초록 ▼

본 연구는 유전자재조합식품의 안전관리를 위하여 안전성 심사 요청된 신규 유전자재조합식품의 시험법 검증을 통하여 공인시험법을 확립하고자 하였다. 이에 유전자재조합 콩 2종(DAS-44406-6, SYHT0H2), 유전자재조합 옥수수 1종(DP-004114-3), 유전자재조합 면화 1종(MON88701), 유전자재조합 카놀라 1종(DP-073496-4) 등 총 5종에 대한 정성시험법과 유전자재조합 콩 1종(FG72)에 대한 정량시험법을 확립하였다.
유전자재조합 콩, 옥수수, 면화, 카놀라의 정성시험법은 민감도, 특이성, 재현성 시

본 연구는 유전자재조합식품의 안전관리를 위하여 안전성 심사 요청된 신규 유전자재조합식품의 시험법 검증을 통하여 공인시험법을 확립하고자 하였다. 이에 유전자재조합 콩 2종(DAS-44406-6, SYHT0H2), 유전자재조합 옥수수 1종(DP-004114-3), 유전자재조합 면화 1종(MON88701), 유전자재조합 카놀라 1종(DP-073496-4) 등 총 5종에 대한 정성시험법과 유전자재조합 콩 1종(FG72)에 대한 정량시험법을 확립하였다.
유전자재조합 콩, 옥수수, 면화, 카놀라의 정성시험법은 민감도, 특이성, 재현성 시험을 통하여 검증하였다. 현재 유전자재조합식품 시험법은 확인시험 전단계로서, p35S와 tNOS를 이용한 스크리닝법이 이용되고 있어 스크리닝 시험법에 대한 검증을 추가적으로 수행하였다. 민감도 시험 결과, 삽입유전자의 검출한계는 DAS-44406-6, SYHT0H2, DP-004114-3, MON88701, DP-073496-4 모두 0.005～0.05%로 확인하였다. 또한, 전사개시인자인 35S 프로모터 및 전사종결인자인 NOS 터미네이터를 모두 가진 이벤트는 SYHT0H2와 MON88701이었고, 전사개시인자인 35S 프로모터만을 가진 이벤트는 DP-004114-3 이였으며, 나머지 DAS-44406-6, DP-073496-4는 35S 프로모터와 NOS 터미네이터를 모두 갖지 않았다. 특이성 시험 결과, 다른 작물(쌀, 밀, 보리) 및 다른 유전자재조합 콩과 옥수수 이벤트에 대하여 교차반응이 일어나지 않음을 확인하였다.
유전자재조합 콩 1종(FG72)에 대한 정량시험법은 CODEX 가이드라인에 따라 검증하였다. 시험법의 증폭효율은 평균 93.84 % 이상 102.83 % 이하, 직선성은 0.99 이상의 값을 보였고, 정확도는 99.91 % 이상 106.37 % 이하, 반복성, 재현성, 진도는 각 8.15 %, 12.14 %, 10.45 % 이하로서 CODEX 가이드라인의 기준치를 모두 충족하였다. 검출한계는 0.1 %로 국내의 비의도적 혼입허용치 3 %를 고려할 때 확립한 방법을 실제 검정에서 유효하게 적용할 수 있을 것으로 판단된다.
더불어 미승인 유전자재조합 밀(MON71800)과 파파야(PRSV-SC)에 대한 정성시험법을 확립하여 국내 수입 단계에서의 검사강화를 통한 안전관리에 기여한 바 있으며 과년도 용역연구인 스크리닝 동시분석법을 최종 검토하여 업무 부담 경감에 활용하고자 하였다.
또한, 한국보건복지인력개발원 교육 프로그램을 통해 유전자재조합식품 검사기관 분석담당자를 대상으로 2회에 걸쳐 교육을 수행하여 유전자재조합식품 분석기술 확산 및 분석역량을 강화하고자 하였다.

