[논문]CL57BL/6 마우스의 발모에 미치는 목향 추출물의 영향

김정희; 이승욱; 백경연; 김극준

doi:10.15324/kjcls.2021.53.1.88

CL57BL/6 마우스의 발모에 미치는 목향 추출물의 영향
Effects of Aucklandia lappa Decne. Extract on Hair Growth in Depilated CL57BL/6 Mice 원문보기

Korean journal of clinical laboratory science : KJCLS = 대한임상검사과학회지, v.53 no.1, 2021년, pp.88 - 95

김정희 (대경대학교 임상병리과) , 이승욱 (계명대학교 식품가공학과) , 백경연 ((주) 옥천당) , 김극준 (대경대학교 임상병리과)

초록
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본 연구에서는 제모된 마우스 모델을 대상으로 목향 추출물의 경구 투여가 발모에 미치는 영향에 대해 조사하였다. 목향 70% prethanol 추출물(ALD)을 제조하여 추출수율과 추출물에 함유된 총 폴리페놀 함량을 측정한 결과 각각 27.30±0.01과 28.39 mg gallic acid equivalent (GAE)/g extract로 측정되었다. ALD를 제모된 CL57BL/6 마우스에 6주간 경구 투여하며 관찰한 결과, 식이량과 체중 변화에 유의적인 변화가 관찰되지 않았다. 혈액 생화학적 검사 및 조직학적 검사를 통해 ALD의 6주간 반복 투여가 주요 장기인 간과 신장의 기능에 미치는 영향을 살펴본 결과, 대조군에 비해 간기능과 콩팥기능 모두 유의적인 변화는 관찰되지 않았다. 이와 더불어 ALD 투여에 따른 모발 성장 정도를 육안적으로 관찰한 결과, ALD 투여군에서 대조군 및 판시딜 투여군(양성 대조군)보다 현저하게 발모가 증가함을 확인하였다. 또한 모낭수와 진피의 콜라겐 생성 정도를 비교한 결과, 대조군 및 판시딜 투여군 대비 ALD 투여군에서 두 항목 모두 유의적으로 증가함을 알 수 있었다. 본 연구로부터 ALD의 경구 투여는 제모된 마우스 모델에서 모발 성장을 촉진하며 진피내 콜라겐 합성 증가와 모낭수 증가를 유도한다는 결론을 도출할 수 있었으며, 이는 ALD를 함유하는 경구용 발모 촉진제 개발을 위한 기초자료로써 그 가치가 있을 것으로 기대된다.

Abstract ▼ AI-Helper

Aucklandia lappa Decne., a traditional herbal medicine, has been used to treat various diseases, including asthma, coughs, rheumatism, and diarrhea. In the present study, the effects of the oral administration of Aucklandia lappa Decne. extract on hair growth was investigated in hair-removed mice. A 70% ethanol extract of Aucklandia lappa Decne. (ALD) was prepared, and the extraction yield and total polyphenol content of ALD were measured as 27.30±0.01 and 28.39 mg gallic acid equivalent (GAE)/g, respectively. The oral administration of ALD to hair-removed CL57BL/6 mice for six weeks had no significant effects on food intake and body weight changes. Biochemical and histological examinations also showed that the oral administration of ALD for six weeks had no significant effect on the liver and kidney functions. On the other hand, hair growth was significantly higher in the ALD group than the control group and the Pancidil group (positive control). In addition, the number of hair follicles and the degree of collagen production in the dermis were significantly higher in the ALD group than in the control and pancidil groups. These results suggest that ALD is a potential source of nutricosmetics with hair growth-promoting effects.

주제어

표/그림 (7)

