선택한 단어 수는 입니다.
최소 단어 이상 선택하여야 합니다.
최소 단어 이상 선택하여야 합니다.
선택한 단어 수는 30입니다.
최대 10 단어까지만 선택 가능합니다.
최대 10 단어까지만 선택 가능합니다.
문제 정의
- 본 연구에서는 고추의 생산량 증대 및 상품성 향상기술을 개발하고자 국내 토양으로부터 고추탄저병균의 생장을 억제하는 미생물을 분리, 동정하였으며, 분리균의 고추 탄저병 방제효과를 검정하여, 고추의 상품성 및 생산성을 증대시킬 수 있는 생물학적 방제에 대하여 보고하고자 한다.
제안 방법
- 고추탄저병균 분생포자현탁액(100 conidia/mL) 900 µL를 혼합하여, 혼합액을 30 µL씩 둥근 홈이 난 slide에 놓고, 습도를 유지하기 위하여 살균수로 포화시킨 필터페이퍼를 넣은 페트리디쉬에 슬라이더 글라스를 옮겨 놓았다. 25℃ 배양기에서 배양하면서 현미경으로 slide glass당 다섯 부위씩 포자 발아율과 부착기의 형성율을 조사하였다. 무처리구는 포자액과 살균수만을 혼합하여 처리하였고, 모든 처리구는 4반복으로 3회 수행하였다.
- 탄저병균의 접종포자현탁액은 5 × 106 conidia/mL의 농도로 조절하였다. 고추과실은 PR 마니따 품종으로서, 1% NaOCl을 이용하여 표면 살균하였다. 살균수로 3회 이상 헹구어 상온에서 건조시킨 후 병 방제 효과 검정실험에 사용하였다.
- 고추탄저병균 분생포자현탁액(100 conidia/mL) 900 µL를 혼합하여, 혼합액을 30 µL씩 둥근 홈이 난 slide에 놓고, 습도를 유지하기 위하여 살균수로 포화시킨 필터페이퍼를 넣은 페트리디쉬에 슬라이더 글라스를 옮겨 놓았다.
- 25℃ 배양기에서 배양하면서 현미경으로 slide glass당 다섯 부위씩 포자 발아율과 부착기의 형성율을 조사하였다. 무처리구는 포자액과 살균수만을 혼합하여 처리하였고, 모든 처리구는 4반복으로 3회 수행하였다. 탄저병균의 포자를 분획하여 포자현탁액에, 분리 미생물의 배양액을 농도 별로 처리하여 포자 발아와 부착기 형성을 락토 페놀(0.
- 실험실내에서 항균활성의 측정은 공시한 고추탄저병균 3균주 Colletotrichum acutatum(KACC 40042), Colletotrichum acutatum(KACC 40689) 및 Colletotrichum acutatum (KACC 40691)를 대상균으로 사용하여 cup method로 행하였다. PDA배지(Difco Co.
- 살균수로 3회 이상 헹구어 상온에서 건조시킨 후 병 방제 효과 검정실험에 사용하였다. 의료용 사혈기를 이용하여 크기와 깊이가 일정한 상처를 고추 3군데에 내었고, 또는 병원균을 상처에 접종한 후 14일간 배양하면서 탄저병균에 의한 병반형성을 조사하였다.
- 5ml을 접종하여 30℃에서 48시간 배양한 후 중층하였다. 이와 같이 만든 평판 배지의 표면에 cup(내경 6 mm, 외경 8 mm, 높이 10 mm)을 올려 놓고, 분리균주의 배양 상등액을 넣어 30℃에서 48시간 동안 배양한 후 형성된 생육 저지환의 직경을 측정하였다.
- 무처리구는 포자액과 살균수만을 혼합하여 처리하였고, 모든 처리구는 4반복으로 3회 수행하였다. 탄저병균의 포자를 분획하여 포자현탁액에, 분리 미생물의 배양액을 농도 별로 처리하여 포자 발아와 부착기 형성을 락토 페놀(0.1% cotton blue)로 염색하여, 광학 현미경으로 관찰하였다(Kim et al., 1999).
