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제안 방법
- Sulforaphane 함량을 증가시키고자 Myb 28 유전자 서열을 편집하는 실험을 실시하였다.
- 따라서 이들 mutant 와 wild type Nyb 28 서열의 발현 량을 분석하고 이들 서열에 기반하여 CRIPSR/Cas9 적용을 위한 gRNA 서열을 제작하였다. 그리고 transformation을 실시할 protoplast 재분화 기법을 확립하여, CRISPR/Cas9 transformation 을 적용하였다.
- 특히 엑손 3 영역의 9 bp deleltion 에 주목하여 다양한 육종게통에서 deletion 이 발생하는지를 분석한 결과 오직 야생 게통에서만 발생한단느 것을 발견하였다. 따라서 이들 mutant 와 wild type Nyb 28 서열의 발현 량을 분석하고 이들 서열에 기반하여 CRIPSR/Cas9 적용을 위한 gRNA 서열을 제작하였다. 그리고 transformation을 실시할 protoplast 재분화 기법을 확립하여, CRISPR/Cas9 transformation 을 적용하였다.
- 야생 품종과 재배 품종간의 Myb 28 서열 변이를 검출하여, CRISPR/Cas9 기법을 육종계통에 적용하여 Sulforaphane 함량이 높은 야생 품종이 가지는 서열로 변이를 유도하고자 한다.
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