Abstract ▼

In this study, we validated qualitative and quantitative detection methods for the newly developed genetically modified (GM) crops in order to strengthen the label management for GM foods. Five kinds of GM events [2 soybeans (DAS-44406-6, SYHT0H2), 1 maize (DP-004114-3), 1 cotton (MON88701) and 1 ca

In this study, we validated qualitative and quantitative detection methods for the newly developed genetically modified (GM) crops in order to strengthen the label management for GM foods. Five kinds of GM events [2 soybeans (DAS-44406-6, SYHT0H2), 1 maize (DP-004114-3), 1 cotton (MON88701) and 1 canola (DP-073496-4)] were selected for the qualitative detection method and one kind of GM events [1 soybeans (FG72)] was selected for the quantitative detection method. For the validation of a qualitative detection method, polymerase chain reaction (PCR) and real time polymerase chain reaction (RT-PCR) were tested for specificity, sensitivity and repeatability. For the preliminary study, we evaluated the screening methods using the p35S and tNOS. The limit of detection (LOD) for MON87705 and MON87769 was 0.005–0.05%.
SYHT0H2 and MON88701 had 35s promoter and NOS terminator only DP-004114-3 had 35S promoter and the others have neither 35S promoter nor NOS terminator. All of the detection methods for 5 GM events showed specificity to other crops or other GM events. Quantitative detection methods for 1 GM event (FG72) was validated according to the CODEX guideline. The validation of these methods was tested for LOD (limit of detection), accuracy, PCR efficiency, linearity, RSDr, RSDR and trueness, etc. The PCR efficiency and accuracy for FG72 showed 93.84 ∼102.83%, 99.91∼106.37%, respectively. The linearity showed more than 0.99. The RSDr, RSDR and trueness showed below 8.15 %, 12.14 % and 10.45 %, respectively. These results met performance requirements in CODEX guideline. This study may imply that our detection methods can be established for the GMO analysis.
In addition, we developed the qualitative methods for the non-approved GM wheat(MON71800) and papaya (PRSV-SC). We also held two training courses about the GMO analytical methods for personnel in charge of GMO analysis from GMO laboratories.

목차 Contents

• 표 지 ... 1
• 자체연구개발과제 최종보고서 ... 2
• 국문 요약문 ... 3
• Summary ... 4
• 목 차 ... 5
• 연구개발과제 연구결과 ... 7
• 제1장 연구개발과제의 개요 ... 7
• 제1절 연구개발과제의 목표 ... 7
• 제2절 연구개발과제의 필요성 ... 7
• 제2장 연구개발과제의 국내ㆍ외 연구개발 현황 ... 10
• 제1절 국내 연구개발 현황 ... 10
• 1. 시험법 개발 및 확립 ... 10
• 2. 유전자재조합식품 교육 및 홍보 ... 15
• 제2절 국외 연구개발 현황 ... 16
• 제3장 연구개발과제의 연구수행 내용 및 결과 ... 18
• 제1절 유전자재조합식품의 검사법 확립 ... 18
• 1. 유전자재조합식품의 정성검사법 확립 ... 18
• 2. 유전자재조합식품의 정량검사법 확립 ... 45
• 3. 확립된 검사법의 가공식품 적용 가능성 확인 ... 53
• 제2절 미승인 유전자재조합식품 검사법 확립 ... 63
• 1. 미승인 유전자재조합 밀의 정성검사법 확립 ... 64
• 2. 미승인 유전자재조합 파파야의 정성검사법 확립 ... 71
• 제3절 과년도 연구결과 검토 ... 76
• 1. 스크리닝 동시분석법 ... 76
• 제4절 기술확산 및 분석역량 강화 ... 84
• 1. 시험법 교육 및 기술 지원 ... 84
• 2. 미승인 GM 파파야(55-1)의 정성시험법 검토 및 파파야가공품의 적용 ... 87
• 제4장 연구개발과제의 연구결과 고찰 및 결론 ... 100
• 제5장 연구개발과제의 목표달성도 및 관련분야에의 기여도 ... 102
• 제6장 연구개발과제의 연구개발 결과 활용계획 ... 103
• 제7장 참고문헌 ... 105
• 별첨 3 참여연구원 ... 109
• 끝페이지 ... 111