[논문]오리나무유래 디아릴헵타노이드 허수테논의 T 세포활성억제 및 항아토피 효능연구

이도익; 서성준; 주성수

doi:10.9721/kjfst.2013.45.4.508

오리나무유래 디아릴헵타노이드 허수테논의 T 세포활성억제 및 항아토피 효능연구
T-lymphocyte Inactivation and Anti-atopic Effects of Diarylheptanoid Hirsutenone Isolated from Alnus japonica 원문보기

한국식품과학회지 = Korean journal of food science and technology, v.45 no.4, 2013년, pp.508 - 514

이도익 (중앙대학교 약학대학 면역학과) , 서성준 (중앙대학교 의학대학 피부과) , 주성수 (강릉원주대학교 생명과학대학 해양분자생명공학과)

초록
AI-Helper

본 연구에서는 오리나무유래 HST의 T 세포 비활성화 효능을 확인하고 그 기전을 탐색하여 새로운 항아토피 천연소재로의 개발 가능성을 제시하고자 하였다. HST는 T 세포 mitogen으로서 anti-CD3 mAb가 처리 된 마우스 비장에서 Th 사이토카인(IL-2, IFN-${\gamma}$, IL-4, IL-5, IL-10)의 발현을 효과적으로 억제하였으며, T 세포 early activation marker인 CD25 유전자 발현이 INCA-6에서 매우 효과적으로 억제되는 것으로 보아, NFAT inactivator-유사 NFAT 탈인산화 억제 기전을 가지는 것으로 예측되었다. 또한 세포주기조절 단백질인 p21과 p27의 유전자도 HST에 의해 upregulation이 되어 효과적인 T 세포 증식 및 분화를 억제할 것으로 생각되었다. 이러한 세포주기조절 효과는 AD를 악화시키는 세균인 S. aureus 성장억제 실험에서 확인되어 향후 항박테리아 효능을 갖는 우수한 항아토피피부염 천연소재로서 HST의 활용 가치가 높을 것으로 판단된다.

Abstract ▼ AI-Helper

2Department of Marine Molecular Biotechnology, College of Life Science, Gangneung-Wonju National University Recently, we reported that diarylheptanoid hirsutenone (HST) effectively inactivated T lymphocytes. However, it has not been evaluated whether HST is involved in calcineurin or calmodulin inactivation. In the present study, cells were treated with T-cell inhibitors with or without HST. Our results revealed that HST successfully inhibited expression of T-helper type I (Th1) and Th2 cytokines. Co-treatment with HST and nuclear factor-activated T cell (NFAT) activation inhibitor III (INCA-6) showed a more sensitive effect than that with other inhibitors, suggesting that HST contributes to inhibition of dephosphorylation of NFAT in the cytosol. HST up-regulated cell cycle arrest genes and inhibited the growth of Staphylococcus aureus. These effects were confirmed in an NFAT electrophoretic-mobility shift assay via successful inhibition of NFAT translocation and in the histological recovery in a 2,4-dinitrochloro benzene-induced in vivo model. Taken together, HST was shown to effectively inhibit T-cell activation via inhibition of cytosolic NFAT dephosphorylation, similar to INCA-6.

주제어

AI 본문요약
AI-Helper

* AI 자동 식별 결과로 적합하지 않은 문장이 있을 수 있으니, 이용에 유의하시기 바랍니다.

문제 정의

interleukin (IL)-2, interferone (IFN)-γ, IL-4 및 IL-5)의 분비를 억제하였고 비만세포에서의 탈과립현상을 억제하여 AD 증상을 완화시키는 것으로 나타났으나, 아직 HST의 세포내 면역억제기전이 정립되지 않았다. 따라서 본 연구에서는 HST의 T 세포 비활성화에 대한 기전을 밝혀 천연물유래 항아토피 신소재 개발에 중요한 기전적 배경을 제시하고자 하였다.
최근 topical calcineurin inhibitor(TCI)에 대해 미국 FDA에서는 이들의 장기 처치 시 림프종(lymphoma)을 포함한 다른 암종 유발과의 연관성에 대한 위험성을 경고하고 있으나 AD 유발의 주요 면역세포인 T 세포와 비만 세포의 활성화를 억제하는 특이적 기전 때문에 기존 스테로이드제제에 의한 adverse hormonal 반응을 야기 시키지 않는 것으로 알려져 있다(25,26). 따라서 본 연구에서는 오리나무로부터 확보된 HST의 강력한 면역억제 효능에 대한 기전연구를 통해 T 세포의 증식 및 분화를 억제하는 항아토피 소재로서의 기전적 특성을 확인 하였다.
본 연구에서는 오리나무유래 HST의 T 세포 비활성화 효능을 확인하고 그 기전을 탐색하여 새로운 항아토피 천연소재로의 개발 가능성을 제시하고자 하였다. HST는 T 세포 mitogen으로서 anti-CD3 mAb가 처리 된 마우스 비장에서 Th 사이토카인(IL-2, IFN-γ, IL-4, IL-5, IL-10)의 발현을 효과적으로 억제하였으며, T 세포 early activation marker인 CD25 유전자 발현이 INCA-6에서 매우 효과적으로 억제되는 것으로 보아, NFAT inactivator-유사 NFAT 탈인산화 억제 기전을 가지는 것으로 예측되었다.

