2016년도 제주지역 양식 넙치(Paralichthys olivaceus)에서 분리된 어병세균의 tetracycline 내성유전자 분포 Distribution of Tetracycline Resistance Genes in Pathogenic Bacteria Isolated from Cultured Olive Flounder (Paralichthys olivaceus) in Jeju in 2016원문보기
Aquaculture practices to ensure greater production, such as high density breeding and excessive feeding, are become stressors that raise the prevalence of diseases. Accordingly, increasingly large volumes of antibiotics are used more frequently each year. Long term use antibiotics can generate resis...
Aquaculture practices to ensure greater production, such as high density breeding and excessive feeding, are become stressors that raise the prevalence of diseases. Accordingly, increasingly large volumes of antibiotics are used more frequently each year. Long term use antibiotics can generate resistant bacteria, which interrupt treatments and cause a potential transfer to human bodies. Thus, antibiotic resistance is of importance in public health. Tetracycline (Tc) is one of the typical medicines used in the aquaculture drugs, which has a wide range of application including gram-positive and gram-negative bacteria. In the examination of 153 strains isolated from olive flounder (Paralichthys olivaceus) farms located in Jeju in 2016, it turned out that a total of 84 strains were resistant to Tc or oxytetracycline (OTC). The extent to which the strains are resistant to Tc and OTC was confirmed through MIC test, mostly within the range of 25 to $100{\mu}g/m{\ell}$. Twelve different types of tet genes were detected using single and multiplex PCR in the 84 Tc-resistant strains. The PCR was used to find tet(K), tet(M), tet(O), and tet(S), which are known to exist primarily in gram positive strains. According to the results, - tet(S) is the most dominant gene in 49 strains of Streptococcus parauberis, accounting for 63.2%. And there were two strains that have two different types of resistant genes. The multiplex PCR was used to detect tet(A), tet(B), tet(C), tet(D), tet(E), and tet(G), which are commonly found in gram-negative strains. Each of tet(B), tet(D), and tet(B)&(M) was found in a strain presumed to be Vibrio sp., and only tet(D) was found in 10 Edwardsiella tarda strains.
Aquaculture practices to ensure greater production, such as high density breeding and excessive feeding, are become stressors that raise the prevalence of diseases. Accordingly, increasingly large volumes of antibiotics are used more frequently each year. Long term use antibiotics can generate resistant bacteria, which interrupt treatments and cause a potential transfer to human bodies. Thus, antibiotic resistance is of importance in public health. Tetracycline (Tc) is one of the typical medicines used in the aquaculture drugs, which has a wide range of application including gram-positive and gram-negative bacteria. In the examination of 153 strains isolated from olive flounder (Paralichthys olivaceus) farms located in Jeju in 2016, it turned out that a total of 84 strains were resistant to Tc or oxytetracycline (OTC). The extent to which the strains are resistant to Tc and OTC was confirmed through MIC test, mostly within the range of 25 to $100{\mu}g/m{\ell}$. Twelve different types of tet genes were detected using single and multiplex PCR in the 84 Tc-resistant strains. The PCR was used to find tet(K), tet(M), tet(O), and tet(S), which are known to exist primarily in gram positive strains. According to the results, - tet(S) is the most dominant gene in 49 strains of Streptococcus parauberis, accounting for 63.2%. And there were two strains that have two different types of resistant genes. The multiplex PCR was used to detect tet(A), tet(B), tet(C), tet(D), tet(E), and tet(G), which are commonly found in gram-negative strains. Each of tet(B), tet(D), and tet(B)&(M) was found in a strain presumed to be Vibrio sp., and only tet(D) was found in 10 Edwardsiella tarda strains.
* AI 자동 식별 결과로 적합하지 않은 문장이 있을 수 있으니, 이용에 유의하시기 바랍니다.
문제 정의
따라서 본 연구에서는 제주도 양식 넙치에서 분리한 세균들을 대상으로 항생제 내성 현황과 테트라사이클린의 내성 정도 및 PCR을 통한 Tc 내성 유전자의 분포 및 종류를 살펴보고자 하였다.
제안 방법
2016년 제주지역 양식장의 병어로부터 분리된 총 153균주에서 tetracycline과 oxytetracycline에 대해 내성을 보이는 총 84균주의 total nucleic acid를 사용하여 Tc 내성 유전자의 유무와 그 종류 및 분포를 조사하였다. 대부분 그람음성세균에서 나타난다고 보고된 tet(A), tet(B), tet(C), tet(D), tet(E) 및 tet(G) 6종류의 tet gene을 검출하기 위한 multiplex PCR 결과, E.