그림 Figure 1. Effects of ALD on NO production and cell viability in LPStreated RAW264.7 cells. Cells were pre-treated with different concentrations of ALD for 1 h and then treated with LPS (100 ng/mL) for 24 h. NO production (A) and cell viability (B) were then measured. Results are presented as mean±SEM (N≥3). ***P<0.01 and ^#P<0.001 vs. LPS control.
표 Table 1. Extraction yield and total polyphenol content of ALD
그림 Figure 2. Photograph of hair regrowth in C57BL/6 mice. The animals were shaved with electric clipper and each sample was given orally for 6 weeks. The photographs were taken at the end of the experiment.
그림 Figure 3. Histological changes of the liver and the kidney tissues in C57BL/6 mice. Histological sections were prepared from the liver and the kidney and stained with hematoxylin and eosin. Representative images were collected at low (×100) magnification for observation under a microscope.
표 Table 2. Effects of ALD on food intake and body weight in C57BL/6 mice
그림 Figure 4. Histological change of hair follicles in the dorsal skin of C57BL/6 mice. Histological sections were prepared from the dorsal skin and stained with hematoxylin and eosin. Representative images were collected at high (×200) magnification for observation under a microscope. Image of H&E stain for hair follicle (A) and number of hair follicle (B) were then measured. Results are presented as mean±SEM (N≥3), and different letter indicates a significant difference among group, according to one-way ANOVA with Duncan's multiple reange test (P<0.05).
그림 Figure 5. Collagenesis of dermis in the dorsal skin of C57BL/6 mice. Histological sections were prepared from the dorsal skin and stained with Masson's trichrome. Representative images were collected at high (×200) magnification for observation under a microscope. Image of Masson's trichrome stain for collagen fibers (A) and relative intensity (B) were then measured. Results are presented as mean±SEM (N≥3), and different letter indicates a significant difference among group, according to one-way ANOVA with Duncan's multiple reange test (P<0.05).

AI 본문요약
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문제 정의

개선에 좋은 영향을 주는 것이 관찰되었다. 본 목향 추출물이 발모에 미치는 영향에 대해 자세히 알아보기 위해 이번 연구에서는 C₅₇BL/6 마우스를 이용하여 제모 모델을 제작한 후 목향추출물이 발모에 미치는 영향을 조사하였다. 동물모델을 이용한 발모 실험에 앞서, 우선 제조한 목향 추출물에 대한 품질 특성평가를 실시하였다.
최근 본 연구실에서는 노화 마우스 모델을 대상으로 이루어진 한 실험에서 목향 추출물의 식이가 노화 마우스의 발모와 모질 개선에 좋은 영향을 주는 것을 우연히 관찰할 수 있었으며, 따라서 목향 추출물이 발모에 미치는 영향에 대해 자세히 알아보기 위해 이번 연구에서는 C₅₇BL/6 마우스를 이용하여 제모 모델을 제작한 후 목향 추출물이 발모에 미치는 영향을 조사하였다.
동물모델을 이용한 발모 실험에 앞서, 우선 제조한 목향 추출물에 대한 품질 특성평가를 실시하였다. 추출물의 특성은 추출수율 및 총 폴리페놀 함량과 함께 선행 연구[23, 24]에서 확인된 바 있는 RAW264.7 세포를 대상으로 한 nitric oxide (NO) 생성 억제활성을 측정함으로써 평가되었다. 70% prethanol로 추출한 목향의 추출 수율은 27.

가설 설정

2)Each value is mean±SEM (N≥3).