제안 방법

7-8주령 수컷 BALB/c 마우스를 희생시킨 후 비장을 무균 처리하여 분리하고, plunger를 이용하여 비장세포를 pH 7.2의 차가운 PBS (phosphate buffered saline)내에서 기계적 분리 공정을 통해 분리하였다. 림프구에 최소한의 영향을 주면서 적혈구 세포를 용해시키는 염화암모늄 포함 RBC lysis buffer (eBioscience, San Diego, CA, USA)를 사용하여 적혈구를 제거한 후 10% fetal bovine serum (FBS, Hyclone, Logan, UT, USA)이 포함된 Roswell Park Memorial Institute (RPMI) 1640 완전배지 내에서 비장세포를 배양하였다.
AD 상재균인 황색포도상구균(S. aureus)에 대한 HST의 성장 저해 효과를 확인하기 위해 S. aureus를 nutrient agar에 접종한 후, 37℃에서 3일간 2회 계대배양 후 액체 배지(tryptic soy broth)에서 OD600 (optical density)이 1일 때 배양을 중지하고 S. aureus를 포함하는 배지와 새로운 배지와의 비율이 1:100이 되게 하였다. 각 시험물질(ampicillin 100 µg/mL, HST 0.
EMSA에 사용된 nuclear extracts는 제조사의 지시에 따라 Nuclear Extraction Reagents (Pierce, Rockford, IL, USA)를 사용 하여 BALB/c 생쥐 비장세포로부터 준비하였으며, EMSA kit (Panomics, Santa Clara, CA, USA)을 사용하여 EMSA 분석을 수행하였다. 즉, 각 군으로부터 동일한 양의 단백질을 포함하는 nuclear extract를 5분간 poly (dI-dC) (1 µg/mL)와 함께 5분간 방치한 후 binding buffer (20 mM HEPES pH 7.
First strand cDNA 합성은 추출된 total RNA 1µg을 사용하여 수행되었고, Improm-II reverse transcription system (Promega)과 oligo dT primers을 사용하여 역전사 반응을 수행하였다.
H&E 염색은 아토피-유사 피부염을 유발시켰던 외이를 수거하여 10% neutral buffered formalin으로 고정시킨 다음, 적절한 크기(0.5×0.5 cm)로 잘라 paraffin으로 embedding하여 조직표본을 제작하였고, microtome을 사용하여 5 µm의 박편으로 조직절편을 준비하여 2일간 건조하였다.
HST는 2.5 µg/mL 이하의 용량에서 세포독성을 나타내지 않는 것으로 확인되어 본 실험에서 유효 적정용량으로 선정하여 사용하였다(Fig. 1).
HST의 비장세포독성 및 적정 용량을 확인하기 위해 세포막 손상에 따라 배지로 유출된 lactate dehydrogenase (LDH)량을 측정하는 LDH release assay (CytoTox 96 Kit, Promega, Madison, WI, USA)를 수행하였다. 비장세포 5×10⁶ cells/well은 96 well plate에 분주와 함께 2시간 선 배양 후 HST를 농도별로(0.
MCl-Gel CHP 20P (75-150 µm, 5×80 cm, Mitsubishi Chemical Co., Tokyo, Japan)을 사용하여 타겟 분획에 대해 컬럼 크로마토그래피를 반복 수행하였다.
5 cm)로 잘라 paraffin으로 embedding하여 조직표본을 제작하였고, microtome을 사용하여 5 µm의 박편으로 조직절편을 준비하여 2일간 건조하였다. Slide glass에 올려진 조직절편을 완전히 건조시킨 다음, xylene, graded ethanol로 de-paraffin과 rehydration 과정을 진행하여 수화된 조직을 hemotoxylin과 eosin dye 로 염색하였고, 광학현미경(Nikon Eclips Ti-S inverted microscope, Tokyo, Japan)으로 각 그룹 조직의 형태를 관찰하였다(23).