Multiplex PCR 분석을 위하여, 0.2 ㎖ microtube에 1 µM 각 primer, 2.5 µM의 각 dNTP, 10x G-Taq Buffer, 2.5 U G-Taq DNA polymerase (Gene Pro Themal Cycler Cosmo, Korea) 및 세균의 template DNA를 첨가한 후, distilled water로 최종 volume이 20 ㎕가 되도록 하였고, 이전에 보고된 각각의 Tc 내성 유전자에 대해 특이적으로 반응하는 단일 forward primer와 6개의 reverse primers를 넣어 실시하였다.
PCR 분석을 위하여, 0.2 ㎖ microtube에 1 µM의 각 primer, 2.5 µM의 각 dNTP, 10x G-Taq Buffer, 2.5 U G-Taq DNA polymerase (Gene Pro Themal Cycler Cosmo, Korea) 및 template DNA를 첨가한 후 distilled water로 PCR 혼합물의 최종 volume이 20 ㎕가 되도록 하였다.
MIC값 측정을 위하여, 96 well plate에 mueller hinton broth (MHB, Difco, USA) 160 ㎕, 단계별로 희석한 항생제 20 ㎕, 10⁵~10⁶으로 희석시킨 균 배양액 20 ㎕를 넣고, positive control에는 MHB 180 ㎕과 균 배양액 20 ㎕를 넣었으며, negative control에는 MHB 200 ㎕만 넣었다. Plate를 27℃에서 18~24시간 배양한 후, 균의 증식여부에 따른 액체배지의 혼탁도를 육안으로 확인하여 균이 자라지 않은 최소농도를 MIC값으로 결정하였다.
균주의 구분을 위해 비브리오 선택배지인 TCBS 평판배지 상에서 초록색 또는 노란색 집락의 집락을 형성한 것으로 규정하였으며, Edwardsiella tarda 균은 선택배지인 SS 배지에서 검은색 집락을 형성하는 것으로 규정하였다.
먼저 DNA의 추출을 위하여, 균을 TSB에 접종하고 27℃에서 18~24시간 배양한 후 배양액 1.5 ㎖를 1.5 ㎖ microtube에 넣고, 10,000 rpm에서 1분간 원심분리하여 pellet을 수집하였다.
본 연구에서는 12종류의 Tc 내성 유전자에 대하여 PCR 방법으로 분석하였으며, 사용된 primer sets는 [Table 2]에 나타내었다.
2016년 제주지역 넙치 양식장에서 질병에 감염된 것으로 추정되는 넙치로부터 총 153 균주를 분리하여 실험에 사용하였다. 분리균은 TSA와 BHIA 배지상에서 증식되었으며, 선택배지인 TCBS, SS, GSP, Blood agar를 사용하여 분류하였다. Vibrioceae는 TCBS 배지상에서 초록색 혹은 노란색 집락을 형성하는 것으로 규정하였으며, E.
상층액을 100% Isopropanol 300 ㎕가 들어있는 새 microtube에 넣고 50회 inverting하여 13,000 rpm에서 1분간 원심분리하였다. 상층액을 제거한 후 80% ethanol로 2번 세척하고, 15분간 상온에서 건조시킨 후, DNA Hydration Solution 50 ㎕를 넣고 5초간 vortex하여 DNA를 추출하였다. 분리된 DNA는 실험에 사용하기 전까지 –20℃에서 보관하였다.
또한, Streptococcus sp.에 대한 세부적인 동정을 위하여, 특이적인 primer sets를 사용하여 PCR을 실시하였다[Table 1].
양식현장에서 장기간 tetracycline계 항생제의 사용으로 내성균이 출현하였으며, 그로 인한 감염증 치료의 어려움 및 적절한 약제 선택의 부재 등의 문제가 발생하였다. 제주도 내 양식장에서 분리한 153 균주 중 tetracycline 내성 균주는 84 균주였으며, MIC test를 통해 내성수준과 균주들이 지니고 있는 내성 유전자의 분포 및 종류를 PCR 및 multiplex PCR을 통해 살펴보았다.