제안 방법

실험군은 정상군(Normal saline, NS), 양성대조군(Pan- sidil, P) 목향추출물 투여군(ALD)로 분류하여, 1일 2회, 400 ㎎/㎏ body weight (BW) 농도로 경구 투여하였다. 6주간 경구투여 후 임상병리학적 검사를 위해 마취제 Avertin-PBS를 1:9 150 μL씩 복강투여 후 심장채혈과 생검을 실시하였다.
조직을 육안검사 후, 자동침투기에서 파라핀을 침투시킨 후 포매, 4 μm 두께로 절편제작하고 60℃에서 건조한 후 탈파라핀, 함수과정을 거쳤다. Collagen fiber의 정량적인 평가를 위해 Weigert iron hematoxylin 용액에 10분 염색 후수세, biebrich scarlet red 용액에 15분간 염색, phospho- molybdic acid/phosphotungstic acid 용액에 15분간 감별, aniline blue 용액에 15분간 염색 후 1% acetic acid 용액에 3분간 탈색하고 탈수, 투명 및 봉입하였다. DP71 현미경 디지털 카메라(Olympus, Japan)로 이미지를 획득한 후 Lepard (zootos, korea) 프로그램을 사용하여 collagen fiber를 정량적으로 측정하였다.
Collagen fiber의 정량적인 평가를 위해 Weigert iron hematoxylin 용액에 10분 염색 후수세, biebrich scarlet red 용액에 15분간 염색, phospho- molybdic acid/phosphotungstic acid 용액에 15분간 감별, aniline blue 용액에 15분간 염색 후 1% acetic acid 용액에 3분간 탈색하고 탈수, 투명 및 봉입하였다. DP71 현미경 디지털 카메라(Olympus, Japan)로 이미지를 획득한 후 Lepard (zootos, korea) 프로그램을 사용하여 collagen fiber를 정량적으로 측정하였다.
10% sodium carbonate (Na₂CO₃) 60 μL를 첨가하여 1시간 반응시키고, microplate spectrophotometer를 사용하여 700 nm에서 흡광도를 측정하였다. Gallic acid를 10, 25, 50, 75, 100 μg/mL 농도로 표준 검량 곡선을 작성한 후 총 polyphenol 함량을 gallic acid equivalent (μg GAE/mg)으로 나타내었다.
7 대식세포를 대상으로 수행되었으며, 그람음성균의 내독소인 lipopolysaccharide (LPS) 처리에 의해 과도하게 생성되는 NO에 대한 생성억제 활성을 확인함으로써 ALD의 항염증활성을 평가하였다. NO 생성억제 활성을 알아보기 위하여 RAW264.7 세포에 ALD를 선행연구들과 유사한 농도 범위인 2.5∼20 μg/mL의 농도로 1시간 전처리한 후 LPS (100 ng/mL)를 처리하고 24시간 배양하였다. 배양이 끝난 후 NO 생성량을 측정하였으며, 그 결과는 Figure 1A와 같다.
세포배양 상층액 50 μL를 96-well plate에 취하고, 여기에 동량의 Griess 시약을 넣어 10분간 반응시킨 후 microplate reader를 이용하여 540 nm 에서 흡광도를 측정하였다. Nitrite의 농도(μM)는 sodium nitrite (NaNO₂)를 사용하여 얻은 표준 직선과 비교하여 산출하였다.
사육실에서 1주일 순화기간을 거친 후 일반증상을 관찰하고, 체중을 측정하여 건강한 개체만을 선별하여 사용하였다. Pentobarbital (50 ㎎/㎏, 엔토발, 한림제약)로 마취 후 피부에 손상이 가지 않게 주의하며 마우스 등 부위의 털을 1 차적으로 제모한 후 실험을 진행하였다. 실험기간 중의 실험동물은 격리동 마우스 케이지 당 5마리씩 수용하고, 사육실 환경 조건은 실내온도 22±2℃, 상대습도 40∼60%, 조명시간 12시간(오전 7시∼오후 7시), 조도는 150∼200 lux로 조정하였으며, 멸균 정제수와 실험동물용 사료를 자유로이 섭취하도록 하였다.
고정된 조직을 절취하여 자동침투기에서 파라핀을 침투시킨 후 포매하여 4 μm 두께로 절편을 제작하고 60℃에서 건조한 후 탈 파라핀, 함수과정을 거쳐 핵을 염색하기 위해 Harris hematoxylin 용액에 7분 염색 후 수세, 감별, 청색화 과정을 거친 후 eosin 용액에 3분간 염색 후 탈수, 투명, 봉입하였다. DP71 microscope digital camera (Olympus, Japan) 현미경 디지털 카메라로 이미지를 획득하였다.
그룹별 모발 성장을 비교하기 위해 조직학적 분석을 통해 모낭 수를 측정한 후 그룹별로 비교하였다. 모낭의 수는 각 마우스의 피부조직을 H&E 염색을 실시한 후 배율 100배에서 배면의 5개 필드에서 현미경으로 분석한 결과, control군 4개, 양성대조군인 판시딜 8.