기전을 확인하기 위해 마우스 비장세포에 T cell receptor (TCR) complex 중 신호전달을 담당하는 CD3를 자극하도록 anti-CD3 mAb를 처리하여 T cell-dependent signal pathway 를 확인하였다. T 세포 활성은 Ca²⁺/calmodulin/calcineurin complex에 의해 NFAT의 탈인산화가 일어나 핵 내로 NFAT translocation에 따른 결과이므로 NFAT의 탈인산화 과정을 제어하는 inhibitors (calcineurin inhibitor (FK506), calmodulin antagonist (W7) 및 NFAT activation inhibitor III (INCA-6))와 HST 병용 또는 단독 처리하여 T 세포 사이토카인 유전자의 발현 정도를 qPCR 을 통해 분석하였다. FK506는 세포질 내 FK506-binding protein (FKBP12)와 복합체 형태로 calcineurin의 효소활성을 억제하는 특징을 가지며 W7은 calmodulin과 결합하여 Ca²⁺-calmodulin-regulated 효소활성을 억제하는 반면 INCA-6는 calcineurin activity에 영향을 주지 않고 calcineurin과 결합하여 NFAT의 탈인산화를 억제하는 기전적 특징을 가진다(27).
qPCR 분석은 Rotor-Gene 6000 (Corbett Research, Mortlake, Australia)을 사용하였으며, Table 1의 primer를 이용하여 AD 관련 유전자의 발현을 정량적으로 측정하였고 β-actin에 normalization 시킨 상대 수치를 비교분석 하였다.
1 mM EDTA, 50 mM KCl, 5% glycerol, 200 µg/mL BSA) 및 biotinylated oligo (10 ng/mL)를 첨가하였다. 각 군에 대한 결합특이성을 control하기 위해 unlabeled 과량(5배)의 올리고를 biotinylated probe 첨가 전 추가하였다. 결합 반응 혼합물을 실온에서 30분간 방치하였으며, protein-DNA 복합체는 4℃에서 0.
각 군의 세포로부터 Trizol reagent (Invitrogen, Carlsbad, CA, USA)를 이용하여 total RNA를 추출하였다. 즉, Trizol reagent 1 mL를 첨가하여 세포를 용해시키고 chloroform 200 µL를 첨가하여 실온에서 5분 동안 방치 후 13,500 rpm에서 15분 동안 원심 분리 하였다.
각 시험물질(ampicillin 100 µg/mL, HST 0.5 mg/mL 및 HST 1 mg/mL)을 혼합하여 4시간 동안 배양을 지속하였고, 반응 종료후 각 그룹에서 100 µL씩 취해 600 nm에서 흡광도를 측정(Molecular Devices)하여 각 군간 성장저해 수준을 비교분석하였다.
전기영동이 끝난 gel을 Biodyne B Nylon Membrane (Thermo, Rockford, IL, USA)으로 transfer한 후 membrane을 10분간 UV crosslinking하여 고정시켰다. 결합된 oligo들을 검출하기 위해, membrane을 blocking buffer (Panomics)을 사용하여 blocking한 후, 기질로서 Streptavidine-HRPO를 첨가하고, 제공된 chemiluminescent nucleic acid detection module (Panomics)을 이용하여 분석하였다.
1). 기전을 확인하기 위해 마우스 비장세포에 T cell receptor (TCR) complex 중 신호전달을 담당하는 CD3를 자극하도록 anti-CD3 mAb를 처리하여 T cell-dependent signal pathway 를 확인하였다. T 세포 활성은 Ca²⁺/calmodulin/calcineurin complex에 의해 NFAT의 탈인산화가 일어나 핵 내로 NFAT translocation에 따른 결과이므로 NFAT의 탈인산화 과정을 제어하는 inhibitors (calcineurin inhibitor (FK506), calmodulin antagonist (W7) 및 NFAT activation inhibitor III (INCA-6))와 HST 병용 또는 단독 처리하여 T 세포 사이토카인 유전자의 발현 정도를 qPCR 을 통해 분석하였다.
농축액을 Sephadex LH-20 컬럼(25-100 µm, 8×150 cm, Pharmacia, Stockholm, Sweden)에 적용하고 메탄올(0-100%)의 농도를 증가시키면서 용출시켰다.
5% DNCB 20 µL를 동일 부위에 반복 도포하였다. 동시에 무처치 대조군에는 아세톤:올리브오일을 4:1의 비율로 혼합하여 도포하였으며, 양성대조군은 0.1% Protopic 연고 (tacrolimus, Fujisawa Korea, Seoul, Korea)를 도포하였고, 시험물질(HST)을 5 mg/kg body weight 도포하여 아토피-유사 피부염의 정상화 수준을 비교분석하였다.