증폭산물은 1x TAE buffer (40 mM Tris-acetate, 1 mM EDTA)를 전기영동을 위한 완충액으로 하여, 0.5 ㎍/㎖ ethidium bromide가 첨가된 1% agarose gel 상에서 전기영동 후, UV 검출기에서 band의 크기를 확인하여 Tc 내성 유전자의 종류를 확인하였다.
대상 데이터
2016년 제주도 내 넙치 양식장에서 질병에 감염된 것으로 추정되는 넙치로부터 균을 분리하여, 실험균주로 사용하였다. 분리균은 tryptic soy agar (TSA, Difco, USA) 또는 brain heart infusion agar (BHIA, Difco, USA) 배지상에서 증식되었으며, 균의 동정을 위해 선택배지인 thiosulfate citrate bile salts sucrose (TCBS) agar (Difco, USA), Salmonella Shigella (SS) agar (MB cell, Korea), glutamate starch phenol-red agar (GSP, Sigma-Aldrich, Korea), Blood agar 배지에 시료의 내부 장기를 도말하고, 27℃에서 18~24시간 배양하였다.
2016년 제주지역 넙치 양식장에서 질병에 감염된 것으로 추정되는 넙치로부터 총 153 균주를 분리하여 실험에 사용하였다. 분리균은 TSA와 BHIA 배지상에서 증식되었으며, 선택배지인 TCBS, SS, GSP, Blood agar를 사용하여 분류하였다.
PCR을 위한 template DNA는 Higene™ Genomic DNA prep kit (BIOFACT, Korea)를 사용하였다.
로 추정되는 20 균주, E. tarda 16 균주, 미 동정된 30 균주를 분리하여 실험에 사용하였다[Fig. 1 & 2].
실험에 사용된 153 균주 중 대부분의 균주들이 2종류 이상의 항생제에 대해 내성을 가지는 다제 내성균이었다. S.
실험에 사용된 항생제디스크는 amoxicillin, ampicillin, amoxicillin/clavulanic acid, ciprofloxacin, doxycycline, norfloxacin, ofloxacin, gentamycin, minocycline, nalidixic acid, oxolinic acid, oxytetracycline, tetracycline, chloramphenicol, erythoromycin, kanamycin, neomycin, penicilline, streptomycin으로 총 19종을 대상으로 실험을 실시하였으며, 모두 Liofilchem®로부터 구입하여 사용하였다.
이론/모형
균주들의 tetracycline과 oxytetracycline에 대한 내성 정도는 broth dilution 방법을 적용하여 MIC값으로 나타냈다. MIC값 측정을 위하여, 96 well plate에 mueller hinton broth (MHB, Difco, USA) 160 ㎕, 단계별로 희석한 항생제 20 ㎕, 10⁵~10⁶으로 희석시킨 균 배양액 20 ㎕를 넣고, positive control에는 MHB 180 ㎕과 균 배양액 20 ㎕를 넣었으며, negative control에는 MHB 200 ㎕만 넣었다.
균주의 구분을 위해 비브리오 선택배지인 TCBS 평판배지 상에서 초록색 또는 노란색 집락의 집락을 형성한 것으로 규정하였으며, Edwardsiella tarda 균은 선택배지인 SS 배지에서 검은색 집락을 형성하는 것으로 규정하였다. 또한, 균주의 세부적인 종 동정은 PCR 방법을 사용하여 확인하였다. 종 동정에 사용한 PCR primer sets는 [Table 1]에 나타내었다.
성능/효과
20 균주, E. tarda 16 균주, 미 동정 30 균주 총 153 균주를 분리하였다.
Vibrio sp. 3 균주 중 1 균주는 tetracycline과 oxytetracycline에 대해 100 ㎍/㎖ 이상의 MIC값을 나타내었고, 2 균주는 각각의 항생제에 대해 25 ㎍/㎖, 50 ㎍/㎖의 값을 나타내었다.
3 균주, E. tarda 11 균주, 미 동정 13 균주로, Tc 내성 균주들과 감수성 있는 균주들의 내성수준은 MIC값으로 확인하였다.
3]에 나타내었다. S. parauberis 86 균주는 nalidixic acid에 88.4%, oxolinic acid에 82.6%, tetracycline과 oxytetracycline에 각각 55.8%로 퀴놀론계 항생제와 테트라사이클린계 항생제에 대해 높은 내성률을 보였으며, erythromycin, streptomycin에는 30.2%와 44.2%의 내성률을 나타내었다. amoxicillin, ampicillin, amoxicillin/clavulanic acid, ciprofloxacin, norfloxacin, ofloxacin, minocycline, chloramphenicol, kanamycin 등의 항생제에 대해서는 10% 이하의 낮은 내성률을 보였으며, 86 균주의 95.
