초록 ▼

현재 정제백일해백신의 역가시험에 사용되고 있는 항체가시험법의 경우, 각 제품 모두 자사 표준품을 사용하고 있어 국내 수급 문제로 인한 국가출하승인 기한 연장이 종종 발생하고 있과 일관된 품질관리에 어려움이 있다. 또한 국내 제조사에서 DTaP백신을 개발하고 있는 까닭에 이에 대한 대비가 필요한 실정이다. 백신의 일관된 품질관리 및 백신 제조사의 개발 진입 장벽을 낮추기 위해서는 항체가시험용 국가 표준품이 반드시 필요하다. 이러한 이유로 2015 ~ 2016까지 “정제백일해백신 역가시험용(항혈청가) 표준품 제조에 관한 연구” 과제를

현재 정제백일해백신의 역가시험에 사용되고 있는 항체가시험법의 경우, 각 제품 모두 자사 표준품을 사용하고 있어 국내 수급 문제로 인한 국가출하승인 기한 연장이 종종 발생하고 있과 일관된 품질관리에 어려움이 있다. 또한 국내 제조사에서 DTaP백신을 개발하고 있는 까닭에 이에 대한 대비가 필요한 실정이다. 백신의 일관된 품질관리 및 백신 제조사의 개발 진입 장벽을 낮추기 위해서는 항체가시험용 국가 표준품이 반드시 필요하다. 이러한 이유로 2015 ~ 2016까지 “정제백일해백신 역가시험용(항혈청가) 표준품 제조에 관한 연구” 과제를 통하여 항체가 시험용 코팅항원 3종(PT, FHA, PRN)과 항체가 산정에 필요한 항혈청을 제조하고 함량을 설정 하였다.

이번 연구에서는 제조된 국가표준품 후보물질을 대상으로 표준품 확립에 요구되는 표준품의 안정성 연구와 제품 적용성 검증 연구를 수행하였다 백일해 항원 표준품 안정성 연구는 실시간 안정성 시험으로서 0, 3, 6, 9, 12, 18, 24개월 간 단백질 함량을 측정하였다. 이 기간 중 경시적 변화는 보이지 않았다. 항원의 가속 안정성은 4개 온도조건(4, 25, 37, 45도)에서 1~ 6개월 간 보관 후 단백질 함량과 항체결합활성을 측정하였다. 결과로서, 단백질 함량의 경우 모든 항원이 4개월까지 안정한 것으로 나타났다. 하지만, 항체결합활성의 경우 PT 표준품은 45도 조건에서 활성이 크게 감소하였다. FHA와 PRN 표준품은 4도 보관조건을 제외한 나머지 보관 조건에서 활성이 크게 변화하였다.

항혈청 표준품의 실시간 안정성은 0, 3, 6, 9, 12 개월에서 3종(anti-PT, anti-FHA 및 an仕-PRN) 항체가를 측정하였다 모든 항체가에서 경시적 변화는 나타나지 않았다. 가속 안정성은 표준품을 4개 온도조건(4, 25, 37, 45되에서 1~ 6개월 간 보관 후 항체가를 측정하였다, 3종 항체가가 모두에서 4도 및 25도에서 경시적 변화를 나타내지 않았다.
반면, 37도 보관 조건에서는 anti-PT를 제외한 2종의 항체가가 2개월 까지 약 45% 감소하였다 45도 조건에서는 3종의 항체가가 모두 60% 이상 감소하였다

백일해 백신에 대한 적용성 검증 연구는 외부기관 2곳과 공동연구로 수행되었다 기허가 백신 3종 8로트와 임상로트를 포함한 국내개발백신 3로트에 대하여 자사표준품과 국가표준품을 사용한 비교역가시험을 실시하였다. 그 결과, 자사표준품을 사용한 시험 결과와 국가표준품을 사용한 결과가 동등하므로, 두 표준품이 서로 대체하여 사용될 수 있음을 확인할 수 있었다, 따라서, 이전 연구와 본 연구를 통하여 확립된 국가표준품 후보물질은 향후 정제 백일해 백신의 국가검정시험 뿐만 아니라 향후 제품개발에도 활용될 수 있을 것으로 사료된다.

(출처 : 요약문 3p)

Abstract ▼

Regulatory authorities perform the national lot release test including a potency test before the products release on the market. Immunogenecity assay is used for the potency test of acellular pertussis (aP) vaccines. In Korea, the immunogenesity assay is adopted only to imported aP vaccines. Availab

Regulatory authorities perform the national lot release test including a potency test before the products release on the market. Immunogenecity assay is used for the potency test of acellular pertussis (aP) vaccines. In Korea, the immunogenesity assay is adopted only to imported aP vaccines. Availability of reference materials for the assay depend on the vaccine manufactures abroad, exclusively. Thus, a domestic supply issue of the in-house materials has brought about delays of national lot release of aP vaccines, inferred to be a possible cause of the vaccine shortage in Korea.

Owing to this reason, the study titied “Study on manufacturing of reference material for serological assay of acellular pertussis vaccines” had been initiated and performed from 2015 to 2016. As consequent accomplishments of the study, 3 pertussis antigen proteins (PT, FHA, PRN) and an antiserum reference materials had been produced and the unitage of the antiserum had been assigned.

Here, as a follow-up study, stability tests and assessment of fitness for purpose was conducted on these reference materials. For real-time stability tests on the antigens which have been stored at -70℃, the protein contents were measured after 0, 3, 6, 9, 12, 18, 24 months. There were no recognizable changes found over the ti me. For thermally accelerated degrada ti on study, antibody-binding activities of the antigens, as well as protein contents, were quantified at four accelerated temperatures (4, 25, 37 and 45 ℃) for 0 ~ 6 months. As a result, significant changes in the antibody-binding activities were shown at 25, 37 or 45 ℃ while the protein contents remained unchanged at most accelerated temperatures.

For the stability study of the antiserum reference, specific—antibody titers (anti-PT, anti-FHA and anti-PRN) were measured in real-time and thermally accelerated conditions (4, 25, 37 and 45℃).

There were not significant changes in the specific—antibody titers in real-time stability. In the thermally accelerated conditions, the specific-antibody titers were shown to be significantly decreased for 2 months ； anti-FHA and anti-PRN decreased by approximately 45% at 37℃ and all three antibody titers were reduced by more than 60% at 45℃.

For the assessment of fitness for purpose, we compared potency test results where our references and in-house references from vaccine manufacturers were used respectively. With the results from three currently approved aP vaccine products (8 lots in all) and one aP vaccine product (3 lots) under development, we verified that both references are equivalent so that they can be used interchangeably. Our studies on the newly established references indicates that these references can be utilized for future aP vaccine developments as well as in the national lot release.

(출처 : Summary 4p)

목차 Contents

• 표지 ... 1
• 자체연구개발과제 최종보고서 ... 2
• 국문 요약문 ... 3
• Summary ... 4
• 목차 ... 5
• 연구개발과제 연구결과 ... 6
• 제1장 연구개발과제의 개요 ... 6
• 제2장 연구개발과제의 국내·외 연구개발 현황 ... 9
• 제3장 연구개발과제의 연구수행 내용 및 결과 ... 11
• 제4장 연구개발과제의 연구결과 고찰 및 결론 ... 36
• 제5장 연구개발과제의 목표달성도 및 관련분야에의 기여도 ... 39
• 제6장 연구개발과제의 연구개발 결과 활용계획 ... 40
• 제7장 참고문헌 ... 41
• 제8장 첨부서류 ... 42
• 끝페이지 ... 43