[논문]Nrf2 활성화(活性化)를 통한 작약(芍藥)의 간보호효과(肝保護效果)

이수환; 정지윤; 박상미; 제갈경환; 변성희; 조일제; 김상찬; 김광중; 김영우

doi:10.6116/kjh.2016.31.1.33.

Nrf2 활성화(活性化)를 통한 작약(芍藥)의 간보호효과(肝保護效果)
Hepatoprotective effect of Paeoniae radix via Nrf2 activation 원문보기

大韓本草學會誌 = The Korea journal of herbology, v.31 no.1, 2016년, pp.33 - 40

이수환 (대구한의대학교 한의과대학) , 정지윤 (대구한의대학교 한의과대학) , 박상미 (대구한의대학교 한의과대학) , 제갈경환 (대구한의대학교 한의과대학) , 변성희 (대구한의대학교 한의과대학) , 조일제 (대구한의대학교 한의과대학) , 김상찬 (대구한의대학교 한의과대학) , 김광중 (대구한의대학교 한의과대학) , 김영우 (대구한의대학교 한의과대학)

Abstract ▼ AI-Helper

Objectives : Liver is one of the largest organs in the human, and has a function of detoxification and energy sensing to prevent severe disease. Paeoniae radix has been used to treat a variety of liver diseases such as hepatitis and chronic hepatic failure. Although P. radix has been used as an medicinal herb for a long time, the effects of P. radix on severe oxidative stress and its action mechanism on the liver was not clearly verified.Methods : This study investigated the protective effects of P. radix extract (PRE), and the underlying mechanism of its action in the liver. tert-butyl hydroperoxide (t-BHP) and carbon tetrachlroride (CCl4) were used to induce oxidative stress in the HepG2 hepatocyte cell line and Sprague-Dawley rats, respectively.Results : t-BHP significantly induced cell death and ROS production in HepG2 cell, as indicated by MTT and FACS analysis. However, pretreatment of PRE inhibited a decrease in cell viability and H2O2 production in the HepG2 cells. PRE also blocked the ability of t-BHP to damage in mitochondrial membrane transition. More importantly, PRE induced Nrf2 activation and antioxidant Phase II enzyme, which may have a role in the effects of PRE. In mice, PRE inhibited the liver damage induced by CCl4.Conclusions : PRE inhibited oxidative stress and hepatic damages as mediated with Nrf2 activation. This study unveil, in part, the effect and mechanism of old medicinal herb, P. radix.

주제어

AI 본문요약
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문제 정의

hydroperoxide (t-BHP)를 처리한 모델과 2) 산화적 간조직 손상을 유발하는 사염화탄소(CCl₄) 동물모델에서 芍藥 추출물(Paeoniae radix distilled water extract, PRE) 의 세포보호 효과 및 이에 대한 작용기전을 규명하기 위한 실험을 실시하였다.
이러한 GCLC, NQO₁은 모두 Nrf2의 전사적 조절을 받는 ARE 를 함유한 target gene이다. 그러므로 다음으로 PRE가 2상 대사 효소의 발현에 미치는 효과를 살펴보았다. HepG2세포에 PRE 0.
따라서, 세포 내 ROS 생성의 중심 장기로서 미토콘드리아를 인식하고 있다. 그러므로, 세포자멸사를 억제하고 ROS 생성을 제어하고 있는 PRE가 미토콘드리아의 손상에 대한 효과를 살펴보고자 하였다.
다음 연구로서 PRE의 항산화 효능을 동물모델에서 탐구하고자 하였다. 사염화탄소(CCl₄)는 간 조직의 산화적 스트레스를 유발하여, 간세포 손상, 간 조직 괴사를 동반하는 염증성 간 질환을 유도한다²⁷⁾.
4B). 다음으로 ARE-luciferase reporter gene assay를 통하여 PRE의 ARE reporter gene 활성화에 미치는 효과를 살펴보았다. PRE를 12시간 동안 HepG2 세포에 처리한 결과, ARE의 활성이 유의적으로 증가하는 것을 관찰하였다(Fig.

