 장기적인 알콜 투여로 인한 고지혈증과 간 손상에 대한 예방효과가 우수한 것으로 생각되며, 王不留行이 硬葉女婁菜의 효능 보다는 약간 더 우수한 것으로 생각된다.
- 이상의 결과로 볼 때, 王不留行과 硬葉女婁菜는 장기적인 알콜 투여로 인한 고지혈증과 간 손상에 대한 개선효과가 있는 것으로 판단되며, 그 중에서 王不留行의 효과가 약간 더 우수한 것으로 생각된다.
- 혈청 중 triglyceride의 변화를 보면, 王不留行投與群에서는 대조군에 비하여 통계적으로 유의성 있게 감소하였으며, 硬葉女婁菜投與群에서는 대조군에 비하여 통계적으로 유의성 있는 변화를 보이지 않았다. 체중의 변화에서는 실험을 시작한 후 4주, 8주의 체중측정에서 王不留行投與群에서는 대조군에 비하여 체중이 통계적으로 유의성 있게 증가되었으나, 硬葉女婁菜投與群에서는 대조군에 비하여 체중이 증가되었으나, 통계적으로 유의성은 없었다.
- 한편, 王不留行과 硬葉女婁菜 사이에 triglyceride의 함량에는 통계적으로 유의성 있는 차이가 있었는데, 硬葉女婁菜가 王不留行에 비하여 통계적으로 유의성 있게 높았다(Table Ⅳ).
- 한편, 王不留行과 硬葉女婁菜 사이에 체중의 함량에는 실험을 시작한 후 8주의 체중측정에서 통계적으로 유의성 있는 차이가 있었는데, 硬葉女婁菜가 王不留行에 비하여 통계적으로 유의성 있게 낮았다(Table Ⅴ).
- 한편, 王不留行과 硬葉女婁菜 사이에는 triglyceride 함량과 8주의 체중 함량에서 통계적으로 유의성 있는 차이가 있었는데, 王不留行의 효과가 더 우수하였다.
- 한편, 王不留行과 硬葉女婁菜 사이에는 간의 무게 변화에서 통계적으로 유의성 있는 차이가 있었는데, 王不留行의 효과가 더 우수하였다.
- 한편, 王不留行과 硬葉女婁菜 사이에 triglyceride의 함량에는 통계적으로 유의성 있는 차이가 있었는데, 硬葉女婁菜가 王不留行에 비하여 통계적으로 유의성 있게 높았다(Table Ⅳ).
- GOT, GPT 활성의 증가는 간 실질세포의 장애가 발생하여 혈중으로 방출이 항진되어 나타나며, 알콜 흡수가 증가되면 간 손상이 있고 GOT, GPT의 수치도 높아진다27). 혈청 중 GOT의 변화를 보면, 王不留行과 硬葉女婁菜 投與群에서는 대조군에 비하여 모두 통계적으로 유의성 있게 감소하였다. 한편, 王不留行과 硬葉女婁菜 사이에 GOT의 변화에는 통계적으로 유의성 있는 차이가 없었다(Table Ⅵ).
- 한편, 王不留行과 硬葉女婁菜 사이에 GOT의 변화에는 통계적으로 유의성 있는 차이가 없었다(Table Ⅵ). 혈청 중 GPT의 변화를 보면, 王不留行과 硬葉女婁菜 投與群에서는 대조군에 비하여 모두 통계적으로 유의성 있게 감소하였다. 한편, 王不留行과 硬葉女婁菜 사이에 GPT의 변화에는 통계적으로 유의성 있는 차이가 없었다(Table Ⅶ).
- . 혈청 중 triglyceride의 변화를 보면, 王不留行 投與群에서는 대조군에 비하여 통계적으로 유의성 있게 감소하였으며, 硬葉女婁菜 投與群에서는 대조군에 비하여 유의성 있는 변화를 보이지 않았다. 한편, 王不留行과硬葉女婁菜 사이에 triglyceride의 함량에는 통계적으로 유의성 있는 차이가 있었는데, 硬葉女婁菜가 王不留行에 비하여 통계적으로 유의성 있게 높았다(Table Ⅳ).
- HDL(high-density lipoprotein) cholesterol의 변화를 보면, 王不留行과 硬葉女婁菜投與群에서는 대조군에 비하여 통계적으로 유의성 있게 증가하였다. 혈청 중 triglyceride의 변화를 보면, 王不留行投與群에서는 대조군에 비하여 통계적으로 유의성 있게 감소하였으며, 硬葉女婁菜投與群에서는 대조군에 비하여 통계적으로 유의성 있는 변화를 보이지 않았다. 체중의 변화에서는 실험을 시작한 후 4주, 8주의 체중측정에서 王不留行投與群에서는 대조군에 비하여 체중이 통계적으로 유의성 있게 증가되었으나, 硬葉女婁菜投與群에서는 대조군에 비하여 체중이 증가되었으나, 통계적으로 유의성은 없었다.
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