2의 차가운 PBS (phosphate buffered saline)내에서 기계적 분리 공정을 통해 분리하였다. 림프구에 최소한의 영향을 주면서 적혈구 세포를 용해시키는 염화암모늄 포함 RBC lysis buffer (eBioscience, San Diego, CA, USA)를 사용하여 적혈구를 제거한 후 10% fetal bovine serum (FBS, Hyclone, Logan, UT, USA)이 포함된 Roswell Park Memorial Institute (RPMI) 1640 완전배지 내에서 비장세포를 배양하였다. 비장세포는 humidified 5% CO₂, 37℃의배양조건에서 96-well plate에 5×10⁶ cell/well의 농도 또는 12-well plate에 1.
메탄올의 비율 구배를 40%에서 80%으로 증가시키면서 용출을 행하였으며, 마지막으로, 용출된 용액을 YMC ODS-gel (s-75 µm, 5×60 cm, YMC Co. Ltd, Kyoto, Japan)으로 채워진 컬럼에 적용하고, 메탄올의 비율 구배를 40%에서 80%으로 증가시키면서 저압액체 크로마토그래피(low pressure liquid column chromatography)를 수행하였다.
비장 면역세포내 T 세포 의존성 활성화를 위해 anti-CD monoclonal antibody (mAb) (eBioscience) 1 µg/mL을 처리하고, T 세포 의존성 기전연구를 위해 tacrolimus (FK506, Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA), calmodulin antagonist (W7, Sigma-Aldrich) 및 NFAT activation inhibitor III (INCA-6, Santa Cruz Biotechnology, Santa Cruz, CA, USA)를 사용하였으며, FK506, W7 및 INCA-6의 최적 억제 농도로서 1 ng/mL, 50 µM 및 250 nM을 각각 단독 및 HST와 병용 처리하여 기전연구를 수행하였다.
비장세포 5×106 cells/well은 96 well plate에 분주와 함께 2시간 선 배양 후 HST를 농도별로(0.001, 0.01, 0.1, 1, 2.5 및 5 µg/mL) 처리하고 24시간 배양하였다.
japonica)의 수피(bark)는 2010년 8월 서울 수달산에서 수집하고 증거표본을 중앙대학교 약학대학 식물표본실에 기탁하였다(AJB2010-08). 시료준비는 잘게 자른 신선한 수피 2.5 kg을 80% 수용성 아세톤과 함께 실온에서 72시간동안 추출하였다. 진공 상태에서 아세톤을 제거한 후, 수용성 용액 여과 후 농축시켰다.
2H). 이러한 결과는 또 다른 cell-cycle regulator인 p27(cyclin과 cdk에 결합하여 S기로의 진입을 단속하는 단백질)에서도 유사한 결과가 관찰 되어 HST가 세포주기조절에 밀접한 연관성을 가짐을 제시하였다(Fig. 2I).
즉, 각 군으로부터 동일한 양의 단백질을 포함하는 nuclear extract를 5분간 poly (dI-dC) (1 µg/mL)와 함께 5분간 방치한 후 binding buffer (20 mM HEPES pH 7.9, 1 mM DTT, 0.1 mM EDTA, 50 mM KCl, 5% glycerol, 200 µg/mL BSA) 및 biotinylated oligo (10 ng/mL)를 첨가하였다.
즉, 아세톤에 용해한 1% DNCB 20 µL를 7일간 도포하여 1차 면역화 반응을 유도한 후 2일 간격으로 추가 5주간 0.5% DNCB 20 µL를 동일 부위에 반복 도포하였다.
Ltd, Kyoto, Japan)으로 채워진 컬럼에 적용하고, 메탄올의 비율 구배를 40%에서 80%으로 증가시키면서 저압액체 크로마토그래피(low pressure liquid column chromatography)를 수행하였다. 컬럼은 Gilson 112 UV/VIS 검출기(254/280 nm)가 장착된 연동펌프(Gilson Miniplus 3)에 연결하고 Gilson 740 ProTech 시스템 컨트롤러 소프트웨어 프로그램(Gilson Inc., Middleton, WI, USA)을 사용하였으며, 최종적으로 고 순도의 정제된 허수테논(0.08 g, 0.0032% (w/w))을 얻었다. 본 실험을 위해 감압하에 동결 건조한 분리물질(허수테논, HST)을 dimethyl sulfoxide (DMSO)에 용해시키고 stock solution으로서 50 mg/mL을 준비하였다.