제안 방법

CCl₄ 처치 전 3일 동안 PRE를 30, 100mg/kg 로 투여하고 CCl₄를 처치한 군을 각각 PRE 30, PRE 100군으로 하였다. CCl₄ 처리 24시간 후, 혈액 샘플을 모아서 assay를 실시하였다.
5ml/kg을 처치하여 간독성을 유발하였다. CCl₄ 처치 전 3일 동안 PRE를 30, 100mg/kg 로 투여하고 CCl₄를 처치한 군을 각각 PRE 30, PRE 100군으로 하였다. CCl₄ 처리 24시간 후, 혈액 샘플을 모아서 assay를 실시하였다.
본 연구에서는 芍藥추출물과 t-BHP 처치 후, 10µM DCFH-DA로 37℃ 에서 1시간 염색한 후, enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) 방법으로 측정하였다. DCF의 형광강도는 excitation (485nm)와 emission (530nm)로 Titertek Multiskan Automatic ELISA multimode reader을 사용하여 측정하였고, 대조군을 기준으로 하여 상대적인 값을 평가하였다.
진행하였다. HepG2 cell에 t-BHP 100µM을 12시간 처리하였을 경우, 산화적 스트레스와 apoptosis를 유발하는 것을 예비 연구를 통하여 확인하였다 (data not shown). 그래서 본 실험에서도 100µM의 t-BHP를 12시간 처리하여 세포독성을 유발하였다.
모든 세포실험에서는 세포성장의 confluency가 80-90%가 유지되는 경우에 실험하였고, 20회 이하의 계대배양세포만 사용하였다. HepG2 cell에서 芍藥추출물의 세포보호 효과를 평가하기 위하여, FBS가 제거된 배지에서 24시간 배양한 후에, 芍藥추출물을 처치하고 1시간 후, t-BHP를 12시간 처치하였다. 芍藥추출물은 DMEM에 녹여 사용하였다.
HepG2 cell을 芍藥추출물과 t-BHP로 처치한 후 Rh123 0.05µg/ml로 1시간 염색한 후, trypsin을 처치하여 tube에 모은 후, 1% FBS를 함유하는 PBS로 세척하였고, 이들 세포들을 FACS로 분석하였다. 이때 Rh123의 low density를 나타내는 군을 RN₁ fraction으로 명명하여, 이를 비교하였다.
Mitochondrial membrane potential (MMP)은 membrane- permeable cationic fluorescent 염색약인 Rh123을 이용하여, fluorescence-activated cell sorter (FACS)로 측정하였다. HepG2 cell을 芍藥추출물과 t-BHP로 처치한 후 Rh123 0.
PRE 0.1mg/ml을 HepG2 cell에 처리한 결과, Nrf2의핵내 발현이 1-3시간 이후로 시간 의존적으로 증가하는 것을 western blot을 통해 관찰하였다(Fig. 4A). 또한, PRE 0.
PRE의 t-BHP로 유도한 세포 자멸사(apoptosis)에 대한 보호 효능을 알아보기 위해 MTT assay를 진행하였다. HepG2 cell에 t-BHP 100µM을 12시간 처리하였을 경우, 산화적 스트레스와 apoptosis를 유발하는 것을 예비 연구를 통하여 확인하였다 (data not shown).
PRE의 항산화 효과를 검증하기 위하여, t-BHP로 산화적스트레스를 유발한 HepG2 cell에서 cell viability, ROS, mitochondrial dysfunction, Nrf2 activation에 미치는 영향을 조사하여 다음과 같은 결론을 얻었다.
이후 芍藥추출물을 처치하고 1시간 후, t-BHP를 12시간 처치하여 세포생존율을 측정하였다. 각 well에 MTT (0.5µg/ml, 4h)를 처치한 후, 4시간 배양하고, 배지를 조심스럽게 제거한 후, 생성된 formazan crystal을 DMSO (dimethyl sulfoxide)를 가하여 녹인 후, 570nm에서 (Titertek Multiskan Automatic ELISA multimode reader [Model Infinite 200 PRO], Männedorf, Switzerland) 흡광도를 측정하였다. 세포 생존율은 control cell에 대한 백분율로 나타내었다.
잘 알려져 있다. 그러므로 다음으로는 PRE의 항산화 작용에 대한 실험을 진행하였다. HepG2 cell에 100µM의 t-BHP를 12시간 처리하였을 경우, 세포 내 H₂O₂ 양이 유의적으로 증가하는 것을 관찰하였다(Fig.
3mg/ml 농도 이하에서 세포 독성을 나타내지 않았다 (data not shown). 그러므로 본 실험에서는 PRE 0.01, 0.03, 0.10mg/ml의 농도로 MTT 실험을 진행하였다. 그 결과, t-BHP에 의해 감소한 세포 생존율은 PRE 농도 의존적으로 증가하는 경향을 나타내었으며, 0.
핵으로 이동한 Nrf2는 항산화 2상대사효소의 전사에 관여하는 antioxidant response element (ARE) 에 결합하여 phase II enzyme의 전사적 발현을 유도한다. 그러므로, 본 실험에서는 먼저, Nrf2의 핵내발현을 살펴보았다.
