초록 ▼

3세대 게놈편집기술인 CRISPR/Cas9 기술을 삽입형 및 비삽입형(integrating/non-integrating) 렌티바이러스 벡터 또는 AAV 벡터 시스템에 도입하여, in vitro 시스템 뿐 아니라 in vivo 동물모델에도 적용할 수 있는 차세대 게놈편집기술을 개발하고자 하였고, 게놈편집용 바이러스벡터의 검증시스템을 in vivo model에서 구축하고 뇌신경계 또는 간암 조직을 타겟으로 한 게놈편집의 가능성을 검증하였음.
(1) GFP 발현 또는 치매동물모델 마우스 구축
(2) 뇌신경계, 또는 간 조직의

3세대 게놈편집기술인 CRISPR/Cas9 기술을 삽입형 및 비삽입형(integrating/non-integrating) 렌티바이러스 벡터 또는 AAV 벡터 시스템에 도입하여, in vitro 시스템 뿐 아니라 in vivo 동물모델에도 적용할 수 있는 차세대 게놈편집기술을 개발하고자 하였고, 게놈편집용 바이러스벡터의 검증시스템을 in vivo model에서 구축하고 뇌신경계 또는 간암 조직을 타겟으로 한 게놈편집의 가능성을 검증하였음.
(1) GFP 발현 또는 치매동물모델 마우스 구축
(2) 뇌신경계, 또는 간 조직의 게놈편집을 가능하게 할 수 있는 수준의 고농도/고순도의 렌티바이러스 벡터디자인, 생산 및 정제
(3) mouse brain의 cortical region 및 hippocampus로의 게놈편집용 바이러스의 표적성 전달
(4) 생체 내 게놈편집 효율성 및 정확성 조사
이를 통해 아래와 같은 활용이 가능한 기반을 구축하였음.
◦ 세포 수준에서만 수행될 수 있었던 게놈편집기술을 동물모델에 적용이 가능하게 함
◦ 질환모델로의 적용가능성 평가를 통해 차세대 유전자치료 기반기술 구축이 가능
◦ 현재 유전자 전달체 표적화 관련 연구의 기술적 난점을 극복할 수 있도록 지원함으로써 인체의 난치성질환에 대한 유전자치료법의 실용화에 기여할 것임.
◦ 기술선점으로 2021년 21조원의 시장이 예측되는 유전자치료 분야로의 진출 기반 확보

(출처 : 보고서 요약서 3p)

Abstract ▼

□ Purpose & Contents
The purpose of this work is to develop lentiviral vector-mediated genome editing technology by establishing integrating and non-integrating lentiviral vector system encoding CRISPR/Cas9 system, that is capable to be used in vivo animal models as well as in vitro cell culture

□ Purpose & Contents
The purpose of this work is to develop lentiviral vector-mediated genome editing technology by establishing integrating and non-integrating lentiviral vector system encoding CRISPR/Cas9 system, that is capable to be used in vivo animal models as well as in vitro cell culture system.

□ Results
◦ We established the GFP-expressing transgenic mouse models.
◦ We established the design production techniques of high concentration/high purity lentiviral vector that capable to GFP genome editing in the brain nervous tissues.
◦ We established the viral vector target delivery system for GFP genome editing to the cortical region and hippocampus of the mouse brain.
◦ We analyzed the GFP genome editing and efficiency in vivo.
◦ We assured the genome editing capability of APP-RGEN sequence through certificating in vitro
◦ We established the fundamental technology for design and production techniques of high concentration/high purity lentiviral vector that capable of genome editing in the brain nervous tissues.
◦ It enabled the construction of fundamental techniques using Alzheimer disease animal model mouse
◦ We established the fundamental techniques through evaluating the genome editing trial and efficacy for Alzheimer disease by introducing the brain nervous targeting.
◦ We conducted the construction and assurance for liver-specific non-integrating viral vector system.
◦ We established the APP/PS1 Alzheimer disease animal model mouse and injected the produced high titer/high purity non-integrating APP-RGEN viral vector in the hippocampus region.
◦ We evaluated the genome editing trial and efficacy for Alzheimer disease by introducing brain nervous targeting.
◦ We have constructed and confirmed the utility system for tissue-specific non-integrating viral vector.

□ Expected Contribution
◦ It enables genomic editing techniques that could only be performed at the cellular level to be applied to animal models.
◦ It is possible to construct the next generation gene therapy based technology through evaluation of applied to disease models.
◦ It will contribute to overcome the technical difficulties of current gene transfer targeting research and contribute to practical application of gene therapy for intractable diseases in the human body.
◦ It secures the basis for entry into the field of gene therapy, which is expected to market 21 trillion won in 2021

(출처 : SUMMARY 5p)

목차 Contents

• 표지 ... 1
• 제출문 ... 2
• 보고서 요약서 ... 3
• 국문 요약문 ... 4
• SUMMARY ... 5
• 목차 ... 6
• 제1장. 연구개발과제의 개요 ... 7
• 1. 연구개발 목적 ... 7
• 2. 연구개발의 필요성 ... 7
• 3. 연구개발 범위 ... 7
• 제2장. 국내외 기술 개발 현황 ... 8
• 제3장. 연구 수행 내용 및 성과 ... 12
• 제4장. 목표 달성도 및 관련 분야 기여도 ... 53
• 1. 목표 달성도 ... 53
• 2. 관련 분야 기여도 ... 53
• 제5장. 연구개발성과의 활용계획 ... 54
• 제6장. 연구 과정에서 수집한 해외 과학기술 정보 ... 55
• 제7장. 연구개발성과의 보안등급 ... 59
• 제8장. 국가과학기술종합정보시스템에 등록한 연구시설·장비 현황 ... 59
• 제9장. 연구개발과제 수행에 따른 연구실 등의 안전 조치 이행 실적 ... 59
• 제10장. 연구개발과제의 대표적 연구 실적 ... 60
• 제11장. 기타 사항 ... 60
• 제12장. 참고 문헌 ... 61
• 끝페이지 ... 62