S. parauberis 균주는 minocycline과 doxycycline에 대해 tetracycline보다 낮은 내성률을 보였는데, 이는 minocycline이나 doxycycline이 tetracycline에 비해 사용된 시기가 짧고, 누적 사용량이 적어 낮은 내성 비율이 나타난 것으로 생각된다.
본 연구에서 tet(M)을 가지는 내성균의 비율이 낮은 이유는 제주도에서 분리된 균주의 지역적 특성으로 분류할 지는 더 지속적인 연구가 필요할 것으로 여겨진다. S. parauberis 내 tet gene을 지니는 균주들의 tetracycline이나 oxytetracycline에 대한 MIC값은 대부분 25~100 ㎍/㎖ 이상의 범위에 속하였으며, tet gene이 확인되지 않은 균주들은 본 연구에서의 primers가 적용되지 않는 다른 내성 유전자를 지닐 가능성이 있는 것으로 추정하였다.
amoxicillin, ampicillin, amoxicillin/clavulanic acid, ciprofloxacin, norfloxacin, ofloxacin, minocycline, chloramphenicol, kanamycin 등의 항생제에 대해서는 10% 이하의 낮은 내성률을 보였으며, 86 균주의 95.3%에 해당하는 82균주가 2종류 이상의 항생제에 대해 내성을 가지는 다제 내성균임을 확인하였다.
5 ㎍/㎖의 범위에 속하였다. oxytetracycline에 대해서는 13 균주 모두 25~100 ㎍/㎖의 MIC값을 나타내었으며, tetracycline보다 좁은 범위의 내성수준을 확인할 수 있었다.
tarda 16 균주 모두 2종류 이상의 항생제에 내성을 나타내는 다제 내성균이었고, 실험에 사용된 모든 균주들은 gentamycin과 neomycin에 대해 감수성이 있었다.
tet gene을 가지는 E. tarda 균주들의 MIC값을 확인해보았더니, 100 ㎍/㎖ 이상의 MIC값을 가진 E. tarda 10 균주는 tet(D)를 가지고 있었으나 tetracycline과 oxytetracycline에 대해 각각 25 ㎍/㎖, 50 ㎍/㎖의 MIC값을 가진 1 균주에서는 tet gene을 확인할 수 없었다.
Streptococcus sp. 균주의 동정 결과, S. parauberis 86 균주, S. iniae 1균주가 분리되었으며, Lactococcus garvieae는 검출되지 않았다. 그리고 Vibrio sp.
그 결과, tetracycline과 oxytetracycline에 대해 감수성 있는 실험균주들의 MIC값은 0.78~1.56 ㎍/㎖의 범위의 값을 나타내었으며(data not shown), 내성을 보이는 S. parauberis 57 균주 중 7 균주가 tetracycline에 대해 100 ㎍/㎖ 이상, 29 균주가 50 ㎍/㎖, 20균주는 25 ㎍/㎖ 그리고 1균주가 6.25 ㎍/㎖의 MIC값을 나타내었으며, oxytetracycline에 대해서는 6 균주가 100 ㎍/㎖이상, 29 균주는 50 ㎍/㎖, 18 균주에서 25 ㎍/㎖, 4 균주가 12.5 ㎍/㎖의 MIC값을 나타내었고, 두 항생제에 대한 S. parauberis 균주의 MIC값은 대부분 25~100 ㎍/㎖의 범위에 속하였다[Table 3].
그람양성균에서 주로 존재한다고 알려져 있는 tet(K), tet(L), tet(M), tet(O), tet(Q), tet(S)를 검출하기 위한 PCR 결과, S. parauberis에서는 tet(S)가 63.2%로 가장 많이 존재하였고, tet(M)&(S), tet(K)&(S) 같이 2종류의 내성 유전자를 가지는 균주는 각각 1균주였으며, 나머지 tet(L), tet(O), tet(Q)는 검출되지 않았다.
