초록 ▼

항파상풍 사람면역글로불린의 역가는 동물에서 독소 중화능을 측정하는 in vivo 역가시험법이 가장 보편적으로 사용되고 있다. 그러나 동물 사용 시험법을 대체하려는 국제적인 노력에 따라 유럽약전에는 in vitro 역가시험법이 채택되었다. 이러한 추세에 발맞추어 본 연구를 통해 항파상풍 사람면역글로불린의 in vitro 역가시험법을 개발하고 검증하여 확립하고자 한다. 효소면역측정법 원리에 기반한 in vitro 역가시험법을 구축하고 시험법 밸리데이션을 수행한 결과 모든 기준에 만족하였다. 항파상풍 면역글로불린의 역가시험용 상용 키트와

항파상풍 사람면역글로불린의 역가는 동물에서 독소 중화능을 측정하는 in vivo 역가시험법이 가장 보편적으로 사용되고 있다. 그러나 동물 사용 시험법을 대체하려는 국제적인 노력에 따라 유럽약전에는 in vitro 역가시험법이 채택되었다. 이러한 추세에 발맞추어 본 연구를 통해 항파상풍 사람면역글로불린의 in vitro 역가시험법을 개발하고 검증하여 확립하고자 한다. 효소면역측정법 원리에 기반한 in vitro 역가시험법을 구축하고 시험법 밸리데이션을 수행한 결과 모든 기준에 만족하였다. 항파상풍 면역글로불린의 역가시험용 상용 키트와 자체적으로 구축한 시험법을 비교하였을 때 정확성 정밀성에서 상용키트와 차이가 없었다. 국내의 제조사 2곳과 공동연구로 항파상풍 사람면역글로 불린 국가표준품의 역가를 산정하였을 때 역가들의 집합은 정규분포임을 확인하였고 총 평균 역가는 37.15 IU/vial 이었다. in vivo 및 in vitro 역가시험법으로 다양한 역가를 갖는 검체의 역가를 측정하여 두 시험법간의 상관성이 매우 높음을 확인하였다 (R² > 0.99). 국가출하승인 검체 48 lot를 대상으로 in vitro 역가시험법을 적용하여 보았을 때 모든 결과가 in vivo 역가시험 결과와 마찬가지로 기준(표시역가 이상)에 적합하였다. 또한 제조사별로 자사의 완제의약품을 in vitro 역가시험법으로 시험하였을 때에도 결과는 기준에 적합하였다. 가혹조건에 정치한 검체를 대상으로 두 시험법을 적용하여 보았을 때에는 건조농축제제에서 in vitro 역가시험법이 in vivo 역가시험법에 비해 역가 감소를 검출하는 것이 지연되었으나, 액상의 완제의약품은 검출 속도가 동등하였다. 이상의 연구결과로서 in vitro 역가시험법은 in vivo 역가시험법을 대체할 수 있으리라 생각된다.

Abstract ▼

To determine the potency of human tetanus immunoglobulin, the in vivo potency assay measuring toxin-neutralizing efficacy in animals is most commonly adopted. However, in line with the international effort to replace the in vivo method by in vitro method, the European Pharmacopoeia (Ph. Eur.) monogr

To determine the potency of human tetanus immunoglobulin, the in vivo potency assay measuring toxin-neutralizing efficacy in animals is most commonly adopted. However, in line with the international effort to replace the in vivo method by in vitro method, the European Pharmacopoeia (Ph. Eur.) monograph states that an in vitro method shall be adapted for the lot release tests. The aim of this study is to develop, validate and establish an in vitro potency assay for human tetanus immunoglobulin. We set up an in vitro method based on an enzyme-linked immunoassay, and all results of the validation were satisfactory. Comparison of our method with commercial potency assay kits has found no differences in accuracy and precision. We collaborated with 2 domestic manufacturers for the potency estimation of Korean standard of human tetanus immunoglobulin. Overall results were normally distributed and total average of estimated potencies was 37.15 IU/vial. It confirmed a high correlation between in vivo and in vitro method, shown by several kinds of human tetanus immunoglobulin which presented R² more than 0.99. We tested 48 lots of human tetanus immunoglobulin final products submitted from Korean manufacturers for national lot release with the in vitro potency assay and all measured values met the regulatory requirements for potency. In addition, the in vitro assay results performed by each manufacturer with their final product also satisfied the criteria of potency. When we applied both potency assays to samples under stress condition which can decrease the potency of samples, the detection of decrease in potency was relatively delayed especially in in vitro assay testing freeze-dried concentrate, but in the case of final product solution, both method showed equivalent detection rates. These results indicate that the in vitro method can be a good alternative to in vivo method.

목차 Contents

• 표 지 ... 1
• 자체연구개발과제 최종보고서 ... 2
• 국문 요약문 ... 3
• Summary ... 4
• 목 차 ... 5
• 연구개발과제 연구결과 ... 6
• 제1장 연구개발과제의 개요 ... 6
• 제2장 연구개발과제의 국내·외 연구개발 현황 ... 10
• 제3장 연구개발과제의 연구수행 내용 및 결과 ... 12
• 제4장 연구개발과제의 연구결과 고찰 및 결론 ... 30
• 제5장 연구개발과제의 목표달성도 및 관련분야에의 기여도 ... 32
• 제6장 연구개발과제의 연구개발 결과 활용계획 ... 34
• 제7장 참고문헌 ... 35
• 끝페이지 ... 36