본 목향 추출물이 발모에 미치는 영향에 대해 자세히 알아보기 위해 이번 연구에서는 C₅₇BL/6 마우스를 이용하여 제모 모델을 제작한 후 목향추출물이 발모에 미치는 영향을 조사하였다. 동물모델을 이용한 발모 실험에 앞서, 우선 제조한 목향 추출물에 대한 품질 특성평가를 실시하였다. 추출물의 특성은 추출수율 및 총 폴리페놀 함량과 함께 선행 연구[23, 24]에서 확인된 바 있는 RAW264.
[26, 27]. 따라서 ALD의 in vitro 항염증활성은 RAW264.7 대식세포를 대상으로 수행되었으며, 그람음성균의 내독소인 lipopolysaccharide (LPS) 처리에 의해 과도하게 생성되는 NO에 대한 생성억제 활성을 확인함으로써 ALD의 항염증활성을 평가하였다. NO 생성억제 활성을 알아보기 위하여 RAW264.
발모 정도 확인과 경구투여 독성을 보기 위해 실험동물 조직을 채취하여 10% 포르말린에 24시간 동안 고정하였다. 고정된 조직을 절취하여 자동침투기에서 파라핀을 침투시킨 후 포매하여 4 μm 두께로 절편을 제작하고 60℃에서 건조한 후 탈 파라핀, 함수과정을 거쳐 핵을 염색하기 위해 Harris hematoxylin 용액에 7분 염색 후 수세, 감별, 청색화 과정을 거친 후 eosin 용액에 3분간 염색 후 탈수, 투명, 봉입하였다.
사용하였다. 사육실에서 1주일 순화기간을 거친 후 일반증상을 관찰하고, 체중을 측정하여 건강한 개체만을 선별하여 사용하였다. Pentobarbital (50 ㎎/㎏, 엔토발, 한림제약)로 마취 후 피부에 손상이 가지 않게 주의하며 마우스 등 부위의 털을 1 차적으로 제모한 후 실험을 진행하였다.
5 mg/mL의 MTT 용액 20 μL를각 well에 처리하고 incubator에서 4시간 동안 배양하였으며, 배양 종료 후 상층액을 제거하고 각 well에 250 μL의 DMSO를 첨가하여 생성된 formazan 결정을 용해시켜 microplate spectrophotometer로 550 nm에서 흡광도를 측정하였다. 세포 생존율은 시료를 처리하지 않고 세포만 배양한 무처리 군의 100% 생존율을 기준으로 상대적인 세포 생존율(cell viability; %) 로 계산되었다.
실험기간 중의 실험동물은 격리동 마우스 케이지 당 5마리씩 수용하고, 사육실 환경 조건은 실내온도 22±2℃, 상대습도 40∼60%, 조명시간 12시간(오전 7시∼오후 7시), 조도는 150∼200 lux로 조정하였으며, 멸균 정제수와 실험동물용 사료를 자유로이 섭취하도록 하였다. 실험군은 정상군(Normal saline, NS), 양성대조군(Pan- sidil, P) 목향추출물 투여군(ALD)로 분류하여, 1일 2회, 400 ㎎/㎏ body weight (BW) 농도로 경구 투여하였다. 6주간 경구투여 후 임상병리학적 검사를 위해 마취제 Avertin-PBS를 1:9 150 μL씩 복강투여 후 심장채혈과 생검을 실시하였다.
Pentobarbital (50 ㎎/㎏, 엔토발, 한림제약)로 마취 후 피부에 손상이 가지 않게 주의하며 마우스 등 부위의 털을 1 차적으로 제모한 후 실험을 진행하였다. 실험기간 중의 실험동물은 격리동 마우스 케이지 당 5마리씩 수용하고, 사육실 환경 조건은 실내온도 22±2℃, 상대습도 40∼60%, 조명시간 12시간(오전 7시∼오후 7시), 조도는 150∼200 lux로 조정하였으며, 멸균 정제수와 실험동물용 사료를 자유로이 섭취하도록 하였다. 실험군은 정상군(Normal saline, NS), 양성대조군(Pan- sidil, P) 목향추출물 투여군(ALD)로 분류하여, 1일 2회, 400 ㎎/㎏ body weight (BW) 농도로 경구 투여하였다.
제거한 날을 실험 1일째로 정하여 피부에서 일어나는 발 모와 체중 변화 정도를 보기 위해 42일째까지 관찰, 육안적 발모 정도를 관찰을 위하여 Cannon DP70 카메라를 이용하여 42일째 발모 부위를 촬영하였다.
조직을 육안검사 후, 자동침투기에서 파라핀을 침투시킨 후 포매, 4 μm 두께로 절편제작하고 60℃에서 건조한 후 탈파라핀, 함수과정을 거쳤다. Collagen fiber의 정량적인 평가를 위해 Weigert iron hematoxylin 용액에 10분 염색 후수세, biebrich scarlet red 용액에 15분간 염색, phospho- molybdic acid/phosphotungstic acid 용액에 15분간 감별, aniline blue 용액에 15분간 염색 후 1% acetic acid 용액에 3분간 탈색하고 탈수, 투명 및 봉입하였다.
총 polyphenol의 함량은 널리 사용되고 있는 Folins-Denis 법을 응용하여 측정하였다. 96-well plate에 시료 60 μL을 분주한 후 2배 희석한 Folin-Ciocalteu phenol reagent 60 μL 를 첨가하고 3 min 간 방치하였다.
콜라겐 생성능을 확인하기 위해 창상 부위와 정상피부가 포함된 조직을 채취하여 10% 중성 포르말린 용액에 24시간 동안 고정하였다. 조직을 육안검사 후, 자동침투기에서 파라핀을 침투시킨 후 포매, 4 μm 두께로 절편제작하고 60℃에서 건조한 후 탈파라핀, 함수과정을 거쳤다.