그리고 실험에 사용된 모든 균주들은 chloramphenicol, ciprofloxacin, norfloxacin, ofloxacin 등의 항생제에 대해 감수성이 있거나 매우 낮은 내성률을 보였는데, 이와 같은 결과는 chloramphenicol, fluoroquinolone 계열의 항생제가 동물에 투여되는 것이 금지되면서 항생제의 사용량이 감소하여 균주들의 내성빈도 역시 낮아진 것으로 보인다.
Vibrio sp. 내 tet gene을 지니는 균주들의 tetracycline과 oxytetracycline에 대한 내성 정도를 확인한 결과, 2종류의 내성 유전자를 지니는 균주에서의 MIC값은 100 ㎍/㎖ 이상이었으며, tet(B)와 tet(D)를 지니는 균주들의 MIC값은 25~50 ㎍/㎖이었다.
대부분 그람음성세균에서 나타난다고 보고된 tet(A), tet(B), tet(C), tet(D), tet(E) 및 tet(G) 6종류의 tet gene을 검출하기 위한 multiplex PCR 결과, E. tarda 10균주에서 500 bp에 근접한 band를 확인할 수 있었다[Fig. 4] 즉, 6종류의 tet gene 중 tet(D)가 많이 존재하였으며, tet(A), tet(B), tet(C), tet(E), tet(G)는 검출되지 않았다[Table 4].
Vibrio sp.로 추정되는 20 균주에서의 내성률은 amoxicillin 65%, ampicillin 70%, penicillin 65%로 페니실린계 항생제에 대해 50% 이상의 내성률을 나타내었고, 다른 계열 항생제에 대한 내성률은 5~20%였으며, ciprofloxacin, norfloxacin, minocycline, gentamycin, neomycin의 항생제에는 감수성이 있었다. 또한, 20 균주 중 90%가 페니실린계 항생제를 포함해 다른 항생제에 대해 내성을 가지는 다제 내성균이었다.
미 동정 균주에서는 tet(S)가 21.4%로 나타났으며, 나머지 균주들은 본 연구에서 사용한 primer sets로는 확인할 수 없었다.
분리된 균주들의 ampicillin, amoxicillin, ciprofloxacin, gentamycin, nalidixic acid, oxolinic acid, tetracycline, oxytetracycline, chloramphenicol, erythromycin, kanamycin, streptomycin, penicillin 등을 포함한 19종의 항생제에 대한 약제감수성 결과, S. parauberis는 nalidixic acid, tetracycline 등의 항생제에 대해 내성률이 높았으며, 이는 S.
와 유사하게 penicillin, amoxicillin, ampicillin 등 페니실린계 항생제에서 68.8~100%였으며, erythromycin, tetracycline, oxytetracycline에 대해서도 50% 이상의 높은 내성 비율을 확인할 수 있었다.
의 다제 내성률이 57.9%라 보고하였으나, 본 연구에서는 70%로 다제 내성균의 비율이 증가하는 것을 확인할 수 있었다.
후속연구
9%라 보고하였으나, 본 연구에서는 70%로 다제 내성균의 비율이 증가하는 것을 확인할 수 있었다. Tetracycline계, penicillin계, quinolone계 항생제에 대한 높은 내성률은 이전의 연구들에서 보고된 바가 있으나 제주지역의 항생제 내성 현황 연구는 제대로 이루어지지 않았었으며, 따라서 본 연구가 제주도 내 항생제 내성경향에 대한 기초자료로 활용될 것으로 사료된다.
(2010)이 다양한 Vibrio sp.가 ampicillin에 대해 90%가 넘는 높은 내성률을 보였다는 보고와 일치하였으며, tetracycline에 대한 내성 비율은 종마다 차이가 있는 것으로 보고되어 이후 세부적인 종 동정과 함께 조사가 더 필요할 것으로 여겨진다.
하지만, 실험에 사용된 Vibrio sp. 균주의 수가 이전의 연구에서 사용된 수보다 부족하기 때문에 향후 보다 많은 균주를 채집하여 추가적인 연구가 필요할 것으로 사료된다. Vibrio sp.
tarda 1 균주, 미 동정 10 균주는 tetracycline이나 oxytetracycline에 대해 내성이 있었으나 본 연구에서 사용한 primer sets로는 내성 유전자를 확인할 수 없었으며, 이러한 결과는 본 연구에서 사용하지 않은 tet(I), tet(T) 및 tet(W) 같이 다른 종류의 내성 유전자이거나, 새로운 tet gene의 출현에 의한 결과로 해석할 수 있다. 따라서 이후에는 본 연구에서 사용되지 않은 primer sets를 통해 확인을 하는 등의 추가적인 연구가 필요할 것으로 생각된다.