대상 데이터

0032% (w/w))을 얻었다. 본 실험을 위해 감압하에 동결 건조한 분리물질(허수테논, HST)을 dimethyl sulfoxide (DMSO)에 용해시키고 stock solution으로서 50 mg/mL을 준비하였다.
오리나무(A. japonica)의 수피(bark)는 2010년 8월 서울 수달산에서 수집하고 증거표본을 중앙대학교 약학대학 식물표본실에 기탁하였다(AJB2010-08). 시료준비는 잘게 자른 신선한 수피 2.

데이터처리

결과는 각 군별 mean±SD로 나타내었고 통계적 의의는 student t-test 방법을 이용하여 p<0.05일 때 유의한 것으로 판단하였다.
결과분석은 GraphPad Prizm 5.01 software를 이용하여 통계 처리하였다. 결과는 각 군별 mean±SD로 나타내었고 통계적 의의는 student t-test 방법을 이용하여 p<0.

이론/모형

아토피-유사 피부염은 2,4-dinitrochloro benzene (DNCB, SigmaAldrich)을 사용하여 Joo 등(22)의 방법에 따라 BALB/c 마우스 외이(n=3)에 도포하여 유발시켰다. 즉, 아세톤에 용해한 1% DNCB 20 µL를 7일간 도포하여 1차 면역화 반응을 유도한 후 2일 간격으로 추가 5주간 0.

성능/효과

Fig. 2A-F에 나타낸 바와 같이 HST처리 시 T 세포 활성화에 따른 Th1/Th2 사이토카인(IL-2, IFN-γ, IL-4, IL-5, IL-10, IL-13) 의 발현이 anti-CD3 mAb 단독 처리군 대비 유의하게 감소하여 T 세포의 활성을 효과적으로 억제하는 것으로 나타났다.
HST는 T 세포 mitogen으로서 anti-CD3 mAb가 처리 된 마우스 비장에서 Th 사이토카인(IL-2, IFN-γ, IL-4, IL-5, IL-10)의 발현을 효과적으로 억제하였으며, T 세포 early activation marker인 CD25 유전자 발현이 INCA-6에서 매우 효과적으로 억제되는 것으로 보아, NFAT inactivator-유사 NFAT 탈인산화 억제 기전을 가지는 것으로 예측되었다.
특히 HST에 의한 Th1 사이토카인인 IFN-γ 발현 저해는 Th2 사이토카인 IL-4, IL-5 및 IL-13 등의 생산을 억제시키고 B 세포의 형질 세포(plasma cell) 분화 유도를 조절하여 결국 IgE 생산을 감소시킬 것으로 사료되었다(28,29). HST와 각 inhibitor와의 연관성을 관찰하기 위해 inhibitor 단독 또는 HST와의 병용 처치 후 Th 사이토카인의 발현 수준을 분석한 결과 HST+FK506에 비해 HST+W7또는 HST+INCA-6와의 병용 처리 시 보다 효과적인 사이토카인 발현억제가 나타나는 것으로 확인되었다(Fig. 2B,D,E,F). 흥미롭게도 Th1 사이토카인(IL-2, IFN-γ)과 비교하여 INCA-6와의 병용 처리 시 INCA-6 단독처리와는 달리(p>0.
05) 유의한 수준으로 Th2 사이토카인(IL-4, IL-5, IL-10, IL-13)의 유전자 발현을 억제하는 결과로부터 HST가 calcineurin과 반응 후 NFAT의 탈인산화를 억제하는 잠재적 기전 특징을 가지고 있는 것으로 예측되 었다(Fig, 2C-F). T 세포 early activation marker인 CD25의 유전자 수준을 분석한 결과 W7과 INCA-6 단독 처리와 비교 시 HST 를 병용 처리한 경우 HST에 의한 T cell activation이 조절되는 것으로 보아 W7 및 INCA-6와는 다른 구역의 반응 부위가 있을 것으로 판단된다(Fig. 2G).
더욱이 HST의 T 세포 활성억제 및 세포주기 조절을 통한 항박테리아 효과는 기존의 항아토피제제에 없는 biphasic한 소재로의 개발 가능성이 매우 높음을 시사하고 있다. T 세포 활성화 신호의 최종 종착지인 핵 내로의 NFAT translocation 억제효과에서도 HST에 의한 NFAT 탈인산화가 거의 완벽하게 이루어지고 있음이 EMSA assay를 통해 확인되었으며(Fig. 4), DNCB-induced atopy-like mouse model에 HST 도포 후 유발된 AD의 조직학적 정상화가 양성대조군인 0.1% protopic 연고(tacrolimus)와 유사한 수준의 정상화를 보였을 뿐 아니라 적출된 비장의 Th1 및 Th2 사이토카인(각각 IL-2 및 IL-4) 유전자의 발현 수준도 대조군 수준으로 억 제되었다(Fig. 5A-C). 이와 같은 결과로부터 만성기(chronic phase) 의 AD에서 우세하게 나타나는 IL-2와 급성기(acute phase) 나타나는 IL-4를 효과적으로 억제하여 반복되는 AD 발병기전을 조절할 것으로 사료되었다(10).
결론적으로 HST는 AD를 유발하는 주요 면역세포인 T 세포의 활성을 효과적으로 억제하며, 이와 같은 효과는 NFAT 탈인산화 조절에 의한 Th 사이토카인의 발현 억제의 결과로 생각된다. 특히 HST는 FK506 및 W7 등과 같은 calcineurin 효소활성 억제효과 보다는 INCA-6와 유사하게 calcineurin과 반응 후 NFAT 탈인산화억제를 유도하는 것으로 판단된다.
HST는 T 세포 mitogen으로서 anti-CD3 mAb가 처리 된 마우스 비장에서 Th 사이토카인(IL-2, IFN-γ, IL-4, IL-5, IL-10)의 발현을 효과적으로 억제하였으며, T 세포 early activation marker인 CD25 유전자 발현이 INCA-6에서 매우 효과적으로 억제되는 것으로 보아, NFAT inactivator-유사 NFAT 탈인산화 억제 기전을 가지는 것으로 예측되었다. 또한 세포주기조절 단백질인 p21과 p27의 유전자도 HST에 의해 upregulation이 되어 효과적인 T 세포 증식 및 분화를 억제할 것으로 생각되었다. 이러한 세포주기조절 효과는 AD를 악화시키는 세균인 S.
본 연구진은 최근 오리나무(A. japonica)로부터 수 종의 diarylheptanoid compounds를 분리 동정하였으며 이들 중 hirsutenone (HST)에서 우수한 항아토피 효능이 있음을 입증하였다(21). 특히 HST는 기존의 T 세포 억제제와 유사하게 nuclear factor-activated T cell (NFAT)의 활성을 억제하여 T 세포 의존성 사이토카인(i.
흥미롭게도 Th1 사이토카인(IL-2, IFN-γ)과 비교하여 INCA-6와의 병용 처리 시 INCA-6 단독처리와는 달리(p>0.05) 유의한 수준으로 Th2 사이토카인(IL-4, IL-5, IL-10, IL-13)의 유전자 발현을 억제하는 결과로부터 HST가 calcineurin과 반응 후 NFAT의 탈인산화를 억제하는 잠재적 기전 특징을 가지고 있는 것으로 예측되 었다(Fig, 2C-F).