사염화탄소(CCl₄)는 간 조직의 산화적 스트레스를 유발하여, 간세포 손상, 간 조직 괴사를 동반하는 염증성 간 질환을 유도한다²⁷⁾. 그러므로, 본 연구에서도 mouse를 정상군, CCl₄ 투여군, CCl₄+PRE 30mg/kg 투여군, CCl₄+PRE 100 mg/kg투여군으로 나누어서 실험을 진행하였다. 예상된바와 같이, CCl₄는 간 손상 혈액 지표인 ALT, AST의 수치를 유의적으로 증가시켰다(Fig.
단백질의 발현을 관찰하기 위하여, HepG2세포를 lysis buffer를 사용하여 lysate를 획득한 후, 15, 000×g에서 30 분간 원심분리하여 찌꺼기를 제거하였다. 정량화된 lysate 을 동일하게 SDS-PAGE로 분리시킨 후, amido black 염색으로 최종 보정하였다.
약물을 처치한 후, 세포를 용해시키고 루미노스캔 (Luminoscan) 을 사용하여 활성도를 측정하였다. 대조군을 기준으로 활성도 값을 비교하여 상대적인 값을 사용하였다.
이 membrane에 각각의 항체를 결합시키고, 비특이적 결합을 제거하기 위하여 1시간 blocking한 후, ECL^® chemiluminescence detection kit (Amersham Biosciences, Buckinghamshire, UK)로 각 protein band를 발색하였다. 발색 후 각 단백질의 발현량을 평가하기 위하여 Image analyzing system (Ultra-Vilolet Products Lts., CA, USA)으로 density를 측정 및 비교하였다.
Mitochondrial permeability transition pore (mPTP) 의 개방은 미토콘드리아 ROS에 의한 막 단백질의 산화와 관련되며, 미토콘드리아의 산화적 스트레스 및 세포 독성을 유발한다³⁹⁾. 본 실험에서는 t-BHP를 처리한 HepG2 세포에서 FACS 분석법을 통해 MMP의 변화를 측정하였고, RN₁ fraction (미토콘드리아 손상과 기능장애를 나타내는 세포의 숫자)의 증가를 통하여 PRE의 미토콘드리아 보호 효과를 확인하였다.
본 실험에서는 미토콘드리아 손상을 알아보기 위하여, mitochondrial membrane potential MMP) 를를 이용하였고, MMP를 측정하기 위하여 막 삼투 양이온 형광 dye인 Rh123 으로 staining한 cell을 FACS를 이용하여 측정하였다. t-BHP를 처리하였을 때, Rh123의 staining 정도가 떨어지는데 (MMP가 감소), 이것은 미토콘드리아의 손상과 기능장애가 증가했다는 것을 보여준다(Fig.
핵으로 이동한 Nrf2는 항산화 2상 대사 효소에 존재하는 antioxidant response element (ARE) 에결합하여 phase II enzyme의 전사적 발현을 유도한다⁶⁾. 본연구에서 PRE 처리에 의한 핵 내 Nrf2 단백질 발현의 증가 및 인산화 증가를 통하여 Nrf2의 활성화를 관찰하였고, ARE reporter gene assay를 통하여, Nrf2 전사적 활성을 검증하였다. 또한 Nrf2의 target gene인 GCLC, NQO₁의 발현증가를 통하여 Nrf2의 활성화가 실지로 세포보호에 기여하는 것을 확인할 수 있었다.
실험은 아무런 처치를 하지 않은 군을 Control군으로 하고 간독성을 유발하기 위하여 CCl₄ 0.5ml/kg을 처치하여 간독성을 유발하였다. CCl₄ 처치 전 3일 동안 PRE를 30, 100mg/kg 로 투여하고 CCl₄를 처치한 군을 각각 PRE 30, PRE 100군으로 하였다.
간세 포주를 (7×10⁵cells/well)6-well에 배양하고 12시간 serum을 고갈하고 난 후 ARE luciferase construct를 주입한 세포를 Lipofectamine과 함께 3시간 동안 형질 도입시켰다. 약물을 처치한 후, 세포를 용해시키고 루미노스캔 (Luminoscan) 을 사용하여 활성도를 측정하였다. 대조군을 기준으로 활성도 값을 비교하여 상대적인 값을 사용하였다.
05µg/ml로 1시간 염색한 후, trypsin을 처치하여 tube에 모은 후, 1% FBS를 함유하는 PBS로 세척하였고, 이들 세포들을 FACS로 분석하였다. 이때 Rh123의 low density를 나타내는 군을 RN₁ fraction으로 명명하여, 이를 비교하였다.
배지로 24시간 배양하였다. 이후 芍藥추출물을 처치하고 1시간 후, t-BHP를 12시간 처치하여 세포생존율을 측정하였다. 각 well에 MTT (0.
원심분리하여 찌꺼기를 제거하였다. 정량화된 lysate 을 동일하게 SDS-PAGE로 분리시킨 후, amido black 염색으로 최종 보정하였다. 보정 후 loading 한 후, 단백질을 nitrocellulose membrane으로 transfer하였다.
3, 000×g, 4℃에서 10 분간 원심분리하여 상등액의 혈청을 얻었다. 혈청 중 alanine aminotransferase (ALT), aspartate aminotransferase (AST)는 Automated blood chemistry analyzer (Photometer 5010, Robert Riele GmbH & Co KG, Berlin, Germany)를 사용하여 분석하였다.