본 연구에서 tet(M)을 가지는 내성균의 비율이 낮은 이유는 제주도에서 분리된 균주의 지역적 특성으로 분류할 지는 더 지속적인 연구가 필요할 것으로 여겨진다.
질의응답
핵심어
질문
논문에서 추출한 답변
양식 산업에서 항생제의 사용은 어떤 문제를 일으킬 수 있는가?
, 2014). 이러한 항생제의 사용은항생제 내성균 발생 다제 내성균의 출현 약물 , ,잔류에 의한 안전성 및 약물의 유실로 인한 환경오염 등의 문제를 야기할 수 있다 수년간 항생 .제의 오남용으로 인해 발생한 내성균으로 감염 ‧증 치료의 어려움이 있어 최근에는 예방대책으로백신의 개발 및 천연물질을 사용하여 어체 내 생리활성 증가시키는 등의 방법이 나오고 있으나,아직까지 많은 양식현장에서 항생제가 사용되고있다(Kim et al.
우리나라의 어류 양식 산업의 지속적인 성장과 항생제 사용의 관계는 어떠한가?
우리나라의 어류 양식 산업은 년대부터 시 1980작하여 지속적으로 성장해왔으며 제주도 내 넙 ,치 양식은 년 톤으로 우리나라 넙치 2015 27,142생산량의 절반 이상을 차지하고 있는 대표적 양식 대상어종이다(KOSIS, 2016). 지속적인 양식 산업의 성장으로 인해 수산생물의 생산량이 증가하면서 고밀도 사육 등의 이유로 수산생물의 질병발생률도 함께 증가하고 있으며 양식현장에서 ,생산성 향상과 감염증 치료 등의 목적으로 수산용의약품의 사용량 및 사용빈도는 매년 증가하고있다(Kim et al., 2014).
테트라사이클린(Tc)은 무엇인가?
, 2014).테트라사이클린(Tc)은 대표적인 수산용의약품중 하나로 호기성 그람양성 및 그람음성균 , ,Richettsia, Mycoplasma, Chlamydia, 말라리아 등여러 감염증에 작용하는 광범위 항생제로 알려져있다 테트라사이클린 옥시테트라사이클린 클로 . , ,르테트라사이클린 등은 구조적으로 유사하고 약리작용 및 독성이 거의 동일하여 테트라사이클린계 항생제로 통합하여 평가 및 관리되며 테트라,사이클린계열 항생제의 세포벽 합성 억제 작용기작은 세균 ribosome의 30S subunit에 결합하여,acceptor 부위에 aminoacyl tRNA가 mRNA와 결합하는 것을 방해하는 방법으로 단백질 합성을 억제시켜 정균작용을 나타낸다 테트라사이클린에 .
참고문헌 (23)
Chopra, I. and Roberts, M. C.(2001). Tetracycline Antibiotics: Mode of Action, Applications, Molecular Biology, and Epidemiology of Bacterial Resistance. Microbiology and Molecular Biology Reviews 65(2), 232-260.
Heo, J. H..Jung, M. H..Cho, M. H..Kim, G. H..Lee, K. C..Kim, J. H. and Jung, T. S.(2002). The study on fish diseases with reference to bacterial susceptibility to antibiotics in the southern area of Kyeognam. Journal of Veterinary Clinics 19(1), 19-22
Jee, B. Y..Shin, K. W..Lee, D. W..Kim, Y. J. and Lee, M. K.(2014). Monitoring of the mortalities and medications in the inland farms of olive flounder, Paralichthys olivaceus, in South Korea. Journal of Fish Pathology 27(1), 77-83.
Jun, L. J.(2003). Characterization of tet genes in fish pathogenic bacteria from Korea. Master's Thesis, Department of Fish Pathology, Pukyong National University, Busan, South Korea.
Jun, L. J.(2010). Characterization of antibiotic resistant genes carried by fish pathogens in Korea. Ph.D. Thesis, Department of Fish Pathology, Pukyong National University, Busan, South Korea.
Kim, J. H..Kim, S. G..Kim, S. S..Kim, J. H..Park, S. H..Nam, K. H..Kim, H. B.(2013). Analysis of the antibiotic resistance gene in Salmonella Typhimurium isolates from diseased pigs in Gyeongbuk province. Korean Journal of Veterinary Service 36(2), 73-78.