후속연구

또한 세포주기조절 단백질인 p21과 p27의 유전자도 HST에 의해 upregulation이 되어 효과적인 T 세포 증식 및 분화를 억제할 것으로 생각되었다. 이러한 세포주기조절 효과는 AD를 악화시키는 세균인 S. aureus 성장억제 실험에서 확인되어 향후 항박테리아 효능을 갖는 우수한 항아토피피부염 천연소재로서 HST의 활용 가치가 높을 것으로 판단된다.

질의응답

핵심어	질문	논문에서 추출한 답변
	피부의 주된 기능은?	특히 각종 산업 활동에 의해 유발되는 대기오염, 수질오염, 토양오염 및 해양오염 등의 급속한 증가는 사람의 생활 및 건강에 유해한 영향을 수반하게 된다. 인간의 신체 중가장 큰 기관인 피부의 주된 기능은 자외선, 유독 화학물질 또는 물에 장기간/반복적 노출 등과 같은 유해한 환경으로부터 몸을 보호하는 것이다(2).
	IgE 유래 즉시형 및 세포매개성 지연형 알러지 반응의 종류에는 무엇이 있는가?	접촉피부염 및 아토피피부염(atopic dermatitis, AD) 등을 포함한 다양한 피부질병이 외부 접촉물질에 의해 IgE 유래 즉시형 및 세포매개성 지연형 알러지 반응이 유발된다(3). 이러한 알러지 반응에는 사이토카인 분비유형에 따라 두 개의 T 세포 subset이 관여하고 있으며 B세포로부터 알러지 특이성 immunoglobulin E (IgE) 항체를 분비하도록 유도하는 T helper 2 (Th2) 반응과 지연형 알러지 반응을 유발하는 T helper 1 (Th1) 반응이 있다(4). 즉시형 알러지 반응은 집먼지 진드기, 꽃가루, 천연고무 라텍스, 우유제품 등에 의해 나타날 수 있으나 AD와 같은 정상적이지 않은 손상된 피부를 통해 침입하여 더욱 악화된다(5).
	알러지성 질환이 증가하는 원인은?	사회가 복잡해지고 산업과 문명의 발달로 자연오염의 증가, 식생활의 변화, 스트레스의 가중 등으로 알러지성 질환이 해마다 증가하고 있다(1). 특히 각종 산업 활동에 의해 유발되는 대기오염, 수질오염, 토양오염 및 해양오염 등의 급속한 증가는 사람의 생활 및 건강에 유해한 영향을 수반하게 된다.