대상 데이터

고정된 조직을 절취하여 자동침투기에서 파라핀을 침투시킨 후 포매하여 4 μm 두께로 절편을 제작하고 60℃에서 건조한 후 탈 파라핀, 함수과정을 거쳐 핵을 염색하기 위해 Harris hematoxylin 용액에 7분 염색 후 수세, 감별, 청색화 과정을 거친 후 eosin 용액에 3분간 염색 후 탈수, 투명, 봉입하였다. DP71 microscope digital camera (Olympus, Japan) 현미경 디지털 카메라로 이미지를 획득하였다.
RAW264.7 세포 배양에 사용된 Dulbecco’s modified Eagle’s medium (DMEM) high glucose, antibiotics (pe- nicillin/streptomycin), fetal bovine serum (FBS)은 Gibco BRL (Grand Island, NY, USA)로부터 구입하였다. 세포 생존율 측정에 사용된 3-(3, 4-dimethyl-thiazolyl-2)―2, 5-diphenyl tetrazolium bromide (MTT) 시약은 Amresco (Solon, OH, USA)로부터 구입하였으며, 특별한 언급이 없는 한 그 밖의 분석용 시약 및 유기용매는 Sigma-Aldrich Co.
7 세포는 한국세포주은행(KCLB, Seoul, Korea)에서 분양받아 사용하였다. RAW264.7 세포 배양은 DMEM (Dulbecco’s modified Eagle’s medium) 배지에 10% FBS (fetal bovine serum)와 penicillin (100 IU/mL), streptomycin (100 μg/mL, respec- tively)를 첨가하여 5% CO₂, 37℃ incubator에서 배양하였다. 세포가 70∼80% 정도 자랐을 때 cell lifter로 세포를 떼어내고 원심분리기로 원심분리(1,000 rpm, 2분)하여 세포를 회수한 후 2일에 1회씩 계대 배양하였다.
동물실험은 영남대학교 의과대학 동물실험윤리위원회의 동물실험 가이드라인(승인번호: YUMC-AE2019-018)에 따라 진행되었으며, 자발적으로 탈모가 진행되는 특징을 가지면서 모발 성장주기 판정이 용이하여 모발연구에 널리 사용되는 CL57BL/6 마우스(6주령)를 하나상사(부산, 한국)에서 구매하여 사용하였다. 사육실에서 1주일 순화기간을 거친 후 일반증상을 관찰하고, 체중을 측정하여 건강한 개체만을 선별하여 사용하였다.
본 연구에 사용된 목향은 영천에 소재하고 있는 ㈜옥천당 영천지점에서 구입하여 사용하였으며, 70% prethanol 추출은 목향 100 g당 10배량(w/v)의 prethanol로 환류 냉각 추출장치를 사용하여 추출하였다. 추출 후 여과지(Whatman NO.
7 세포 배양에 사용된 Dulbecco’s modified Eagle’s medium (DMEM) high glucose, antibiotics (pe- nicillin/streptomycin), fetal bovine serum (FBS)은 Gibco BRL (Grand Island, NY, USA)로부터 구입하였다. 세포 생존율 측정에 사용된 3-(3, 4-dimethyl-thiazolyl-2)―2, 5-diphenyl tetrazolium bromide (MTT) 시약은 Amresco (Solon, OH, USA)로부터 구입하였으며, 특별한 언급이 없는 한 그 밖의 분석용 시약 및 유기용매는 Sigma-Aldrich Co. (St. Louis, MO, USA)로부터 구입하여 사용하였다.
실험에 사용한 마우스 유래의 대식세포인 RAW264.7 세포는 한국세포주은행(KCLB, Seoul, Korea)에서 분양받아 사용하였다. RAW264.

