초록 ▼

4. 당해년도 연구결과 요약
1. 시제 백신(조직배양 비정제항원)의 돼지에서의 면역원성 측정
- 여러회 계대(마우스에서 5~7회, ZZR에서 3회, BHK에서 9회)된 바이러스를 이용하여 시제 백신을 제작하고 돼지에서 면역원성 시험을 실시하였다.
- O/KOR/AD/2010의 경우 1차 면역에서는 16-32배 수준의 항체 수준을 보였으며, 2차 접종후 32-128의 항체 수준을 확인 할 수 있었다.
- O/KOR/YJ/2010의 경우 1차 면역에서는 16-64수준의 중화항체가 형성되었으며, 2차 접종 후 64-

4. 당해년도 연구결과 요약
1. 시제 백신(조직배양 비정제항원)의 돼지에서의 면역원성 측정
- 여러회 계대(마우스에서 5~7회, ZZR에서 3회, BHK에서 9회)된 바이러스를 이용하여 시제 백신을 제작하고 돼지에서 면역원성 시험을 실시하였다.
- O/KOR/AD/2010의 경우 1차 면역에서는 16-32배 수준의 항체 수준을 보였으며, 2차 접종후 32-128의 항체 수준을 확인 할 수 있었다.
- O/KOR/YJ/2010의 경우 1차 면역에서는 16-64수준의 중화항체가 형성되었으며, 2차 접종 후 64-256으로 O/KOR/AD/2010와 비교시 약간 높은 수준의 중화항체를 확인할 수 있었다.
2. 구제역 바이러스의 플라크 순수분리
- 분리된 바이러스가 여러 표현형이 혼재되어 있는 양상을 보였기 때문에 단일 클론으로 순수 분리할 필요가 있었으며, 20여회 계대를 실시하였다.
- 순수 분리된 바이러스 역가는 IBRS-2 세포에서 10^6.1~6.5TCID50/0.1ml의 역가를 보이고 있다.
3. 구제역 백신후보 바이러스의 유전자 염기서열의 변화
- 구제역바이러스를 23-24대 계대한 후 처음 야외주 형태의 바이러스와 유전자의 변화를 관찰하였다.
- O/KOR/AD/2010와 O/KOR/YJ/2010는 각각 단백질을 코딩하는 서열에서 각각 8, 11개의 유전자 변화를 보였으며,
- 아미노산은 각각 6개 와 6개의 차이를 보였다.
- 구조단백질의 변화는 5개, 3개의 변화가 있었다.
- AD주와 YJ주는 구조단백질에서 아미노산의 가장 많은 변화가 있는 부위는VP2는 3개와 1개의 변화와 VP1으로 각 2개, 2개의 변화를 보였다.
4. 돼지에서의 공격바이러스 접촉공격 모델 개발
- 돼지에서 계대되어 확보된 수포액 등의 바이러스를 다시 접종하여 병원성이 확보됨
- 돼지에 접종후 2일후 18시간 접촉 공격하는 돼지 접촉공격모델 작성완료
5. 구제역 바이러스의 불활화 및 정제방법의 확립
- Sucrose gradient 를 이용한 항원의 순수정제에서 146S 항원은 12개의 fraction 중에서 7 fraction에서 항원이 확인됨
- 간이항원 킷트에 의한 항원의 정제 확인완료
6. 돼지에서의 정제된 백신(146S)의 면역원성(안전성) 시험 및 공격접종시험
- 백신 접종후 면역기간 중 특이할 만한 이상증상은 없었음
- 두당 2 및 5 ug으로 접종하였으며, 항체반응은 2ug 보다 5 ug에서 면역 반응은 더 높게 확인되었으며, 백신과 비교할 경우 그 보다 모두 낮은 수준으로 확인됨
- 면역 후 와 공격접종후의 IFN-gamma와 proliferation 결과가 면역된 항체 수준 및 방어능과 관련이 있게 확인됨
- 항원량은 2 ug 및 5 ug 을 시도하였으나 각 1두에서 구제역 증상이 확인된 바 향후 백신 항원으로 정제된 백신을 위해서는 5-10 ug 항원량의 조정이 필요할 것으로 생각됨

목차 Contents

• 총괄요약표 ... 1
• 연구과제 연차실적보고서 ... 3
• Ⅰ. 연구배경 및 목표 ... 3
• Ⅱ. 연구방법 및 수행전략 ... 5
• Ⅲ. 연구결과 ... 6
• Ⅳ. 연구결과요약 ... 18
• V. 금후 추진계획 ... 19
• VI. 연구결과 활용실적 및 계획 ... 19
• VII. 연구사업 추진상 문제점 및 건의사항 ... 20
• VIII. 주요연구 변경사항 ... 20
• IX. 참고자료 ... 20
• 끝페이지 ... 21