참고문헌 (32)

Strannegard O, Strannegard IL. The causes of the increasing prevalence of allergy: is atopy a microbial deprivation disorder? Allergy 56: 91-102 (2001)

상세보기
English JSC, Dawe RS, Ferguson J. Environmental effects and skin disease. Brit. Med. Bull. 68: 129-142 (2003)

상세보기
Leung DY. Molecular basis of allergic diseases. Mol. Genet. Metab. 63: 157-167 (1998)

상세보기
Romagnani S. T-cell subsets (Th1 versus Th2). Ann. Allerg. Asthma Im. 85: 9-18 (2000)

상세보기
Yura A, Shimizu T. Trends in the prevalence of atopic dermatitis in school children: longitudinal study in Osaka prefecture, Japan, from 1985 to 1997. Brit. J. Dermatol. 145: 966-973 (2001)

상세보기
Diaz-Sanchez D. Pollution and the immune response: atopic diseases- are we too dirty or too clean? Immunology 101: 11-18 (2000)

상세보기
Jee HM, Kim KW, Kim CS, Sohn MH, Shin DC, Kim KE. Prevalence of asthma, rhinitis and eczema in Korean children using the international study of asthma and allergies in childhood (ISAAC) questionnaires. Pediatr. Allergy Respir. Dis. 19: 165-172 (2009)
Wollenberg A, Bieber T. Atopic dermatitis: From the genes to skin lesions. Allergy 55: 205-213 (2000)

상세보기
Leung DY, Bieber T. Atopic dermatitis. Lancet 361: 151-160 (2003)

상세보기
Dokmeci E, Herrick CA. The immune system and atopic dermatitis. Semin. Cutan. Med. Surg. 27: 138-143 (2008)

상세보기
Hjern A, Haglund B, Hedlin G. Ethnicity, childhood environment and atopic disorder. Clin. Exp. Allergy 30: 521-528 (2000)

상세보기
Williams HC, Robertson CF, Stewart AW, At-Khaled N, Anabwani G, Anderson R, Asher I, Beasley R, Bjrkstn B, Burr M, Clayton T, Crane J, Ellwood P, Keil U, Lai C, Mallol J, Martinez F, Mitchell E, Montefort S, Pearce N, Shah J, Sibbald B, Strachan D, von Mutius E, Weiland SK. Worldwide variations in the prevalence of symptoms of atopic eczema in the international study of asthma and allergies in childhood. J. Allergy Clin. Immun. 103: 125-138 (1999)

상세보기
McKeever TM, Lewis SA, Smith C, Collins J, Heatlie H, Frischer M, Hubbard R. Siblings, multiple births, and the incidence of allergic disease: a birth cohort study using the West Midlands general practice research database. Thorax 56: 758-762 (2001)

상세보기
Serafini U. Do infections protect against asthma and atopy? Allergy 52: 955-957 (1997)

상세보기
Holt PG. Environmental factors and primary T-cell sensitisation to inhalent allergens in infancy: reappraisal of the role of infections and air pollution. Pediatr. Allergy Immu. 6: 1-10 (1995)

상세보기
Novac N, Bieber T, Leung DYM. Immune mechanisms leading to atopic dermatitis. J. Allergy Clin. Immun. 112: S128-S139 (2003)

상세보기
Yang HJ, Park KW, Kim HS, Cho SM, Park KM. Effect of antiatopic allergic reaction in response to oriental herb extracts. Korean J. Food Sci. Technol. 42: 109-114 (2010)
Sehra S, Tuana FM, Holbreich M, Mousdicas N, Tepper RS, Chang CH, Travers JB, Kaplan MH. Scratching the surface: towards understanding the pathogenesis of atopic dermatitis. Crit. Rev. Immunol. 28: 15-43 (2008)

상세보기
Buys LM. Treatment options for atopic dermatitis. Am. Fam. Physician 75: 523-528 (2007)

상세보기
Petry V, Bessa GR, Poziomczyck CS, Oliveira CF, Weber MB, Bonamigo RR, d'Azevedo PA. Bacterial skin colonization and infections in patients with atopic dermatitis. An. Bras. Dermatol. 87: 729-734 (2012)