데이터처리

Image of H&E stain for hair follicle (A) and number of hair follicle (B) were then measured. Results are presented as mean±SEM (N≥3), and different letter indicates a significant difference among group, according to one-way ANOVA with Duncan’s multiple reange test (P<0.05).
실험 결과는 SPSS 17.0 (Statistical Package for Social Sciences, SPSS Inc., Chicago, IL, USA) software를 이용하여 분산분석을 실시하였으며, 유의적 차이가 있는 항목에 대해서 Duncan’s multiple range test로 P<0.05 수준에서 유의성 검정을 실시하였다.

이론/모형

NO 생성량 측정은 Griess 분석방법으로 측정하였다. RAW264.
RAW264.7 세포에 대한 추출물의 독성을 측정하기 위해 MTT assay를 실시하였다. 세포 3×10⁵ cells/well을 48-well plate에 분주하여 24시간 동안 배양하였으며, 그 후 dimethyl sulfoxide (DMSO)에 녹인 추출물을 농도별로 1시간 처리한 다음 LPS (100 ng/mL)를 처리하고 24시간 동안 추가 배양하였다.

성능/효과

7 세포를 대상으로 한 nitric oxide (NO) 생성 억제활성을 측정함으로써 평가되었다. 70% prethanol로 추출한 목향의 추출 수율은 27.30±0.01로 측정되었으며, 추출물의 총 폴리페놀 함량을 gallic acid로 환산한 결과 28.39±1.50 mg GAE/g으로 나타났다(Table 1). 목향 추출물(ALD)의 총 폴리페놀 함량의 경우 선행연구[25]에서 60% 알코올 추출물이 2.
ALD를 400 ㎎/㎏ BW 용량으로 1일 2회, 6주간 경구투여한 후 체중변화를 관찰한 결과, ALD 그룹의 평균 체중 증가량은 24.24 g으로 대조군(20.64 g) 대비 4.4 g 높게 나타났으며, 양성대조군인 판시딜(20.49 g) 처리군에 비해서도 3.75 g 높은 것으로 확인되었으나 통계학적 유의성은 확인되지 않았다(Table 2).
ALD의 투여가 마우스 피부조직 내 콜라겐 생성에 미치는 영향을 조사하기 위해 Masson’s trichrome 염색을 실시한 결과를 보면 Pansidil 투여군(36.10%)보다 ALD 투여군(45.27%) 콜라겐 생성률이 높게 나타났다(Figure 5).
7 세포를 대상으로 한 nitric oxide (NO) 생성 억제활성 측정한 결과를 Figure 1A에 나타내었다. RAW264.7 대식세포에 LPS를 처리한 결과, NO 생성량이 30.65±0.42 μM로 LPS 무처리군에 비해 약 12배가량 증가하였으나 ALD 처리농도에 의존적으로 NO 생성량이 감소하여 20 μg/mL에서는 NO 생성량이 11.31±0.58 μM로 유의적인 감소를 보였다. 또한 ALD가 세포 생존율에 미치는 영향을 MTT assay를 이용하여 확인한 결과, 모든 농도에서 80% 이상의 세포 생존율을 보였으며(Figure 1B), 이로부터 ALD의 NO 생성억제 활성이 세포 독성과는 연관성이 없음을 확인할 수 있었다.
간 조직을 관찰한 결과 정상군, 판시딜 투여군 및 ALD 투여군 모두 간소엽, sinusoid 구조의 변성이나 중심정맥 주위변화, 담관 및 문맥 주위의 특이적인 변화는 관찰되지 않았으며, 콩팥의 사구체, 근위곡세뇨관 그리고 원위곡세뇨관 또한 세 그룹에서 모두 정상적인 소견으로 보였다.