대상 데이터

Dulbecco's modified Eagle's medium (DMEM)과 fetal bovine serum (FBS)는 BioWhittaker사 (Walkersville, MD, USA)와 Life Technologies (Gaithersburg, MD, USA)로부터 구입하였고, Penicillin 및 streptomycin 은 Gibco/BRL (Eggenstein, Germany)로부터 구입하였다. 2'7'-dichlorofluorescein diacetate (DCFH-DA)와 3-(4, 5 -dimethylthiazol-2-yl)-2, 5-diphenyltetrazoleum (MTT) 및 기타 시약들은 Sigma (St. Louis, MO, USA)에서 구입하였다.
또한, 芍藥으로부터 분리된 6-O-β -D-glucopyranosylbiflorin은 C₅₇BL/6 mouse로부터 얻은 osteoblast-like cell인 MC₃T3-E1의 alkaline phosphatase 의 activity를 증가시켰다³³⁾. 본 실험에서는 芍藥의 추출물 (PRE)의 산화 스트레스에 대한 간 보호 효과를 관찰하기 위하여, 1) t-BHP를 사용하여 산화적 스트레스를 유발한 인체 유래 간세포 HepG2 세포 모델과 2) CCl₄로 유도한 간손상 동물모델을 활용하였다.
Anti-Nrf2 항체와 horseradish peroxidase-conjugated rabbit anti-goat는 Santa Cruz Biotechnology社 (Santa Crus, CA, USA)에서 구입하였고, Anti-NQO₁, anti-Lamin A/C와 horseradish peroxidase-conjugated anti-mouse, anti-rabbit IgGs는 Cell Signaling社 (Beverely, MA, USA) 로부터 구입하였으며, Anti-GCLC는 Abcam社 (Cambridge, MA, USA)에서 구입하였다. Dulbecco's modified Eagle's medium (DMEM)과 fetal bovine serum (FBS)는 BioWhittaker사 (Walkersville, MD, USA)와 Life Technologies (Gaithersburg, MD, USA)로부터 구입하였고, Penicillin 및 streptomycin 은 Gibco/BRL (Eggenstein, Germany)로부터 구입하였다.
구입하였다. Dulbecco's modified Eagle's medium (DMEM)과 fetal bovine serum (FBS)는 BioWhittaker사 (Walkersville, MD, USA)와 Life Technologies (Gaithersburg, MD, USA)로부터 구입하였고, Penicillin 및 streptomycin 은 Gibco/BRL (Eggenstein, Germany)로부터 구입하였다. 2'7'-dichlorofluorescein diacetate (DCFH-DA)와 3-(4, 5 -dimethylthiazol-2-yl)-2, 5-diphenyltetrazoleum (MTT) 및 기타 시약들은 Sigma (St.
芍藥은 대원약업사 (Daegu, Korea)에서 구입하였으며, 芍藥 300g을 2L의 물로 3시간 전 탕하고, 거즈로 1차 여과한 후, 0.2µm 필터 (Nalgene, New York, NY, USA)로 여과하였다. 여과한 여액을 농축하고, 동결건조하여 19.
HepG2 cell에서 芍藥추출물의 세포보호 효과를 평가하기 위하여, FBS가 제거된 배지에서 24시간 배양한 후에, 芍藥추출물을 처치하고 1시간 후, t-BHP를 12시간 처치하였다. 芍藥추출물은 DMEM에 녹여 사용하였다.
환경에서 배양하였다. 모든 세포실험에서는 세포성장의 confluency가 80-90%가 유지되는 경우에 실험하였고, 20회 이하의 계대배양세포만 사용하였다. HepG2 cell에서 芍藥추출물의 세포보호 효과를 평가하기 위하여, FBS가 제거된 배지에서 24시간 배양한 후에, 芍藥추출물을 처치하고 1시간 후, t-BHP를 12시간 처치하였다.
본 연구에 사용된 HepG2 cell (human hepatocyte-derived cell line)은 American Type Culture Collection (Rockville, MD, USA)로부터 구입하였으며, 세포배양은 10% fetal bovine serum (FBS) 과 50U/ml penicillin, 50mg/ml streptomycin 을 함유하는 Dulbecco's modified Eagle's medium (DMEM) 를 사용하여 37℃, 5%의 CO₂환경에서 배양하였다. 모든 세포실험에서는 세포성장의 confluency가 80-90%가 유지되는 경우에 실험하였고, 20회 이하의 계대배양세포만 사용하였다.
실험동물은 6주령의 Sprague-Dawley계 흰쥐 (140-160g) 수컷 32마리를 Samtaco Bio Korea (오산, 한국)로부터 공급받아 1주일 동안 실험실 환경에 적응시킨 후 실험에 사용하였으며, 사육실 환경은 온도 20-23℃, 습도 50%, 12시간 간격으로 light/dark cycle을 유지하고, 사료 (Nestle Purina Petcare Korea, Seoul, Korea)와 음용수는 자유롭게 섭취하도록 하였다.
실험동물은 ethyl ether로 마취한 후, 복대 정맥으로부터 혈액을 채취하였다. 3, 000×g, 4℃에서 10 분간 원심분리하여 상등액의 혈청을 얻었다.

