초록 ▼

식품의약품안전청에서 보유 중인 생물의약품 국가표준품 중 혈액응고 제8인자 역가시험법 국가표준품의 경우 2001년 확립하여 국가검정 및 생물의약품 제조사의 품질관리에 활용하고 있다. 그러나 2008년 ‘생물의약품 국가표준품 품질경영체계 운영 및 안정성 평가연구’ 결과 혈액응고 제8인자 1차 국가표준품의 경우 시간의 경과에 따라 유의한 역가 감소 경향을 보이고 있어 본 연구를 통해 혈액응고 제8인자 2차 국가표준품의 제조 및 확립을 이루고자 하였으며 이를 위해 국내 제조사를 포함, 총 4개 기관의 공동연구를 실시, 역가감소 경향을 보이

식품의약품안전청에서 보유 중인 생물의약품 국가표준품 중 혈액응고 제8인자 역가시험법 국가표준품의 경우 2001년 확립하여 국가검정 및 생물의약품 제조사의 품질관리에 활용하고 있다. 그러나 2008년 ‘생물의약품 국가표준품 품질경영체계 운영 및 안정성 평가연구’ 결과 혈액응고 제8인자 1차 국가표준품의 경우 시간의 경과에 따라 유의한 역가 감소 경향을 보이고 있어 본 연구를 통해 혈액응고 제8인자 2차 국가표준품의 제조 및 확립을 이루고자 하였으며 이를 위해 국내 제조사를 포함, 총 4개 기관의 공동연구를 실시, 역가감소 경향을 보이는 1차 국가표준품에 대한 역가 재평가 및 2차 국가표준품 확립을 추진하였다. 2차 국가표준품 후보물질은 (주)녹십자에서 생산하는 ‘건조 FVIII:C 단클론항체 정제 사람 혈액응고 VIII:C인자’ 최종원액의 일부를 취하여 품질평가를 실시하여 적합성이 확인된 것을 사용하였으며 이 후보물질의 역가는 약 10 IU/mL로 조정, 5 mL 바이알에 1 mL씩 충전하고, 동결건조를 실시한 결과 최종 완제품의 역가는 약 9 IU/vial로 나타났으며 제조수량은 약 8,000바이알이 되었다. 본 제제는 국내 혈장유래 혈액응고 제8인자 중 고순도 제제에 속하는 것으로서 혈장을 수집하여 동결침전한 후 단클론항체를 이용한 면역친화성 크로마토그래피 공정을 거쳐 제조하였다. 제조한 표준품 후 보물질에 대해서는 장기 안정성 시험과 가속 안정성 시험(-20 ℃, 4 ℃, 20 ℃, 37 ℃, 45 ℃)을 실시한 결과 6개월까지 장기 안정성이 유지되는 것으로 평가되었으며 가속안정성 시험의 경우 37 ℃, 45 ℃ 보관 시 역가 감소를 나타내었다. 제조된 2차 국가표준품 후보물질은 국가검정센터, (주)녹십자, 에스케이케미칼(주), 대한적십자사 혈장분획센터의 공동연구를 통하여 역가를 추정하였으며 역가는 혈액응고 제8인자 역가시험에 사용하는 두가지 시험법인 응고시간 측정법(clotting assay)와 합성기질 측정법(chromogenic assay)에 대하여 각각 실시하였다. 그 결과 각 실험실의 측정치를 통합한 역가 추정치가 응고시간 측정법의 경우 8.9 IU/vial을, 합성기질 측정법의 경우 7.4 IU/vial의 역가를 나타내어 응고시간 측정법에서의 역가가 통계적으로 유의하게 높은 것으로 나타나 (p<0.0001) 본 표준품의 경우 시험방법 간 역가 불일치를 인정, 시험방법별로 각각 역가를 설정하고자 하였다. 또한, 실험실 간 변동성(intra-laboratory variability)을 보기 위한 GCV(%)의 경우 응고시간 측정법과 합성기질 측정법에서 각각 3.42%, 7.60 %로 10 % 미만의 변동을 보였다.

Abstract ▼

The National Standard of Blood coagulation Factor Ⅷ owned in Korea Food and Drug Administration was established in 2001 and have used for National Lot Release and supply to Manufacture for Quality Control of Products. But according to `Establishment of Quality Management System and Evaluation Techni

The National Standard of Blood coagulation Factor Ⅷ owned in Korea Food and Drug Administration was established in 2001 and have used for National Lot Release and supply to Manufacture for Quality Control of Products. But according to `Establishment of Quality Management System and Evaluation Techniques of Stability Testing for National Biological Standards' published in 2008 showed the potency decrement trend. Therefore we studied to establish the secondary National Standard of blood coagulation factor Ⅷ and tried to joint research with 4 agencies, propelled a potency revaluation of the first National Standard which shows a potency decrement trend and the Establishment of the secondary National Standard. The candidate material of secondary National Standard was produced form final bulk product of 'Factor Ⅷ:C Monoclonal Antibody-purified, Freeze-dried Human Blood Coagulation Factor Ⅷ:C' and confirmed the fact that a quality is suitable for the specification. The potency of the candidate material adjusted about 10 IU/mL and filled in the vial of the volume 5 mL and followed in freeze drying. Finally the potency of the candidate material become about 9 IU/vial and produced about 8,000 vials. This material is originated form the domestic blood plasma and blood coagulation Factor Ⅷ is purified using the immunity affinity chromatography process which uses the monoclonal antibody and as belonging in high purity Product of blood coagulation factor Ⅷ. The candidate material of National Standard carried out the real-time stability test and accelerated degradation stability test(- 20 ℃, 4 ℃, 20 ℃, 37 ℃ and 45 ℃). The results showed the real-time stability is maintained until resultant 6 month and according the accelerated degradation stability study, the potency decrement is represented in the case of storing in 37 ℃ and 45 ℃. The candidate material of secondary National Standard which is manufactured by Green cross and tested collaboratively with the Center for Lot Release, Green Cross, SK chemical corp and Korean Red Cross and the potency executed two kind of methods of clotting assay and chromogenic assay, respectively. Finally the potency is decided to 8.9 IU/vial using clotting assay and 7.4 IU/vial using chromogenic assay. Because of the variance between assays shows statistically significant(p<0.0001), we decided that the potency of standard represent separately between methods. Also, the variability between laboratory (intra-laboratory variability) showed the fluctuation was estimated under 10% with 3.42 %(clotting assay) and 7.60 %(chromogenic assay) of GCV (%).

목차 Contents

• 최종보고서 ... 1
• 표지 ... 3
• 국문요약문 ... 5
• SUMMARY ... 6
• 목차 ... 7
• I. 연구개발과제 연구결과 ... 8
• 제1장 연구개발과제의 개요 ... 8
• 제1절 연구개발과제의 목표 ... 8
• 제2절 연구개발과제의 필요성 ... 8
• 제2장 연구개발과제의 국내?외 연구개발 현황 ... 9
• 제3장 연구개발과제의 연구수행 내용 및 결과 ... 10
• 제4장 연구개발과제의 연구결과 고찰 및 결론 ... 19
• 제5장 연구개발과제의 목표달성도 및 관련분야에의 기여도 ... 21
• 제6장 연구개발과제의 연구개발 결과 활용계획 ... 22
• 제1절 활용성과 ... 22
• 제2절 활용계획 ... 22
• 제7장 참고문헌 ... 23
• 제8장 첨부서류 ... 24