Kim, J. H..Lee, C. H. and Kim, E. H.(2006). Transferable R plasmid of Streptococci isolated from diseased olive flounder (Paralichthys olivaceus) in Jeju. Journal of Fish Pathology 19(3), 267-276.
Kim, J. W..Cho, M. Y..Jee, B. Y..Park, M. A. and Kim, N. Y.(2014). Administration and use of aquaculture drugs in Korea. Journal of Fish Pathology 27(1), 67-75.
Kim, M. S..Cho, J. Y..Seo, J. S..Jung, S. H..Choi, H. S. and Park, M. A.(2012). Distribution of MIC value of antibiotics against Edwardsiella tarda isolated from olive flounder (Paralichthys olivaceus). Journal of Fish Pathology 25(3), 181-188.
Kim, M. S..Seo, J. S..Park, M. A..Cho, J. Y..Hwang, J. Y..Kwon, M. G. and Jung, S. H.(2010). Antimicrobial resistance of Edwardsiella tarda, Vibrio spp., and Streptococcus spp. isolated from olive flounder (Paralichthys olivaceus). Journal of Fish Pathology 23(1), 37-45.
Kim, S. S..Jang, J. W..Song, J. W..Lim, S. J..Jeong, J. B..Lee, S. M..Kim, K. W..Son, M. H. and Lee, K. J.(2009). Effects of dietary supplementation of alga mixtures (Hizikia fusiformis and Ecklonia cava) on innate immunity and disease resistance against Edwardsiella tarda in olive flounder (Paralichthys olivaceus). Korean Journal of Fisheries and Aquatic Science 42(6), 614-620.
Kim, S. Y..Kim, Y. C..Jeong, S. K..Jun, L. J..Jin, J. W. and Jeong, H. D.(2014). Increased resistance to Quinolones in Streptococcus parauberis and development of a rapid assay for detecting mutations in topoisomerase genes. Korean Journal of Fisheries and Aquatic Science 47(3), 247-254.
Kim, Y. H.(2004). Characterization of tetracycline resistance genes in Vibrio spp. isolated from marine fishes. Master's Thesis, Department of Fish Pathology, Pukyong National University, Busan, South Korea.
KOSIS.(2016). Korean Statistical Information Service.
Lee, H. W..Lim, S. K. and Kim, M. N.(2009). Characteristics of Ampicillin-Resistant Vibrio spp. isolated from a west coastal area of Korean peninsula. Korean Journal of Fisheries and Aquatic Science 42(1), 20-25.
Levy, S. B..MuMurry L. M..Barbosa, T. M..Burdett, V..Courvalin, P..Hillen, W..Roberts, M. C..Rood, J. I. & Taylor, D. E.(1999). Nomenclature for new tetracycline resistance determinants. Antimicrobial Agents and Chemotherapy 43(6), 1523-1524.
Park, Y. K..Nho, S. W..Shin, G. W..Park, S. B..Jang, H. B..Cha, I. S..Ha, M. A..Kim, Y. R..Dalvi, R. S..Kang, B. J..Jung, T. S.(2009). Antibiotic susceptibility and resistance of Streptococcus iniae and Streptococcus parauberis isolated from olive flounder (Paralichthys olivaceus). Veterinary Microbiology 136, 76-81.
Sakai, T..Iida, T..Osatomi, K. and Kanai, K.(2007). Detection of Type 1 Fimbrial genes in fish pathogenic and non-pathogenic Edwardsiella tarda strains by PCR. Fish Pathology 42(2), 115-117.
Son, K. T..Oh, E. G..Lee, T. S..Lee, H. J..Kim, P. H. and Kim J. H.(2005). Antimicrobial susceptibility of Vibrio parahaemolyticus and Vibrio alginolyticus from fish farms on the southern coast of Korea. Korean Journal of Fisheries and Aquatic Science 38(6), 365-371.
Song, J. H.(2009). Current status and future strategies of antimicrobial resistance in Korea. Korean Journal of Medicine 77(2), 143-151.
Woo, S. H..Kim, H. J..Lee, J. S..Kim, J. W. and Park, S. I.(2006). Pathogenicity and classification of streptococci isolated from cultured marine fishes. Journal of Fish Pathology 19(1), 17-33.
※ AI-Helper는 부적절한 답변을 할 수 있습니다.