EGF, FGF, TGF-beta, IGF, HGF/SF, PDGF가 모발 성장에 관여하는 성장인자로 알려져 있다[19]. 그러나 섬유모세포 성장인자(FGF)가 C57BL/6 Mice에서 beta-catenin과 Shh의 발현을 통하여 모발성장을 유도한다는 [20] 결과와 섬유모세포가 교원섬유, 탄력섬유, 세망섬유를 생성한다는 잘 알려진 이론과 본 연구에서 Masson’s trichrome 염색결과 판시딜 대비 ALD 투여군이 콜라겐 생성이 증가함과 유사한 결과를 증명한다.
58 μM로 유의적인 감소를 보였다. 또한 ALD가 세포 생존율에 미치는 영향을 MTT assay를 이용하여 확인한 결과, 모든 농도에서 80% 이상의 세포 생존율을 보였으며(Figure 1B), 이로부터 ALD의 NO 생성억제 활성이 세포 독성과는 연관성이 없음을 확인할 수 있었다.
58 μM로 유의적인 감소를 보였다. 또한 ALD가 세포 생존율에 미치는 영향을 MTT assay를 이용하여 확인한 결과, 모든 농도에서 80% 이상의 세포 생존율을 보였으며(Figure 1B), 이로부터 ALD의 NO 생성억제 활성이 세포 독성과는 연관성이 없음을 확인할 수 있었다.
측정한 후 그룹별로 비교하였다. 모낭의 수는 각 마우스의 피부조직을 H&E 염색을 실시한 후 배율 100배에서 배면의 5개 필드에서 현미경으로 분석한 결과, control군 4개, 양성대조군인 판시딜 8.6개 대비 목향투여군의 모낭 수가 11.5개로 유의적(P<0.05)으로 증가함을 확인할 수 있었다(Figure 4).
목향 추출물의 70% prethanol로 추출한 목향의 추출 수율은 27.30±0.01%로 측정되었으며, 총 폴리페놀 함량을 gallic acid로 환산한 결과 28.39±1.50 mg GAE/g으로 나타났다 (Table 1). RAW264.
제모 후 판시딜과 ALD를 6주간 경구투여 후 그룹간 발모 정도를 육안적 관찰 결과 ALD 투여군은 5마리 중 4마리에서 발모(화살표)를 관찰할 수 있었고, 판시딜 투여군은 4마리 중 1마리만 발모를 관찰할 수 있었다. Control 군은 4마리 모두 발모를 관찰할 수 없었다(Figure 2).
제모 후 판시딜과 ALD를 6주간 경구투여 후 그룹간 발모 정도를 육안적으로 관찰한 결과 ALD 투여군에서 판시딜 투여군 보다 현저하게 발모 및 모낭수가 증가함을 확인하였다(Figure 4) [23, 24]. 따라서 본 연구결과는 목향추출물이 발모성장에 기여한다는 것을 최초로 시사하나, 추가적인 기전연구가 필요할 것으로 사료된다.

후속연구

24]. 따라서 본 연구결과는 목향추출물이 발모성장에 기여한다는 것을 최초로 시사하나, 추가적인 기전연구가 필요할 것으로 사료된다.
성장 촉진제, 그들의 줄기 색소 침착은 모낭 멜라닌 세포에 의존하여 성장기 동안에만 색소를 생성한다[26]. 목향추출물이 섬유모세포 활성을 유도하여 콜라겐 합성에 영향을 미치는지 확인하기 위하여 Masson’s trichrome 염색을 실시하여 정량 분석한 결과를 Figure 5에 나타낸 바와 같이 양성대조군인 판시딜보다 ALD 투여군이 9.17% 콜라겐 생성률이 높게 나타나 콜라겐 양이 증가할수록 발모증가를 유도한다는 것을 확인하였으나, 추가적인 기전규명이 요구된다. EGF, FGF, TGF-beta, IGF, HGF/SF, PDGF가 모발 성장에 관여하는 성장인자로 알려져 있다[19].

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저자의 다른 논문 :

표제어: PCR

동의어: Packet Collision Rate

용어 설명 출처 목록 (6)

용어 설명: PCR은 세균 특이성이 있는 primer를 이용하여 적은 수의 세균이 있을지라도 쉽게 검출할 수 있는 유용한 방법이며, 이를 이용하여 구강 내 치면세균막이나 타액에서 직접 세균을 검출할 수 있게 되었다[8].

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