대상 데이터
- 45 µm milipore filter에 통과시켜 균체를 완전히 제거한다음, 상징액 70 µL를 항생물질 검정용 filter paper(φ 8 mm)에 주입하였다. 28℃ 항온 배양기에서 7일 동안 배양 후, 분리균 중에서 대상균에 대하여 가장 좋은 활성을 나타내는 균주를 선발하였다.
- 수원시 근교 고추밭 토양으로부터 분리한 균주를 NB 액체배지(meat extract 0.3%, peptone 0.5%)에 백금이로 1회 접종하고, 30℃에서 5일 동안 진탕배양 하였다. 배양액을 12,000 × g에서 20분간 원심분리한 후 고추탄저병균(Colletotrichum acutatum KACC 40032)을 대상으로 사용하여 paper disc method로 배양 상등액의 항균활성을 측정하였다.
- 탄저병 접종원은 탄저병에 걸린 병든 과실로부터 직접 포자를 채취하여 사용하였다. 탄저병균의 접종포자현탁액은 5 × 106 conidia/mL의 농도로 조절하였다.
이론/모형
- 균주의 동정은 Bergey's manual of determinative bacteriology(Buchanan, 1974), Microbiological methods(Collins and Lyne, 1976) 및 Bergey's manual of systematic bacteriology(Sneath, 1989) 등에 수록되어 있는 일반적인 세균동정법에 따라 수행하였다.
- 배양액을 12,000 × g에서 20분간 원심분리한 후 고추탄저병균(Colletotrichum acutatum KACC 40032)을 대상으로 사용하여 paper disc method로 배양 상등액의 항균활성을 측정하였다.
성능/효과
- Bacillus sp. 1 균주의 배양액, NASS-1 균주를 배양하기 위한 배지를 처리하였을 때는 탄저병균이 100% 발병하였는데, NASS-1 균주배양액을 75% 희석하여 처리한 경우는 70% 이상의 발병이 억제되고, 50% 희석하여 처리하였을 때는 탄저병균의 발병을 크게 억제하는 효과를 나타내었다. 고추 과실에 합성농약과(0.
- NASS-1 균주의 배양액을 10배, 100배, 및 1000배로 희석하여 탄저병균의 포자 현탁액에 처리하여 포자 발아와, 부착기 형성에 미치는 영향을 조사한 결과, NASS-1 균주의 배양액(1/10 희석)은 포자 발아에는 영향을 나타내지 않았으나 부착기 형성을 99%이상 억제 하였다(Table 3). 이는 일반적으로 Bacillus subtilis가 생산하는 Iturin의 작용기작과는 다른 기작을 가지고 있음을 알 수 있었다 (Klich et al.
- 고추 과실에 합성농약과(0.001 g/mL, 0.01 g/mL), NASS-1 균주의 배양액(100 µL/mL, 250 µL/mL, 500 µL/mL)을 처리한 후 발병된 탄저병균의 병반을 조사한 결과, NASS-1 균주의 배양액 500 µL/mL 처리 하였을 때 고추 과실에 탄저병균의 병반이 전혀 나타나지 않았다(Fig. 2).
- 고추 탄저병원균인 Colletotrichum acutatum(KACC 40042), Colletotrichum acutatum(KACC 40689) 및 Colletotrichum acutatum(KACC 40691) 3균주에 대한 분리 미생물 배양액의 균사생장 억제효과를 검정 한 결과, Fig. 1에 나타난 바와 같이 선발 미생물의 배양액은 전 공시균주에 대하여 균사 생장 억제효과를 나타내었으며, 고추재배 농가에서 많이 사용하고 있는 합성 농약인 항진균제(carbendazim 40% + kasugamycin 3.45%, 0.001 g/mL)와 대등한 억제 효과를 나타내었다.
후속연구
- , 1994). NASS1 균주의 배양액에서 생산되는 부착기 형성저해에 관여하는 대사물질을 분리하여 구조를 동정하여 Iturin과는 다른 계통의 물질로 확인된다면 새로운 진균병 억제 미생물제로 사용가능 할 것으로 추정된다. Fig.
※ AI-Helper는 부적절한 답변을 할 수 있습니다.