데이터처리

실험 결과는 mean±S.D.로 나타내었으며, 처치군 간의 유의성은 one way analysis of varience (ANOVA)로 검정한 후 Tukey test로 검정하였다. 통계적 유의성 검정은 p< 0.

이론/모형

10 mg/ml of PRE for 1h prior to the addition of t-BHP (100 µM), and the cells were further incubated for 12 h. The effect of PRE on cell viability was assessed using MTT assays. Data represent the mean±S.
리포터 유전자 분석은 dual-luciferase reporter assay system (Promega, Madison, WI)을 사용하였다. 간세 포주를 (7×10⁵cells/well)6-well에 배양하고 12시간 serum을 고갈하고 난 후 ARE luciferase construct를 주입한 세포를 Lipofectamine과 함께 3시간 동안 형질 도입시켰다.
의 량을 상대적으로 평가한다. 본 연구에서는 芍藥추출물과 t-BHP 처치 후, 10µM DCFH-DA로 37℃ 에서 1시간 염색한 후, enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) 방법으로 측정하였다. DCF의 형광강도는 excitation (485nm)와 emission (530nm)로 Titertek Multiskan Automatic ELISA multimode reader을 사용하여 측정하였고, 대조군을 기준으로 하여 상대적인 값을 평가하였다.
핵 분획은 이전에 보고된 Kay 등의 방법²⁶⁾에 따라 준비하였다. 처치된 1×10⁷의 HepG2 cell을 ice-cold PBS로 2차례 세척한 후, PBS 1ml을 가하여, 세포들을 microtubes에 수거하였다.

