본 연구에서는 석류에서 단세포성 곰팡이의 성장을 저해하는 항진균 물질을 탐색하고 새로운 천연 항생물질을 찾기 위한 목적으로 석류를 과피, 씨, 전체로 각각 분리하고 추출하여 항진균 활성을 조사하였다. 고흥에서 생산된 석류를 전체, 과피, 씨로 나누어 70% EtOH로 추출한 후 Candida albicans에 대한 항진균 활성을 측정한 결과, 항진균 활성이 액체배지에서 각각 비슷하게 나왔으며 고체배지에서는 석류 전체 추출물을 사용하였을 때 가장 잘 나타났다. 고체배지에서와 액체배지에서 공통적으로 석류 전체 및 과피 추출물의 chloroform, ethyl acetate 용매 추출물의 C. albicans의 항진균 활성도를 측정한 결과 ethyl acetate 추출물에서 모두 높은 활성도를 나타냈다. C. albicans, Candida glabrata, Candida tropicalis, Candida lusitaniae에 대한 항진균 활성은 석류 전체 및 석류 과피의 ethyl acetate 용매 추출물에서 각각 36%, 25% 이상의 저해율을 보였다. 이러한 결과는 석류 내 존재하는 항진균 활성 물질은 ethyl acetate에 잘 녹는 지용성 물질인 것으로 추정된다.
본 연구에서는 석류에서 단세포성 곰팡이의 성장을 저해하는 항진균 물질을 탐색하고 새로운 천연 항생물질을 찾기 위한 목적으로 석류를 과피, 씨, 전체로 각각 분리하고 추출하여 항진균 활성을 조사하였다. 고흥에서 생산된 석류를 전체, 과피, 씨로 나누어 70% EtOH로 추출한 후 Candida albicans에 대한 항진균 활성을 측정한 결과, 항진균 활성이 액체배지에서 각각 비슷하게 나왔으며 고체배지에서는 석류 전체 추출물을 사용하였을 때 가장 잘 나타났다. 고체배지에서와 액체배지에서 공통적으로 석류 전체 및 과피 추출물의 chloroform, ethyl acetate 용매 추출물의 C. albicans의 항진균 활성도를 측정한 결과 ethyl acetate 추출물에서 모두 높은 활성도를 나타냈다. C. albicans, Candida glabrata, Candida tropicalis, Candida lusitaniae에 대한 항진균 활성은 석류 전체 및 석류 과피의 ethyl acetate 용매 추출물에서 각각 36%, 25% 이상의 저해율을 보였다. 이러한 결과는 석류 내 존재하는 항진균 활성 물질은 ethyl acetate에 잘 녹는 지용성 물질인 것으로 추정된다.
Antifungal activities of pomegranate were investigated. Seventy percent ethanol extracts of seeds, peels, and whole fruits of pomegranate showed similar antifungal activities against Candida albicans in liquid media, whereas extract of whole fruit showed relatively high antifungal activity in solid ...
Antifungal activities of pomegranate were investigated. Seventy percent ethanol extracts of seeds, peels, and whole fruits of pomegranate showed similar antifungal activities against Candida albicans in liquid media, whereas extract of whole fruit showed relatively high antifungal activity in solid media. When 70% ethanol extracts were fractionated sequentially with chloroform and ethyl acetate, ethyl acetate fraction exhibited the highest anti-fungal activities against C. albicans. Ethyl acetate fractions of whole fruits and peel portions showed at least 36% and 25% growth against C. albicans, Candida glabrata, Candida tropicalis, and Candida lusitaniae in liquid media, respectively. These results indicate that pomegranate contains antifungal compounds soluble with organic solvents.
Antifungal activities of pomegranate were investigated. Seventy percent ethanol extracts of seeds, peels, and whole fruits of pomegranate showed similar antifungal activities against Candida albicans in liquid media, whereas extract of whole fruit showed relatively high antifungal activity in solid media. When 70% ethanol extracts were fractionated sequentially with chloroform and ethyl acetate, ethyl acetate fraction exhibited the highest anti-fungal activities against C. albicans. Ethyl acetate fractions of whole fruits and peel portions showed at least 36% and 25% growth against C. albicans, Candida glabrata, Candida tropicalis, and Candida lusitaniae in liquid media, respectively. These results indicate that pomegranate contains antifungal compounds soluble with organic solvents.
