초록 ▼

본 연구에서는 신종곰팡이독소로 알려진 알테나리아 독소(4종) 및 엔니아틴 및 베아우베리신 곰팡이곰소(5종)에 대한 액테크로마토그래피법(LC/MS/MS) 법을 확립하고, 국내 유통 곡류 중 엔티아틴 및 베아우베리신 곰팡이독소의 함량을 파악하였다.
알테나리아 독소는 Alternaria alternata, A. dauci, cucumerina, A solani, A. tenuissima 등 일반적인 환경에서 존재하는 Alternaria 속에 의해 생성되는 대사체들로서 습기가 많은 지역과 반건조 지역에서 작물(곡물, 토마토, 종실류

본 연구에서는 신종곰팡이독소로 알려진 알테나리아 독소(4종) 및 엔니아틴 및 베아우베리신 곰팡이곰소(5종)에 대한 액테크로마토그래피법(LC/MS/MS) 법을 확립하고, 국내 유통 곡류 중 엔티아틴 및 베아우베리신 곰팡이독소의 함량을 파악하였다.
알테나리아 독소는 Alternaria alternata, A. dauci, cucumerina, A solani, A. tenuissima 등 일반적인 환경에서 존재하는 Alternaria 속에 의해 생성되는 대사체들로서 습기가 많은 지역과 반건조 지역에서 작물(곡물, 토마토, 종실류 및 과일류 등)의 수확, 저장 시 생성되는 독소이다. 채소류 및 종실류 중에서 alternariol(AOH), alternariol monomethyl ether(AME), tentoxin(TEN), tenuazonic acid(TeA)를 추출용매로 추출하고, 정제용 카트리지와 C18으로 정제한 후 HPLC/MS/MS로 측정하였다. 시험법 검증을 위해 시험법 밸리데이션을 수행한 결과 Alternariol(AOH), Alternariol monomethyl ether(AME), Tentoxin(TEN), Tenuazonic acid(TeA)의 정량한계는 10, 2, 2, 20 μg/kg, 직선성은 0.999 이상을 나타냈으며, 회수율은 표준액 각 시료별로 허용기준치(70〜120%)이하의 양호한 결과를 얻었다. 또한 확립된 시험방법으로 측정불확도를 산출하였다.
베아우베리신 및 엔니아틴 곰팡이독소는 Fusarium 속 곰팡이가 생성하는 2차 대사산물로 cyclic hexadepsipeptide의 기본구조에 D-α-hydroxyisovaleryl 및 amino acid unit이 번갈아가며 붙어있는 물질로서 최근 신종독소로 주목받으며 연구가 진행 중이다. 곡류 중 베아우베리신 및 엔니아틴 곰팡이독소의 동시분석방법을 확립하고 국내 유통 곡류의 오염실태를 조사하였다. 곡류 중 베아우베리신, 엔니아틴 A, 엔니아틴 A1, 엔니아틴 B 및 엔니아틴 B1의 분석은 메탄올로 추출한 후 HLB cartridge로 정제하여 HPLC/MS/MS로 측정하였다. 시험법 검증을 위해 시험법 밸리데이션을 수행한 결과 베아우베리신, 엔니아틴 A, 엔니아틴 A1, 엔니아틴 B 및 엔니아틴 B1의 정량한계는 3 μg/kg, 직선성은 0.999 이상을 나타냈으며, 회수율은 71.8〜110.9%, 상대표준편차는 5.7% 이하로서 양호한 결과를 얻었다. 또한 확립된 시험방법으로 베아우베리신 표준품을 백미공시료에 첨가하여 분석, 측정불확도를 추정한 결과 40.3±3.9 μg/kg으로 산출되었다. 국내 유통 곡류 72건(백미, 찹쌀, 보리, 현미, 밀가루, 옥수수, 수수)을 수거하여 확립된 시험방법으로 곡류 중 베아우베리신, 엔니아틴 A, 엔니아틴 A1, 엔니아틴 B 및 엔니아틴 B1를 분석한 결과, 베아우베리신은 16건(22.2%), 엔니아틴 B는 2건(2.8%), 엔니아틴 A, A1, B1은 각 1건(1.4%)씩 검출되었다. 특히 수수 중 베아우베리신의 오염도가 높게 나타났는데 총 11건의 시료 중 10건에서 검출, 평균값은 27 μg/kg, 최대 검출량은 66 μg/kg이었다.