성능/효과

1. PRE(0.1mg/ml)는 산화적 스트레스 유발물질인 t-BHP 에 의한 cell death를 유의하게 억제하였다.
2. PRE는 t-BHP로 증가된 세포 내 ROS 생성을 유의적으로 억제하여, 항산화 효과를 나타낸다.
3. PRE는 t-BHP로 유발된 미토콘드리아 기능손상으로부터 세포를 보호하여 미토콘드리아 보호 효과를 가진다.
4. PRE는 시간 의존적으로 Nrf2의 핵 내 증가를 유도하고, Nrf2의 인산화를 증가시키며, Nrf2 target 항산화 효소의 발현을 유발하였다.
5. PRE는 사염화탄소로 유발된 간 손상 동물모델에서 간 조직 손상 지표인 ALT와 AST의 증가를 억제하는 효과를 가진다.
다음으로 ARE-luciferase reporter gene assay를 통하여 PRE의 ARE reporter gene 활성화에 미치는 효과를 살펴보았다. PRE를 12시간 동안 HepG2 세포에 처리한 결과, ARE의 활성이 유의적으로 증가하는 것을 관찰하였다(Fig. 4C). 이와 같은 결과는 PRE가 항산화 전사인자인 Nrf2를 활성화시킨다는 것을 증명해 주고 있다.
10mg/ml의 농도로 MTT 실험을 진행하였다. 그 결과, t-BHP에 의해 감소한 세포 생존율은 PRE 농도 의존적으로 증가하는 경향을 나타내었으며, 0.10mg/ml의 농도에서 가장 효과적인 세포 보호 능을 나타내었다(Fig. 1). 그래서 다음 실험들은 PRE 0.
이러한 CCl₄에 의한 산화적 간손상 모델은 항산화 물질의 효능을 스크리닝하기위한 좋은 모델로서 인정되고 있으며, 실제로 다양한 물질들이 CCl₄ 동물 모델을 활용하여 연구되고 있다²⁷⁾. 그러므로 본 연구에서도 芍藥의 항산화 효능을 동물 수준에서 증명하기 위하여 CCl₄를 single injection 하는 acute liver toxivcity모델을 활용하였으며, 이전의 연구 결과와 마찬가지로 간손상 혈액 지표인 ALT, AST의 유의적인 증가를 관찰할 수 있었고, PRE는이러한 간손상을 예방하였다.
본연구에서 PRE 처리에 의한 핵 내 Nrf2 단백질 발현의 증가 및 인산화 증가를 통하여 Nrf2의 활성화를 관찰하였고, ARE reporter gene assay를 통하여, Nrf2 전사적 활성을 검증하였다. 또한 Nrf2의 target gene인 GCLC, NQO₁의 발현증가를 통하여 Nrf2의 활성화가 실지로 세포보호에 기여하는 것을 확인할 수 있었다. 그러므로, PRE의 항산화 효과는 Nrf2 의존적인 항산화 효소의 발현과 관련지어 설명할 수 있다.
또한 t-BHP는 간세포에서 GOT, LDH의 유리, malonedialdehyde (MDA) 형성을 초래한다고 보고되었다. 본 실험에서도 t-BHP는 HepG2 간세포에서 세포 자멸사를 유발하고, 세포 내 H₂O₂의 생성을 유발하였으며, 미토콘드리아의 손상을 일으키는 것으로 나타났는데, 이러한 결과는 앞서 언급한 이전연구 결과들과 일치하는 것이다. CCl₄는 잘 알려진 간세포를 손상시키는 물질인데, 그 작용기전으로서 산화적 스트레스가 많이 보고되고 있다²⁷⁾.
3A). 여기에서 보여지는 RN₁ fraction의 세포 숫자가 손상받은 미토콘드리아와 기능장애를 가진 미토콘드리아를 나타내는데, t-BHP의 처치는 RN₁ fraction 숫자의 증가를 유도하였고, PRE는 이를 억제하였다. 이러한 결과는 PRE의 세포와 미토콘드리아의 보호 효과를 증명하는 것이다(Fig.
1 mg/ml을 전처리 하였을 경우, 증가된 H₂O₂ 양이 유의 적으로 감소하였다. 이러한 결과는 PRE가 t-BHP에 의해 유도된 ROS의 생성을 억제하여 HepG2 간세포의 자멸사를 억제한다는 것을 증명해 주고 있다.
5). 이러한 결과는 PRE의 항산화 효과가 Nrf2의존적인 항산화 효소의 발현을 통하여 나타난다는 것을 보여주고 있다.

후속연구

이러한 연구 결과는 나아가 신약개발 및 건강기능식품으로의 활용도가 있을 것으로 기대한다.
일련의 실험 결과로 PRE는 간에서 산화적 스트레스를 억제하고, 미토콘드리아를 보호하는 것으로 확인되었으며, 향후, 이러한 항산화에 대한 기전 연구가 지속적으로 필요할 것으로 판단된다. 이러한 연구 결과는 나아가 신약개발 및 건강기능식품으로의 활용도가 있을 것으로 기대한다.

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표제어: PCR

동의어: Packet Collision Rate

용어 설명 출처 목록 (6)

용어 설명: PCR은 세균 특이성이 있는 primer를 이용하여 적은 수의 세균이 있을지라도 쉽게 검출할 수 있는 유용한 방법이며, 이를 이용하여 구강 내 치면세균막이나 타액에서 직접 세균을 검출할 수 있게 되었다[8].

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