일반적으로 식물성 천연물들의 항산화 효과, 항균성 등은 추출방법, 추출조건 등에 따라 유효물질의 함량 및 함유 패턴이 다르고, 생리적 활성도 다르게 나타나기 때문에 석류의 효율적인 이용을 위해서는 석류 추출물의 형태에 따른 체계적인 유효성분의 검증이 필요할 것으로 사료된다. 본 연구에서는 Candida albicans, Candida tropicalis, Candida glabrata 등 단세포성 곰팡이의 성장을 저해하는 항진균 물질을 탐색하고 새로운 천연 항생물질을 찾기 위해 석류의 과피, 씨, 전체를 추출하여 항진균 활성을 측정하여 석류의 과피와 씨의 효율적인 활용방안을 검토하고자 한다.
제안 방법
본 연구는 석류 추출물의 항균 활성을 Candida sp. 진균을 대상으로 검증하였다. Candida spp.
석류 추출액을 chloroform, ethyl acetate 용매 순으로 추출하였다. 석류 추출액 90 mL와 유기용매 90 mL를 1:1비율로 혼합한 후에 유기용매층과 물층으로 분리된 층 중에서 유기용매층을 감압건조 시킨 후 남은 건조한 추출물을 70% EtOH로 녹여서 실험에 시료로 사용했다.
대상 데이터
고흥에서 생산된 석류를 전체, 과피, 씨로 나누어 통풍이 잘 되는 곳에서 건조한 후 막자사발로 분쇄하여 분말 형태로 만들었다. 다양한 에탄올 농도에서 석류 분말을 추출한 예비실험 결과 70% 에탄올 농도에서 효과적으로 항진균 활성이 측정되었으며, 분말 10 g과 70% EtOH 100 mL를 혼합한 후 30°C shaking incubator에서 24시간 진탕한 다음 원심분리 하여 상층액을 추출물 시료로 사용했다.
데이터처리
추출물에 의한 진균성장 저해실험은 3번 실험한 결과를 토대로 평균표준편차를 산출하였다. 진균성장저해율(%)은 시료가 첨가되거나 첨가되지 않은 배지에서 일정시간 성장한 배양액의 흡광도를 측정한 후 다음과 같은 식에 따라 계산하여 얻었다; [(Δ시료처리군의 흡광도－Δ대조군의 흡광도)/ Δ대조군의 흡광도]×100.
01) 10 μL를 96 well plate에 분주한 후 30°C incubator에서 24시간 배양하면서 12시간마다 ELISA reader를 이용하여 600 nm에서 성장 정도를 측정하였다. 추출물에 의한 진균성장 저해실험은 3번 실험한 결과를 토대로 평균표준편차를 산출하였다. 진균성장저해율(%)은 시료가 첨가되거나 첨가되지 않은 배지에서 일정시간 성장한 배양액의 흡광도를 측정한 후 다음과 같은 식에 따라 계산하여 얻었다; [(Δ시료처리군의 흡광도－Δ대조군의 흡광도)/ Δ대조군의 흡광도]×100.
이론/모형
석류추출물의 항진균 활성 여부를 알아보기 위해 Kim 등(9)의 disc diffusion 실험에 따라 수행하였다. 미리 배양한 C.
성능/효과
2에서 보이듯이 항진균 활성이 약하게 나타났으므로 활성을 좀 더 명확하게 보기 위해서, 또한 항진균 물질의 특성을 추정하기 위해 이들 추출물을 chloroform, ethyl acetate 용매 순으로 추출하였다. Disc diffusion 방법을 이용하여 각 추출물에 따른 고체 배지에서의 Candida spp.의 항진균 활성도를 측정한 결과 2가지 시료 모두 ethyl acetate 추출물에서 높은 활성도를 보였다(Fig. 3, Table 1). Chloroform 추출물에서는 약한 활성도를 보이는 것으로 보아 추출에 사용되는 용매에 따라 다르다는 것을 알 수 있었다.