상세보기
Joo SS, Kim SG, Choi SE, Kim YB, Park HY, Seo SJ, Choi YW, Lee MW, Lee do I. Suppression of T cell activation by hirsutenone, isolated from the bark of Alnus japonica, and its therapeutic advantages for atopic dermatitis. Eur. J. Pharmacol. 614: 98-105 (2009)

상세보기
Joo SS, Yoo YM, Ko SH, Choi W, Park MJ, Kang HY, Choi KC, Choi IG, Jeung EB. Effects of essential oil from Chamaecypris obtusa on the development of atopic dermatitis-like skin lesions and the suppression of Th cytokines. J. Dermatol. Sci. 60: 122-125 (2010)

상세보기
Joo SS. In vitro and in vivo hair growth promotion effects of Lactobacillus plantarum-fermented plant extracts (MBN). Korean J. Food Sci. Technol. 43: 381-386 (2011)

원문보기 상세보기
Leung D. Superantigens, steroid insensitivity and innate immunity in atopic eczema. Acta Derm. Venereol. Suppl. 215: 11-15 (2005)
Plotz SG, Ring J. What's new in atopic eczema? Expert Opin. Emerg. Dr. 15: 249-267 (2010)

상세보기
Bornhvd EC, Burgdorf WH, Wollenberg A. Immunomodulatory macrolactams for topical treatment of inflammatory skin diseases. Curr. Opin. Invest. Dr. 3: 708-712 (2002)
Sieber M, Baumgrass R. Novel inhibitors of the calcineurin/ NFATc hub - alternatives to CsA and FK506? Cell Commun. Signal. 7: 25 (2009)

상세보기
Jujo K, Renz H, Abe J, Gelfand EW, Leung DY. Decreased interferon gamma and increased interleukin-4 production in atopic dermatitis promotes IgE synthesis. J. Allergy Clin. Immun. 90: 323-331 (1992)

상세보기
Leung DY, Boguniewicz M, Howell MD, Nomura I, Hamid QA. New insights into atopic dermatitis. J. Clin. Invest. 113: 651-657 (2004)

상세보기
Firpo EJ, Koff A, Solomon MJ, Roberts JM. Inactivation of a Cdk2 inhibitor during interleukin 2-induced proliferation of human T lymphocytes. Mol. Cell. Biol. 14: 4889-4901 (1994)

상세보기
Khanna AK, Hosenpud JD. In vitro and in vivo transfection of p21 gene enhances cyclosporin A-mediated inhibition of lymphocyte proliferation. J. Immunol. 165: 1882-1888 (2000)

상세보기
Baker BS. The role of microorganisms in atopic dermatitis. Clin. Exp. Immunol. 144: 1-9 (2006)

상세보기

저자의 다른 논문 :

표제어: PCR

동의어: Packet Collision Rate

용어 설명 출처 목록 (6)

용어 설명: PCR은 세균 특이성이 있는 primer를 이용하여 적은 수의 세균이 있을지라도 쉽게 검출할 수 있는 유용한 방법이며, 이를 이용하여 구강 내 치면세균막이나 타액에서 직접 세균을 검출할 수 있게 되었다[8].

내보내기 구분	파일저장 인쇄 메일전송
구성항목	기본정보 상세정보 관리번호, 논문명, 저널/프로시딩명, 저자 , 발행년, 권, 호, 시작페이지, 끝페이지, 발행기관 관리번호, 논문명, 대등논문명, 저자 , 저널/프로시딩명, 발행기관, 발행년, 발행언어, 권, 호, 시작페이지, 끝페이지, ISBN, ISSN, 주제분야, 키워드, 초록(한글), 초록(영문), 저자(소속기관)
저장형식	Text(ASCII format) Excel format RefWorks Direct Export RIS format (for Reference Manager, ProCite, EndNote), Scholar's Aids, Mendeley
메일정보	받는사람 (필수) @ 보내는사람 (선택) @ 제목 내용 KISTI 검색결과 이메일 서비스
안내	총 건의 자료가 검색되었습니다. 다운받으실 자료의 인덱스를 입력하세요. (1-10,000) 검색결과의 순서대로 최대 10,000건 까지 다운로드가 가능합니다. 데이타가 많을 경우 속도가 느려질 수 있습니다.(최대 2~3분 소요) 다운로드 파일은 UTF-8 형태로 저장됩니다. 파일의 내용이 제대로 보이지 않을실 때는 웹브라우저 상단의 보기 -> 인코딩 -> 자동선택 여부를 확인하십시오. ~ Text(ASCII format) Excel format

연합인증