Abstract ▼

Alternaria is a common genus of microfungi, and contains numerous species that are both saprophytic on organic materials and pathogenic on many plants. Due to their growth even at low temperature they are also responsible for spoilage of these commodities during refrigerated transport and storage. L

Alternaria is a common genus of microfungi, and contains numerous species that are both saprophytic on organic materials and pathogenic on many plants. Due to their growth even at low temperature they are also responsible for spoilage of these commodities during refrigerated transport and storage. LC-MS/MS analysis has usually been performed using electrospray ionisation (ESI) interface in the negative mode. Quantification of AOH, AME, TEN and TeA in food by means of LC-MS/MS allowed for a quantification limit of 2, 10, 20 μg/kg for both TEN and AME , AOH and TEA respectively. The established method have been validated by interlaboratory studies.
Beauvericin and enniatins are emerging secondary metabolites produced by Fusarium species such as F. proliferatum, F. avenaceum and F. subglutinans. They are cyclic hexadepsipeptidies that consist of three D-α-hydroxyisovaleryl and N-methyl amino acid residues linked alternately. This study aimed to develop the analytical method for the determination of beauvericin and four major enniatins in grains and monitor their occurrence in korean grains using high performance liquid chromatography(HPLC) coupled to mass spectrometry. Homogenized samples were extracted methanol followed by purifcation on Oasis HLB cartridge. The analytical method using gradient solvent system was capable of separating a mixture of the beauvericin and four enniatins. The limit of quantitaion(LOQ) were determined at 3 μg/㎏ of all 5 compouds and good linearity was obtained(r2>=0.999) within the range of 2 to 200 μg/kg. The average recovery ranged from 71.8-110.9% with a relative deviation lower than 5.7% in rice and brownrice samples. For quality assurance, estimate measurement uncertainty for every factors that affect the results of the analysis. Occurrnece data survey of beauvericin and enniatins was conducted on 72 commonly consumed grains(rice, stickyrice, barley, brownrice, flour, corn and sorghum). Beauvericin was the most abundant compound that detected 22.2% followed by enniatin B(2.8%), enniatin B1, A, A1(1.4%) in order of detection respectively. Especially 10 out of 11 sorghum samples were contaminated with beauvericin at levels up to 66 μg/kg. ly.

목차 Contents

• 표 지 ... 1
• 자체연구개발과제 최종보고서 ... 2
• 총괄 연구개발과제 ... 5
• 국문 요약문 ... 6
• Summary ... 8
• 목 차 ... 10
• 연구개발과제 연구결과 ... 12
• 제1장 총괄연구개발과제의 개요 ... 12
• 제2장 총괄연구개발과제의 국내·외 연구개발 현황 ... 14
• 제3장 총괄연구개발과제의 연구수행 내용 및 결과 ... 41
• 제4장 총괄연구개발과제의 연구결과 고찰 및 결론 ... 137
• 제5장 총괄연구개발과제의 목표달성도 및 관련분야 기여도 ... 141
• 제6장 총괄연구개발과제의 연구개발결과 활용계획 ... 143
• 제7장 참고문헌 ... 146
• 제8장 첨부서류 ... 162
• 제(1)세부연구개발과제 연구결과 ... 169
• 자체연구개발과제 최종보고서 ... 170
• 국문 요약문 ... 171
• Summary ... 172
• 제1장 총괄연구개발과제의 개요 ... 173
• 제2장 총괄연구개발과제의 국내·외 연구개발 현황 ... 174
• 제3장 총괄연구개발과제의 연구수행 내용 및 결과 ... 185
• 제4장 총괄연구개발과제의 연구결과 고찰 및 결론 ... 231
• 제5장 총괄연구개발과제의 목표달성도 및 관련분야 기여도 ... 232
• 제6장 총괄연구개발과제의 연구개발결과 활용계획 ... 234
• 제7장 참고문헌 ... 237
• 제8장 첨부서류 ... 249
• 제(2)세부연구개발과제 연구결과 ... 256
• 자체연구개발과제 최종보고서 ... 257
• 국문 요약문 ... 260
• Summary ... 262
• 목 차 ... 264
• 제1장 연구개발과제의 개요 ... 265
• 제2장 연구개발과제의 국내·외 연구개발 현황 ... 266
• 제3장 연구개발과제의 연구수행 내용 및 결과 ... 277
• 제4장 연구개발과제의 연구결과 고찰 및 결론 ... 333
• 제5장 연구개발과제의 목표달성도 및 관련분야에의 기여도 ... 336
• 제6장 연구개발과제의 연구개발 결과 활용계획 ... 337
• 제7장 참고문헌 ... 338
• 제8장 첨부서류 ... 345
• 끝페이지 ... 347