4,Table 2). 이 결과로 4종의 곰팡이를 저해하는 석류 내의 항진균 활성물질이 지용성일 것으로 추정된다. 반면에 석류과피의 아세톤 추출물은 벼 도열병 곰팡이인 Magnaporthegrisea의 성장을 억제하는 것으로 보고(11)되었는데, 본 연구에서 발견된 지용성 석류 추출물이 사상성 곰팡이에도 성장 억제 활성을 보이는지는 좀 더 연구되어야 할 것이다.
후속연구
이 결과로 4종의 곰팡이를 저해하는 석류 내의 항진균 활성물질이 지용성일 것으로 추정된다. 반면에 석류과피의 아세톤 추출물은 벼 도열병 곰팡이인 Magnaporthegrisea의 성장을 억제하는 것으로 보고(11)되었는데, 본 연구에서 발견된 지용성 석류 추출물이 사상성 곰팡이에도 성장 억제 활성을 보이는지는 좀 더 연구되어야 할 것이다.
질의응답
핵심어
질문
논문에서 추출한 답변
석류의 자생지는?
석류(Punica granatum LINNE, Pomegranate)는 석류과(Punicaceae)에 속하는 낙엽 활엽 교목의 열매로 이란을 중심으로 한 아시아 서남부 및 인도의 북서부가 자생지로 알려져 있다. 석류는 여성의 폐경 질환 완화와 유방암 및 전립선암 예방과 강력한 동맥경화성의 병반 분해에 유효하며, 천연에서 가장 강력한 항산화 활성 등과 연관되어 있고 그 기능성 성분은 의학, 치료, 수명 및 배란 등에서 개발 가능성이 널리 제시되어 왔다(1,2).
석류씨를 부르는 다른 이름은?
석류씨는 석류자(Granati Semen)라고 하며, 석류가지,줄기, 뿌리 및 석류과실의 껍질은 석류피(Granati Cortex)라고 한다. 예로부터 한방에서 석류열매, 줄기껍질, 뿌리의 껍질을 건조하여 각종 기생충, 특히 촌충의 구제, 설사, 이질, 구내염, 장출혈에 효과가 있어 한약재로 이용돼 왔다.
석류자 성분 중 생리활성 및 섭취효과가 보고된 것은?
예로부터 한방에서 석류열매, 줄기껍질, 뿌리의 껍질을 건조하여 각종 기생충, 특히 촌충의 구제, 설사, 이질, 구내염, 장출혈에 효과가 있어 한약재로 이용돼 왔다. 최근 석류씨 중의 punicic acid, estrogen, estradiol, β-sistosterol의 생리활성 및 섭취 효과가 보고되면서 석류 씨에 대한 많은 연구들이 발표되고 있다(3). 석류나 콩과류에서 발견되는 phytoestrogen의 주성분은 isoflavones와lignans 등의 페놀성 화합물이며(4), 이들 페놀성 화합물은 천연의 성호르몬과 공통성을 갖는 구조를 가지고 있어 암,심장혈관질환, 골다공증 등의 만성질환에 대해서 예방 효과가 있다고 보고되고 있다(5).
참고문헌 (11)
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Shim SM, Choi SW, Bae SJ. 2001. Effects of Punica granatum L. fractions on quinone reductase induction and growth inhibition in several cancer cells. J Korean Soc Food Sci Nutr 30: 80-85.
Mori-Okamoto J, Otawara-Hamamoto Y, Yamato H, Yoshimura H. 2004. Pomegranate extract improves a depressive state and bone properties in menopausal syndrome model ovariectomized mice. J Ethnopharmacol 92: 93-101.
Goldfien A, Monroe SE. 1997. Basic & clinical endocrinology. 5th ed. Greenspan FS, Strewler GJ, eds. Appleton Lange Company, London, UK. p 474-477.
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Takahama U. 1985. Inhibition of lipoxygenase-dependent lipid peroxidation by quercetin: mechanism of antioxidative function. Phytochemistry 24: 1443-1446.
Schubert SY, Lansky EP, Neeman I. 1999. Antioxidant and eicosanoid enzyme inhibition properties of pomegranate seed oil and fermented juice flavonoids. J Ethnopharmacol 66: 11-17.
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